6株羊源乳酸杆菌电转化条件的优化

选取质粒pLEM415-egfp电转化源于陕北白绒山羊瘤胃的乳酸杆菌,研究不同生长时期及电场强度对6株羊源乳酸杆菌电转化效率的影响,并优化其转化条件。在37 ℃培养条件下,培养6株羊源乳酸杆菌,当D_{600 nm} 达到0.4、0.6、0.8、1.0和1.2时,离心收集菌体,制备感受态细胞;在电阻200 Ω、电容25 uF条件下,分别采用1.5、2.0和2.5 kV 3种电场强度电击转化感受态细胞。结果表明,羊源植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、罗伊乳酸杆菌(Lactobacillus reuteri)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、棒状乳酸杆菌(Lactobacillus coryniformis)和弯曲乳酸杆菌(Lactobacillus curvatus)获得最高转化效率的D_{600 nm}和电场强度分别为0.8、1.2、1.0、0.6、0.8、0.4和1.5、1.5、1.5、1.5、1.5、2.0 kV。羊源乳酸杆菌最佳转化条件的确立,为后续乳酸杆菌转基因工程菌的构建及其应用奠定了基础。     

甘蔗尾中乳酸菌的分离筛选和鉴定

该研究利用传统培养法从0–90 d打包青贮发酵的甘蔗(Saccharum sinense)尾中分离得到20株乳酸菌。通过形态学观察、API 50 CH生化试剂盒鉴定及16S rDNA基因序列分析法对分离纯化的菌株进行鉴定,并测定其产酸能力。结果显示,菌株Y42是干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),菌株Y32、Y59是副干酪乳杆菌(L. paracasei),其余的17株是植物乳酸杆菌(L. plantarum);分离的20株菌株在培养18 h后,菌株发酵液的pH可降低至3.70以下,Y67菌株的pH最低,为3.57。从甘蔗尾中分离的20株乳酸菌产酸能力均较强,具备良好的青贮潜力,可作为制备青贮饲料发酵剂的菌种。     

西藏灵菇中Lactobacillus casei LC577的分离鉴定及特性

从西藏灵菇中分离到一株菌株,命名为LC577,经形态学特征、16S rRNA基因序列及生理生化特性分析,鉴定为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)。结果表明:干酪乳杆菌LC577具有良好的产酸能力,进行脱脂乳发酵后具有浓郁的干酪香气;同时该菌株具有一定的耐酸耐胆盐能力,在模拟人工胃液环境中培养4 h后,活菌数出现微弱增加,而经3 g/L牛胆汁作用4 h后,活菌数降至6.15×10~5 CFU/mL。     

圈养非人灵长类乳酸杆菌的分离筛选和功能鉴定

乳酸杆菌对于动物的肠道健康有着非常重要的作用。为研究圈养非人灵长类动物肠道乳酸杆菌,无菌采集不同品种的表观健康的圈养灵长类动物新鲜粪便,进行乳酸杆菌的分离培养及纯化,并通过耐酸耐胆盐试验、细胞黏附试验和对大肠杆菌抑菌试验,对其进行生物学特性研究。结果显示:共分离得到17株乳酸杆菌,有3株菌Lac5-2、Lac5-4、Lac6-2在pH 3.0和胆盐浓度0.5%时表现出良好耐酸耐胆盐性能,且无耐药性。其中菌株Lac6-2黏附性及对大肠杆菌的黏附抑制性均较好,黏附率为16.2%(MOI=100),黏附抑制率为85.5%(MOI=10)。经16S r DNA测序,Lac5-2、Lac5-4、Lac6-2均为罗伊氏乳酸杆菌。最终确定菌株Lac6-2为候选优势益生菌株。该研究为利用乳酸杆菌防治圈养野生动物消化道疾病提供基础。     

果洛地区传统发酵牦牛酸奶中乳酸菌的分离鉴定

本实验对青海省果洛藏族自治州4县8份传统发酵牦牛酸奶中的乳酸菌进行分离纯化,并利用生化鉴定试剂盒进行鉴定。结果表明,分离得到的16株乳酸菌中,3株为德式乳酸杆菌、2株为干酪乳酸杆菌、2株为罗伊氏乳杆菌、1株为嗜酸乳杆菌、8株为嗜热链球菌。     

奶牛瘤胃液和瘤胃残渣来源固氮菌的比较研究

试验拟对奶牛瘤胃液和残渣中兼性厌氧固氮菌的一些性质进行比较研究。首先采集3头荷斯坦奶牛的瘤胃液和残渣,分离兼性厌氧固氮菌;然后对其进行固氮酶活性测定、生理生化鉴定和16S r DNA测序。结果表明,从瘤胃液和残渣中分别分离到6株(LY-1、LY-2、LY-3、LY-4、LY-5和LY-6)和4株(LC-1、LC-2、LC-3和LC-4)兼性厌氧固氮菌;从两种来源均分离到了同一种属的索诺拉沙漠芽孢杆菌(LY-3和LC-2、LC-4)。比较发现,从同一来源中分离到的同一种属的菌株(LY-5和LY-6;LC-2和LC-4)的固氮酶活性基本相同,而从不同来源中分离到的同一种属的菌株(LY-3和LC-2,LC-4)的固氮酶活性则有所不同,瘤胃残渣中菌株的酶活性高于瘤胃液中的。据此推测,兼性厌氧固氮菌可能更适合生存在饲料残渣上。     

苜蓿青贮饲料中优良乳酸菌菌株的筛选

本研究从苜蓿（Medicago sativa L.）青贮饲料中分离得到若干株乳酸菌,对所有菌株进行生长曲线和产酸速率测定,发现其中8个菌株产酸速率较快,能于24h内将培养基pH值降至4.0以下。根据形态、生化鉴定及16S rDNA同源性序列分析,鉴定4株为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,2株为戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）,1株为类植物乳杆菌（Lactobacillus paraplantarum）,1株为副干酪乳杆菌（Lactobacillusparacasei）。通过适当的工艺处理其有望作为乳酸菌添加剂单独或混合添加入青贮中以提高青贮饲料品质。     

干酪乳杆菌的筛选及其在褐色活性乳饮料中的应用

以产酸速度、pH2.5人工胃液耐受性、pH8.0人工肠液耐受性、0.3％胆盐耐受性,对传统发酵乳制品中分离的298株干酪乳杆菌进行筛选,并对其在褐色活性乳饮料中的应用进行评价.结果表明:共有1 1株干酪乳杆菌在脱脂乳中产酸速度显著快于其他菌株(P＜0.05),其中IMAU60143、IMAU70020和IMAU10510具有优良的人工胃肠液和胆盐耐受能力(P＜0.05),此3株干酪乳杆菌在褐色活性乳饮料中具有良好的贮藏稳定性,其中IMAU70020于4℃贮藏28d活菌数仍大于5.0×108CFU/g.     

猪源乳酸杆菌的安全性及抗逆性评价

对本实验室自行分离自猪肠道的3株乳酸杆菌进行安全性和抗逆性检测,采用体外法对分离自不同生理阶段猪(仔猪、生长肥育猪、母猪)肠黏膜和食糜的罗伊乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LA5、植物乳杆菌(L.plantarum)L47和约氏乳杆菌(Ljohnsonii)L63进行生长特性、溶血性、有害代谢产物、...     

酸马奶中乳酸杆菌的分离与鉴定

从内蒙古锡林郭勒盟地区牧民家庭自制酸马奶样品中,分离纯化得到11株乳酸杆菌.经形态学、生理生化特性研究,11株乳酸杆菌分别鉴定归属于干酪乳杆菌(L.casei)、嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、植物乳杆菌(L.plantarum)、旧金山乳杆菌(L.sanfranciso).