中红外光谱技术检测灭菌乳中糠氨酸的研究

[目的]开发一种缩短灭菌乳中糠氨酸含量检测时间的方法,可以提升乳制品质量控制效率。[方法]利用中红外光谱技术结合偏最小二乘法（PLS）,定量分析样品中的糠氨酸含量,实现微量糠氨酸的快速简便定量检测。[结果]与农业行业标准方法《NY/T 939-2016巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳的鉴定》相比,本文糠氨酸定量检测方法结果出具时间由2天缩短至15 min。[结论]该方法重复性较好,精密度和准确性较高,符合检测要求,具有较好应用前景。     

基于中红外光谱法快速检测蜂蜜中还原糖的研究

目前蜂蜜的还原糖测定方法主要有滴定法、液相色谱法、气相色谱法等。传统化学检测方法费时、费力,因此无法做到快速、无损检测。中红外光谱技术具有快速、简便、无样品预处理、无损伤等特点,现已成为国内外的研究重点。本研究采用中红外光谱技术,利用偏最小二乘法建立模型,结合高效液相色谱法测定的蜂蜜中果糖和葡萄糖的检测结果。采用主成分分析和PLS的方法,建立和优化蜂蜜果糖和葡萄糖的快速检测模型,实现蜂蜜还原糖的快速检测。     

美科学家使用纳米技术开发出大肠杆菌快速检测法

美国佛罗里达大学科学家使用纳米粒子技术,开发出一种新的大肠杆菌检测法,即使样本里只有一个大肠杆菌也能检测出来,整个过程只需要20分钟。据英国《自然》杂志网站10月10日报道,新检测方法针对的是O157∶H7型大肠杆菌。这种细菌非常危险,即使食物只被很少几个细菌污染,也可能危及人体健康。对该细菌进行高灵敏度检测非常重要,但传统方法必须先对样本中的细菌进行培养、增加数量,然后进行检测,得出结果的时间可能长达48小时。新方法用纳米级的二氧化硅粒子进行检测。每个纳米粒子里都装有数以千计的荧光染色分子,并且每个纳米普子都附着在…     

基于免疫纳米颗粒强化的压电免疫传感器检测大肠杆菌O157:H7

[目的]结合纳米技术建立检测大肠杆菌(Escherichia coli)O157:H7高灵敏检测技术.[方法]采用化学共沉淀法制备出核心粒径约为10 nm的免疫纳米磁颗粒,柠檬酸钠还原法制备粒径约为20 nm的免疫胶体金.压电免疫传感器通过金黄色葡萄球菌蛋白A(Protein A from Staphylococcus aureus SPA)法将抗体固定于石英晶振上,两种免疫纳米颗粒借助不同的抗体连接于传感器上对检测频率信号进行放大.[结果]SPA在石英晶振上的最佳固定浓度和时间为1.2 mg/mL和40 min,抗体的最佳固定浓度和时间为1.0 mg/mL和60 min.压电免疫传感器通过两种免疫纳米颗粒的放大作用,使其对大肠杆菌O157:H7的检测限从104 cfu/mL提高到101 cfu/mL.[结论]免疫纳米颗粒强化对压电免疫传感器的检测频率信号具有很好的放大效应,可以明显提高其检测灵敏度.     

近红外和中红外光谱技术在快速鉴别豆粕中掺入尿素聚合物的研究

本试验旨在应用并比较近红外和中红外光谱技术结合模式识别方法对掺假的豆粕进行快速鉴别。试验收集了不同批次145个纯豆粕样品,随机选取部分纯豆粕样品,掺入0.08%~5.00%的尿素聚合物,利用傅立叶变换近红外和中红外光谱技术及偏最小二乘判别分析(PLS-DA)和支持向量机(SVM)分类方法,对掺假豆粕进行识别。结果表明:近红外光谱经变量标准化后建立的SVM分类模型训练集识别率为99.8%,测试集识别率为99.2%,检测限为1.0%;中红外光谱数据经变量标准化和一阶导数7点平滑处理后,建立的PLS-DA和SVM分类模型对样品的识别率均达到100.0%,检测限为0.08%。因此,近红外和中红外光谱技术均可对掺入尿素聚合物的豆粕快速鉴别,后者的灵敏度高于前者。     

猪伪狂犬病毒纳米PCR检测方法的建立

[目的 ]快速灵敏检测猪伪狂犬病毒(PRV)[方法 ]根据PRV g B基因设计特异性引物,建立了PRV纳米PCR检测方法。[结果 ]PRV纳米PCR方法的最低检出限为10拷贝/μL,其敏感性比未添加纳米金的对照PCR提高100倍;建立的纳米PCR与猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒等常见猪病毒性病原均无交叉反应。应用纳米PCR和PRV国家标准中的PCR方法,对2014—2016年期间采集自17个省市发病猪场的148份临床样品进行平行检测,PRV纳米PCR的阳性检出率为49.3%(73/148),PRV国标PCR方法的阳性检出率为23.6%(35/148),并且PRV纳米PCR检测为阳性,而PRV国标PCR方法检测为阴性的38份样品,测序结果均确认为PRV阳性。[结论 ]本研究建立的纳米PCR检测方法敏感特异,可用于猪伪狂犬病的病原学检测。     

基于石墨烯电化学免疫传感器检测牛病毒性腹泻病毒

构建一种新型电化学免疫传感器用于检测牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV),为BVDV提供一种新型快速的检测方法。利用甲壳胺(Chi)修饰石墨烯(G)并负载金纳米粒子(AuNP),得到石墨烯-甲壳胺-金纳米粒子(G-Chi-AuNP)纳米复合物用于修饰金电极,然后固定抗BVDV NS3蛋白单克隆抗体,构建BVDV电化学免疫传感器。所构建的电化学免疫传感器对BVDV的检测敏感度为10~(1.2) TCID_(50),特异性试验结果表明,该方法对牛轮状病毒(BRV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛分支杆菌(MB)、牛冠状病毒(BCV)和猪瘟病毒(CSFV)无交叉反应。研究建立的BVDV电化学免疫传感器具有特异性好和灵敏度高的优点,在BVDV快速检测领域具有良好的应用前景。     

近红外光谱技术在青贮饲料品质检测中的研究进展

本文总结了近年来青贮饲料近红外光谱无损检测技术的研究进展，主要从光谱仪种类、化学计量学方法优化以及近红外光谱技术在青贮上的应用进行综述，为进一步利用近红外光谱技术检测青贮饲料质量提供参考。 [关键词] 近红外光谱技术|青贮|无损检测|化学计量学     

大肠杆菌O157∶H7实时定量PCR检测方法的建立

根据GenBank公布的大肠杆菌O157∶H7的Flic(H7)基因序列进行同源性比较分析,选择保守序列设计一对特异性扩增引物,通过优化反应条件,建立一个用于大肠杆菌O157∶H7快速定量检测的实时定量PCR方法。该方法的最低检测极限是103CFU/mL,敏感性比常规PCR提高10倍。方法重复性好、特异性强,重复性检测的变异系数均小于2%;只能检测大肠杆菌O157∶H7,对非大肠杆菌O157∶H7血清型细菌、猪链球菌2型、副猪嗜血杆菌无反应。利用此方法对模拟样本进行定量检测,其结果与平板细菌计数基本一致,表明此方法可作为大肠杆菌O157∶H7快速诊断和疫情监测的一种快速、准确、简便的检测工具。     

用红外光谱检测禽饲料中脂质添加物

用化学计量学方法红外光谱分析,快速检测禽配合饲料中脂肪酸添加量。在标准饲料配方中,添加10%含有二十二碳六烯酸(DHA)的脂肪酸,其扫描波长范围为4000～10000cm-1。通过主成分分析(PCA)评估光谱找出偏最小二乘法下的异常值。通过一次微分光谱建立模型。用特征性36个光谱库中的30个光谱库校正模型,用其余随机选择的6个子光谱库谱验证方程。偏最小二乘法(PLS)模型的回归系数是0.98314,校正标准差是0.44772。这项技术能快速检测饲料添加物中脂肪酸含量。     

2013年国内外蜂产品质量安全研究进展(续)

<正>拉曼光谱是一种散射光谱,其原理是对与入射光频率不同的散射光谱进行分析以得到分子振动、转动方面信息,并应用于分子结构研究的一种分析方法。最常用的红外及拉曼光谱区域波长是2.5²5μm。通过拉曼光谱,化学计量学方法和人工神经网络快速分析蜂蜜中糖类,包括葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖含量[11]。由于糖分子在蜂蜜样品中的相似性,使得仅运用单一的方法来测定蜂蜜中的糖类是不可能的。这个瓶颈通过结合拉曼光谱,化学计量学方法(主成分分析和偏最小(续2014年第3期上半月)     

能量色散X射线荧光光谱法快速检测配方乳粉中的铁和锌

[目的]建立能量色散X射线荧光（ED-XRF）光谱快速检测配方乳粉中铁和锌的新方法。[方法]乳粉样品用70~100 °C去离子水调成浆状,经ED-XFR扫描,标准加入法进行定量。[结果]在考察的浓度范围内,方法线性良好,R²>0.999,铁、锌的定量下限分别为5.90 mg/kg和3.43 mg/kg,加标回收率分别为98.88%~102.7%和99.66%~102.9%,相对标准偏差分别0.38%~1.12%和0.22%~0.75%。[结论]该方法样品处理简单,定量快速、准确,为使用ED-XRF光谱技术进行配方乳粉的质量控制与监测提供了有价值的借鉴。     

采用红外光谱技术检测反刍动物甲烷排放

反刍动物甲烷排放监测一直难以建立起精确的评估体系,其中一个重要原因是常用检测反刍动物甲烷排放的方法不够完善,另外检测仪器受外部环境的影响,难以保证其准确度和灵敏度。目前,红外光谱检测技术正在被广泛应用于反刍动物甲烷排放检测,一些基于红外光谱检测技术的最新检测方法,如甲烷激光检测(LMD)、傅里叶变换红外光谱检测(FTIR)、Green Feed(GF)系统和便携式自动开路气体量化系统(GQS)也得到广泛运用。与以往常用方法相比,红外光谱检测技术具有一定优势。本文根据现有文献,从红外光谱检测的原理、可靠性及与其他常见方法对比,论述了红外光谱检测方法在反刍动物甲烷排放中的应用现状和应用前景,旨在为精确检测反刍动物的甲烷排放提供参考。     

大肠埃希菌PCR检测方法的建立及应用

本研究建立了一种快速诊断动物大肠杆菌病的PCR检测方法,与传统的细菌分离培养、生化鉴定方法相比较有效缩短了检测时间,提高了检测效率,同时为大肠杆菌病的快速诊断和流行病学调查提供了有效的技术手段。通过对大肠埃希菌ECs1048基因序列分析,利用Premier5.0软件设计并合成了1对特异性引物,建立了检测大肠埃希菌ECs1048基因的PCR检测方法。通过反复试验确定本方法的最佳退火温度为56℃。灵敏性试验和特异性试验表明本方法能够检测出的最低菌悬液浓度为1.5×10~2 CFU/mL,并具有较高的特异性。稳定性与重复性试验表明本方法具有良好的稳定性。利用本方法对临床样品的检测结果与生化试验鉴定结果的符合率为100%。本研究建立的检测方法灵敏性高、特异性强、稳定性好,可应用于动物大肠杆菌病的诊断。     

大肠杆菌O157:H7实时定量PCR检测方法的建立

根据GenBank公布的大肠杆菌O157:H7的Flic(H7)基因序列进行同源性比较分析,选择保守序列设计一对特异性扩增引物,通过优化反应条件,建立一个用于大肠杆菌O157:H7快速定量检测的实时定量PCR方法.该方法的最低检测极限是103CFU/mL,敏感性比常规PCR提高10倍.方法重复性好、特异性强,重复性检测的变异系数均小于2%;只能检测大肠杆菌O157:H7,对非大肠杆菌O157:H7血清型细菌、猪链球菌2型、副猪嗜血杆菌无反应.利用此方法对模拟样本进行定量检测,其结果与平板细菌计数基本一致,表明此方法可作为大肠杆菌O157:H7快速诊断和疫情监测的一种快速、准确、简便的检测工具.     

数字RT-PCR检测鲤春病毒血症的方法建立与应用

[目的]通过实时定量RT-PCR和数字RT-PCR两种方法的比对试验,建立快速检测鲤春病毒血症的数字RT-PCR方法。[方法]利用同一对引物和探针,以梯度稀释的方法测定两种方法针对SVCV的灵敏性、特异性及重现性。[结果]两种方法均能够检测出104倍稀释的SVCV,而数字RT-PCR可以检测出单个微滴中的SVCV,其灵敏度性高于实时定量RT-PCR。同时,两种方法的特异性都很强,对其他病毒,如传染性胰腺坏死病毒（IPNV）、传染性造血器官坏死病毒（IHNV）、病毒性出血败血病毒（VHSV）均未有扩增反应。两种方法的重现性也较好。[结论]数字RT-PCR方法比实时定量RT-PCR具有更高的灵敏度,在鲤春病毒血症的早期快速诊断方面具有重要作用。     

奶牛乳房炎中大肠杆菌PCR检测方法的初步建立

大肠杆菌是引起奶牛乳房炎的一种主要细菌.为了建立PCR直接检测奶牛乳房炎致病菌的方法,本试验以大肠杆菌为主要研究对象,根据已发表的致病性大肠杆菌16-23S rRNA特异性序列设计并合成一对引物,对昆明市的某发生奶牛乳房炎的病牛的牛奶进行大肠杆菌PCR检测,并对扩增片段进行序列分析,建立一种直接从牛奶中检测大肠杆菌的PCR快速诊断方法.结果表明,该方法能够检测到乳样中的大肠杆菌,而且具有快速、准确和特异的优点.     

纳米花结合G-四链体对大肠杆菌的可视化检测方法的建立

为建立一种新型、快速、可视化的病原菌检测方法,使用刀豆蛋白(ConA)-磷酸铜纳米花结合G-四链体对大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)进行可视化检测,通过纳米花中包含的铜离子(Cu~(2+))催化水解溶液中叠氮和G-四链体片段之间的点击化学反应,最终形成完整G-四链体结构,简化传统检测方法中的固定及洗涤等步骤。在血红素(hemin)的作用下,激活DNAzyme,使其具有类似辣根过氧化物酶(HRP)的活性;利用四氮甲基联苯胺(TMB)作为底物产生肉眼可视的颜色变化,根据其颜色深浅可对靶标细菌的含量进行定性及定量的分析。结果表明,经过各种条件优化试验及灵敏性、特异性试验得出该病原菌纳米花结合G-四链体可视化检测方法稳定、快速、灵敏,且可以应用于多种病原的检测。     

利用DHI奶样检测孕酮的可行性分析

孕酮检测能够准确反映牛只妊娠状态,DHI是牧场目前最广泛应用的通过收集奶样用中红外法进行乳成分检测的手段。本文从孕酮以及中红外光谱的特性对利用DHI奶样检测孕酮的可行性进行了综合分析,为利用DHI奶样进行孕酮检测提供理论参考依据。     

鱼类神经坏死病毒纳米探针的制备与特征分析

为了快速检测鱼类神经坏死病毒,本研究设计了病毒特异性的发夹型探针,经硫醇修饰后与纳米银溶胶结合,制备了鱼类神经坏死病毒纳米探针（Ag-NNV）,并使用透射电镜、多功能酶标仪、表面增强拉曼光谱仪等对纳米探针Ag-NNV的表征及发夹型探针在纳米银粒子表面的覆盖率进行了测定和分析。结果表明,裸露的纳米银粒子为球形,平均直径50 nm;制备的纳米探针颗粒为球形,平均直径90 nm。纳米银粒子和纳米探针在溶液中均具有良好的分散性。平均每个纳米银粒子表面结合发夹型探针约100条,单位表面积的探针覆盖量为0.56 pmol/cm2。该纳米探针制备简便,适合用于表面增强拉曼散射法对鱼类神经坏死病毒进行快速检测。