‘凤丹’牡丹幼胚愈伤组织诱导的优化和再生体系的建立

以‘凤丹’牡丹的幼胚为材料,从取样时期、切割接种方式、基本培养基和植物生长调节剂选择等方面进行再生体系优化。结果表明:授粉后60 d为‘凤丹’牡丹幼胚诱导愈伤的最佳取材时期;完全破碎切割成幼胚薄片比完整胚、1/2胚和1/4胚更容易获得高质量的愈伤组织,且褐化率较低;MS基本培养基添加0.162μmol·L^-1 H₂O₂可提高幼胚愈伤组织诱导率,但会增加褐化率,而在WPM基本培养基中添加不同浓度的H₂O₂,对愈伤诱导率和褐化率的影响不大;WPM基本培养基比MS更适于‘凤丹’牡丹幼胚再生;WPM+2.5 mg·L^-1 2,4-D+0.1 mg·L^-1 6-BA是诱导愈伤的最佳植物生长调节剂组合,诱导率可达93.33%;不定芽和不定根诱导的最佳组合分别为WPM+30 g·L^-1蔗糖+3 g·L^-1植物凝胶+0.5 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1     

影响洋葱愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的因素研究

以洋葱雄性不育系种子(10-8F)为外植体,研究了蔗糖浓度、暗处理及取材时间对洋葱愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的影响,以期优化胚性愈伤组织的形成条件,为转基因提供良好受体并为建立高频再生体系奠定基础.结果表明:40 g/L蔗糖及光培养最适合愈伤组织的诱导;50 g/L蔗糖及暗培养最适合胚性愈伤组织的诱导,最适宜的取材时间为45 d.     

橄榄胚性愈伤组织的诱导初探

橄榄 (ＣａｎａｒｉｕｍａｌｂｕｍＲａｅｕｓｃｈ )属于橄榄科橄榄属 ,为福建的特产名果。可鲜食 ,也可加工制成各种风味佳美的蜜饯 ,而且还有药用价值。由于橄榄树体高大 ,童期长 ,且缺乏遗传背景研究资料 ,常规育种遇到很大困难。本文报道诱导橄榄胚性愈伤组织的有效途径 ,以期为利用现代生物技术改良橄榄品种及快速繁殖苗木打下基础。1　材料与方法花后 40～ 5 0ｄ的橄榄幼果采自闽侯村下橄榄园 ,供试品种为福建省的主栽品种惠圆 ,树龄为 2 0年左右。橄榄幼果先用 75 %的酒精浸泡 1ｍｉｎ ,再用 0 1 %的升汞浸泡消毒 1 0ｍｉｎ ,无菌水…     

‘襄汾圆枣’合子胚愈伤组织诱导成苗技术研究

【目的】获得胚性后代植株,优化枣合子胚培养条件,完善枣合子胚培养技术,从而为提高枣树新品种选育效率提供理论依据。【方法】以败育程度较轻的优良晚熟鲜食品种‘襄汾圆枣’枣盛花后30 d(球形胚)、40 d(心形胚)合子胚为外植体,进一步优化胚乳看护培养条件,并利用愈伤组织途径获得再生植株。【结果】适宜胚龄30 d、40 d的合子胚沿胚性生长的培养基分别为MS+IBA 0.2 mg·L-1+ZT 1.0 mg·L-1+GA35.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+蔗糖7%+LH 0.5 g·L-1、MS+IBA 0.5 mg·L-1+ZT 0.5 mg·L-1+GA35.0 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1+蔗糖5%+LH 0.5 g·L-1,成胚率分别为54.17%、55.25%;不同胚龄的襄汾圆枣合子胚发育所需适宜的激素配比不同,在30 d胚龄阶段,NAA是影响成胚率的主要激素因子,而在40 d胚龄阶段,IBA则成为影响成胚率的主要激素因子。合子胚愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+BA1.5mg·L-1+蔗糖4%,诱导率达70.59%;适宜合子胚分化培养基为MS+TDZ 0.8 mg·L-1+IAA 0.5 mg·L-1+蔗糖3%,分化率为58.90%。适宜生根培养基为1/2MS+IBA 1.0 mg·L-1+蔗糖2%,生根率达80%以上,移栽成活率超过85%。【结论】通过合子胚愈伤组织途径获得完整胚培苗,为枣育种技术开辟了新途径。     

荔枝胚性愈伤组织的诱导和保持

以荔枝绿沙，兰竹，东刘一号三个品种的４－７周幼胚为外植体，培养胚性愈伤组织的发生，结果表明，以２，４－Ｄ２ｍｇ／Ｌ和ＢＡ０．５－１ｍｇ／Ｌ配合使用，可使以上三个品种的胚性愈伤组织诱地率分别为绿沙２３－２７％，兰竹２８．６－３０５．％，东刘一号２９－３３．７％。采用有激素和无激素培养基交替继代可以长期保持兰竹，东刘一呈的胚性愈伤组织。     

不同激素配比对牡丹愈伤组织诱导及生化指标的影响

以牡丹组培苗叶片、叶柄为外植体,设计5个不同激素水平的诱导培养基,在愈伤组织形成过程中对所需激素水平、生化指标变化规律进行研究。结果表明:叶片、叶柄愈伤组织诱导的最适培养基均为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L。在6-BA浓度一定下,叶柄愈伤组织诱导率随NAA浓度的升高而增高,褐化率随NAA浓度升高而下降;叶片愈伤组织诱导率及褐化率与NAA浓度无明显关联。外植体在不同培养基上愈伤组织诱导过程中可溶性糖、可溶性蛋白、SODP、OD 4个生化指标随时间变化规律各不相同。     

金莲花愈伤组织诱导与分化

以金莲花无菌种子苗为试材,采用组织培养的方法,研究了外植体种类、基本培养基和外源激素等对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响,以期建立其快速繁殖体系。结果表明:金莲花无菌种子苗的子叶为最佳外植体;MS是诱导愈伤组织的最佳基本培养基;附加6-BA和2,4-D的浓度分别为2.0 mg·L^-1和1.0 mg·L^-1时,愈伤组织的生长量最大,达到72.00%,长势最好;30 g·L^-1芽麦糖作为碳源优于蔗糖;培养基添加75 mg·L^-1的活性炭可有效的抑制褐化现象;金莲花愈伤组织分化的最佳附加植物生长调节剂为NAA 0.5 mg·L^-1和KT 1.0 mg·L^-1。     

生长素和细胞分裂素诱导植物胚性愈伤组织研究进展

植物胚性愈伤组织在植物研究与应用中是一种重要的试材,有很多关于植物胚性愈伤组织诱导方法研究的报道。生长素和细胞分裂素被广泛应用于胚性愈伤组织的诱导,是胚性愈伤组织诱导的关键因子。阐述了生长素和细胞分裂素在植物胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生过程中的作用,讨论了其在植物胚性愈伤组织诱导中的作用、使用方法与原则,为愈伤组织诱导、愈伤组织胚性化诱导等研究中植物生长调节剂的使用提供依据。     

菠萝叶基愈伤组织诱导体细胞胚

以菠萝[Ananascomosus(L.)Merr.]吸芽上的叶基部组织为材料,研究了2,4-D、NAA、BA、TDZ在菠萝愈伤组织诱导体细胞胚过程中的影响。结果表明,2,4-D在体细胞胚诱导过程中起着极为重要的作用,其适宜浓度为5mg/L,适当浓度(1mg/L)的BA在降低畸形胚比例和增加体细胞胚发生率方面有重要作用,但BA也会促进愈伤组织分化不定芽;低浓度的TDZ与BA效果相似,在不同生长调节物质处理组合中,MS+0.01mg/LTDZ+5mg/L2,4-D培养基的体细胞胚发生率最高(97%)。低浓度NAA(2￣5mg/L)利于非胚性愈伤组织的增殖,而高浓度的NAA虽能促进体细胞胚发生,但这种体细胞胚很难继续增殖,在萌发时只生根不发芽。成熟体细胞胚在MS+0.2%活性炭上30d时的转株率为22.7%。     

南丰蜜桔胚性愈伤组织的诱导

以南丰蜜桔"杨小—26"花药为外植体,培养诱导胚性愈伤组织。结果表明:在不同取材时期和培养基条件下,胚性愈伤组织发生率是不同的。南丰蜜桔花药培养的取材最佳时期是单核靠边期;培养基LP+TDZ3.0mg/L+A1.03.0mg/L+NAA1.0mg/L+10mg/LAgNO3较适于胚性愈伤组织再生,再生率高达20.3%;培养基配方中AgNO3对胚性愈伤组织再生无显著影响。本研究首次报道了南丰蜜桔花药离体培养,诱导出胚性愈伤组织。     

红掌愈伤组织诱导和芽的分化

 对影响红掌愈伤组织诱导及芽分化的几个因素进行了研究。同一成熟度的外植体, 其叶柄愈伤组织诱导率、芽分化率、分化时间均明显优于叶片。不同放置方式和光照时间对叶片愈伤组织的诱导亦有影响, 叶背向下放置, 光照时间24 h/ d 和10 h/ d 愈伤组织诱导率较高, 分别为100 %、97 %。光照时间对叶柄愈伤组织诱导无显著影响, 但光照24 h/ d 和10 h/ d 较无光照处理的明显促进芽的分化。叶柄培养以N6 , KC 和1/ 2 MS 培养基为佳。叶片培养则以P , N6 和1/ 2 MS 为好。以未展叶叶柄为外植体, 从接种到丛芽分化共49 d , 较已有报道提前11～31 d。     

番茄花药愈伤组织诱导中脯氨酸含量变化的研究

通过接种在两种不同激素浓度培养基上的花药进行培养得到的不同愈伤组织,进行游离脯氨酸的测定,结果表明:愈伤组织的游离脯氨酸含量始终高于胚性愈伤组织的含量,说明游离脯氨酸在愈伤组织形成过程中起重要作用.     

4种固化剂对若干草坪草愈伤组织诱导的影响

 比较了Phytagel、Canageenen (卡拉胶) 、Agar A 和Agar powder对匍匐翦股颖(Agrostis palustris Huds. ) 品种‘L293’; 草地早熟禾(Poa pratensis L. ) 品种‘佛特纳’; 高羊茅( Festuca arundinacea Schreb) 品种‘新秀’、‘翠碧’; 结缕草( Zoysia japonica Steud. ) 品种‘青岛结缕草’、‘Zenith’和‘松南结缕草’及普通狗牙根(Cynodon dactylon L. ) 品种‘佳宝’成熟种子愈伤组织诱导和胚性愈伤组织发生的影响。结果表明, 就匍匐翦股颖、草地早熟禾而言, 无论是愈伤组织诱导率还是胚性愈伤组织发生率, 均以在Phytagel固化的培养基中最高。高羊茅在Agar powder上愈伤组织诱导率最高, 但就胚性愈伤发生而言固化剂之间无显著差异。虽然‘Zenith’和‘松南结缕草’在愈伤组织诱导上4种固化剂无显著差异, 但就胚性愈伤组织发生而言, ‘青岛结缕草’、‘Zenith’和‘松南结缕草’依次在Phytagel、Canageenen和Agar powder为佳。只有在Phytagel固化的培养基上普通狗牙根形成了胚性愈伤组织。     

侧柏胚性愈伤组织的诱导研究

以侧柏未成熟合子胚、胚根为试材,研究了基本培养基、不同外植体、植物激素、合子胚发育阶段等因素对侧柏愈伤组织诱导的影响.结果表明:未成熟合子胚、胚根在适宜的培养基上都能诱导出愈伤组织,DCR+2.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+0.5 g/L谷氨酰胺是未成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基,诱导率高达96.67％.DCR+1.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA+0.5 g/L谷氨酰胺是胚根诱导愈伤组织的最佳培养基,诱导率高达93.33％.最佳采样时期为7月3日前后.     

甜瓜花药愈伤组织分化与激素处理间的关系

将甜瓜花药接种在MS+NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L+KT1.5mg/L的脱分化培养基上,15d左右生成结构紧凑的淡绿色愈伤组织,然后再分别转接在不同激素组合的分化培养基上。结果表明,接种在2,4-D0.4mg/L+KT1.0mg/L培养基上的愈伤组织可以诱导出胚性细胞团;若将这种愈伤组织及时转到无激素培养基上则可使细胞团继续分化直至形成心形胚和子叶形胚;另外,接种在NAA0.5mg/L+IAA0.1mg/L+6-BA0.5mg/L+KT1.0mg/L培养基上的愈伤组织可以诱导出完整植株。     

枣幼胚愈伤组织诱导和胚状体发生

以陇东马牙枣盛花后50～60d的幼胚为试材,采用三步培养法诱导胚状体。结果表明:诱导愈伤组织适宜的培养基为Nitsch培养基上附加BA 1.0mg/L+2,4-D 1.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4.0g/L。诱导胚状体培养基宜选用,MS+BA 1.0mg/L+IBA 0.2mg/L+LH0.5mg/L+VC 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4.0g/L,并获得完整植株。     

刺葡萄愈伤组织的诱导和分化培养

以刺葡萄叶片为材料,在1／2MS培养基上附加不同种类及浓度配比的植物激素,研究叶片愈伤组织的诱导及分化培养。实验结果表明：叶片愈伤组织的诱导较容易,最佳诱导培养基配方为以ZT1．0mg／L＋2,4-D2．0mg／L,诱导率可达100％,光培养条件下刺葡萄叶片愈伤组织的诱导率比暗培养的诱导率高。继代培养愈伤组织能诱导出根,但诱导出芽不易,刺葡萄叶片再生植株较难。增殖培养ZT以1．0mg／L＋NAA0．01mg／L为佳,1周增殖率可达1．292％。     

油松未成熟合子胚离体培养诱导胚性愈伤组织

研究了油松未成熟合子胚不同发育时期和不同植物生长调节剂组合对油松胚性愈伤组织诱导的影响。结果表明:在沈阳地区,油松未成熟合子胚诱导胚性愈伤组织的最佳采种时间为7月10日左右;以DCR为基本培养基,添加较低浓度的KT和较高浓度的2,4-D有利于油松胚性愈伤组织的诱导,其中以添加2,4-D 2mg/L和KT 0.5mg/L时诱导率最高,可达88.3%。     

芦柑,雪柑胚性愈伤组织的诱导

柑桔是世界重要果树之一，由于其所特有的多胚性，漫长的童期，遗传上的高度异质性及在部分品种的不育性限制了有性杂交在柑桔品种改良匕的应用，原生质体融合技术的出现，使柑桔品种问、种间、属问的基因重组成为可能，为柑桔品种改良，抗病有种提供了新的方法和手段。为完成芦柑、雪租等基香科植物的原生质体融合，首先必须建立芦柑、雪柑胚性愈伤组织。柑桔的珠心组织可产生无性胚，经组织培养获得的胚性愈伤组织，具有良好的分化、再生能力，可为其原生质体培养、体细胞亲交、种质的保存等方面研究提供材料来源。诱导胚性愈伤组织一般可…     

月季‘萨蔓莎’愈伤组织的诱导及植株再生

 以试管苗的小叶为外植体, 探讨了月季品种‘萨蔓莎’愈伤组织诱导及植株再生的方法。结果表明: 高浓度的生长素能诱导小叶产生愈伤组织, 经2,4-D 7.0～10.0 mg/L光下诱导愈伤15 d的小叶外植体, 在含TDZ 1.5 mg/L的MS培养基上光下培养约20 d后有白色假珠芽形成, 此芽暗培养在含NAA、ZT和GA3 的培养基上产生新的假珠芽和新的愈伤组织, 通过持续选择继代生活力高的组织, 约1年后获得可长期继代的愈伤组织, 到目前为止已保存了16个月。此愈伤组织在TDZ 1.0 mg/L、NAA 0.01 mg/L和GA3 0.1 mg/L的诱导下30 d内分化出不定芽, 在含BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的培养基上不定芽伸长形成正常植株。