从海鱼中分离出一种新血清型的猪丹毒杆菌

从海鱼分离的335株猪丹毒杆菌中发现有3株的血清型不同于国内外已确定的23个型.按照Kucsers(1973)猪丹毒菌血清型命名法,定名为24型.这3个菌株对小白鼠的毒力较强,100个菌可使小白鼠全部死亡,但以1,000万个菌皮内接种健康猪,不能使猪呈现局部红肿反应.     

不同血清型猪丹毒杆菌的交互免疫试验

Wood等人已试验证明猪丹毒杆菌的免疫效力与血清型有关。White曾报道用1型或2型菌株制备的菌苗接种猪后,再用几种不同血清型的猪丹毒杆菌攻击,结果表明在免疫力上,同型菌间比异型菌间坚强。为了了解我国目前使用的菌苗对抵抗自然界猪丹毒各型菌株的免疫效力,本试验利用从我国江苏和四川荣昌健康猪脾脏、骨髓、扁桃     

猪丹毒QL251弱毒株安全性及免疫原性试验

猪丹毒ＱＬ２５１弱毒株是我所保存的猪丹毒强毒菌种Ｃ４３００９的变异株，对其进行了毒力和免疫原性的测定，该菌株毒力原来是３－５个活菌可致死小白鼠，现在对小白鼠皮下注射７．４×１０~８活菌，小白鼠全部健活，对敏感猪皮下注射９．４×１０~（１０）活菌均健活且无任何反应；小白鼠免疫９－１２个活菌７２％保护，对猪免疫２９０－５９０×１０~４活菌１００％保护。     

安徽省猪丹毒病原血清型的调查

<正> 1976年秋,我省开始使用GC—42弱毒菌株生产的猪丹毒冻干苗,但发现不少猪于接种后8～86天仍死于猪丹毒,因此,对我省猪丹毒病原进行血清型调查。     

湖北省鸡大肠杆菌病流行情况调查及病原分离鉴定

湖北省２９个养鸡场的１３６８１０只鸡在１９９２－１９９６年大肠杆菌病的发病率为２６．４％,死亡率为８．７％。从病死鸡分离出１８株大肠埃希氏菌,主要血清型Ｏ７８,Ｏ２和Ｏ１,分别占鉴定菌株的３８．８％,１６．７％和１１．０％,分离菌株肉汤培养物接种小白鼠和４日龄雏鸡,可使５０％以上小白鼠在２ｄ内死亡;３０％以上雏鸡在７ｄ内死亡,剖检存活鸡可见典型的大肠杆菌病病变。     

抗青霉素猪丹毒菌株的研究

近年来,我们从某些发生猪丹毒病的猪体内分离到一种对青霉素有抗药性的革兰氏阳性细菌,经过常规细菌学检查,包括形态、染色、培养、小动物接种试验、小白鼠免疫保护试验、治疗试验、抗菌素抑菌试验以及菌型鉴定证明:该菌是A型猪丹毒杆菌。最近一些年来,在实践中发现许多病原菌不断出现对抗菌素的耐药菌株,一般认为,猪丹毒菌对青霉素敏感,不易产生抗药性,虽然有人在试管抑菌试验中发现过一株对青霉素有抗药性的猪丹毒菌株,但目前似尚未见到从自然发病猪体内     

猪源大肠杆菌O157:H7广西分离株的鉴定

为了解大肠杆菌O157:H7是否在猪场存在,采集有拉稀症状猪的粪便,接种到新生霉素mEC增菌肉汤,增菌培养后转接到O157:H7显色培养基上,对可疑菌株用因子血清和PCR方法做进一步鉴定,实验结果证实得到5株大肠杆菌为O157:H7血清型。动物试验发现,5个分离菌株对小白鼠的致死率为33.3%—100%之间。调查结果证实广西猪群中存在强致病性的O157:H7血清型大肠杆菌。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌参考株抗血清的制备及野毒株血清型鉴定

将猪传染性胸膜肺炎放线杆菌全部12个血清型的国际参考菌株接种于培养基大量培养。回收菌体、甲醛灭活后，加入蜂胶佐剂制成疫苗。分别免疫健康的试验用白兔。获得针对该菌单一血清型的抗血清。虽然不同血清型间有一定的交叉反应，但对同源菌株的菌体抗原的凝集效价最高。分别可达6～8个log2。用该套血清对2003年从山东省各地分离到的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌野毒株11株进行了血清型鉴定。分别为3型（2株）、4型（1株）、5型（4株）和7型（4株）。     

广西副猪嗜血杆菌病流行病学调查

本研究于2009年5月至2010年11月调查了广西南宁、桂林、玉林、钦州4个市60个猪场发生副猪嗜血杆菌病的情况。采集病猪组织样品共86份进行副猪嗜血杆菌分离;对疑似菌株进行形态学观察、培养特性、生化特性和PCR鉴定;最终分离鉴定到26株副猪嗜血杆菌,分离率为30.2%;对分离菌株进行血清型鉴定、致病性和药敏试验。结果表明26株分离株中血清4型有5株,5型3株,9、11、13、14、15型各1株,有1株与2、9、10、11型血清均有凝集,其余12株未能鉴定出血清型。血清型5、13、14菌株和5个未能定型的菌株能引起小白鼠全部死亡,其他菌株对小白鼠致病性不强。药敏试验结果表明70%以上的菌株除对恩诺沙星和氟苯尼考高度敏感外,对其他药物敏感性不高。本调查结果将对广西副猪嗜血杆菌病的防治提供指导。     

仔猪水肿病病原菌的分离和鉴定

选择东北三省的锦州、丹东、盘锦、阜新地区自然发生仔猪水肿病的病例,共分离出96株仔猪水肿病大肠杆菌。对其中的12株菌进行生化鉴定、血清型鉴定和致病性检测。生化鉴定结果:12株菌均符合大肠埃希氏菌生化特征。血清型鉴定结果:12株菌分别为O139、O138、O141、054和048五种血清型,主要为O139、O138和O141三种血清型。致病性检测的结果:菌液、毒素对小白鼠攻毒,结果表明对小白鼠有较强的致病性,引起小白鼠死亡,剖检见相关器官水肿;菌液、毒素对猪攻毒试验结果表明感染断奶仔猪,各病变脏器均分离到大肠杆菌,各方面特性均与所攻毒菌株一致。     

猪支气管败血波氏杆菌菌株对普通饲养猪的致病力

猪支气管败血波氏杆菌对普通饲养猪滴鼻感染的致病力,因变异、菌量和猪龄不同而育很大差异.细菌变异是降低致病力的主要原因,致明显乃至完全的鼻甲骨萎缩主要与接种的猪龄有关,而肺炎的发生主要与接种菌量有关.强毒力株为原型Ⅰ相菌,对周龄内仔猪致鼻甲骨萎缩的能力强于Ⅲ相变异菌株10万倍以上,6万至10万个活菌可使大部分猪致明显乃至完全萎缩。两个菌相致肺炎及皮肤坏死作用亦有显著差别。未发现Ⅰ相菌株在呼吸道内变异为Ⅲ相菌,而试管内稳宅的Ⅲ相菌株大菌量接种时,在周龄猪可全部返祖为Ⅰ相菌,仅部分例致轻度乃至中度萎缩;在2.5～3.0月龄猪仅半数例返祖为Ⅰ相菌,不能返祖者被迅速清除,不致病变.     

猪丹毒丝菌C43-5株菌种毒力检定标准再评价

为进一步完善猪丹毒疫苗毒力检定标准，对猪丹毒丝菌C43-5株在肉肝胃消化汤中的生长规律进行了分析，测定了菌株对猪的最小致死剂量，并对1986、1996、2006、2015年4个冻干代次菌种进行了毒力和免疫原性测定。结果显示：C43-5株在肉肝胃消化汤中培养16 h时活菌数最高，而后进入稳定期，培养19 h后活菌数迅速下降，菌体大量死亡；以3.5×10¹⁰ CFU活菌静脉注射56～63日龄健康易感猪，2只试验猪在4 d内全部死亡；1986、1996、2006、2015年4个冻干代次的C43-5株菌种毒力和免疫原性检定结果均符合要求。同时提出了猪丹毒丝菌C43-5株毒力检定标准的修改建议，为延长菌种的保存期限提供了数据支撑。     

我国南方猪高热病的研究(Ⅰ)——大肠杆菌的分离、鉴定和致病性测定

从湖南3个高热病发病猪场11头病死猪的病料组织中均分离出了大肠杆菌,经血清学鉴定,鞭毛抗原(K88、K99、987P和F41)全为阴性反应。经过157种菌体抗原血清学检测,血清型为5、6、15、22、32和83型。药物敏感试验结果表明,分离的大肠杆菌对大多数常用药物耐药,对氟喹诺酮和头孢类药物敏感。将其中4头猪原代分离的大肠菌培养物以原倍(2×107个/mL)、104和108稀释的菌液分别感染18~22 g小白鼠,原倍菌液感染的小白鼠12/30在感染后24 h内出现死亡,而104和108稀释菌液感染的小白鼠均健活;将未经除菌的病死猪组织悬液、过滤除菌的组织悬液、大肠杆菌、过滤除菌的组织悬液及大肠杆菌分别感染30日龄左右的健康小猪,除未经除菌的组织悬液感染猪3/3发病,2/3死亡外,其余所有感染猪只出现体温升高,升幅达1~2℃,减食,精神萎靡,但没有死亡;将死亡猪再次分离到的大肠杆菌感染小白鼠和猪,小白鼠12/15出现死亡,感染猪只出现体温升高(超过1℃),没有出现死亡。结果证明:大肠杆菌在高热病的发病过程中只起协同诱发作用,引起猪发病死亡的真正原因可能是病毒感染。     

胸膜肺炎放线杆菌两种不同血清型相互作用的研究

对胸膜肺炎放线杆菌（Abpp)1，2，5和7血清型野外菌株做了体外和体内相互作用的研究，当两个型的菌株在体外共同培养时，一种血清型对外另一种血清型没有影响，用血清1型与血清2型或5，7型同时接种小鼠时，血清1型无论在2型之前或之后接种都起主导作用，两株同时接种比接种单一菌株死亡率高，上述各型菌株同时接种可导致早期死亡，自死亡小鼠可回收到相应血清型细菌。     

急性死亡猪中猪丹毒杆菌的分离鉴定

本试验从江西省南昌市某规模化猪场送检的2份疑似猪丹毒杆菌引起的急性死亡猪组织中分离出2株可疑菌株,经细菌分离培养、染色镜检、生化试验等实验室诊断,进一步以猪丹毒杆菌16S rRNA的特异性引物进行PCR鉴定,确定2株分离菌为猪丹毒杆菌.然后进行动物致病性试验及药敏试验,并对该厂常用的消毒药进行最小抑菌浓度(MIC)的测定.结果表明,1×10⁸ CFU的剂量可致死小白鼠;分离菌对β-内酰胺类抗菌药高度敏感,对多数抗菌药耐药;该厂常用消毒药的抑菌作用已明显下降.本试验结果对临床防制猪丹毒具有参考意义.     

副猪嗜血杆菌15个血清型标准分离株对小鼠毒力的研究

为了确定Balb/c小鼠是否适合作为副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的试验动物模型,试验用1～15血清型HPS标准菌株感染Balb/c小鼠,每只小鼠接种量为1.0×109 cfu。结果表明:用血清型1,2,5,10,12,13,14接种的5只小鼠均死亡4只,用血清型4,15接种的5只小鼠分别死亡2,3只,用血清型3,6,7,8,9,11接种的5只小鼠均没有死亡;各血清型的毒力与猪体试验的结果基本相符。说明Balb/c小鼠适合作为副猪嗜血杆菌的试验动物模型。     

猪丹毒弱毒菌苗(G_4T_(10))对不同血清型菌株的免疫性试验

猪丹毒杆菌的血清型目前已确认的有22个,还有一个亚型及N型。经猪丹毒菌苗免疫的动物对这些血清型菌株是否有保护力,这是生产上急需解决的问题。我们以猪丹毒弱毒菌株G4T10制成的菌苗免疫动物,以不同的血清型参考菌株攻击,测其保护率;并用未免疫动物测各菌株的致病性。现将试验结果报告于后。     

鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定

无菌采取病死鸡脑、肝脏、脾脏和肾脏接种于麦康凯琼脂平板,分离出特征性的大肠杆菌菌落,经生化和血清型鉴定,鉴定出该分离菌为肠埃希氏菌1型,血清型为O78,但与O92血清型有很高的交叉。药敏试验结果显示：该分离菌株对头孢拉定、头孢噻吩和头孢氨苄有耐药性,而对头孢曲松中度敏感,对卡那霉素、庆大霉素、氨苄西林、氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星敏感。致病力试验显示：腿部肌肉注射的雏鸡全部死亡,腹腔注射的雏鸡部分死亡,其他鸡只健康存活。     

水貂绿脓杆菌的分离与鉴定

2011~2013年间,从山东省、河北省和江苏省等地的多个貂场疑似水貂出血性肺炎病貂的肺脏、肝脏和脾脏中分离到425株疑似绿脓杆菌。用绿脓杆菌的OprF和PEA基因的PCR引物对分离菌株的目的基因扩增,经核苷酸测序确定其均为绿脓杆菌序列。通过日本生研株式会社血清学分型系统进行分型：G型376株,占88.5%;B型34株,占8%;C型12株,占2.8%;E型3株,占0.7%。取其中6株细菌（G血清型3株,其他血清型各1株）进行详细生化试验,结果显示该6株菌均符合绿脓杆菌的生化特性,并且从这6株中选4株细菌（每血清型各1株）腹腔接种小白鼠和气管内接种水貂,结果表明4株菌对其均有致病性。     

冻猪胃中鼠伤寒沙门氏菌的分离与鉴定

从一客户送检的冻猪胃中分离出一株细菌，经细菌分离培养，生化反应，梅里奥微生物自动分析仪检测以及血清凝集试验鉴定为鼠伤寒沙门氏菌，抗原式为4，5：i:1,2。该菌株致接种的小白鼠全部死亡；分离菌对先锋V，氟哌酸，环丙沙星，氯霉素高敏，对复方新诺明，青霉素，红霉素耐药。