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为了研究兔抗鹅IgG酶标抗体的制备,试验采用水稀释-辛酸-硫酸铵法粗提,透析除盐,DEAEA-50纤维素层析相结合的方法提取鹅卵黄IgG,经核酸蛋白检测仪和SDS-PAGE测定IgG浓度;制备兔抗鹅IgG酶标抗体;利用酶标抗体检测小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因疫苗的免疫效果。结果表明,粗提的IgG浓度为10 mg/mL,抗体纯度可达到94.5%;免疫扩散得出兔抗鹅 IgG抗血清效价约 1∶32,抗体酶标后效价为1∶3000;酶标抗体可以作为检测疫苗效果一种很好的工具。 相似文献
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《畜牧与兽医》2017,(11):75-81
为了研究牛支原体P48抗原蛋白的免疫学功能及相应卵黄抗体的生物学特性,探究其抗体效价随免疫时间的变化规律,试验采用牛支原体P48蛋白疫苗免疫健康产蛋母鸡,定时采血并收集鸡蛋,用水稀释法结合硫酸铵盐析法制备特异性卵黄抗体,利用间接ELISA法检测血清抗体(IgG)和卵黄抗体(IgY)效价。结果表明,低、中、高剂量组均能诱导蛋鸡产生有效免疫应答,血清抗体效价与卵黄抗体效价的变化趋势基本一致,但卵黄抗体的产生滞后于血清抗体,在首次免疫后8~10周Ig Y效价达到峰值,其中中剂量组的免疫效价最高,最高效价为1:212。经SDS-PAGE检测,制备所得的纯度达86%以上,得率在8.6 mg/m L以上。说明采用牛支原体P48蛋白免疫蛋鸡可制备高效价、高纯度的抗牛支原体P48蛋白卵黄抗体,从而为卵黄抗体在牛支原体的检测与防控方面的研究奠定了基础。 相似文献
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鸡新城疫(ND)血凝抑制(HI)试验是监测鸡群免疫状态的常规血清学方法,主要用于检测鸡血清中的HI抗体。为避免捉鸡采血对产蛋鸡群的不良影响,一些研究者用卵黄代替血清来检测HT抗体。近年来,报道了ND琼扩(AGP)试验方法,並应用AGP试验检测ND沉淀抗体。从1987年以 相似文献
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赵昌廷 《上海畜牧兽医通讯》1994,(2)
鸡IBD、ND高免卵黄抗体用于治疗鸡法氏囊炎,新城疫病,收到了一定的效果,但也要了解其临床应用有五不宜.(一)不宜使用于种用和蛋用雏鸡.用于制作高免卵黄抗体的蛋一般为普通商品代母鸡所产,蛋在形成和产出过程中难免受到某些病原体的污染.虽然在制作过程中加入一定量的抗生素和防腐剂,也只能杀死或抑制部分细菌.但对通过卵传递的某些病毒则毫无作用.为避免疫病(如霉形体病、减蛋综合征等)的垂直传播,故而不宜用于种用和蛋用雏鸡.(二)不宜与疫苗接种同期进行.鸡IBD、ND高免卵黄液为高效价抗体制剂,当用于治疗鸡IBD和ND时,必须适当避开其相应的疫苗接种,以免因抗体、抗原中和而导致治疗或免疫失败.一般在高免卵黄抗体注射10天内不可接种相应的疫苗.或疫苗接种5天内不可注射含有相应有效抗体的卵黄液;若必须注射时,应待卵黄抗体效价降至无保护作用,再重新接种相应的疫苗,鸡体才能获得坚强免疫.(三)不宜单纯用于疫病的防治.高免卵黄液只不过是一种人工被动抗体制剂,注入鸡体后其有效免疫期也仅15天左右.如果对鸡群不采取疫苗接种,而是仅赖于卵黄抗体去防、去治,势必出现一些弊端.如用卵 相似文献
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试验用猪链球菌Ⅱ型CVCC606株制备疫苗免疫产蛋鸡,首免后7d检测到低水平的卵黄抗体,再经3次强化免疫,于末次免疫后7d卵黄抗体效价达到9log2,最高效价达到10log2,高水平卵黄抗体可维持到末次免疫后50d,随后出现下降。收集抗体效价大于9log2的高免蛋卵黄,经喷雾干燥成卵黄抗体粉,效价在10log2以上,卵黄抗体粉质量稳定,于室温(25℃)保存6个月抗体水平无明显降低。体外抑菌试验表明,高免卵黄抗体粉可有效抑制猪链球菌Ⅱ型CVCC606株和猪链球菌II型强毒分离株。高免卵黄抗体粉可有效预防猪链球菌Ⅱ型菌株对BALB/c小鼠的致死性感染。 相似文献
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鸡抗传染性法氏囊病卵黄抗体的ELISA及琼脂扩散检测 总被引:2,自引:0,他引:2
鸡传染性法氏囊病(IBD)是目前危害养鸡业的主要疾病之一。卵黄抗体(IgY)是母鸡血清中的IgG转移至卵黄中并积累形成,且与血清中抗体水平相当,因此通过检测卵黄抗体可监测鸡群的抗体水平,为鸡传染性疾病(如:IBD、新城疫、禽流感等)免疫程序的建立提供参考。研究使用间接ELISA(酶联免疫吸附试验)快速检测卵黄抗体的方法,同时对卵黄抗体的生产制备具有指导意义。 相似文献
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兔瘟是一种急性、热性、败血性和毁灭性的传染病,发病率和死亡率极高,是目前危害我国养兔业最重要的疫病之一。间接ELISA抗体检测方法是兔瘟血清学抗体水平检测的主要方法,在兔瘟的诊断、流行状态的监测和流行病学调查等方面得到了广泛应用。为了评价兔瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒在兔瘟抗体检测中的应用效果,利用兔瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒对2012年采集于河南、河北、山东等地的818份免疫兔血清进行了检测,并进行了间接ELISA抗体检测试剂盒与间接血凝抑制试验(HI)的符合率研究。结果显示两者的符合率达94.0%,说明ELISA试剂盒具有良好的临床适用性和准确性,非常适用于兔场免疫后兔群的抗体水平监测。 相似文献
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《中国兽医学报》2016,(1)
为研究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p54抗原蛋白及其相应卵黄抗体的生物学特性,特制备ASFV p54蛋白及相应鸡卵黄抗体。可溶性表达制备高纯度ASFVp54抗原蛋白,并制定合理的免疫程序,免疫产蛋母鸡,定时采血并收集鸡蛋。卵黄液经粗提取后二次盐析,制备特异性卵黄抗体。酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,在首次免疫后7d后的血清中即可检测出相应抗体,14d后在卵黄中提取到相应抗体,35d后IgY效价达到峰值。经SDS-PAGE检测,制备所得纯度达到90%,得率在8.8g/L以上。Western-blot检测结果显示,纯化的IgY具有高度的特异性。 相似文献
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用鸡蛋蛋黄(直接稀释和经萃取两种方法)和血清监测禽流感H5N1(Re-1株)HI抗体,对三种方法监测结果进行相关性研究。选择免疫抗体处于临界状态的产蛋鸡群进行加强免疫,然后将鸡群分为随机采样组和固定采样组跟踪疫苗说明书规定的免疫期进行免疫抗体监测。结果表明:两组试验在免后21天抗体达到高峰.卵黄抗体和血清抗体HI值接近,在21天前卵黄抗体的上升滞后血清抗体的上升。免疫抗体达到高峰后三种方法监测结果呈强相关.个值分析血清与卵黄相差一个滴度以内的占绝大多数,均值经t检验有不同程度的差异,但差异不超过半个滴度。因此,用卵黄进行禽流感HI抗体监测是可行的。 相似文献