大额牛（Bos frontalis）与黄牛（Bos taurus） 的种间杂交研究

【目的】探讨大额牛（Bos frontalis）与黄牛（Bos taurus）种间杂交利用及杂交育种前景。【方法】以云南黄牛（大理黄牛、德宏黄牛,n=379）和西本杂（西门塔尔牛♂×云南黄牛♀,n=136）为母本,大额牛为父本,采用人工授精进行种间杂交。母牛在输精后约60 d,通过直肠检查进行妊娠诊断,并对妊娠母牛进行跟踪调查,统计产犊数,测定云南黄牛及杂种牛的初生、6月龄、12月龄、18月龄和24月龄体重、体尺,观察调查杂种牛的主要外貌特征。【结果】①用大额牛冷冻精液累计输精515头母牛,平均受胎率和产犊率分别达73.98%和92.13%,其中黄牛母本的平均受胎率和产犊率分别为68.87%和90.81%,西本杂母本的受胎率和产犊率分别达88.24%和95.00%。②大西本杂（大额牛♂×西本杂♀）的初生、6月龄、12月龄、18月龄和24月龄体重分别为22.86、103.86、142.40、176.21和243.25 kg,比云南黄牛的11.73、82.42、108.37、124.60和132.10 kg提高94.89%（P＜0.01）、26.01%（P＜0.01）、31.40%（P＜0.01）、41.42%（P＜0.01）和84.14%（P＜0.01）,比大本杂（大额牛♂×云南黄牛♀）的17.70、102.19 、134.81、161.43和201.91 kg提高29.15%（P＜0.01）、1.63%（P＞0.05）、5.63%（P＞0.05）、9.16%（P＜0.05）和20.47%（P＜0.01）;大本杂的初生、6月龄、12月龄、18月龄和24月龄体重亦分别比云南黄牛提高50.90%（P＜0.05）、23.99%（P＜0.01）、24.40%（P＜0.01）、29.56%（P＜0.01）和52.85%（P＜0.01）;大西本杂初生到24月龄的平均日增重为301.90 g,极显著高于大本杂的264.67 g和黄牛的164.89 g(P＜0.01),大本杂平均日增重亦极显著高于云南黄牛 (P＜0.01);大本杂的初生、12月龄和24月龄体重的杂种优势率分别为28.21%、3.87%和4.20%,以初生重的杂种优势率最高。③初生时,大西本杂的体高和胸围分别比同龄云南黄牛提高8.38%(P＜0.05)和8.34%(P＜0.05),大本杂的体高和胸围分别比云南黄牛提高11.48%(P＜0.05)和7.23%(P＜0.05)。在6月龄,大西本杂的体高、胸围、腹围和管围分别比云南黄牛提高25.88%(P＜0.05)、16.50%(P＜0.05)、9.81%(P＜0.05)和29.48%(P＜0.05);大本杂的胸围、腹围和管围分别比云南黄牛提高10.89%(P＜0.05)、11.10%(P＜0.05)和21.23%(P＜0.05)。在12月龄,大西本杂的体斜长、体高、胸围、腹围和管围分别比云南黄牛提高33.82%(P＜0.05)、30.64%(P＜0.05)、31.16%(P＜0.01)、29.95%(P＜0.01)和26.63%(P＜0.05);大本杂的胸围、腹围和管围分别比云南黄牛提高11.41%(P＜0.05)、13.34%(P＜0.01)和21.86%(P＜0.05);大西本杂的体斜长、体高、胸围、腹围分别比大本杂提高33.20%(P＜0.05)、31.43%(P＜0.05)、17.72%(P＜0.01)和14.65%(P＜0.01);在24月龄,大西本杂的体斜长、体高、胸围、腹围和管围分别比云南黄牛提高33.30%(P＜0.01)、31.69%(P＜0.01)、38.83%(P＜0.01)、32.12%(P＜0.01)和41.60%(P＜0.05);大本杂的胸围、腹围和管围分别比云南黄牛提高22.69%(P＜0.01)、24.42%(P＜0.01)和40.92%(P＜0.05);大西本杂的体斜长、体高、胸围分别比大本杂的明显提高38.72%(P＜0.01)、27.83%(P＜0.01)和13.16%(P＜0.01)。表明杂种牛在初生时体高和胸围优势明显,6月龄以后以胸围、腹围和管围生长较为明显;特别是三元杂的体斜长、体高和胸围生长从12月龄开始明显地超过二元杂。④大额牛与大理黄牛杂交F₁的初生体重显著高于大额牛与德宏黄牛杂交F₁(P＜0.05),但两者的各体尺指标比较差异不明显（P＞0.05）,表明大额牛与两地黄牛杂交效果基本一致。⑤成年杂种的外貌特征和主要习性与大额牛的非常相近。【结论】大额牛和云南黄牛种间杂交可行,杂种生长发育快,适应性强,杂种优势明显,且三元杂优于二元杂;F₁代母牛可育,但公牛可能不育;大额牛与黄牛杂交利用潜力大,推广应用前景好。     

大额牛与婆罗门牛种间杂交的亲子鉴定*

 利用9个微卫星座位对一例大额牛与婆罗门牛杂交后代进行亲子鉴定,所有座位都呈孟德尔共显性遗传,计算的父权相对机会为99.994 9 %,证实此例亲子鉴定的确是一个三联体家庭成员,也证实大额牛（Bos frontalis）与婆罗门牛（Bos indicus）种间杂交的可行性。     

大额牛冻精在瘤牛超数排卵中的应用效果及F1代的亲子鉴定

【目的】本研究旨在探讨大额牛（Bos frontalis）冻精在瘤牛（Bos indicus）体内胚胎生产及杂交改良中的应用前景。【方法】对9头瘤牛（婆罗门牛）供体进行超排,发情后将供体分为试验组（n=5）和对照组（n=4）,分别用大额牛和瘤牛（婆罗门牛）冻精人工授精（AI）,以第1次AI之日为0天,在第7天回收胚胎;对试验组287号供体左侧子宫角回收胚胎,右侧子宫角使胚胎继续着床妊娠;对287号母牛所产F1代犊牛（大额牛×瘤牛）进行亲子鉴定;测定F1代牛的初生、6月龄和12龄的体重、体尺指标。【结果】试验组和对照组供体的受精率分别是90.5 %和80.8%,头均获胚数分别是4.2±1.3枚和6.5±4.7枚,可用胚数分别是3.0±1.2枚和4.3±5.3枚,可用胚率分别是71.4%和65.4%,两者差异不显著（P＞0.05）;287号母牛左侧子宫角回收到2枚可用胚,右侧子宫角内胚胎继续发育,并成功产下1头母犊,妊娠期为288 d;对F1代犊牛亲子鉴定显示,9个微卫星座位上犊牛与公牛、犊牛与母牛都具有共享的等位基因,父子关系相对机会（RCP）为99.9949%,证明此例亲子鉴定的确是一个三联体家庭,从而证实了种间杂交的真实;F1代牛的初生、6月龄和12月龄重分别为31.5 kg、180.0 kg和280.0 kg;初生～12月龄平均日增重达680.8 g。【结论】大额牛冻精在瘤牛超排中应用效果好;并获得国内首例大额牛（独龙牛）与瘤牛杂种牛犊;F1代牛生长较快,杂种优势明显。     

解冻温度对大额牛(Bos frontalis)精子活率及形态的影响

分别用32、35、38、41和44 ℃水浴解冻大额牛细管冻精,解冻后在常温(平均温度18.06±1.50 ℃,相对湿度46.64±4.52 %)下保存40 h,分别在0、6、12、18、24、30、36、38、39和40 h取样在显微镜下观察记录精子活率和活力;并在解冻后0、6、12、18和24 h用姬姆萨染色,在显微镜下观察记录精子形态,统计分析5个时段的精子畸形率.研究结果:①35 ℃解冻的精子复苏率为68.80 %,极显著高于44 ℃解冻的54.2 %(P<0.01),但与其它3个解冻温度比较差异不显著(P>0.05).②以38～44 ℃解冻的精子存活时间在38～39 h之间,以32 ℃解冻的存活时间最短,仅为36 h.④解冻后0 h的精子活率在42.50 %～50.00 %之间,不同解冻温度间差异不显著(P>0.05);保存6、12和18 h时,分别以35、38和41 ℃显著高于44 ℃(P<0.05);保存24 h后,各解冻温度间差异不显著P>0.05).④解冻后0 h的精子活力以35 ℃极显著高于44 ℃(P<0.01);保存6 h以32～41 ℃显著高于44 ℃(P<0.05);保存18 h,以32和41 ℃高于44 ℃(P<0.05);保存24 h后各解冻温度间差异不显著(P>0.05).⑤用41和44 ℃解冻的总精子畸形率极显著高于38 ℃(P<0.01),显著高于35 ℃(P<0.05),32、35和38 ℃间及32、41和44 ℃间差异不显著(P>0.05),用35和38 ℃解冻对精子形态损伤较小.研究表明:解冻温度越高大额牛冻精的精子活率和活力降低速度越快,精子畸形率也高,且解冻温度对精子头部和尾部形态的影响最大;大额牛细管冻精宜用38±3 ℃水浴10s解冻,解冻后在18 ℃以下常温下保存6h对其精子活力等影响不大.     

杂交大额牛肉质特性研究初报

 选择健康、年龄1～2岁的大额牛×云南黄牛的杂交大额牛4头，对其在pH 值、失水率、剪切嫩度、熟肉率、肉色、风味等肉质特性进行了测定。结果表明：pH值在6.05～6.26，失水率在10.65%～20.94%，剪切嫩度腰大肌的值为3.08，熟肉率为63.84%。pH值、剪切嫩度、风味等指标，达到优质中高档牛肉的标准。     

大额牛的生物学特征及研究开发利用潜力

 大额牛是中国唯一的半野生半家养的珍珍稀牛种,仅分布于云南省的独龙江和怒江流域，以及印度的阿萨姆邦、东孟加拉和与缅甸北部钦邦。根据国内外研究和多年调查认为：(1)大额牛（Bos frontalis）染色体的数目、形态、结构均不同于黄牛(Bos taurus)和野牛(Bos gaurus)，3者染色体数目(2n)分别为58，60和56条，在常染色体中黄牛没有近中着丝点染色体，野牛有两对，而大额牛有一对，染色体的臂数相等；（2）大额牛的食物以竹子、青蒿和杂草为主，饲料条件差，生存环境恶劣，但其生长速度快，0.5，1，1.5，2和3岁大额牛的体重可分别达140 kg，218 kg，264 kg，296 kg和342 kg；(3)大额牛具有较为典型的肉用牛体型和较好的产肉性能，且其肌纤维直径明显小于其它牛，牛肉的系水率、嫩度和多汁性明显高于其它牛；（4）繁殖力强，能繁母牛基本上可实现一年一胎，且可以与黄牛杂交。大额牛不仅具有极高的研究学术价值，而且有极大的开发利用价值。     

落叶松种间杂交测定技术

以新疆落叶松为母本，华北、日本、兴安和长白落叶松为父本进行控制授粉制种、育苗和造林。结果表明：各杂交组合苗木均具有较强的杂交优势，但以日本、兴安和长白落叶松为父本的杂交子代苗，新梢木质化程度较差；以华北落叶松为父本的杂交苗抗性好，且花期与新疆落叶松较为吻合。综合分析认为，华北落叶松可作为杂交利用的首选组合亲本。     

大豆育种的种间杂交

迄今为止,大豆育种基本上以种内杂交(品种间杂交,品系间杂交等)为主,长期的种内杂交不可避免地导致了遗传基因缺乏多样性,使得大豆育种难以取得突破性的进展。50年代开始利用人工诱变法培育出了几个品种,但从获得的优良变异性状可以看出,他们的变异性基本没有超出种内变异的范围。     

凤凰山迁地保种大额牛的外貌特征及主要习性

 对云南怒江州泸水县凤凰山半野生状态下大额牛的外貌特征和主要习性的观察结果进行了较详细地叙述,以补充和完善大额牛的形态特征描述。①外貌特征：从外观看,大额牛体形介于水牛和牦牛之间;根据白毛在牛身上分布的部位,可分为“一白”(四肢下部白)、“二白”(四肢下部和头、颈部白)、“三白”(四肢下部、头部和尾尖白)和“全黑”4种;公牛阴囊和母牛乳房发育比较紧凑,以适应丛林生活。②主要习性：大额牛好动喜游走,季节迁移;性喜群栖,合群性好,公牛好斗,母牛间争斗少;觅食力强,食谱广泛,以竹叶、灌木等为主,可谓“吃百草,疫病少,身体健”;酷爱舔盐,人易接近;昼间活动,夜间休息,夏天绝大多数牛有午休习惯,气温越高则休息时间越多;生性爱干净,排粪排尿时前肢直立,后肢半蹲姿势,不易被粪便玷污;理毛次数多,时间较长,以保持其身体的卫生。母牛在产犊前,离群单独活动。结果表明,大额牛具有较典型的肉用牛体型和较独特的生活习性。     

云南大额牛的生物学特征及其瘤胃微生物特点综述

[目的]为大额牛的进一步研究及开发提供参考。[方法]根据国内外研究现状,综述了云南大额牛的生物学特征及其瘤胃微生物特点。[结果]云南大额牛具有较为典型的肉用牛体型和较好的产肉性能,且其肌纤维直径明显小于其他牛,牛肉的系水率、嫩度和多汁性明显高于其他牛;染色体的数目、形态、结构均不同于黄牛和野牛,三者染色体数目（2n）分别为58、60和56条,且可与黄牛杂交;独特的食性体现在以竹子为主食,且对各种粗饲料的体外干物质消化率都显著高于云南黄牛;瘤胃中总可见细菌和纤维分解菌分别为4.51×109和1.63×109个/ml,显著高于云南黄牛,其瘤胃优势细菌主要为纤维分解菌。[结论]云南大额牛不仅具有极高的学术研究价值,而且有极大的开发利用价值。     

云南大额牛的生物学特征及其瘤胃微生物特点综述(英文)

[目的]为大额牛的进一步研究及开发提供参考。[方法]根据国内外研究现状,综述了云南大额牛的生物学特征及其瘤胃微生物特点。[结果]云南大额牛具有较为典型的肉用牛体型和较好的产肉性能,且其肌纤维直径明显小于其他牛,牛肉的系水率、嫩度和多汁性明显高于其他牛;染色体的数目、形态、结构均不同于黄牛和野牛,三者染色体数目(2n)分别为58、60和56条,且可与黄牛杂交;独特的食性体现在以竹子为主食,且对各种粗饲料的体外干物质消化率都显著高于云南黄牛;瘤胃中总可见细菌和纤维分解菌分别为4.51×109和1.63×109个/ml,显著高于云南黄牛,其瘤胃优势细菌主要为纤维分解菌。[结论]云南大额牛不仅具有极高的学术研究价值,而且有极大的开发利用价值。     

SMAD1基因的沉默和过表达及对秦川牛原代成肌细胞生肌的影响

【目的】为了探索秦川牛（Bos taurus）SMAD1基因在成肌细胞分化过程中的分子作用机制,通过研究沉默、过表达该基因后对牛原代成肌细胞分化及成肌相关基因表达量的影响,以期为BMP信号通路在牛肌肉组织生长发育过程中的作用机制提供理论依据。【方法】根据Genbank牛SMAD1（NM_001077107.2）已知序列设计并合成靶向沉默SMAD1基因的干扰序列siSMAD1和阴性对照siRNA-NC。以秦川牛原代成肌细胞cDNA为模板,利用PCR技术克隆获得SMAD1基因CDS序列,构建腺病毒过表达穿梭载体pDC316-mCMV-EGFP-bSMAD1。将腺病毒基因组质粒和腺病毒载体穿梭质粒共转染到HEK 293细胞中,通过Cre-loxp重组酶获得重组腺病毒。获得的携带目的基因的腺病毒标记为AD-bSMAD1,重组质粒pDC316-EGFP标记为AD-NC,用做对照组病毒,利用LaSRT法测定腺病毒的滴度。将获得的干扰序列siSMAD1和过表达腺病毒AD-bSMAD1分别侵染秦川牛原代成肌细胞,采用实时荧光定量PCR检测SMAD1基因和成肌标志基因MyoD、Myf5、MyoG的mRNA水平,并观察对细胞分化融合情况的影响。【结果】成功获得了1条能有效沉默SMAD1基因siRNA,将其转染秦川牛原代成肌细胞后进行人工诱导分化,相比对照组,SMAD1基因分别下调了75.4%（诱导1d,P<0.01）、66.7%（诱导3d,P<0.01）、60.0%（诱导6d,P<0.01）、54.7%（诱导9d,P<0.01）。此外,还成功构建了秦川牛SMAD1基因的腺病毒过表达穿梭载体,获得了滴度为1×10 ¹⁰pfu/mL的过表达重组腺病毒AD-bSMAD1。与对照组相比,高滴度过表达病毒AD-bSMAD1侵染秦川牛原代成肌细胞0、1、3、6、9d后,与对照组相比,SMAD1基因的表达水平分别上调了2.10倍（诱导1d）、3.19倍（诱导3d）、105.3倍（诱导3d）,P<0.01）和144倍（诱导9d,P<0.01）;结合肌管形成过程的变化和实时荧光定量结果证明,SMAD1基因促进原代成肌细胞分化和肌管形成,并显著上调成肌标志基因MyoD、Myf5、MyoG的表达。 【结论】获得了能有效沉默秦川牛原代成肌细胞SMAD1表达的特异性的干扰序列siSMAD1,以及可成功实现过表达SMAD1基因的腺病毒介导的体外表达载体,可正向调控成肌细胞的分化和肌管形成过程。     

黄鳝生长特性的初步研究

经15个月室内连续观察测量和数理统计分析,发现黄鳝的生长属均匀性生长,可用 Von-Bertalanffy 生长方程描述其生长规律,体长生长为{L_t}_(mm)=768.143 0[1-exp(-0.6624A)],体重生长为{M_t}_g=1317.635 1[1-exp(0.662 4 A)]~3(上二式 A={t}a-0.5656)。体长与体重呈幂函数相关,其回归方程为:{M}_g=1.9110×10~6×{L}_(mm)~3.08.在适温范围内,黄鳝的生长与水温呈正相关,其停止摄食生长的下限温度为12.5℃。并据黄鳝阶段生长速度提出黄鳝饲养周期为2a 比较合理。     

溢多酶P-8901对罗非鱼生长性能的影响

在罗非鱼基础饲料(对照组)中分别添加不同比例溢多酶P-8901,探讨溢多酶P-8901对罗非鱼生产性能的影响。结果表明,在罗非鱼鱼种试验中,与对照组相比,添加100 g.t-1、150 g.t-1、180 g.t-1溢多酶P-8901试验组的饲料效率分别比对照组提高8.48%、7.89%和9.03%(P<0.05);增重率分别提高9.00%、10.33%和9.50%(P<0.01);生长率分别提高4.00%、4.48%和4.13%(P<0.01);蛋白质效率分别提高8.38%、7.75%和8.84%(P<0.01)。养成试验中,添加100 g.t-1、150 g.t-1、180 g.t-1溢多酶P-8901试验组饲料系数分别比对照组提高4.28%、5.41%和6.56%(P<0.05);增重率分别提高6.31%、7.94%和8.82%(P<0.01);生长率分别提高3.68%、4.72%和5.26%(P<0.01);蛋白质效率分别提高5.36%、7.53%和9.24%(P<0.01)。饲养结果表明,添加溢多酶P-8901能够明显提高饲料利用率,提高罗非鱼的生长性能,尤其对鱼种的效果比养成阶段更好。