PRSV对番木瓜叶片防御酶活性的影响

对不同抗性番木瓜（Carica paporya L．）品种人工接种番木瓜环斑型花叶病毒病（Papaya ringspot virus，PRSV）Ys株系，分析其抗病性与叶片中POD、PPO及SOD等防御酶活性及POD同工酶变化的关系．结果表明，接种PRSV-Ys后，抗病突变体“岭抗1号”（暂名）的POD和PPO活性先升后降，上升幅度明显高于感病品种穗中红，后期POD和PPO活性则低于穗中红；SOD活性在初期升高，后期则恢复到正常水平．“岭抗1号”叶片POD同工酶增加1条谱带砒0．745．POD同工酶组成型表达及酶活性的变化与抗病相关，可作为评价抗病性的生理生化指标．     

CaCl2对番木瓜幼苗酸雨伤害的生理保护效应

用30 mmol/L的CaCl2预处理番木瓜(Carica papaya L.)幼苗,结果表明,钙预处理能有效减缓番木瓜幼苗因酸雨胁迫引起的光合速率、叶绿素含量的下降,增加超氧歧化酶(SOD)活性,减少膜质过氧化产物丙二醛(MDA)含量,降低细胞质膜透性,维持细胞汁液pH值稳定性,减轻酸雨对番木瓜幼苗的酸致损伤.     

番木瓜棕榈疫霉核糖体DNA-ITS序列分析

采用真菌核糖体转录间隔区通用引物ITS1和ITS4,PCR扩增了2株分离自广州的番木瓜疫霉菌(Phytoph-thorasp.)的核糖体基因ITS序列,并对PCR产物进行了克隆测序.供试菌株C0506071、C0506072分别克隆出814 bp、830 bp的序列,两菌株ITS序列间的相似同源率为99.62%.将供试菌株的ITS序列与GenBank中登陆的20株疫霉菌株的ITS序列进行聚类分析,结果表明,供试菌株与GenBank注册的AF467093、AJ517463聚在同一分枝上,均为棕榈疫霉(Phytophthora palmivora),其他不同的疫霉种聚在不同的分支上,系统学关系较远.这表明分离自广州的2株番木瓜疫霉菌为棕榈疫霉(Phytophthora palmivora).     

番木瓜小孢子发生和雄配子体形成

首次报道了番木瓜(Carica papaya L.)雄花小孢子发生和雄配子体形成的过程.结果表明,番木瓜花花药4室,药壁5～6层,腺质绒毡层;小孢子母细胞减数分裂为同时型,四分体呈正四面体形.成熟花粉粒为二细胞型,呈圆形;小孢子发育及雄配子体形成过程中有败育现象,产生空粒花粉粒.导致花粉粒败育的主要原因是绒毡层细胞延迟解体退化,不能及时提供小孢子正常发育的营养.     

番木瓜胶孢炭疽菌的生物学特性研究

对引起番木瓜（Carica papaya）炭疽病的胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosprioides Penz.）的生物学特性进行了研究.结果表明,该病原菌菌丝生长的温度为10～35℃,最适温度为25～28℃,分生孢子萌发的温度为10～40℃,最适温度为28～30℃;该菌在pH 3～11的范围内均可生长,菌丝生长的最适pH为6,分生孢子萌发的最适pH为5;分生孢子萌发对相对湿度要求严格,在水滴中萌发率最高;该菌在完全黑暗条件下生长速度最快;葡萄糖、乳糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉能促进分生孢子的萌发和形成;该菌的致死温度为55℃10 min.     

转基因番木瓜抗病性测定和纯合系的获得

分别对转番木瓜环斑病毒（Papaya ringspot virus，PRSV）复制酶基因（Trp）的T3、T4代番木瓜（Carica papaya L．）品系在苗期进行攻毒试验和PCR分子生物学分析．结果表明，在苗期T3、T4代分子检测阳性株均高抗PRSV的Ys株系，证实Trp基因能够在后代中稳定遗传．除品系Trp-6-2外，其它所有T3、T4代自交植株仍有基因分离．Trp-6-2的自交株和其T4杂交后代，苗期攻毒试验均表现抗病，PCR检测复制酶基因均为阳性，所转基因没有发生分离，可以初步推定Trp-6-2为转基因的纯合系．大田病情调查结果表明，T3代在定植田间的前5个月内，转基因植株均高抗PRSV．但在定植5个月后发现一个转基因品系38株中有3株表现发病．     

番木瓜杂交果座籽与发芽及F1代的环斑花叶病调查研究

研究了番木瓜杂交制种中存在的结实座籽,以及田间对环斑花叶病的问题。这一结果为进一步筛选抗病杂种新品系,不断开发和综合利用番木瓜的优良特性,提高其经济价值和效益,有一定的参考意义。     

核桃早实基因的RAPD标记及其序列分析研究

 【目的】确定RAPD标记OPB-08900与核桃早实基因的遗传距离，对该标记测序，分析其序列特征。【方法】以核桃早实优系绿园和晚实、速生优系绿丰及绿园×绿丰杂交组合的154株F1杂种后代材料的DNA为模版，OPB-08（5′-GTCCACACGG-3′）为引物，PRAD-PCR技术检测与核桃早实基因相关的RAPD标记OPB-08900在供试亲本和F1群体的分离状况，Haldane函数计算遗传距离；对OPB-08900 DAN片段克隆测序；DNAMAN软件分析序列酶切位点，BLAST分析序列同源性。【结果】RAPD标记OPB-08900在早实亲本绿园上标记带出现，在70株早实后代的69株上出现；但在晚实亲本绿丰上该标记带未出现，在84株晚实后代中有82株未出现；供试杂交群体早实和晚实性状的分离比例符合1﹕1的分离比例，RAPD标记OPB-08900与核桃早实基因共分离，OPB-08900与核桃早实基因的遗传距离为1.99 cM，序列全长958 bp，该标记应记为OPB-08958，GenBank序列号为DQ673614；有36个限制性内切酶对OPB-08958序列有97个酶切位点， OPB-08958序列和植物基因组序列没有同源性。【结论】核桃的早实性状受多基因控制，RAPD标记OPB-08958与核桃早实基因之一相连锁，其DNA序列为核桃基因组所独有。     

基于RAPD分子标记芹菜品种亲缘关系分析研究

[目的]研究RAPD分子标记芹菜品种亲缘关系分析方法。[方法]以来自中国不同地区4JD种不同品种的芹菜为试材,对RAPD技术在鉴定芹菜品种中的科学性进行验证与分析。[结果]13种不同长度引物扩增的不同品种芹菜DNA的谱带清晰度以及数量等有明显区别,在相似系数为0．61时,可将所有测试芹菜品种划分为4类。[结论]RAPD技术是适用于分析芹菜品种亲缘关系的简易与理想的DNA分子标记技术。能很好的区分芹菜品种间亲缘关系的远近。     

MicroRNA用于创制抗PRSV番木瓜新种质的展望

微小RNA(microRNA,miRNA)是真核生物体内调控基因表达的一类非常重要的小分子RNA,在植物逆境适应过程中发挥着重要的作用。总结番木瓜环斑病毒(papaya ring spot virus,PRSV)致病机理研究的最新进展,探讨miRNA在植物抗病毒中的研究进展和应用前景,提出研究番木瓜miRNA参与抗PRSV机制的途径,为开展番木瓜miRNA研究和创制抗PRSV番木瓜新种质提供理论参考。     

17个番木瓜品种(系)的RAPD分析

利用RAPD技术,从214个引物中筛选出能稳定扩增的16个引物,对17个番木瓜品种(系)进行了扩增,共扩增出120条谱带,77条具有多态性,多态性比例占64.17%.根据RAPD扩增结果,采用非加权成对平均数算法(UPGMA)对17个番木瓜品种(系)进行了聚类分析,结果表明,其遗传距离在0.06-0.23之间,在0.17水平上可以分为4类.     

小麦抗叶锈基因Lr34的RAPD分析

在建立了适合本实验室的RAPD反应体系基础上,用120个随机引物对含抗病基因Lr34小麦品种和感病品种Thatcher进行了RAPD分析.68个引物均能扩增出可辨条带,其中S22扩增出1条660 bp特异性条带,S130扩增出1条2 000 bp特异性条带,S503扩增出1条500 bp特异性条带.S22和S503在实验中获得较好的重复性,并将其产物命名为S22-660和S503-500.     

牛血清白蛋白在锁阳RAPD分析中的作用

由于植物DNA常含有内源多酚化合物，影响其PCR扩增。而研究表明，牛血清白蛋白（Bovine serum albumin，BSA）被应用于酶及PCR反应系统中，可以起到减少内源抑制物的干扰作用。为此，笔者研究了BSA在锁阳RAPD分析中的作用。     

牛血清白蛋白在锁阳RAPD分析中的作用

[目的]为了研究牛血清白蛋白(BSA)在RAPD分析技术中的作用。[方法]通过锁阳RAPD分析中添加BSA,观察其对RAPD扩增的改善情况。[结果]结果表明,在锁阳RAPD分析过程中,添加BSA可显著改善锁阳的PCR扩增效果,并降低Taq酶的用量,BSA最佳使用浓度为2μg/μl。[结论]添加BSA以改善植物RAPD分析的方法是可行的;该研究为BSA在RAPD分析技术中的应用提供依据。     

甘蓝型油菜白花基因的RAPD标记

以甘蓝型白花油菜及其分离群体为材料,对甘蓝型油菜白花性状的遗传规律进行了研究。结果表明,白花对黄花是一对由不完全显性基因(WW)控制的不完全显性遗传性状;利用集群分离法(BSA)对该白花基因进行RAPD分析,在1 200个随机引物中,获得了引物S1092(5-CCC AGG CTA C-3),在白花基因库和黄花基因库间扩增出多态性产物S-10921250;对该分离群体及其姊妹系和其他白花油菜进行的单株验证表明,S-10921250与甘蓝型油菜白花基因相连锁,遗传距离为0.84 cM。     

17个番木瓜品种(系)的RAPD分析

利用RAPD技术,从214个引物中筛选出能稳定扩增的16个引物,对17个番木瓜品种（系）进行了扩增,共扩增出120条谱带,77条具有多态性,多态性比例占64.17%.根据RAPD扩增结果,采用非加权成对平均数算法（UPGMA）对17个番木瓜品种（系）进行了聚类分析,结果表明,其遗传距离在0.06-0.23之间,在0.17水平上可以分为4类.     

利用RAPD—BSA分子标记技术筛选金针菇色泽基因研究

色泽是金针菇的重要性状之一,受一对等位基因的控制。以FL19(黄色)、8801(白色)及其后代(F1代、F2代)菌株和相应单核菌株为材料,采用分离群体分组分析(BulkedSegregantAnalysis,BSA)方法,对金针菇基因组DNA进行RAPD分析,通过对200个引物的筛选,获得了一个与白色性状基因紧密连锁的RAPD标记S3751800,并在亲本及其后代菌株进行了验证,具有较好的重复性和稳定性。可用于白色金针菇新品种的辅助选育。     

抗PRSV转基因番木瓜研究进展

番木瓜花叶环斑病毒（PRSV）严重影响着热带亚热带的重要水果番木瓜的生产,在物理和化学防治措施效果不佳的情况下,利用病原获得抗性防治PRSV的方法给番木瓜的生产带来一线生机。综述了近年来转基因番木瓜中所采用的PRSV病毒的几个基因及其优缺点。