镉对大鼠睾丸氧化应激和线粒体功能影响及葛根素保护效应

为探究镉对大鼠睾丸氧化应激和线粒体功能的影响及葛根素的保护效应,将24只雄性SD大鼠随机分为4组,分别为对照组、葛根素组、醋酸镉组、镉与葛根素共处理组,持续5周。试验结束后,制作睾丸病理切片并镜检观察;比色法测定丙二醛(MDA)含量和还原型谷胱甘肽(GSH)活性;使用MTT和Rhodamine 123染料检测线粒体功能;qPCR检测凋亡相关基因表达水平。结果表明：镉导致雄性大鼠睾丸MDA含量极显著升高,GSH活性显著降低(P<0.01),线粒体活力和膜电位降低(P<0.01),凋亡相关基因表达增加(P<0.01),精子数量和活力下降(P<0.01);镉与葛根素共处理组上述损伤明显减轻。这说明氧化应激和线粒体功能障碍是镉致睾丸损伤的关键环节,葛根素可改善镉暴露诱导的睾丸氧化应激、线粒体损伤和细胞凋亡,从而在镉致睾丸损伤中发挥保护效应。     

镉对大鼠原代培养肝细胞毒性的研究

为探讨镉对原代大鼠肝细胞的毒性作用。用二步灌流法获得大鼠肝细胞,肝细胞暴露于浓度为2.5、5.0、10.0、20.0μmoL/L的醋酸镉中12、24 h,应用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法检测醋酸镉对肝细胞存活率的影响及培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性变化。结果表明,肝细胞暴露于浓度为2.5、5.0、10.0、20.0μmoL/L的醋酸镉中,细胞相对存活率显著下降(P0.01),LDH的释放量增加,且具有剂量效应关系。提示一定浓度的醋酸镉可引起肝细胞的毒性损伤。     

异硫氰酸丙烯酯对大鼠肝细胞凋亡的影响

为研究异硫氰酸丙烯酯对细胞活性的影响,试验以20mg·L-1的内毒素(LPS)和1.25×10-5mol·L-1的异硫氰酸丙稀酯(AITC)分别或共同处理大鼠肝细胞3h后,用AnnexinV/PI双染色,流式细胞术分析细胞凋亡;反转录酶聚合酶链反应(RT-RCR)分析FasL和Caspase-8的表达情况。结果表明,AITC能有效抑制LPS(20mg·L-1)诱导的肝细胞凋亡,且在此过程中,FasL、Caspase-8的表达量均有减少。结果提示AITC可以通过Fas途径抑制LPS诱导的肝细胞凋亡,其作用有可能导致肿瘤的发生。     

镉损伤肝细胞体外模型的建立

在建立大鼠原代肝细胞体外培养的基础上,研究了不同浓度的醋酸镉对肝细胞存活率的影响。在原代肝细胞体外培养的不同时间点(4、7、10、24 h),用不同浓度的醋酸镉(0、0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L)处理3 h,MTT法测定细胞的相对存活率。结果显示,随着镉剂量的增加,细胞的相对存活率降低。当醋酸镉浓度为4.0μmol/L,细胞的相对存活率为78.35%,与对照组有极显著性差异(P0.01);用4.0μmol/L醋酸镉在不同时间点处理肝细胞,与对照组相比,细胞存活率均极显著降低(P0.01)。表明镉损害肝细胞具有一定的浓度依赖性。     

L-肉碱对NEFA致肝细胞氧化应激损伤的保护作用

奶牛酮病时引起非酯化脂肪酸(NEFA)增加,造成肝细胞线粒体损伤,引发氧化应激反应.L-肉碱作为一种抗氧化剂,是否对NEFA导致的肝脏氧化应激损伤具有保护作用仍然未知.为探讨L-肉碱对NEFA致细胞氧化应激损伤的保护效果,通过建立NEFA诱导小鼠肝细胞AML12氧化应激损伤模型,运用试剂盒检测氧化应激相关指标和线粒体分布及线粒体膜电位.结果表明,与对照组相比,NEFA极显著升高AML12细胞丙二醛和活性氧水平(P<0.01),降低总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性(P<0.01),导致线粒体异常分布(P<0.01),降低线粒体膜电位(P<0.01);但在NEFA中添加L-肉碱处理后,与NEFA组相比,极显著降低丙二醛和活性氧水平(P<0.01),升高总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性(P<0.01),极显著降低线粒体异常分布率(P<0.01),升高线粒体膜电位(P<0.05).试验结果表明,L-肉碱可减轻NEFA引起的小鼠肝细胞氧化应激损伤,为奶牛酮病治疗提供一种新思路.     

葛根素对镉致大鼠肺脏氧化损伤的保护作用

为探究葛根素对镉致大鼠肺脏氧化损伤是否有保护作用,将40只7周龄雄性SD大鼠随机分为4组,分别为对照(Con)组、镉(Cd)组、葛根素(Pu)组、镉与葛根素共处理(Cd+Pu)组。Con组自由饮水;Pu组和Cd+Pu组每日灌服200 mg·kg^-1的葛根素,连续3周。第4周开始,Cd组和Cd+Pu组开始自由饮用氯化镉水(75 mg·L^-1), Pu组和Cd+Pu组继续灌服葛根素,持续4周。试验结束后,采集大鼠肺脏,测定肺系数,检测丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果表明：与Con组相比,Cd组肺系数、MDA含量和T-SOD活性极显著升高,T-AOC、CAT和GSH-Px活性极显著降低;与Cd组相比,Cd+Pu组肺系数、MDA含量与T-SOD活性极显著降低,T-AOC、CAT和GSH-Px活性极显著升高。综上,葛根素对镉致大鼠肺脏氧化损伤有一定的保护作用。     

乐果对大鼠肝细胞凋亡的影响及其机理研究

在大鼠肝细胞培养液中加入不同浓度乐果,染毒12、24 h后,检测肝细胞凋亡率、细胞内Ca^2＋浓度、活性氧（ROS）及线粒体膜电位（Δψm）变化,并观察凋亡细胞。结果表明：染毒后肝细胞出现了凋亡变化;细胞凋亡率明显升高,除3μmol.L^-1组外,其余各处理组与对照组相比差异显著,且呈时间-剂量效应;3μmol.L^-1组细胞内Ca^2＋浓度极显著高于对照组,之后随染毒剂量的增加,细胞内Ca^2＋浓度逐渐下降;ROS水平为3-100μmol.L^-1时随染毒剂量的增大和染毒时间的延长而升高,而300μmol.L^-1组略有下降,除3μmol.L^-1组外,其余各处理组与对照组相比差异均极显著;Δψm除24 h 300μmol.L^-1组外其余各处理组均持续下降。表明低剂量乐果可诱导肝细胞凋亡,细胞内Ca^2＋、ROS和Δψm也可能参与这一过程。     

线粒体凋亡途径在硫酸黏菌素致PC12细胞凋亡中的作用

探讨线粒体凋亡途径在硫酸黏菌素诱导PC12细胞凋亡中作用.取对数生长期PC12细胞,用含0、62.5、125、250 μg· mL-1硫酸黏菌素DMEM培养液,作用24 h,采用Hoechst33258荧光染色法检测PC12细胞凋亡,Western blot法检测细胞色素C(Cyt-C)、Bax、Bcl-2蛋白表达含量,试剂盒检测Caspase-3活性.与对照组相比,125、250 μg· mL-1硫酸黏菌素剂量组细胞PC12细胞Cyt-C、Bax蛋白表达量、Caspase-3活性显著升高(P＜0.01);Bcl-2蛋白表达显著降低(P＜0.01),具有剂量-效应关系.说明线粒体途径介导PC12细胞凋亡是硫酸黏菌素神经毒性作用机制之一.     

氯胺酮对发育期大鼠肝脏氧化应激和细胞焦亡的影响

为探讨氯胺酮麻醉对发育期大鼠肝脏氧化应激和细胞焦亡的影响。7日龄SD大鼠连续注射氯胺酮,对照组注射生理盐水,检测大鼠肝脏病理组织学、肝功能指标、氧化应激水平和炎性细胞因子含量;Western blott和q PCR法检测焦亡相关蛋白和mRNA表达含量。结果表明,与对照组相比,氯胺酮组大鼠肝脏结构受损、肝功能指标降低、氧化应激和炎性细胞因子水平增加、细胞焦亡水平（NLRP3、ASC、caspase-1和GSDMD蛋白和mRNA）上调。可知,氧化应激和细胞焦亡参与氯胺酮诱导肝损伤的发病过程,为氯胺酮在兽医临床应用及肝损伤机制提供理论依据和参考。     

羟基红花黄色素A对氧化应激损伤血管内皮细胞的保护作用研究

目的 探讨羟基红花黄色素A （hydroxysafflor yellow A,HSYA）对血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用及其可能机制。方法 体外培养人血管内皮细胞EC-304,用H₂O₂构建细胞氧化应激损伤模型,分别设置正常对照组、H₂O₂损伤模型组、HSYA药物组,其中各药物组用不同浓度的HSYA预培养细胞24 h后加入50 μmol/L的H₂O₂,继续培养12 h。用MTT法检测细胞的增殖活力,用试剂盒检测各组细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）的含量,用Western Blot法检测各组细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3、cleaved Caspase-3蛋白表达水平。结果 与H₂O₂模型组相比,HSYA能显著提高细胞存活率,且呈剂量依赖性,提高细胞内SOD的活性,提高细胞内NO的含量,降低Bax表达,提高Bcl-2表达,降低Caspase-3和cleaved Caspase-3的表达（P<0.01或P<0.05）。结论 HSYA对于H₂O₂诱导的血管内皮细胞氧化应激损伤具有保护作用,其可能的作用机制与抑制EC-304细胞凋亡相关。     

蚯蚓(Eisenia foetida)对水稻土中Cd的富集及其氧化应激

以赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)为模式生物,研究其暴露于不同外源Cd浓度(0～10 mg·kg^-1)水稻土中14 d后Cd等重金属在蚯蚓体内的富集,以及活性氧(ROS)、抗氧化酶和氧化损伤蛋白等生化指标对Cd胁迫的响应。结果表明,与其他金属相比,蚯蚓更易吸收和富集Cd,富集系数(BSAF)可达14.68,且外源Cd浓度的增加能显著抑制(P< 0.05)蚯蚓对Ni、Cu和Zn的富集。采用饱和模型对应用梯度扩散薄膜技术(DGT)测得的土壤有效态Cd和蚯蚓体内Cd含量进行拟合,结果显示良好的相关性(r²=0.99)。Cd胁迫能诱导蚯蚓体内产生活性氧(ROS)并导致蛋白质氧化损伤,但超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性呈现先降后升的"U"型剂量效应。通过比较可知,ROS和蛋白羰基(PCO)可作为土壤Cd污染早期诊断的生物标志物,水稻土中Cd对蚯蚓产生早期伤害可能的阈值范围为0.13~0.21 μg·L^-11 DGT-Cd。     

Oxidative Stress: Role in Acetamiprid-Induced Impairment of the Male Mice Reproductive System

Acetamiprid has a wide range of influence on physiological functions in mammals. The objective of this study was to examine the effect of acetamiprid on the reproductive function of male mice, and to study the role of oxidative stress in acetamiprid-induced damage to the testes. Fifty adult Kunmin male mice (25-30 g) were divided into five groups (n=10 per group), i.e., control, blank, acetamiprid alone, acetamiprid and vitamin E, and vitamin E alone. All groups were treated for 35 d. The results showed that acetamiprid significantly decreased the body weight and the weight of testosteroneresponsive organs, such as the testis, epididymis, seminal vesicle, and prostate. Furthermore, acetamiprid also significantly reduced the serum testosterone concentration, and decreased sperm count, viability, motility, and the intactness of the acrosome (P＜0.05 for each parameter). The mice treated with acetamiprid had damaged seminiferous tubules and Leydig cells based on the histological structure of testes; there was degeneration of the mitochondria and endoplasmic reticulum of Leydig cells. These deleterious effects of acetamiprid may be mediated by increasing oxidative stress, as acetamiprid increased malondialdehyde and nitric oxide in the testes, reduced the activity of catalase, glutathione peroxidase, superoxide dismutase, and activated p38. The concentration of acetamiprid in the testes was lower than that in liver, so did the concentrations of liver function tests, including aspartate transaminase (AST), alanine transaminase (ALT) and alkaline phosphatase (ALP), which suggest that male reproductive function may be affected through the indirect action of its metabolites. Vitamin E significantly ameliorated the effects of acetamiprid. We conclude that acetamiprid damages male reproductive function through inducing oxidative stress in the testes.     

外源性γ-氨基丁酸抵抗仔猪氧化应激的效果及机制

【目的】 研究外源性γ-氨基丁酸（GABA）抵抗仔猪氧化应激的作用效果,及海马神经元GABA受体调节凋亡信号通路在其中可能的介导作用,为GABA作为动物应激调节剂的应用提供科学依据。【方法】 基于成功构建的仔猪活体和大鼠海马神经元氧化应激模型,考察外源性GABA对仔猪血清及海马组织中氧化/抗氧化相关指标、仔猪日增重、脑海马GABA受体以及大鼠海马神经元中GABA受体及凋亡信号通路相关基因表达水平的影响。【结果】 低、中、高浓度的GABA灌喂组（LD+OS; MD+OS;HD+OS）仔猪血清的MDA含量均极显著低于氧化应激（OS）组(P<0.01),而GSH水平均极显著高于OS组(P<0.01),同时HD+OS 组仔猪血清T-AOC水平极显著高于OS组和对照组(P<0.01);且高浓度(100 mg·kg^-1 BW)GABA降低仔猪血清MDA含量和增加GSH水平的幅度均高于低浓度(20 mg·kg^-1 BW)和中浓度(60 mg·kg^-1 BW)GABA。因此,后续研究仅考察100 mg·kg^-1 BW GABA的作用效果及其抗氧化应激的机制。OS组仔猪0-7、8-14和0-28日龄的日增重极显著低于对照组(P<0.01),而HD+OS组0-7、8-14和0-28日龄仔猪的日增重极显著高于OS组(P<0.01);OS组仔猪15-28日龄的日增重显著低于对照组(P<0.05),HD+OS组15-28日龄的日增重极显著高于OS组(P<0.01)。以上结果表明,100 mg·kg^-1 BW GABA的灌喂极显著地增加了仔猪的日增重。对照组、OS组和HD+OS组在前、中、后期的腹泻率均无显著差异(P>0.05)。氧化应激组海马组织的MDA含量极显著高于对照组和HD+OS组 (P<0.01),而T-AOC和GSH的水平均极显著低于另外两组(P<0.01),表明GABA能提高仔猪海马组织抗氧化能力。HD+OS组的海马组织GABA_A和GABA_B受体水平均极显著高于对照组和氧化应激组(P<0.01),表明GABA提高了海马组织GABA_A和GABA_B的水平。氧化应激组脑海马Bcl-2蛋白水平显著低于对照组(P<0.05),Bax和Caspase-3蛋白水平极显著高于对照组(P<0.01)。HD+OS组的Bcl-2蛋白水平极显著高于氧化应激组（P<0.01）,Bax蛋白水平极显著低于氧化应激组（P<0.01）,Caspase-3蛋白水平显著低于氧化应激组（P<0.05）。与此一致的是,氧化应激组、GABA+OS+Picrotoxin组和GABA+OS+CGP54626组大鼠海马神经元的Bax和Caspase-3蛋白水平均显著高于对照组和GABA+OS组（P<0.05）,表明GABA缓解了氧化应激状态下海马神经元的损伤,而GABA受体抑制剂的添加阻挡了GABA的抗应激损伤作用。【结论】 GABA降低了仔猪海马的氧化应激水平,而GABA抗应激的作用机制可能与其降低凋亡蛋白基因的表达相关,而GABA_A和GABA_B受体介导了该过程。     

镉胁迫对不同品种烟草生长发育和镉吸收规律的影响

【目的】探讨不同品种烟草对镉（Cd）胁迫的响应,深入了解Cd对烟草的毒害作用,为烟草Cd污染防控提供理论依据。【方法】以10个烟草品种为试材,在不同浓度外源镉胁迫条件下,采用盆栽法测定各烟草品种农艺性状、生理生化指标及镉含量。【结果】镉胁迫对部分烟草品种作用为低促高抑,其他品种表现为抑制作用,其中‘中烟100’和‘豫烟10号’对镉胁迫较敏感,在高、低镉胁迫下生物量降幅均较高,‘中烟100’分别为29.98%、29.94%,‘豫烟10号’分别为22.16%、28.39%;随着镉浓度的升高,烟草叶片叶绿素含量、净光合速率Pn、气孔导度Gs、蒸腾速率Tr整体呈现降低趋势,SOD活性、POD活性、MDA含量、游离脯氨酸含量整体呈增加趋势。烟草各器官镉含量随着镉浓度的升高而增加,表现为叶>茎>根,整个生育期中,镉含量呈现先增加后降低的趋势,在旺长期达到最高值,其中‘中烟100’、‘豫烟10号’和‘豫烟13’叶片镉含量显著高于其他品种,在3 mg/kg镉浓度下‘豫烟10号’叶部镉含量最高、为60.27 mg/kg,‘云烟87’和‘K326’的镉含量较低、分别为38.88、39.23 m...     

镉(Cd)胁迫对枇杷生长和光合速率的影响

采用塑料袋营养土栽培试验方法,研究了Cd对枇杷苗生长和光合速率的影响.结果表明,高浓度的Cd对枇杷的生长有显著的抑制作用,且随着Cd浓度的增加,这种抑制作用愈明显.300、400、500 mg·L-1Cd处理使根系生物量分别比对照下降了35.75%、38.78%、43.04%,茎生物量分别比对照下降了29.84%、34.31%、37.93%,叶生物量则分别比对照下降了31.06%、34.83%、39.57%,并且使根的含水量分别比对照下降了9.27%、11.78%、12.91%,茎的含水量分别比对照下降了11.97%、12.24%、15.34%,叶的含水量分别比对照下降了10.61%、15.57%、18.50%.枇杷对Cd的敏感程度表现为根＞叶＞茎.Cd胁迫使枇杷叶片叶绿素以及类胡萝卜素含量下降,叶绿素b比叶绿素a和类胡萝卜素(Car)更容易受到伤害,叶绿素b、类胡萝卜素的含量基本同步减少.Cd胁迫影响枇杷叶片的光合作用,造成光合效率的降低,净光合速率下降.     

硅对镉胁迫下水稻幼苗体内镉分布规律的研究

采用溶液培养,研究不同浓度(0、30、80、130、180mg/L)的SiO2在4.0mg/LCdCl2浓度胁迫下对水稻幼苗体内镉(Cd)的分布规律。结果表明,在Cd胁迫下Si降低了水稻幼苗根、茎、叶、鞘、共质体和质外体Cd含量,其分布规律为:根茎叶茎鞘叶片,呈现出末端分布规律。说明Si促使大量的Cd累积在根中,根是Cd累积的主要部位,而茎、叶中Cd累积量较少。可见,Si可抑制水稻体内Cd由地下部分向地上部分运输,且能抑制地上部分Cd向叶片运输,并能减少Cd进入共质体。     

镉(Cd)胁迫对枇杷生长和光合速率的影响

采用塑料袋营养土栽培试验方法,研究了Cd对枇杷苗生长和光合速率的影响。结果表明,高浓度的Cd对枇杷的生长有显著的抑制作用,且随着Cd浓度的增加,这种抑制作用愈明显。300、400、500 mg.L-1Cd处理使根系生物量分别比对照下降了35.75%、38.78%、43.04%,茎生物量分别比对照下降了29.84%、34.31%、37.93%,叶生物量则分别比对照下降了31.06%、34.83%、39.57%,并且使根的含水量分别比对照下降了9.27%、11.78%、12.91%,茎的含水量分别比对照下降了11.97%、12.24%、15.34%,叶的含水量分别比对照下降了10.61%、15.57%、18.50%。枇杷对Cd的敏感程度表现为根>叶>茎。Cd胁迫使枇杷叶片叶绿素以及类胡萝卜素含量下降,叶绿素b比叶绿素a和类胡萝卜素(Car)更容易受到伤害,叶绿素b、类胡萝卜素的含量基本同步减少。Cd胁迫影响枇杷叶片的光合作用,造成光合效率的降低,净光合速率下降。