金花茶育种十四年

<正> 金花茶是我国特产的世界珍稀花木,主产广西西南部。60年代初在广西发现了金花茶Camellia chrysantha(Hu)Tuyama之后,举世瞩目,引起了国内外山茶爱好者和育种家的重视。 1973年底开始,著者就开始投入了金花茶杂交育种工作。1979—1980年金花茶外流日本、美国、澳大利亚等国后,我们更而临了严峻的国际竞赛。近年国内陆续发现新的金花茶     

薏苡属种间杂种形态的观察和比较

通过薏苡属(Coix)栽培种(C.lacryma-jobi L.)和野生种(C.agrestis lour.)远缘杂交 F_1和 F_3形态观察和比较,确证出现性状的疯狂分离和超亲变异,符合远缘杂交的特征,从形态上证明远缘杂种的真实性。     

二倍体和四倍体球茎大麦及其种间杂种的C—带核型研究

二倍体和四倍体球茎大麦的核型相似，都有５组非常相似的中着丝粒染色体，一组中着丝粒染色体和一组随体染色体。Ｃ－带带纹很小，大多数染色体只有一开两条着丝粒带，染色体４有１条中间带，随体染色体有次溢痕带，二倍体类型的带型表现出一定的多态性     

甘蓝型油菜与甘蓝种间杂种的鉴定及特性研究

采用新型甘蓝型油菜细胞质雄性不育源(Eru CMS)为材料,通过杂交与胚抢救技术,获得甘蓝型油菜与甘蓝的种问杂种,对杂种进行鉴定并对杂种性状进行研究.用流式细胞仪和染色体计数鉴定后发现,真杂种的DNA含量为两亲本的中间值,并且染色体数目均为28条.通过对真杂种特性进行研究,结果表明:杂种植株幼苗形态都介于亲本之间,生长...     

毛百合×有斑百合种间杂种的核型研究

利用染色体常规压片方法,对毛百合、有斑百合及其3个杂种后代进行了核型分析.结果表明:毛百合、有斑百合和3个杂种染色体均为2n=2x=24.毛百合核型公式为2n=6m(2SAT)+4sm(2SAT)+14st,有斑百合核型公式为2n=2m+8sm+12st+2t,杂种F1-1核型公式为2n=4m+2am+18st,F1-2核型公式为2n=2m+8sm(2SAT)+14st,F1-3核型公式为2n=2m+8sm+14st.F1-1、F1-2和母本的核型类型都是3B型,而F1-3与父本的核型类型都是3A型.在染色体长度比、平均臂比及不对称系数等指标上,杂种大部分都趋于父母本的中间值.杂种染色体形态具有父母本双亲的特点,可以鉴定为真杂种.     

大葱和洋葱种间杂种的获得及其特性

【目的】构建大葱和洋葱的种间杂种。【方法】以章丘大葱和洋葱自交系06-38为材料,进行远缘杂交,对杂种子房进行培养;利用CAPS技术对所获得植株进行鉴定;利用花粉染色法、离体萌发法和自交对其进行育性鉴定。【结果】大葱和洋葱正反交,自然状态下胚败育。在未添加激素的MS培养基上进行大葱与洋葱种间正反交后的子房培养,均获得种间杂种F1,授粉后第7天为最佳培养时期;通过子房培养分别获得了大葱×洋葱、洋葱×大葱杂种植株26株和22株;经CAPS检测,杂交后代全部为真杂种。F1杂种植株具有明显的杂种优势,杂种雄性不育。【结论】利用子房培养技术,克服了大葱和洋葱远缘杂种在自然状态下胚败育的情况发生,获得了种间杂种F1;所获得的杂种植株表现出明显的杂种优势,且雄性不育。     

RAPD标记分析棉花种间杂种后代的遗传相似性

选用８０个随机引物,对栽培种陆地棉、野生种雷蒙德氏棉、它们的杂种一代以及从回交代中选育的９个种质系进行了ＲＡＰＤ指纹图谱和遗传相似性研究。结果表明：２９个随机引物扩增的带具多态性,并能将两个不同棉种、Ｆ１和种质系相互间加以区别。在９个种系中分别检测到５～９条（３．７％～５．３％）带与野生种相同的特异带,大多数带与陆地棉回交亲本一致。野生种与种质系间的相似系数为０．３８８～０．４７９,陆地棉亲本与种     

山茶花品种间杂交育种研究

为培育山茶花新品种,１９８２￣１９８８年,以白荷为父本,以金盘荔枝为母本进行了杂交育种试验,新育成的杂交后代于１９９１年均已开花,并有多株观赏价值较高的单株,探讨了山茶花杂交育种的部分遗传规律。     

DRIS 法在金花茶和山茶营养诊断上的应用研究

【目的】根据研究结果及植物营养与肥料的关系进行平衡施肥,提高八角林下金花茶和山茶的生产能力和肥料利用率,为林下种植金花茶和山茶的栽培养护提供理论依据。【方法】以金花茶(Camellia nitidissima Chi)和山茶(C. japonica L)为试验材料,测定4种不同郁闭度下的金花茶和山茶的N、P、K元素含量,同时用DRIS法分析金花茶和山茶在不同郁闭度的八角林下的营养指标和养分情况。【结果】金花茶叶片的全N、全P含量均随着郁闭度的增加呈"增加-减小"趋势,均在郁闭度0.7下最大;金花茶叶片的全K和山茶叶片的全N、P、K含量均随着郁闭度的增加呈现增加趋势,且均在郁闭度0.9下最大。根据诊断施肥综合法(DRIS)分析发现,不同郁闭度下两种植物的需肥顺序各不相同;金花茶在全光照、郁闭度0.5、郁闭度0.7、郁闭度0.9下的需肥顺序为KPN、NPK、KNP、PNK;山茶在全光照、郁闭度0.5、郁闭度0.7、郁闭度0.9下的需肥顺序为NPK、KPN、KNP、PKN;金花茶的NII(营养不平衡指数)大小表现为郁闭度0.9CK郁闭度0.7郁闭度0.5,山茶表现为CK郁闭度0.9郁闭度0.5郁闭度0.7。【结论】根据两种植物的NII值大小可以得出,金花茶在郁闭度0.5下、山茶在郁闭度0.7下的营养最平衡,比较适宜两种植物的生长,但不同郁闭度下两种植物土壤养分状况、需肥情况存在一定差异,在生产上要根据实际郁闭度进行合理施肥。     

金花茶成年树茎段离体器官发生

以金花茶成年树茎段为外植体进行离体器官发生研究。结果表明:分段消毒法是较为理想的消毒方式;附加2 mg.L-1BA及0.5 mg.L-1IAA的改良WPM培养基适合诱导腋芽萌发,萌发率达57.1%;芽苗在附加3 mg.L-1BA及0.2 mg.L-1IAA的改良WPM培养基上增殖效果较好;在附加4 mg.L-1或6 mg.L-1NAA的1/2MS培养基上可诱导芽苗生根。     

金花茶体胚和叶片愈伤组织培养

分别以金花茶子叶胚切块和成年植株叶片为材料,进行愈伤组织培养的研究。结果表明:金花茶子叶胚去外表皮后切块,接种于MS+1.5mg·mL-12,4-D+0.5mg·mL-1KT中,能诱导出愈伤组织,并能较好地继代,蔗糖浓度为6%时,愈伤组织生长良好;金花茶成年叶片在流水中冲洗30min,75%酒精浸泡30s后,转入0.2%HgCl2消毒剂中浸泡8min,接种于MS+1.5mg·mL-16-BA+0.5mg·mL-1IAA+4mg·mL-1NAA中,愈伤诱导率为98.335%,遮光有助于叶片愈伤组织的生长。     

广西防城金花茶花期气候适应性分析

[目的]研究金花茶开花期与各气象要素的相关性,为提高金花茶产量和品质提供决策依据.[方法]收集广西防城国家基准气候站1982年11月~2016年3月逐日观测数据,运用普查法查找防城站1982~2016年共34年的逐日雨量、温度、相对湿度、日照、风等气象要素,统计各要素的平均值、距平值和5年滑动平均值等,用线性倾向估计最小二乘法和累积距平法找出各气象要素与金花茶开花期的相关性.[结果]广西防城金花茶花期多年降雨量稳定在200.0~300.0 mm,呈减少趋势,但不明显;金花茶单花周期降雨量在4.0~12.0 mm的时段长,为最适宜开花时段;11月上旬和3月中、下旬单花周期雨量≥12.0mm概率和中雨以上降雨过程概率均较高,不利于开花.广西防城金花茶花期干旱概率在35.0%以上,干旱特征明显.花期多年平均相对湿度为77%,线性拟合递减率为-0.527,有减小趋势,但不显著;3月中、下旬相对湿度≥85%以上日数在7d以上,高温高湿天气频现,对开花不利,12月中旬中后期和下旬前期易出现低温低湿天气.单花所需≥8℃有效积温约110℃,相对固定,各旬气温分布不均,导致单花维持周期呈单峰型分布,1月下旬单花周期最长,11月上、中旬和3月中、下旬最短.11~12月单花周期日照时数过多,均在24.0h以上,3月中旬平均日照时数仅有9.8 h.多年花期出现大风概率占全年出现大风概率的53.5%,需防范偏北大风天气.[结论]广西防城金花茶花期主要受持续性降雨、干旱、低温低湿、低温高湿、高温高湿、大风等气象灾害影响,种植户应关注当地天气预报,及时采取相应的防范措施,以达到提高金花茶产量和品质的目的.     

金花茶种子萌发与快速繁殖技术研究

[目的]研究防城港金花茶种子萌发及组培快繁技术,初步建立金花茶组织培养体系,为金花茶的组培快繁利用提供参考.[方法]以金花茶种子为外植体进行组织培养试验,设置3个不同种子的发育程度处理、17个不同培养基的激素浓度处理,测定不同处理对金花茶种子萌发率、增殖系数、株高、叶片数等的影响,筛选出适宜金花茶组培苗生长的萌发、继代和壮苗培养基.[结果]选用胚乳直径大于1.0 cm的金花茶种子接种于MS+GA3 1.0 mg/L培养基中,萌发率可达82.4%;金花茶组培苗增殖系数随6-BA浓度增加呈先上升后下降的变化趋势,当6-BA浓度为3.0 mg/L时增殖系数最大,达3.79;适宜金花茶壮苗生长的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,其平均株高、叶片数、茎粗等均优于其他处理;在黄泥∶泥炭=1∶1组合处理下金花茶组培苗移栽生根率最高,达61%,成活率也较高,为90%.[结论]广西防城港金花茶适宜的种子萌发培养基为MS+GA3 1.0 mg/L、继代增殖培养以MS+6-BA 3.0 mg/L效果较好、壮苗培养基以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L较适宜、黄泥∶泥炭=1∶1作为金花茶组培苗移栽基质最适宜.     

金花茶多酚氧化酶基因的克隆及其体胚发生过程中的表达分析

以金花茶胚性培养物为材料,对体胚PPO基因克隆以及在体胚发生过程中的转录水平进行q PCR分析和酶活性变化检测.结果表明:克隆获得的金花茶PPO基因c DNA序列1788 bp,含有完整的开放阅读框(ORF),编码595个氨基酸;与登录Gen Bank的山茶属其他植物PPO基因序列进行核苷酸和氨基酸比对发现,同源性分别为74%和72%左右.同时,以18S rRNA作为内参基因进行的q PCR分析表明:金花茶体胚发生过程中PPO基因表达量呈下降趋势,球形胚PPO基因表达量最大,子叶胚和心形胚次之,成熟胚最小;而正常子叶胚和花状多子叶胚的表达量存在明显差异.此外,对金花茶体胚发生过程中PPO活性变化检测结果表明:在此过程中PPO活性明显比较低,变化趋势与PPO基因定量表达结果相似,推测PPO基因可能在金花茶体胚发生早期发挥重要作用.     

金花茶CnCHS基因原核表达载体的构建及表达分析

根据已经克隆得到的金花茶（Camellia nitidissima Chi．）查尔酮合成酶基因序列,设计引物对P1／P2扩增出该基因全长并将其构建到原核表达载体 pGEX 4T 1中,转入大肠杆菌BL21后,用浓度为0．4 mmol／L的IPTG诱导其表达。SDS PAGE电泳检测结果显示,被诱导的大肠杆菌菌体中出现了约68 ku的特异融合蛋白,表明该基因在大肠杆菌中成功表达。     

我国金花茶研究概况及其自主知识产权保护

通过对我国金花茶研究概况的论述,了解金花茶育种、分类、演化和应用的基本情况。在利用金花茶资源的基础上,分析存在问题,并就其自主知识产权的保护提出建议。