解冻温度和保存时间对牛细管冻精精子活率的影响

本试验采用4组解冻温度,每组解冻温度设计了2个不同的解冻时间,观察不同解冻温度、解冻时间及解冻后常温保存时间对牛细管冷冻精液精子活率的影响。结果显示,4组解冻温度以80℃（3s）精子活率最高,为48．77％,20组（2（80s）精子活率最低,为30．02％,两者差异极显著（P〈0．01）。各组精液解冻后保存1h检查精子活率明显高于解冻时镜检活率（P〈0．05）,80℃解冻后间隔5h精子活率仍达到30％。     

羊冷冻精液的制作技术研究

通过对羊精液冷冻稀释液组成成分的研究,筛选合适的稀释液配方,研究精子平衡时间、解冻温度、稀释倍数和稀释方法等对精子活力的影响。结果如下:①解冻后的精子活率以加入Tris的一组稀释液活率最高,与其他组相比差异极显著(P<0.01)。②精液的平衡时间以平衡4～5h解冻后活率最高。③在45℃～60℃的水温条件下,取得了精子复苏率74.5%的解冻效果。④选用5种稀释比例(精液:稀释液),分别为1∶4、1∶5、1∶6、1∶6、1∶8,结果1∶8的稀释比例精液解冻后活率最高,达到了70%以上。     

牛精液的贮存、解冻及品质检查

1冷冻精液的贮存和解冻方法牛的冷冻精液是以液氮做冷源进行贮存的,需要时可随时取出。为防止温度变化对精液品质的影响,取放动作要迅速,尽量减少在空气中停留的时间。从贮存容器中提取冷冻精液时,精液不应超过液氮容器的颈基部,避免因温度的回升造成精液解冻活率的下降。冷冻精液的解冻过程会影响精子的活力,要注意解冻的温度和操作方法。最初世界各国对解冻温度的要求不同,大体可分为高温40℃、室温15￣20℃和冷水10℃,当前认为40℃左右解冻效果最好。随着解冻温度的降低,精子活率有逐渐降低的趋势。颗粒精液解冻多采用将颗粒精液投入一定…     

犬精液冷冻解冻技术研究

试验以Tris-果糖稀释液为基础稀释液,研究了甘油浓度(4%、6%和8%)、冷冻起始温度(-80℃和-113℃)、冷冻时精液在液氮面上的高度(2 cm4、cm和6 cm)和解冻方法(30℃、12s和65℃、5 s)对犬精液冷冻保存效果的影响。结果表明,犬的精子冷冻保存以6%的甘油浓度、-80℃的始冻温度、在液氮面上2 cm的高度进行冷冻和65℃5 s的解冻方法为好,冷冻-解冻后精子的活率可达0.450 0±0.044 7。     

猪精液冷冻技术研究

手握法采集约克种公猪(12月龄)精液,于37℃离心后弃去精清,收集浓缩段富含精子部分,采用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。通过对不同稀释液及冷冻保护剂进行筛选研究,结果表明,Ⅶ号稀释液优于其他6种稀释液(P<0 05);甘油为较佳的冷冻保护剂(P<0 01),其适宜浓度为2%;干解冻效果优于湿解冻,其适宜温度为40～45℃,解冻后精子活率达0 46～0 52;稀释液中添加安钠咖可有效延长精子的冻后存活时间(P<0 01)。     

不同稀释液生理参数对关中奶山羊精液 保存及冷冻效果的研究

[目的]探讨了不同pH值、渗透压的稀释液对关中奶山羊冻精品质的影响,以确定关中奶山羊精液最佳保存与冷冻效果。[方法]通过显微检测在不同pH值、渗透压的稀释液处理对降温前、平衡后与解冻后的精子的活率、复苏率、精子顶体完整率、精子畸形率及精子冻后存活时间等指标进行评估。[结果],关中奶山羊精液稀释液pH值为7.3时,降温前、平衡后与解冻后的精子活率最高,分别达到0.742±0.011%、0.645±0.011%、0.489±0.012%;冻后活率、复苏率及解冻后顶体完整率分别达到0.431±0.009%、63.1±0.427%、65.7±2.018%;精子存活时间在降温前、平衡后及解冻后分别达到12.50±0.141h、11.96±0.186h、11.61±0.753h,冻后 8 h 活率0.52±0.014%;当渗透压为Δ0.754℃时,其精子的保护效果最佳,降温前、平衡后与解冻后的精子活率分别达到0.752±0.045%、0.671±0.024%、0.649±0.036%;冻后活率、复苏率及解冻后顶体完整率分别达到0.481±0.019%、63.6±0.377%、69.9±1.068%;精子存活时间在降温前、平衡后及解冻后分别达到11.82±0.165h、11.94±0.145h、11.70±0.753h,冻后 8 h 活率达到0.43±0.033%。[结论]关中奶山羊精液稀释液最合适的pH值是7.3,最佳渗透压为Δ0.754℃,这一结果对奶山羊稀释液配方优化提供了一定的理论指导。     

不同解冻方法对猪冷冻精液品质的影响

为优化猪冷冻精液解冻方法、提高精液利用效率,试验采用两种不同的解冻方法解冻0.5 mL猪细管冷冻精液,一种在38℃水浴直接解冻30 s(1组),另一种在50℃水浴解冻16 s后再放到30℃水浴中静置40 s(2组)。对解冻后的精液分别进行精子活力、生存时间、顶体完整率的测定和顶体形态观察。结果表明：2组解冻精液的精子活力、顶体完整率极显著高于1组(P<0.01),但两组的生存时间差异不显著(P>0.05);精子顶体形态学观察发现,两组冻精的精子顶体膨胀、缺损情况都较严重。说明与38℃慢速解冻冷冻精液相比,50℃快速解冻的猪细管冷冻精液的精子活力好而且顶体完整率高。     

牛细管精液冷冻温度曲线的研究

牛冷冻精液精子复苏率的高低与原精质量、精子耐冻性、稀释液种类、稀释方法及精液冷冻和解冻速度等因素有关。其中，精液在冷冻过程中温度变化曲线是影响精子复苏率高低的重要因素之一。研究细管精液在不同条件下冷冻，精液温度变化曲线及精子复苏率变化的规律，优选出细管精液最适宜的冷冻温度曲线，可以为提高牛冷冻精液质量提供重要保障。     

波尔山羊冷冻精液稀释液及稀释倍数研究

通过研究波尔山羊冷冻精液稀释液和稀释倍数,以筛选最佳稀释液配方、确定适宜的稀释倍数、提高波尔山羊精液冷冻效果。结果表明,4号稀释液解冻后精子活率高于1号、2号、3号稀释液解冻后精子的活率,差异极显著( P<0 .0 1 ) ;4号稀释液解冻后精子存活时间为61 .2 6h,长于1号、2号稀释液精子存活时间( P<0 .0 1 ) ,短于3号稀释液精子存活时间,但差异不显著( P>0 .0 5 ) ,说明4号稀释液冷冻效果最好。精液稀释3倍、4倍、5倍解冻后精子活率分别为0 .5 0 2、0 .5 0 1、0 .495 ( P>0 .0 5 ) ,均高于稀释6倍、7倍、8倍的精子活率( P<0 .0 1 ) ,表明波尔山羊冷冻精液稀释倍数以3～5倍为宜。     

提高早胜公牛冷冻精液品质的因素分析

为提高早胜牛冷冻精液的品质,研究了稀释液中添加不同浓度的海藻糖,解冻温度、解冻时间和生产中常见的解冻后保存运输方法等对精液品质的影响。结果表明:在果糖-柠檬酸钠-卵黄-甘油稀释液中,分别添加不同浓度的海藻糖(0.000、0.025、0.050、0.075和0.100 mol/L)对早胜牛精液进行稀释,各试验组均对冻精的精子活率、畸形率、顶体质膜完整率和精子存活时间产生不同程度的改善,其中,以0.050 mol/L的效果最好(P<0.01)。75℃快速解冻精子品质显著高于另外两种解冻方法(38℃、12℃解冻)(P<0.05),但仅适用于短时间保存。而38℃解冻后保存于0～5℃下的精液品质符合国家输精标准的时间较长。     

解冻温度对精子活力的影响

[目的]为了获得较为理想的解冻效果.[方法]采用不同温度,不同解冻时间,通过镜检解冻后活力的方法.[结果]发现:不同解冻温度对牛冷冻精子复苏的影响,用39.5℃温水解冻30 s精子的活力最高,冷冻精液解冻后精子活力达O.53.用40.O℃温水解冻10s、39.0℃温水解冻30 s精子的活力也较高,冷冻精液解冻后精子活力...     

猪精液冷冻技术的研究

从稀释液、解冻液、解冻速率方面研究了猪精液冷冻保存的效果。结果表明：在八种稀释液中,用Ⅰ号稀释液制作的冷冻精液解冻后精子活率（33&#177;1．2）％优于其它组（P〈0．05）;Ⅴ号解冻液解冻后精子活率（34&#177;2．4）％极显著高于Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ号解冻液（P〈0．01）,Ⅴ号解冻液解冻后精子存活时间506．6&#177;40．4h,极显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号解冻液（P〈0．01）;以27．5℃／s的速率解冻,解冻后精子各项指标均为最高值。     

BMY牛冷冻精液质量控制及影响因素研究

[目的]为了加大BMY牛的推广应用力度和提高人工授精受胎率,开展了BMY牛冷冻精液质量控制研究,优选出冷冻稀释液及得出冷冻精液质量控制技术程序。[方法]采用不同的初始冷冻温度、不同种类的稀释液、不同的冷冻方法对BMY牛精液冷冻及解冻效果进行试验。[结果]不同的初始冷冻温度、不同种类的稀释液、不同的冷冻方法,BMY牛精液冷冻解冻效果各异。初始冷冻温度为-121--140℃时,TRIS液为基础稀释液添加糖类和氨基酸一步法稀释BMY牛精液冷冻6-10 min BMY牛冷冻精液解冻效果较好,用程控冷冻仪冷冻BMY牛精液,同样获得良好的解冻效果,解冻活力达到0.372±0.026。BMY牛冷冻精液平均解冻活力可达0.357±0.029以上,精子解冻复苏率达50%以上。精子畸形率平均为16.8%±4.26%,BMY牛采精成功率为75.3%。[结论]全放牧条件下BMY牛电刺激采精法获得很好效果,精液质量好,更有利于种质资源的保存和利用。     

温度对犬精液冷冻保存的研究

本实验在以往研究的基础上进一步研究了冷冻起始温度(始冻温度)、解冻温度对精子活率的影响.实验结果表明:始冻温度为-70℃时冻后精液质量最好,冻后镜子活率达0.6284±0.0408,优于-65℃和-75℃时的冻后精子活率;解冻温度为70℃时对解冻后精液质量最好,达0.6810±0.0324,明显优于60℃和65℃的精子活率.     

不同咖啡因浓度对鸡精液冷冻效果的影响

以广东海洋大学家禽育种中心的小麻大冠鸡为试验材料,利用液氮制作颗粒冷冻精液,研究不同浓度咖啡因对鸡精液解冻后的精子活力、畸形率和存活时间的影响.结果表明:咖啡因添加量为4mmol/L时,鸡精液冷冻解冻效果最佳,精子活力最高,为0.46,畸形率最低,为7.2%,精子体外存活时间最长,为105min.     

不同浓度咖啡因对三黄鸡精液冷冻效果的影响

试验以湛江海洋大学家禽育种中心的三黄鸡为试验材料 ,利用液氮制做颗粒冷冻精液 ,比较冷冻保护液中不同浓度添加物如咖啡因、甘油、二甲基桠枫以及平衡时间、解冻液种类及解冻液温度对广东三黄鸡冷冻精液解冻后精子活力、畸形率和存活时间的影响。结果表明 ,咖啡因添加量为 4～ 5mmol/L时 ,鸡精液冷冻解冻效果最佳 ,精子活力最高 ,为 0 4 4～ 0 4 8,畸形率最低 ,为 7 2 %～7 4 %,精子体外存活时间最长 ,为 1 0 4～ 1 0 9min(P <0 0 1 )。     

平衡温度对种公牛冷冻精液制作效果的影响

本试验将三头种公牛的精液稀释、平衡,封装后各分为5组,经不同的平衡温度后进行冷冻,检查牛冷冻精液解冻后的精子活力、顶体完整率、畸形率、37℃4h存活率。结果表明,牛冷冻精液在制作过程中,最佳平衡温度为4℃,在此条件下,冻精质量可以达到国家标准。     

咖啡因对猪精液冷冻的影响及冷冻-解冻方法的优化

本试验对猪精液冷冻保护液中添加咖啡因的作用进行了研究,并优化冷冻-解冻程序,提高0.5 mL细管猪精液冷冻解冻后的质量。在预先设计稀释液配方的基础上,使咖啡因终浓度为0、0.2、0.4、0.6 mg/mL,选择最佳咖啡因浓度,选出最优组合与传统的TCG稀释液和商业用Androhep CryoGuardTM冷冻稀释液进行比较,比较3种不同的冷冻曲线对猪冷冻精液解冻后精子品质的影响,最后对38℃下30 s、50℃下13 s 2种解冻方法进行比较。结果表明,咖啡因浓度为0.2、0.4mg/mL的精子冷冻后活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于00、.6 mg/mL(P0.05),最佳添加浓度为0.2 mg/mL;预设计的稀释液配方及冷冻方案优于传统的TCG法(P0.05),但与Androhep CryoGuardTM稀释液(美国商业用)有一定差距(P0.05);A曲线在猪精液冷冻-解冻后活力、质膜完整率和顶体完整率方面均显著优于B和C冷冻曲线(P0.05);50℃水浴解冻13 s显著优于38℃解冻30 s(P0.05)。     

在4℃降温平衡过程中0.2g/L咖啡因与精子共孵育时间对猪颗粒冻精质量的影响

实验旨在探讨在猪精液于4℃平衡2 h过程中0.2 g/L咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h,对颗粒冻精解冻后精子活率、活力、质膜完整性和顶体完整性以及解冻后精子体外存活时间等指标的影响,以期进一步提高猪颗粒冻精质量。实验结果表明,在精液冷冻之前,咖啡因不同平衡时间组的精子活率和活力都呈现出升高趋势,但与对照组差异不显著;咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h组的精子顶体完整率和质膜完整率显著低于对照组,前3组之间差异均不显著。而颗粒冻精解冻后,咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h组精子活率和活力均显著高于对照组,其中共孵育1 h组显著高于其他3组(P0.05),共孵育2 h组和0.5 h组间差异不显著(P0.05);共孵育2 h组精子顶体完整率和质膜完整率显著低于对照组和共孵育0.5 h、1 h组(P0.05),但后3组之间差异不显著;共孵育2 h组精子存活时间显著低于对照组、共孵育1 h和0.5 h组(P0.05),其中共孵育1 h组精子存活时间最长,达7 d以上。总之,在精液4℃降温平衡过程中咖啡因与精液共孵育1 h对冷冻后精子质量最有利,解冻后精子活率和活力显著高于其他各组,且解冻后精子体外存活时间最长。     

稀释方法对绒山羊冷冻精液品质的影响

选取7只精液品质优良的雁门绒山羊种公羊,通过测定其冷冻精液解冻后的精子活率（0、4 h）、精子存活指数、顶体完整率及精清中透明质酸酶（HYD）、谷草转氨酶（GOT）、乳酸脱氢酶（LDH）酶活力,研究一步稀释法和二步稀释法对冷冻精液品质的影响。结果表明,二步稀释法解冻后的精子存活指数显著（P＜0.05）高于一步稀释法,其解冻后精清中透明质酸酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶的活力均显著（P＜0.05）低于一步稀释法。表明采用二步稀释法冷冻的绒山羊精液品质好于一步稀释法。