核转录因子кB系统与肿瘤放射敏感性

离子化辐射可诱导许多早期反应基因的表达 ,包括 c- fos,c-jun,egr- 1,p5 3和 NFк B,这些早期反应基因编码的核转录因子 ,经由多条信号传导途径 ,进行细胞间及细胞内的信息传递 ,对于受照射的细胞起着重要的保护作用。凋亡是肿瘤细胞在放疗作用下最主要的被清除的方式。近年来许多研究发现 ,NFк B的活化和表达与肿瘤细胞抵抗辐射诱导的凋亡有关 ,电离辐射在诱发细胞凋亡的同时 ,也激活了 NFк B。因此 ,研究离子化辐射诱导的早期基因 ,更有助于阐明有关的细胞应激反应中的分子事件及生化事件。1　 NFк B系统的生物学特性在哺乳动物…     

常规剂量地塞米松对大鼠脑损伤后脑组织核转录因子-κB表达的影响

目的了解常规剂量地塞米松对大鼠脑损伤后脑组织核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法将60只SD大鼠随机分为空白组、假手术组、地塞米松组3组,每组20只。局灶性脑损伤后,空白组和假手术组分别腹腔注射0.1mL/(kg.d)生理盐水,地塞米松组腹腔注射地塞米松0.1mg/(kg.d)。各组动物分别在6、24、48和96h处死5只取脑制片,NF-κB表达用免疫组化检测。结果空白组各时间点NF-κBp65蛋白表达均高于假手术组(P<0.05或0.01);地塞米松组6、48h均低于空白组(P<0.01),两组24、96h时点差异均无统计学意义(P>0.05)。结论脑损伤后受损脑组织NF-κB表达升高,常规剂量地塞米松可以抑制NF-κB表达而有效保护创伤脑组织。     

蛴螬提取物对大鼠光损伤视网膜变性NF-κB表达及核转位的影响

目的探讨蛴螬提取物对大鼠光损伤视网膜变性核因子κB(NF-κB)表达的影响。方法将48只大鼠随机分成6组,分别为空白组、模型组、驻景丸组、蛴螬低、中、高剂量组,每组8只动物,16只眼。除空白组外,其余5组均建立光损伤视网膜变性模型,分组给药3周后取材做NF-κB免疫组化检测,计算机系统图像分析结果并进行统计分析。结果与模型组比较,蛴螬中、高剂量组的NF-κB积分光密度和核转位数增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论蛴螬通过增加NF-κB信号通路的活化,抑制细胞凋亡死亡受体信号通路来发挥保护视网膜作用。     

MIκBα对TNF-α诱导的大鼠肝星状细胞凋亡的影响

目的:探讨MIκBα对TNF-α诱导的大鼠肝星状细胞生长抑制和凋亡的影响。方法:首先用不同剂量的TNF-α对培养成功的MIκBα稳定转染组细胞和未转染大鼠肝星状细胞进行诱导,并使用间接免疫荧光法检测细胞中NF-κB/P65蛋白的表达,应用MTT法测定细胞生长率,然后用Annexin V-FITC和PI试剂分别进行双标记利用流式细胞仪对两组细胞的凋亡情况进行检测。结果:转染MIκBα的大鼠肝星状细胞的组NF-κB蛋白的表达明显被抑制,转染组较未转染组的细胞生长明显受到抑制,两者比较有统计学差异性。转染MIκBα的大鼠肝星状细胞有较高的凋亡率,而未转染MIκBα的大鼠肝星状细胞只有少许细胞发生凋亡,两者比较差异有统计学意义。结论:MIκBα表达可以抑制NF-κB蛋白的表达,从而提高大鼠肝星状细胞对TNF-α的敏感性,通过诱导肝星状细胞的凋亡,可能寻找到一条治疗肝纤维化的途径。     

辛伐他汀对内毒素所致脓毒症大鼠肾组织NF-κB、iNOS表达的影响

目的了解辛伐他汀对脓毒症大鼠肾组织病理变化和肾组织核转录因子-κB（NF-κB）蛋白、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达的影响。方法成年SPF级雄性SD大鼠90只,随机分为A组（生理盐水静脉推注）、B组（内毒素5mg／kg静脉推注）、C组（内毒素5mg／kg＋辛伐他汀20mg／kg,静脉推注）,每组30只。每组分别在2、4、6、12、24h时点随机处死6只大鼠,取右下肾组织,观察肾组织病理变化,免疫组化检测NF-κB蛋白及iNOS蛋白表达。结果A组肾小球、肾小管结构正常;B组白细胞浸润,肾小管损伤明显;C组肾病理损伤减轻。A组NF-κB蛋白及iNOS蛋白表达只有微量表达,B组表达较A组增加（P〈0．01）,C组表达较B组减少（P〈0．05）。结论辛伐他汀能抑制NF-κB和iNOS蛋白的过量表达,减轻脓毒症时肾组织的病理性炎症损伤。     

NF-κB抑制剂PDTC对卵巢癌细胞HO8910增殖、凋亡的影响

应用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测不同浓度吡咯烷二硫代氨基甲酸(PDTC)、顺铂(DDP)和联合应用PDTC与DDP对HO8910细胞生长抑制的影响;采用流式细胞仪检测不同浓度PDTC作用HO8910后的细胞凋亡率.结果表明: ① PDTC浓度为25、50、100和200 μmol·L-1时,作用12、24、36 h均明显抑制HO8910细胞的增殖,与对照组比较差异极显著(P<0.01),并具有时间、剂量依赖性.②顺铂联合应用PDTC时能显著提高顺铂杀伤卵巢癌细胞作用.③ 25、50、100 μmol·L-1 PDTC诱导卵巢癌HO8910细胞凋亡.PDTC能有效抑制卵巢癌HO8910细胞增殖并能够增强顺铂化疗作用,提高疗效.     

LPS诱导流产小鼠蜕膜组织TNF-α及NF-κB的表达

目的：比较正常妊娠与脂多糖（LPS）诱导流产小鼠模型蜕膜组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）及核转录因子kppaB（NF—κB）的表达。方法：建立正常妊娠模型和LPS诱导流产模型。采用SABC法测定两组模型孕鼠13d蜕膜组织TNF-α和NF-κB的表达水平。结果：LPS诱导流产模型蜕膜组织TNF-α和NF-κB的表达明显高于正常妊娠模型（P〈0．01）。结论：NF-κB异常表达可能是小鼠流产的重要因素。     

六味地黄汤对5/6肾切除大鼠NF-κB、MCP-1、Col-Ⅲ表达的影响

目的 观察六味地黄汤对5/6肾切除大鼠残肾转录因子-核因子κB（NF-κB）、单核细胞趋化因子（MCP-1）及Ⅲ型胶原（Col-Ⅲ）表达的影响,探讨六味地黄汤抑制肾间质纤维化进展的作用机制。方法 按照随机数字表法将60只SD雄性大鼠分为5组：空白组、假手术组、模型组、依那普利组、六味地黄汤组,每组12只,后三组行5/6肾切除术诱导大鼠肾衰模型,假手术组同期手术,但不损及肾脏。造模术后3 d进行灌胃干预。灌胃8周后处死各组大鼠,观察各组大鼠残肾组织形态学变化并用免疫组化法检测大鼠残肾NF-κB、MCP-1、Col-Ⅲ的表达。结果（1）观察5/6肾切除大鼠残肾组织细胞形态学,与模型组相比六味地黄汤、依那普利组可减轻大鼠肾间质损害及纤维化程度;（2）免疫组化半定量分析显示六味地黄汤组肾皮质的NF-κB、MCP-1及Col-Ⅲ表达均明显低于模型组（P<0.05）,与依那普利组差异无统计学意义（P>0.05）。结论 六味地黄汤可能通过下调NF-κB、MCP-1及Col-Ⅲ的表达,减少细胞外基质的积聚,减轻炎症反应和纤维化程度,抑制5/6肾切除大鼠肾间质纤维化进展,可作为慢性肾衰竭的辅助用药。     

视黄醇对大肠杆菌诱导的大鼠乳腺上皮细胞NF-κB信号通路的抑制作用

为探讨视黄醇对大肠杆菌诱发的大鼠乳腺上皮细胞炎症反应的影响,原代培养大鼠乳腺上皮细胞,试验组预先经视黄醇处理24 h后,对照组和试验组分别经大肠杆菌处理30 min和60 min,收集细胞和上清液。结果显示,大肠杆菌诱发能显著提高TLR4和NF-κB表达,进而促进促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β的释放以及炎性介质iNOS(诱导型-氧化氮合酶)的表达。视黄醇处理能抑制NF-κB表达,进而降低炎性细胞因子和炎性介质的释放和表达,从而达到保护乳腺上皮细胞的作用。     

划痕损伤对大鼠脑皮层星形胶质细胞NF-κB表达及继发性死亡的影响

目的观察划痕损伤对大鼠脑皮层星形胶质细胞NF-B表达及自噬、凋亡和坏死的影响。方法建立SD大鼠脑皮层星形胶质细胞划痕损伤模型,用NF-B抑制剂吡咯醛二硫氨基甲酸（PDTC）干预48 h,分别用流式细胞术、免疫荧光法、Western blot检测不同时间点（1、6、12、24、48 h）星形胶质细胞凋亡、坏死及NF-B p65蛋白、自噬蛋白LC3Ⅱ表达。结果星形胶质细胞NF-B蛋白表达在划痕损伤后1 h开始增多,24 h达高峰,凋亡、坏死及LC3Ⅱ表达均随时间推移有不同程度升高（P〈0.01）。PDTC处理后,上述变化均有不同程度的抑制（P〈0.01）。结论划痕损伤后可激活脑星形胶质细胞NF-B表达、自噬、凋亡和坏死。     

小鼠NF-κB p65亚基真核表达质粒的构建

[目的]构建小鼠NF-κB p65亚基真核表达质粒。[方法]扩增NF-κB p65亚基,然后构建其真核表达质粒(m-NF-κB-p65-p EGFPC1),并通过PCR和测序验证重组质粒中p65亚基的正确性;然后提取无内毒素的质粒,转染Hep G2细胞,通过观测重组蛋白所融合的绿色荧光蛋白,检测目的蛋白表达情况。[结果]PCR产物的电泳结果显示,成功扩增了小鼠NF-κB p65亚基,成功构建了小鼠NF-κB p65亚基的真核表达质粒,将其命名为m-NF-κB-p65-p EGFP-C1。在真核细胞中,重组质粒可以成功表达小鼠NF-κB p65亚基融合绿色荧光蛋白的目的蛋白。[结论]重组质粒NF-κB-p65-p EGFP构建成功,为后续开展NF-κB信号通路的相关研究奠定了基础。     

NF-κB、MIF在子宫内膜异位症的表达及其相关性研究

采用免疫组织化学SABC法检测30例对照组子宫内膜、35例子宫内膜异位症患者的在位内膜及60例子宫内膜异位症患者的异位内膜中核转录因子-κB(NF-κB)、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)的表达。结果表明:NF-κB、MIF主要表达于3组内膜的腺上皮细胞,在异位内膜的间质及血管内皮细胞中亦有表达。对照组子宫内膜低表达,而在患者异位内膜的表达最强(P<0.01);NF-κB与MIF在3组内膜中的表达具有较强的相关性,相关系数分别是0.875、0.882、0.927。NF-κB、MIF在子宫内膜异位症患者的在位及异位的内膜中有异常高表达,而在正常子宫内膜组织中低表达;NF-κB与MIF的表达呈正相关。NF-κB可能通过上调MIF的表达在子宫内膜异位症发病机制中起重要作用。     

基于SIRT1/NF-κB炎性通路探讨加味脑泰方对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马组织病理形态的影响

目的 探讨加味脑泰方（以下简称JWF）对血管性痴呆（vascular dementia,VD）大鼠SIRT1/NF-κB p56炎性通路的调控作用。方法 采用双侧颈总动脉结扎法（two-vessel occlusion,2-VO）复制VD大鼠模型。实验设正常组,假手术组,模型组,JWF高、中、低剂量组和奥拉西坦组,其中JWF高、中、低剂量组和奥拉西坦组分别灌胃给予JWF17.0、34.0、51.0 g/kg和奥拉西坦0.216 g/kg,其余3组灌服等容量蒸馏水,连续干预30 d。采用Morris水迷宫、HE染色分别检测大鼠学习记忆能力和海马组织病理形态变化;采用免疫组化检测沉默信息调节因子-1（silent informatio regulator-1,SIRT1）、核因子κB抑制蛋白d亚基（The nuclear factorκB inhibits theprotein subunit,IκBα）、核因子-κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著降低（P<0.05）,海马神经元变性、坏死,炎性细胞浸润增加,且SIRT1、IκBα表达下调,NF-κB p56表达上调（P<0.05）;与模型组比较,奥拉西坦组和JWF高、中剂量组大鼠学习记忆能力显著增强（P<0.05）,海马组织中神经元锥体细胞排列较整齐,轮廓清晰,炎性细胞浸润显著减少,且海马组织内SIRT1、IκBα表达上调,NF-κB p56表达下调（P<0.05）。结论 JWF对血管性痴呆大鼠炎性相关信号通路SIRT1/NF-κB p56具有明显的调控作用,这可能是其保护VD大鼠海马神经元继而改善学习记忆能力的重要机制之一。     

NF-κB研究进展及其与炎症的关系

文中详细综述了NF-κB信号通路的组成、激活途径及其与人类炎症性疾病的相关性,并对其未来发展进行了展望。     

黄连素对PCOS大鼠肠道菌群以及LPS/NF-κB信号通路的影响

【目的】探讨黄连素对PCOS模型大鼠血清性激素水平、肠道菌群以及LPS/NF-κB信号通路的影响。【方法】将SD大鼠随机分成对照组、模型组[来曲唑1 mg/（kg·d）]、达英-35组[0.18 mg/（kg·d）]、二甲双胍组[0.135 g/（kg·d）]、黄连素组[0.216 g/（kg·d）]以及黄连素+二甲双胍+达英-35(3种药物合用)组,每组10只,灌胃28 d,检测大鼠体质量,用ELISA法检测血清性激素水平、胰岛素指数（HOMA-IR）、脂多糖（LPS）、白介素1(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(INF-γ)变化,用16s rDNA扩增子焦磷酸测序肠道菌群变化。【结果】黄连素和二甲双胍明显减低PCOS模型大鼠体质量,血清促黄体生成素（LH）和睾酮（T）水平,HOMA-IR、LPS和炎性因子水平表达,增加肠道菌群数量和多样性,增加拟杆菌门（Bacteroidetes）、变形菌门（Proteobacteria）、放线菌门（Actinobacteria）、疣微菌门（Verrucomicrobia）、拟杆菌属（Bacteroides）、乳酸菌属（Lact...     

海藻糖抑制NF-κB介导的炎性反应缓解镉致大鼠肾脏损伤

为探究海藻糖对镉致大鼠肾脏炎性反应和组织损伤的保护作用及其机制,将32只体重110 g的雄性SD大鼠随机分为对照组、镉处理组、海藻糖组、镉与海藻糖共处理组,持续8周。试验结束后采集血清检测肾功能生化指标,ELISA检测肾脏组织中促炎因子含量,Western blot和免疫组织化学方法检测核因子κB (NF-κB)信号通路的变化,Real-time PCR检测NF-κB下游促炎因子转录水平。结果表明：与对照组相比,镉处理组血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和尿酸(UA)含量极显著升高,NF-κB信号通路激活介导肾脏炎性反应。与镉处理组相比,镉与海藻糖共处理组血清Scr、BUN、UA含量显著降低,肾脏组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、巨噬细胞趋化蛋白(MCP)-1含量极显著降低,NF-κB核转位极显著减少并抑制下游促炎因子转录。综上,海藻糖可通过降低NF-κB介导的炎性反应而缓解镉致大鼠肾脏损伤。     

PCV2感染对仔猪肝脏MyD88-NF-κB信号途径的影响

选取31头经检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原和抗体均为阴性的5周龄断奶仔猪,随机分为对照组16头和试验组15头,对照组仔猪每头滴鼻4 mL PBS,试验组仔猪每头滴鼻4 mL 5×105TCID50.mL-1PCV2悬液。于PCV2接种当天剖杀4头仔猪作为对照组,分别于14、21和35 d剖杀4头对照组和5头试验组仔猪,采集肝脏。用激光共聚焦显微镜检测核因子κB/P65(NF-κB/P65)蛋白的核易位变化;蛋白提取法分别提取肝脏细胞核蛋白和胞浆蛋白,Western blot定量检测细胞核中NF-κB/P65和细胞浆中p-IκBα、MyD88蛋白含量的变化;电泳迁移率(EMSA)法检测细胞核中NF-κB DNA的结合率变化。检测结果显示,PCV2接种仔猪,肝脏中NF-κB/P65蛋白核易位逐渐增多,到21 d达到峰值;p-IκBα、MyD88、NF-κB/P65 DNA结合率在接种后均先升高后趋于恢复,并于21 d达到高峰。与对照组仔猪相比,肝脏中MyD88和NF-κB/P65蛋白含量以及NF-κB DNA结合率在14和21 d试验组均显著升高(P<0.05),35 d含量变化不显著;21 d时试验组p-IκBα蛋白含量显著升高。相关性分析显示,NF-κB/P65蛋白含量与MyD88含量、NF-κB DNA结合率之间存在显著正相关,相关系数分别是0.566和0.528。结果表明,PCV2可通过激活MyD88启动NF-κB信号途径;通过IκBα的磷酸化降解激活NF-κB,并促进其进行核易位,使NF-κB与DNA发生结合,调控相关炎性细胞因子的转录和表达。     

核因子-κB与鼻息肉组织中缺氧诱导因子-1α表达的相关性研究

目的:观察核因子-κB(NF-κB)与鼻息肉组织中缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)表达水平的相关关系,以探讨鼻息肉发病的可能机制。方法:运用免疫组化SP法检测鼻息肉组织中NF-κB、H IF-1α的表达水平,采用t检验和直线相关分析进行组间差异和相互关系的统计学分析。结果:鼻息肉组织中NF-κB、H IF-1α的表达水平明显高于下鼻甲黏膜(P<0.001),鼻息肉组织中NF-κB与H IF-1α表达水平呈中度的正相关关系(r=0.628,P<0.001)。结论:NF-κB、H IF-1α在鼻息肉组织中呈阳性表达,其表达强度高于下鼻甲黏膜,与鼻息肉的发生发展相关;NF-κB可能通过上调H IF-1α的表达而作用于鼻息肉的形成过程。