应用斑点酶标法诊断耕牛血吸虫病

应用斑点酶标法诊断耕牛血吸虫病四川省兽医总站（６１００４１）毛光琼谢智明阳爱国德阳市兽医站朱庭荣什邡市畜牧局吴兴国目前，全省各地均采用粪孵法诊断耕牛血吸虫病。但由于该方法劳动强度大、时间长、检出率低，一般情况下，每天每人只能检测３０头份粪便，检出率...     

斑点酶标法与斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病初探

目的比较宽点酶标法与癍点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病的效果。方法选择疫区水牛,耳静脉取血制备血纸,作为待检样品。分别采用斑点金标免疫渗滤法与癍点酶标法检测,比较检测结果。结果癍点金标渗滤法检测仅需30min,而斑点酶标法则需160min。结论疵点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病,操作简便易行、快捷,省时、省工,工作效率成倍提高。     

斑点金标免疫渗滤法快速检测牛血吸虫病抗体的效果观察

目的观察斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病抗体的效果。方法使用斑点金标免疫渗滤诊断试剂盒检测粪检血吸虫病牛血清(血纸)146头份,疫区耕牛血清(血纸)562头份,并用间接血凝法(indirect haem aggluti-nation assay,IHA)法作对比。结果146头份粪检阳性血清(血纸)检测为阳性者140头份,阳性检出率95.9%,IHA法检测为阳性者141头份,阳性检出率96.6%。结论斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点,但仍有一定漏检,有待于进一步研究提高。     

检测家畜血吸虫抗体的二步金标免疫渗滤法研究

将待检家畜血纸浸出液点在硝酸纤维素膜上，以金标记的血吸虫虫卵可溶性抗原为探针（以下简称血吸虫抗原胶体金），建立了检测家畜血吸虫抗体的二步金标免疫渗滤法（Two-step Dot Immunogold Filtration Assay，T—DIGFA）。家畜血吸虫病阳性血样在50-90S形成肉眼可观察的红色斑点，可进行快速诊断。该法可以检测出人工感染血吸虫尾蚴7d和7d以上的阳性牛和兔血纸抗体，与肝片吸虫、锥虫、蛔虫病之间无交叉反应。T—DIGFA检测粪孵血吸虫毛蚴阳性牛血纸139份、阴性牛血纸130份，与粪孵法阳性符合率为100％，阴性符合率为99．2％；T—DIGFA与斑点酶联SPA法阳性符合率和阴性符合率完全相同。血吸虫抗原胶体金在4～8℃保存期可达6个月、室温保存期为3个月。试验证实，T-DIGFA有很高的敏感性、特异性、重复性和稳定性，适合于基层单位和现场进行家畜血吸虫病抗体的快速诊断、普查和检疫。     

斑点酶标株联试剂盒在牛三种寄生虫病检测中的应用

斑点酶标株联试剂盒在牛三种寄生虫病检测中的应用（浙江省海盐县畜禽防站）笪加元，高和生，冯明章，高觉立，项雷生长期以来，我们采用粪孵法结合镜检毛蚴进行耕牛血吸虫病的监测工作。此法费工费时费钱，给大量样品普查工作带来困难。为此，我们在省农科院畜牧兽医研究...     

粪孵法对自然感染日本血吸虫牛检出率效果的评价

粪孵法对自然感染日本血吸虫牛检出率效果的评价沈杰（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所）家畜日本血吸虫病的诊断方法，近几十年来，应用时间最长、范围最广的属粪便毛拗孵化法（简称粪孵法），１９７５年农业部批发给全国血防单位作为牛血吸虫病查病推荐方法，１９７９...     

斑点金标免疫渗滤新技术检测家畜血吸虫病的效果试验

斑点金标免疫渗滤新技术(简称金标法)检测家畜血吸虫病抗体,在本省进行了特异性、敏感性、符合率等试验.金标法能检出人工感染犬血吸虫14 d后的血吸虫病抗体,检出率为100%,可用于血吸虫病早期诊断.粪孵100头份血吸虫病阳性的牛血纸,用金标法检测全部为阳性,阳性符合率为100%;在非疫区的2个县分别采牛血纸100份,用金标法进行检测,未查出血吸虫病阳性牛,阴性符合率为100%.在金标法检测4 000份牛血纸,检出阳性牛为129头,再对这129头牛采粪孵化,有血吸虫毛蚴的牛128头,金标法与病原学检查法阳性符合率为99.2%(99%～100%).在本省54个血防疫区县推广应用,取得了显著的社会经济效益.     

应用斑点酶标联诊盒检测牛羊“四虫病”的效果观察

应用斑点酶标“三虫病”与“四虫病”联诊盒检测牛羊血吸虫、锥虫、肝片吸血和血矛线虫病的效果比较。试验共检测牛７３８头，羊２１５只，牛锥虫病的阳性符合率９８．７％，肝片吸虫阳性符合率９８．６％，羊为９８．２％。     

牛病毒性腹泻病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

将牛病毒性腹泻病毒超免疫血清以常规方法提取IgG，采用过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶（HRP），建立了从粪样中检测牛病毒性腹泻病毒抗原的双抗体夹心ELISA。结果，抗体的最佳包被量为150μg／mL，酶标抗体最适工作浓度为1：200；封闭液为50mL／L的兔血清；待检粪样及酶标抗体的感作时间为37℃ 120min；底物显色时间为室温15min。应用建立的检测方法对河北省8个大中型奶牛场298份乳牛腹泻粪样进行了检测，结果，阳性检出率为42．6％。     

用检测牛乳或血清中抗体的方法普查片形吸虫病

将大片形吸虫分泌排泄产物作为诊断抗原，应用斑点酶联免疫吸附试验和免疫胶体金滴渗法检测牛乳和血清中出现的特异性抗体。测５４头粪便中查出虫卵的牛的乳汁和血清，结果全部呈阳性，符合率１００％。４６头粪检阴笥的牛，检测出２４头牛抗体阳性、提高检出率２４％。这表明，用检测牛乳中抗体的方法诊断片形吸虫感染同检测血清一样具有敏感性高、特异性强、准确性可靠等优点。另外，将待检材料牛乳或血清按１０个一组混合检测，感     

用间接血凝反应诊断耕牛日本血吸虫病的体会

根据1976年至1977年上海家畜血研所在浙江省江山县和临安县采用间接血凝反应、环卵沉淀反应、常规粪孵法诊断牛日本血吸虫病的现场比较试验,共剖检17头粪孵法为阴性而免疫法(间接血凝反应和环卵沉淀反应)为阳性的牛,结果其中7头剖检到日本血吸虫。为了提高日本血吸虫病牛的检出率,加快消灭该病的步伐,我们在上海家畜血研所的热情支持、帮助和指导下,在用常规粪孵法普查耕牛日本血吸虫病的基础上,推广应用间接血凝反应诊断耕牛日本血吸虫病。自1978年起,全县用间接血凝反应检查42429头,其中阳性牛1127头,并对阳性牛用硝硫氰氨、吡喹酮进行治疗,使我县很快达到基本消灭牛日本血吸虫病的目的。1984年至今没有粪检到日本血吸虫病     

应用酶标抗体法检查牛粪便及瘤胃内容物中的大肠杆菌O157

杉本等研究了应用酶标抗体法检测牛粪便及瘤胃内容物中大肠杆菌O157的敏感性和特异性，探讨了大肠杆菌O157在消化道内的动态。     

猪、牛日本血吸虫病粪便孵化法毛蚴孵出时间比较

猪、牛日本血吸虫病粪便孵化法毛蚴孵出时间比较李亚敏，邱丹（江苏省动物血防站）（南京市兽医站）张咏梅，高金宝，张观斗（南京农业大学兽医院）正确掌握各种不同畜种血吸虫病粪孵毛蛐出现的时间，对于家畜血吸虫病的确诊、判定各种家畜血吸虫病的感染度十分重要。过去...     

耕牛血吸虫病实验诊断的研究——(一) 粪便沉孵法、直孵法及直肠粘膜镜检法之比较

在血吸虫病流行地区全面开展耕牛血吸虫病的普查普治和复查复治工作中,必须准确及迅速的查出病牛,目前常用的为粪便检查法和直肠粘膜镜检法二项。粪便检查法一般应用的有常用沉孵法、也有推荐采用纸卷直孵化。直肠粘膜镜检法目前推荐的有手持锐匙刮取直肠粘膜或先用开膣器打开直肠再以锐匙刮取粘膜等法。为此较上述二类方法的准确性及实用意义,我们于奉贤县对147头耕牛进行了细致的比较观察。方法及材料一、粪样采集:将编号牛只147头,分三次(三天)采集粪样,每次采粪量不少于250克,用稻草、草纸或菜叶包裹,附编号送粪卡送验。二、粪便检查法:将上述粪样以二等分,分别进行沉孵法及直孵法。共操作常规完全按1960年家畜血吸虫病防治措施方案(草案),孵化室温为25°—30℃。最后一次加水孵化的水温为28°—30℃。     

4种粪孵法诊断牛血吸虫病的实验

近30年来,南方各地在用粪孵法诊断牛日本血吸虫病工作中进行了较多的改革试验,并取得了较好的成效。为了鉴别和探索新的诊断法,1982年5月,中国农科院上海血研所召集南方12省(市、区)科技人员,     

单克隆和多克隆双抗体夹心斑点酶联法检测兔瘟病毒的研究

本文建立的酶标双抗体夹心斑点酶联法检测兔瘟病毒的主要步骤为,以单抗包被,加入待测抗原,再加多克隆兔抗兔瘟病毒血清,最后加酶标羊抗兔抗体示踪。由于本法操作简便、试剂用量小、肉眼可观察结果、无需特殊仪器,故对兔瘟的诊断具有较大的实用价值。     

ELISA双抗体夹心法诊断犬冠状病毒肠炎

从冠状病毒（ＣＣＶ）阳性病犬粪便提取物中提纯抗原，制备豚鼠抗血清，用饱和硫酸铵盐析法粗提，再经ＱＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０离子柱层析，提取ＩｇＧ，以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记，制备酶标抗体，按ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法操作术式，建立检测犬冠状病毒的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法，诊断犬冠状病毒肠炎粪样，并以电镜检查比较，证明该法特异、敏感，可在４小时内报告结果。     

BSA对牛结核抗体ELISA检测的影响

分别研究了封闭液、血清稀释液及酶标二抗稀释液中BSA成分对牛结核抗体ELISA检测的影响。结果显示酶标二抗稀释液中BSA的存在使ELISA检测值普遍偏低，且BSA的含量越高，检测值越低；结果提示，为了提高ELISA检测值，使其达到理想检测效果，必须提高酶标二抗的使用浓度。结论：BSA中可能存在的牛血清抗体杂质对酶标二抗起到了“中和”作用，降低了酶标二抗与目标抗体结合的实际浓度，使检测结果普遍偏低。     

Dot-ELISA与IHA方法诊断肝片形吸虫病的比较

用斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)对200份经粪检和间接血凝试验(IHA)血检的血清样品进行肝片形吸虫感染的检测,同时在屠宰场现场对50份样品进行检测,并与剖检相比较。结果显示Dot-ELISA与IHA法相比,阳性符合率较低(84.21%),阴性符合率高(95.58%),总符合率94.50%;Dot-ELISA与粪检结果相比,阳性符合率(94.74%)明显高于IHA法;与剖检法比较,Dot-ELISA对屠宰场现场样品的检出率和阳性符合率均为100%。结论:Dot-ELISA较IHA法敏感性高、特异性强,适宜用作牛、羊肝片形吸虫感染的现场检测。     

斑点酶免疫试验检测牛体内囊尾蚴循环抗原的方法

斑点酶免疫试验检测牛体内囊尾蚴循环抗原的方法闫玉河，陈春花摘译于三科校本研究是在Ｂｒａｎｄｔ等（１９９２）试验的基础上，用单抗建立的一种更加简便易行的ｄ。ｔ—ＥＬＩＳＡ方法。所用的单抗（２Ｈ和１２ＧＳ）是Ｂｒａｎｄｔ用牛囊尾蚴的排泄──分泌抗原经浓缩...