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基因芯片标准化是其特异灵敏检测病原的基本保障,本研究针对金标银染可视化基因芯片制备中点样缓冲液的使用、点样次数、杂交温度、杂交时间、胶体金浓度以及银染时间分别进行优化实验,分析其对金标银染可视化共检基因芯片杂交信号的影响.分别选取猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的S和M基因,猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis of swine virus,TGEV)的N和S基因,A型猪轮状病毒(Group A porcine rotavirus,GAR)的VP7和NSP4基因设计引物.根据目的基因片段设计5’端修饰有15个T碱基的60-mer寡核苷酸探针,分别以1∶1混合点样缓冲液和直接进行喷样两种方式,利用芯片点样仪喷样分别喷样1次、2次、3次于醛基玻片上制成基因芯片.应用不对称PCR对实验室构建保存的三种腹泻病毒的阳性质粒进行生物素掺入标记,分别在40、45、50和55℃与基因芯片杂交30、60、90和120 min.利用生物素-链霉亲和素的特异性链接,分别将稀释10、20、30、40、50及60倍的链霉亲和素修饰的纳米金颗粒引入反应体系,通过不同银离子染色时间后后,直接眼观实验结果.应用优化后的标准化可视化芯片和RT-PCR同时对173份临床送检病料进行检测,以评价芯片临床应用.结果表明,应用探针和点样缓冲液1∶1混合的方法进行1次喷样制作的基因芯片,在50℃环境中杂交90 min后,与4μg/mL链霉亲和素修饰的纳米金颗粒结合,再进行12~14 min银染,经过10次重复性实验,可确定为金标银染可视化基因芯片的最佳优化条件.临床病料可视化芯片检测结果与RT-PCR检测结果一致.本研究确定了病毒性腹泻可视化共检芯片的最佳反应条件,为该技术的临床应用标准化研究奠定了基础. 相似文献
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牛病毒性腹泻病是一种临床上常见的腹泻病,传染性较强。所以,做好相应的防控和管理是现代兽医学研究的主要课题之一。为了进一步有效并良好地防治牛病毒性腹泻病,对我国这种病症的危害状况进行简要分析,探究防控现状,并根据现状提出了相应的解决方案,旨在为我国牛病毒性腹泻病防控提供一定的参考和帮助。 相似文献
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现如今,随着我国生猪养殖业的迅速发展,中小规模的养殖场逐渐增多,而个体养殖户逐渐减少,但这些中小规模的养殖场普遍存在监管不力和疾病预防知识缺乏等问题,导致猪疾病发生率越来越高,给养殖场带来了极大的经济损失。因此,为了减少养殖户和养殖场的经济损失,积极做好猪相关疾病的预防和治疗至关重要。基于此,阐述了生猪常见病及治疗措施,并提出了预防生猪疾病的一系列措施,旨在减少生猪养殖户的经济损失。 相似文献
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最近几年,市场经济的发展带动了社会上其他行业的迅猛发展,其中以养殖业的发展最为突出。猪的养殖在养殖业中的发展规模最大,但在猪养殖过程中,会经常出现诸多的问题,影响养殖者的经济收益。基于此,针对在养猪场中猪的常见病进行论述,分析猪的常见病的治疗与用药方法,希望为养殖者带来一定的参考。 相似文献
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猪腹泻性疾病是规模化猪场的多发病,是造成猪死亡的重要原因之一。对于养殖户而言,一旦猪发生腹泻性疾病,就会影响到猪的生长,严重的还会造成猪死亡,进而给养殖户造成经济损失,对此,必须采取有效的治疗措施。基于此,分析猪腹泻性疾病的综合治疗措施。 相似文献
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应用解剖学和组织学方法(包括光镜、电镜和组织化学技术)研究了猪的犁鼻器。成年猪的犁鼻器呈梭形,长约3.5cm,中段直径约0.6cm,后端达犬齿的横切面。犁鼻管的外侧壁衬有非感觉上皮,内侧壁衬有感觉上皮。感受细胞的远侧突含有丰富的细胞器,游离面覆盖着许多长短不等的微绒毛。固有层除了大量的血管、神经和腺体外,常见到孤立淋巴小结。感觉上皮的浅带显示ACP、SDH和NSE活性,但ALP活性仅见于感觉上皮的最表层。 相似文献
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猪的体温在猪病治疗和诊断中起着重要的作用。基于此,介绍了测量病猪体温的方法,深入分析了机体发热的生理作用,然后提出了注射和药物处理的治疗方案,期望能提高治疗的效果,减少病猪死亡率,减少农户的经济损失。 相似文献
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