葡萄简化组织培养外植体系的建立

为了在简化组培条件下获得葡萄高效外植体系,对抑菌剂的使用浓度、浸泡时间和培养浓度进行了大量比较试验。试验结果表明：抑菌剂浸泡浓度为4%,浸泡时间为6h,培养浓度为0.2%时,葡萄外植体的成功率能够达到95%以上,所获外植体分化正常。     

马大杂种相思组培快繁技术研究

本试验选择马大杂种相思20年生抗风直干型单株,借助扦插繁殖技术获得足够数量的试验材料,再以当年新生枝条的带腋芽茎段作为外植体开展试验,旨在提高马大杂种相思的繁殖效率。经研究发现,最适宜的消毒方法为15 min消毒以及30 s乙醇处理,污染率为6.58%,存活率为78.08%。质量浓度1.0~1.5 mg/L,增殖倍数达到3倍,芽长势较好;当NAA浓度为0.1 mg/L时,增殖倍数最大,芽的长势优异。当在IBA 6 000 mg/L培养4~8 h,再放入MS进行培养,能够实现生根率100%,同时幼苗生长旺盛,为最佳处理方法。试验结果表明,外植体的消毒效果既与消毒剂处理有密切关系,同时还受到外植体采集时间以及采集部位等因素影响,增殖效果与6-BA、NAA浓度有关。随着6-BA倍数的增加,增殖倍数呈上升趋势;随着NAA浓度的增加,芽体生长状况逐渐变好。因此,借助高质量浓度激素进行浸泡处理,生根效果理想,不仅有着较高的生根率,生根数也较多。     

茶树腋芽离体培养中的褐化控制研究

为降低茶树离体培养过程中外植体褐化程度,以‘凫早2号’当年生未木质化的春季健壮新梢为材料,带茎段和叶柄的单个腋芽为外植体,接种前用2.0 g/L PVP溶液浸泡1 h,采用正交试验研究不同培养基、起始培养温度和时间对外植体的褐化控制效果。结果表明,腋芽在1/4MS+BA 2.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖20g/L+琼脂7.5 g/L培养基中,10℃下避光培养48 h褐变率最低,仅为5.6%;培养时间和培养基类型2个因素对降低腋芽褐化没有显著影响,温度对降低腋芽褐化有显著影响;温度因素外植体对褐化影响最大,培养基次之,培养时间最小,说明低起始培养温度是降低外植体褐化的主要因素。     

山葡萄“双优”再生系统建立的研究

以山葡萄"双优"茎段、叶柄和叶片为材料,采用不同的激素浓度进行再生体系的建立。结果表明,以山葡萄茎段为外植体,MS为培养基,激素浓度2.0 mg/L的BA和0.02～0.05 mg/L的IBA再生,获得了山葡萄再生芽,分化率达到6.67%～8.36%,激素浓度为0.2mg/L的IBA进行生根培养,经过15～20 d培养,生根率可达100%,获得了山葡萄再生植株。     

辣椒6421子叶外植体离体培养

以辣椒自交系6421子叶外植体为实验材料,通过筛选6-BA浸泡预处理浓度、优化不定芽诱导培养基、芽伸长培养基和生根培养基配方来提高辣椒子叶离体培养效率。结果表明:6-BA浸泡预处理子叶外植体最佳浓度为50 mg/L,最佳不定芽诱导培养基为MS+4.0 mg/L 6-BA,外植体浸泡处理1 min后接种至该培养基中,培养15 d后不定芽诱导率达93.21%;最佳不定芽伸长培养基为MS+6.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA,培养20 d后芽伸长率可达23.21%;最佳生根培养基为1/2 MS+0.25 mg/L IAA+0.25 mg/L IBA,培养30 d后生根率可达90.12%。     

沙冬青脱水素基因转化紫花苜蓿的研究

为获得抗旱性较强的转基因苜蓿植株,以紫花苜蓿品种中苜2号作为基因转化受体,通过对外植体选择、菌液浓度、选择压确定、侵染时间和共培养时间等因素进行优化,成功建立了农杆菌介导的遗传转化体系。在此基础上,将沙冬青脱水素基因通过农杆菌的介导,转化到中苜2号中。试验结果显示,子叶和下胚轴作为外植体愈伤组织诱导频率最高,可达100%;获得抗性愈伤组织与转基因植株的卡那霉素最佳筛选浓度为25 mg/L;外植体与农杆菌的共培养时间以5 d为最佳。试验共获得126株T0抗性株,PCR检测30株表现为阳性,表明脱水素基因已转入受体植株中。     

多纹泥炭藓外植体消毒及其培养基筛选

如今泥炭藓植物的使用受到越来越多的重视,导致人工采摘严重,泥炭藓湿地严重破坏,本研究针对该问题进行泥炭藓植物的人工培养试验,以多纹泥炭藓外植体为实验材料,筛选出无菌苗存活率最高,染菌率最低的消毒方法:200 mg/L的青霉素浸泡2.5 h,75%酒精浸泡60 s,0.3%浓度下的次氯酸钠浸泡60 s,在该消毒方法下以Konp培养基为基本培养基,多纹泥炭藓存活率达100%,染菌率为33%;将无菌苗接入Beneck、MS、BG-11和Knop 4种培养基内进行组织培养,筛选出最适培养基-Beneck培养基;在不同培养基中加入10个不同浓度梯度的蔗糖,筛选出发芽率最多的培养基及其最适蔗糖浓度,即Beneck培养基,蔗糖浓度为2%。最适的消毒配方和培养基配方将会在短期时间内提供大量的多纹泥炭藓无菌苗,对解决添加栽植苗供应量不足的问题起到积极帮助。     

毛叶木姜子组织培养中无菌苗建立的初探

为进一步开展毛叶木姜子组培再生研究,获得毛叶木姜子的无菌苗从外植体取材时间、不同消毒剂浓度与时间以及外植体抗褐变等多方面对无菌苗获得的前期条件进行分析。结果表明:于5月上旬采集当年生半木质化枝条剪取茎段,0.2%HgCl 2处理12 min为毛叶木姜子无菌体系建立时的最佳消毒方式,污染率为15.56%,但外植体的褐变率较高;进一步采用正交试验设计L 9(34)进行抗褐变试验,采用多指标综合平衡法进行分析,结果表明:外植体类型、冷藏时间、PVP为外植体抗褐变及腋芽萌动的主导因素,而AC对毛叶木姜子外植体抗褐变效果不明显,予以剔除,得出毛叶木姜子外植体抗褐变的最优水平组合为选用半木质化枝条作为外植体,接种前5℃低温冷藏5 h,培养基为MS+PVP 1.00 g·L^-1。     

不同浓度细胞分裂素对甜菜种子引发的影响

为了测定不同浓度细胞分裂素6-BA的引发剂对甜菜种子引发的效果,为甜菜种子包衣剂物料筛选提供依据,本研究以TD802甜菜种子为试验材料,设置3种浓度和3个时间梯度的9个处理,通过对甜菜种子浸泡回干发芽培养,测定它们的发芽势、发芽率、发芽指数以及活力指数。结果显示,0.1%6-BA处理甜菜种子在8、12、24 h时的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数均较高于对照种子;0.5%6-BA不同时间处理甜菜种子,处理时间8 h和12 h的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数都高于对照;1%6-BA只有处理甜菜种子12 h时的发芽率、发芽指数和活力指数高于对照。不同浓度细胞分裂素6-BA对甜菜种子的萌发随着时间不同,效果也各有不同。处理时间过长或过短都会影响引发效果。     

细子龙扦插技术研究

为研究不同因素对细子龙扦插的影响,找到适合细子龙扦插生根的方法,提高生根率,以细子龙成年母株当年生枝条为试验材料,分别探讨激素种类、激素浓度和浸泡时间3个因子对细子龙扦插生根率和愈伤率的影响。结果表明：激素种类、激素浓度和浸泡时间3个因子对细子龙扦插生根率和愈伤率的影响显著(P<0.05)；影响细子龙生根率最大的因子是浸泡时间,而不是激素种类；激素种类及激素浓度显著(P<0.05)影响细子龙扦插愈伤率且激素种类影响力大于激素浓度；用浓度为500mg/L的IBA溶液处理10min细子龙扦插生根率最高为62.22%。     

燕麦愈伤组织诱导和分化再生影响因素的研究

以燕麦3个品种(系)幼胚、幼穗为材料,通过组织培养方法,研究了基因型、培养基、外植体对愈伤组织诱导、继代和分化再生的影响。结果表明,对愈伤组织的诱导,基因型和培养基起重要作用,对幼胚作用极显著,对幼穗作用显著;外植体不同也影响愈伤组织形成,随培养基成分改变而变化,且幼穗较幼胚更易培养;2,4-D浓度影响愈伤组织生长和胚性愈伤组织形成,3 mg/L 2,4-D有利于愈伤生长,促进胚性愈伤形成;草莜一号幼穗愈伤组织有很强的继代能力,继代培养330 d仍具有46.58%的分化率,该材料在组织培养和基因工程研究中具有很大潜力。     

黄花矶松组织培养及培养基筛选研究

试验选用种子培养的黄花矶松无菌苗的子叶、茎段、下胚轴作为外植体材料,研究不同外植体的离体培养技术及其适宜的培养基。结果表明,生长素2,4-D对不定芽诱导具有明显的促进作用,在其浓度为1.5 mg/L时诱导率最高,子叶是诱导不定芽的良好外植体,最适培养基为MS+ 2,4-D 1.5 mg/L+ 6-BA 2.0 mg/L+ NAA 1.0 mg/L。黄花矶松的最适增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+ NAA 1.0 mg/L,而且是以丛生芽的方式进行增殖的;最适生根培养基是1/2 MS+ KT 1.0 mg/L+ IBA 1.0 mg/L。     

木槿花粉活力检测方法筛选

摘 要：以2个木槿（Hibiscus syriacus）品种花粉为材料,用TTC法和离体萌发法对木槿花粉活力进行了检测。结果表明：木槿花粉活力检测不适合用TTC法;以木槿花粉为外植体,采用蔗糖悬浮溶液为培养基,确定适合木槿花粉萌发的条件为15%蔗糖溶液+15 mg/L硼酸在30 ℃恒温培养箱中培育0.5 h即开始开始萌发。     

莱阳矮樱桃的离体培养技术研究

用莱阳矮樱桃茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究6-BA对外植体芽诱导的影响,研究两种激素6-BA和IBA不同浓度组合的芽增殖效应,及研究IBA的生根效果。试验结果表明：莱阳矮樱桃的最佳分化培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+IBA0.1 mg/L+Sugar30 g/L+Agar6 g/L,最有效的生根培养基为1/2MS+IBA0.5 mg/L+Sugar30 g/L+Agar6 g/L。     

油梨愈伤组织诱导及分化研究

摘要：[目的]研究不同激素及外植体类型对‘哈斯’油梨（Persea Americana Mill.cv.Hass）愈伤组织诱导及分化的影响,筛选最佳诱导条件和外植体。[方法]通过间接器官发生途径。主要探讨（1）单一激素萘乙酸（1-Naphthylacetic acid,NAA）、2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-dichlorophenoxy acetic acid,2,4-D）;6-苄氨基腺嘌呤（6-Benzylaminopurine,6-BA）分别与2,4-D和NAA 结合时对‘哈斯’油梨叶片愈伤组织的诱导效应。（2）不同外植体（叶片、叶柄、茎尖、茎段）在相同条件下（基本培养基：MS+1 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+0.1NAA mg/L）的愈伤组织诱导效应。（3）单一激素 6-BA（或与NAA结合）对油梨愈伤组织芽分化的效应。[结果]结果表明：以MS为基本培养基,（1）添加1.0 mg/L 2,4-D/NAA,其诱导效果最佳,诱导率分别为45.3%和20.2%;但NAA诱导的愈伤质地较佳。（2）1 mg/L NAA与1.0 mg/L 6-BA结合,诱导效果较好,其诱导率最高可达84%。（3）诱导愈伤组织的最适外植体为茎段,其诱导率≥72.8%。叶柄次之,叶片和茎尖较差。[结论]综上,不同激素种类及其浓度和外植体类型对‘哈斯’油梨愈伤组织诱导影响显著。最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+7g/L琼脂。愈伤组织诱导最佳外植体为茎段,但诱导形成的愈伤组织难以分化出芽。     

影响黄瓜直接不定芽诱导的品种等因素研究

以黄瓜（Cucumis sativus L.）子叶节为外植体，研究了品种、6-苄氨基嘌呤、外植体大小及硝酸银对黄瓜直接不定芽诱导的影响。结果表明：不同黄瓜品种直接不定芽数量诱导存在显著差异，但长度诱导无显著差异；6-苄氨基嘌呤对直接不定芽数量和长度的诱导作用显著，其中4.0mg/L为数量诱导适宜浓度，其出芽率和每外植体出芽数达到最高，分别为100.0%和11.1，0.5mg/L为长度诱导适宜浓度，其平均芽长12.0mm；外植体的大小对直接不定芽数量和长度均具显著影响，随着子叶的增大诱导直接不定芽的数量和长度增加，其中单片完整子叶为最适宜大小，其出芽率、每外植体出芽数和平均芽长分别达到100%、6.7和17.1mm；硝酸银也对直接不定芽数量诱导影响显著，其中2.0mg/L为适宜浓度，出芽率和每外植体出芽数分别达到97.2%和4.2，但对芽长有抑制作用。     

不同处理方式对‘蜜光’葡萄生长的影响

为了提高葡萄生长的速度,开展了不同处理方式的试验研究。以1年生‘蜜光’葡萄苗为供试材料,通过田间试验研究5个处理方式（CK:清水喷施;处理A:绿地康3号不同浓度喷施不同次数;处理B:维大力不同浓度喷施不同次数;处理C:阿泰灵不同浓度喷施不同次数;处理D:寡雄腐霉菌-多利维生不同浓度喷施不同次数）对‘蜜光’葡萄生长情况及霜霉病染病率的影响。结果表明:采用不同方式对‘蜜光’葡萄进行喷施,其生长速度显著提高,且效果不同,其中采用0.1%阿泰灵喷施2次效果最佳,选用0.2%绿地康3号喷施2次、0.1%维大力喷施2次和0.1%寡雄腐霉菌-多利维生喷施2次效果相近;采用0.2%绿地康3号喷施2次、0.1%维大力喷施2次、0.1%阿泰灵喷施2次、0.1%寡雄腐霉菌-多利维生喷施2次均能显著降低‘蜜光’葡萄霜霉病染病率,显著提高‘蜜光’葡萄株高、枝条成熟长度和枝条直径。试验表明在‘蜜光’葡萄栽培中单独应用绿地康3号、维大力、阿泰灵、寡雄腐霉菌-多利维生,对葡萄生长及霜霉病防治效果均较为显著。本试验结合葡萄植株生长情况和对霜霉病防治效果,确定可行性方案,以期为张家口地区葡萄产业的发展提供指导。     

茎尖部位与激素对甘蔗‘福农39’和‘新台糖22’愈伤过程的影响

以甘蔗品种‘福农39’和‘新台糖22’的茎尖为外植体,以MS为基本培养基,研究不同激素浓度和不同茎尖部位对愈伤组织的诱导与分化的效应。结果表明:添加3.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)对甘蔗品种‘福农39’愈伤组织的诱导效果最佳。在此浓度下,‘福农39’和对照‘新台糖22’愈伤组织诱导率分别达到98.9%和97.8%;茎尖生长点基部(较粗的一端)以上0?3 cm的部位愈伤组织诱导效果最好,‘福农39’和对照‘新台糖22’该部位的愈伤组织诱导率分别达到了97.8%和88.9%;添加2.0 mg/L 6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)对甘蔗品种‘福农39’愈伤组织的分化诱导效果最好。在此浓度下,‘福农39’和对照‘新台糖22’愈伤组织分化出苗率分别达到了57.4%和74.1%;茎尖生长点基部以上0?3 cm部位诱导的愈伤组织分化出苗率最高,‘福农39’和对照‘新台糖22’在该部位的愈伤组织分化出芽率分别达到了41.5%和54.8%。本研究为后续‘福农39’转基因研究及健康种苗生产提供帮助。