一起鸡传染性支气管炎的RT-PCR诊断

2008年11月,河南焦作某鸡场发生一起疑似鸡传染性支气管炎的疫情。根据鸡传染性支气管炎S1基因序列设计、合成1对引物,应用RT-PCR技术对病死鸡的气管和肾脏等组织进行RT-PCR扩增,扩增出预期目的基因。结合临床症状和病理剖检变化初步诊断为鸡传染性支气管炎。     

鸡传染性支气管炎实验室诊断技术

鸡传染性支气管炎病是危害养禽业的主要疾病之一,该病的临床和病理变化复杂多样,又常继发或并发其他细菌性、病毒性疾病,给该病的诊断带来了很大的困难,本文结合多年临床疾病诊断经验,分别从病毒学、血清学、人工感染和分子生物学方面的阐述了该病实验室诊断技术,从而为该病的确诊诊断提供一定的技术支撑.     

鸡传染性支气管炎实验室诊断技术研究进展

传染性支气管炎（IB）是由冠状病毒属传染性支气管炎病毒（IBV）引起的鸡的一种急性、高度接触性的呼吸道和泌尿道传染病，以气管音、咳嗽、打喷嚏为特征。对产蛋鸡常引起产蛋下降、畸形蛋、软壳蛋，由于呼吸道症状和肾病变可引起雏鸡死亡。本病存在多种血清型，且都不能交叉保     

鸡传染性支气管炎实验室诊断技术

鸡传染性支气管炎是危害世界养鸡业的主要疫病之一 ,本文对该病的实验室诊断技术进行了介绍。从传统的琼脂扩散试验、中和试验和血凝抑制试验 ,到目前发展很快的RT PCR技术、Dot-ELISA和斑点免疫金技术 ,都各具特点 ,互有利弊     

鸡传染性支气管炎的诊断与控制

鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis of Chickens,IB)是仅发生于鸡的急性、高度接触性的呼吸道疾病。本病呈世界性分布。据报道,本病在临诊上常有腺胃型传染性支气管炎(腺胃型IB)、呼吸型传染性支气管炎(呼吸型IB)、肾型传染性支气管炎(肾型IB)。 病原与流行病学 1 病原学 鸡传染性支气管炎病毒(IBV)是冠状病毒科的代表种。 各地分离出来的病毒,在血清学反应和致病性上都可能有所不同。目前报道过的至少有10个血清型,Massachusetts 41, Connecticut, Iowa 97, Iowa 609, Holte,JMK,Clarlk 333, SE 17,lorida和Arkansas 99。刘福安(1999)认为至少有14个血清     

鸡传染性支气管炎的实验室诊断技术

鸡传染性支气管炎是危害世界养鸡业的主要疫病之一,临床上无典型的病变特征,诊断较为困难,故对该病的实验室诊断技术进行了介绍。从病料采集和处理、病毒分离、病毒鉴定,包括传统的琼脂扩散试验、中和试验和血凝抑制试验,到目前发展很快的酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光抗体技术,其各具特点,互有利弊。为了更好地控制该病,有必要根据临床特点对目前各种检测鸡传染性支气管炎的方法及其优缺点进行分析,为临床寻找一种适合的快速和准确的诊断方法、制定合理的免疫程序以及发展新型的诊断方法提供参考。     

传染性支气管炎病毒RT-PCR方法的建立

传染性支气管炎病毒 (IBV)的主要结构蛋白有 3种 ,纤突蛋白 S、膜蛋白 M和核蛋白 N。S蛋白由 S1和 S2 2部分组成 ,其中 S1蛋白的进化最为活跃 ,是 IBV具有众多血清型的基础。 S1蛋白的活泼表现源于 S1基因容易发生插入、缺失和不同毒株基因间重组。因此 ,围绕着 S1基因的研究工作就成为 IBV研究的热点 [1～ 3 ]。研究 IBV基因组结构的基本手段之一是建立有效的反转录聚合酶链反应 (RT- PCR)以扩增出所需要的基因片段 ,由于 IBV基因组结构比较特殊 (核酸片段较大 ,碱基分配不均匀 ,G C含量较低 ) ,其 RT-PCR方法的建立十分困…     

鸡传染性支气管炎病毒793/B RT-PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank已发表的鸡传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus，IBV）793／BS1基因序列，设计1对引物，扩增891bp特异性核酸片段，建立了检测IBV793／B的RT—PCR方法。特异性试验结果表明，IBV793／B能扩增出891bp的核酸片段，而IBVM41H120H52毒株以及新城疫病毒（NDV）、禽流感病毒（AIV）、传染性法氏囊病病毒（IBDV）均无特异性条带出现。敏感性试验结果表明，该方法的最低检出量为10pg的模板。上述结果表明，本试验所建立的RT—PCR方法敏感性高、特异性强。利用建立的RT—PCR方法对从山东省分离的8株疑似鸡IBV793／B进行检测，结果7株为阳性。该方法的建立为IBV793／B的诊断及流行病学调查提供了可靠的方法。     

鸡传染性支气管炎的诊断与防制

鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis,简称IB)是由传染性支气管炎病毒(infectious bron-chitis virus,IBV)引起鸡的一种急性高度接触性传染的病毒性疾病。该病主要侵害鸡的呼吸系统、泌尿生殖系统和消化系统,使病鸡出现呼吸困难、肾脏病变、产蛋下降等症候。雏鸡感染     

肉仔鸡肾型传染性支气管炎的诊治

鸡肾型传染性支气管炎是由鸡传染性支气管炎病毒(IBD)嗜肾型毒株引起的一种急性高度接触性传染病。本病仅发生于鸡,各种年龄的鸡均可发病,但雏鸡最为严重,死亡率也高,一般以40日龄以内的鸡多发。其传播途径主要为呼吸道和消化道传染,病毒在鸡群中能迅速传播与感染鸡。同置一层的易感鸡通常在48h内出现症状。其传染源为病鸡和带毒鸡,病鸡和带毒鸡从呼吸道、粪便排出的病毒经空气、飞沫传染给易感鸡,也可通过饲养人员、被污染的饲料、饮水、用具等经消化道感染。本病一年四季均可发生,但以冬春季多发,尤其是鸡群拥挤、过热、过冷、通风不良…     

肾型传染性支气管炎的诊治和预防

肾型传染性支气管炎（下简称肾型传支）是由冠状病毒引起的鸡传染性支气管炎的一种病理表现形式。１９６２年由Cosgrove首先发现并描述，其最具代表性的毒株是澳大利亚的T株。肾型传支现已遍布世界各国。２０世纪９０年代以后，亚洲地区开始流行。泰国（１９９０）、马来西亚、台湾（１９９６）、中国大陆、韩国（１９９８）均有初报。近年来，尤其是去冬今春以来，我国山东省，尤其青岛地区肾型传支发病率显著升高，造成养鸡业，特别是肉鸡饲养业不小的经济损失，从而引起广泛关注。肾型传支并不是由独立病毒引起的一种独立性疾病，它是传…     

鸡肾型传染性支气管炎的诊断和防治要点

鸡的肾型传染性支气管炎(以下简称肾传支)多发生于1～5周龄的雏鸡群,在疫区流行时无明显的季节性,但相对低温期发病率更高。因该病主要通过呼吸道感染,在密集饲养的肉仔鸡群中易呈暴发性流行。该病自然病程约10d左右。一旦发病,除直接因原发病和继发病引起死亡外,还严重影响病愈鸡的生产性能,例如能损伤患病鸡的性腺发育,降低性成熟后的繁殖功能,使肉仔鸡脱水失重,发育滞后,甚至形成僵鸡。肾传支病程有以下进行规律,现介绍如下供诊断参考:急性期:以上呼吸道症状为主,两眼流泪,鼻有清涕,干咳甩头,有轻湿啰音。但病鸡应激敏感,能自由饮食,此时…     

核酸探针检测鸡传染性支气管炎病毒方法的建立及应用

以地高辛(DIG)标记鸡传染性支气管炎病毒(IBV)pol基因的保守片段制成核酸探针,与IBV参考株、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、禽流感病毒、正常鸡胚尿囊液及正常鸡肾组织等的RT-PCR产物进行斑点杂交,以检测探针的特异性,结果该探针仅与IBV毒株的RT-PCR产物杂交呈阳性,与对照病毒和组织的RT-PCR产物杂交呈阴性.敏感性试验显示,探针最低能检出约3.4pg的IBV RT-PCR产物.用该方法检测了38份疑似IBV临床病料,31份阳性;而用RT-PCR法扩增IBV S2基因确诊为阳性的只有29份.对人工接种IBV H52弱毒苗鸡咽喉和肛门拭子32份进行检测,检出15份阳性.结果表明,利用DIG探针检测IBV的RT-PCR产物,特异性和敏感性强,可重复,能克服RT-PCR非特异性反应和探针Northern杂交的不稳定性.     

鸡肾型传染性支气管炎的诊断与防治

鸡传染性支气管炎（IB）是由冠状病毒引起的一种传染病。由于冠状病毒的病原基因型变化多，近年来所引起的症状和病理变化有很大差异，同时各血清型之间的免疫学反应也不完全一致。在临床上表现为肾型、呼吸道性、肠道等症状，以下将对IB的诊断和防治进行阐述。     

一例犬瘟热的RT-PCR诊断

采用特异性引物，对一例犬瘟热疑似病例的肺脏及肝脏样品进行RT-PCR扩增(反转录多聚酶链式反应试验)，结果得到两份与预期相符合的阳性产物，而在对牛瘟疫苗进行扩增时则未得到阳性结果，表明该方法对犬瘟临床病例的诊断特异而有效。     

鸡传染性支气管炎病毒变异株ZZ2004 RT-PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank已发表的鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV) ZZ2004 3a、3b及E基因序列,设计1对引物,扩增540 bp特异性核酸片段,建立了检测IBV ZZ2004的RT-PCR方法.特异性试验结果表明,IBV ZZ2004能扩增出540 bp的核酸片段,而IBV M41、H120、H52毒株以及新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、传染性腔上囊病病毒(IBDV)均无特异性条带出现.敏感性试验结果表明,该方法的最低检出量为1.525 pg的模板.上述结果表明,本试验所建立的RT-PCR方法敏感性高、特异性强.利用建立的RT-PCR方法对从河南省分离的6株疑似鸡IBVZZ2004进行检测,结果5株为阳性.该方法的建立为IBV ZZ2004的诊断及流行病学调查提供了可靠的方法.