饲料中致病性大肠杆菌的分离与鉴定

大肠杆菌可分为致病性大肠杆菌和非致病性大肠杆菌两类,二者在菌落形态、染色反应、培养特性和生化反应等方面无明显差异,但抗原构造不同.迄今已知大肠杆菌有菌体抗原(O)171种,表面抗原(K)103种,鞭毛抗原(H)60种,表现为许多血清型.在引起畜禽肠道疾病的血清型中有肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)和肠出血性大肠杆(EHEC)4种.致病性大肠杆菌主要通过畜禽的消化道感染,在畜禽中可引起多种综合征,包括羔羊和犊牛痢疾,马、绵羊流产,家禽败血症,慢性呼吸道疾病和输卵管炎,仔猪水肿病等.随着我国加入WTO和西部大开发计划的实施,我国的畜牧业生产进入了一个全新的发展阶段,各大、中、小饲料厂也相继不断发展和壮大,为了进一步了解青海省饲料中致病性大肠杆菌的分布情况,2004年3～4月,笔者等对西宁市某饲料厂的饲料随机抽样并进行了致病性大肠杆菌的分离与鉴定.现将结果报告如下.     

规模化牛场致病性大肠杆菌的分离与鉴定

湖北省某肉牛场2014年3~4月发生牛腹泻,无菌采集病牛腹泻物进行细菌分离培养,涂片、染色、镜检观察,并对其形态特征、培养特性、生化特性及致病性等生物学特性进行研究。结果表明引起该次疫病的病原是致病性大肠杆菌(E.coli)。     

3种致泻性大肠埃希氏菌多重PCR检测方法的研究

根据毒力因子、致病机理及遗传特性，国际上将致泻性大肠埃希氏菌（E．coli）分为肠致病性E．coli（EPEC）、肠出血性E．coli（EHEC）、肠侵袭性E．coli（EIEC）、肠产毒性E．coli（ETEC）、肠集聚性E．coli（EAggEC）。其中ETEC菌株通过LT和ST致病基因的作用引起腹泻。EPEC的致病性与LEE毒力岛上的eaeA毒力基因有关。EIEC的侵袭性是因为在侵袭性质粒上含有ipaH毒素基因。     

兔大肠埃希氏菌的分离培养与鉴定

大肠埃希氏菌病是由致病性大肠埃希氏菌引起的一种急性肠道传染病,新生和幼龄动物最易感染,以发生严重腹泻、肠毒血症、败血症为特征,各种温血动物都易感染患病。     

猪源肠外致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定与药敏试验

为对陕西某猪场仔猪肺炎病例进行确诊,无菌采集患病仔猪肺脏,并进行细菌分离培养、生化试验、16S rRNA基因测序、小鼠致病性试验、药敏试验以及耐药基因检测。结果表明,分离到的菌株其培养特性和生化试验与大肠埃希氏菌一致,16S rRNA基因测序与大肠埃希氏菌的同源性为98%;小鼠致病性试验验证了该菌株的致病性;药敏试验显示该菌对氨苄西林、复方阿莫西林、庆大霉素、四环素、头孢噻呋钠、头孢他啶、恩诺沙星、氟苯尼考和磺胺异恶唑等9种抗菌药物表现耐药,对替加环素、美罗培南和多黏菌素B敏感;耐药基因检测结果发现该菌携带sul3、tetA和TEM等耐药基因。研究结果确定了引起某猪场仔猪肺炎的病原菌,并对其生物学特性、耐药情况进行了研究,为临床诊断治疗提供参考。     

鸵鸟大肠埃希氏菌的分离鉴定

从某鸵鸟养殖场发病的幼鸵鸟肝脏和脾脏分离到一种细菌，通过培养特性，菌体形态，菌落形态，染色特性，生化试验等一系列的系统鉴定，确定为大肠埃希氏菌，动物致病性试验表明该菌对小白鼠和雏鸡有较强的致病性，药敏试验证明该菌对常见的抗生素不敏感，经血清型鉴定该菌血清型为O1。     

致犊牛肺炎大肠埃希氏菌的分离鉴定

为了了解犊牛肺炎病原菌情况,为治疗和预防犊牛肺炎提供依据,通过剖检发病濒死犊牛,采集病料,分离纯化病原菌。应用动物试验、药敏试验和生化鉴定,确定此次发病是由具有强致病性和耐药性大肠埃希氏菌引起。     

鹈鹕大肠埃希氏菌的分离鉴定

从一起因呕吐、食欲减退而死亡的鹈鹕的内脏中分离到3株细菌,其培养性状及生化特性基本一致,经VITEK-32鉴定均为大肠埃希氏菌。动物试验表明,分离株对小鼠均具有较强的致病性,且从死亡鼠内脏中回收到相应细菌结果表明,分离到的菌株为致病性大肠埃希氏菌。     

鹅大肠埃希氏菌的分离与鉴定

根据病鹅的临床症状、细菌分离和分离菌株生化鉴定,确诊为大肠埃希氏菌感染.通过药敏试验选择药物治疗,取得较好疗效。     

鸽致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药基因的检测

江苏省某鸽场鸽群出现呼吸困难,死亡增多现象,剖检病死鸽,呈现气囊炎、腹膜炎和皮下广泛性出血等病变。无菌采集脾脏、肺脏等脏器进行病毒分离,但未分离到病毒。选取健康鸽和病鸽各10只,测定新城疫抗体,其抗体水平均较高。同时,无菌采集病料分离到2株细菌,经分离培养、染色镜检、生化特性鉴定,确定为大肠杆菌,玻板凝集试验表明C株为O163型,D株为O138型。对分离到的细菌做药敏试验,结果表明,C株对链霉素等8种药物产生了耐药性,对氟苯尼考等4种药物敏感;D株对庆大霉素等5种药物产生耐药性,对链霉素等7种药物敏感。分别设计引物对其耐药基因进行PCR检测。     

湖北省部分地区鸭致病性大肠杆菌的分离与血清型鉴定

鸭大肠杆菌病是一种急性败血性传染病,因而又名鸭大肠杆菌败血病[1].该病在临床剖检上主要表现为纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎.各种年龄的鸭均可感染,雏鸭最易感,2～6周龄多发,发病率和死亡率较高,在商品肉鸭中死亡率可高达50%左右,而且常常与鸭传染性浆膜炎混合感染,成年鸭和种鸭主要表现为零星死亡.随着养鸭业的日益发展和集约化程度的提高,鸭大肠杆菌病的发生日趋严重,给养鸭业造成了严重的经济损失[2].为弄清湖北省鸭场大肠杆菌病的流行情况及其致病性菌株的优势血清型、致病力等特点,我们对湖北省部分地区鸭场的大肠杆菌进行了分离与鉴定,并对分离株进行血清型鉴定和动物致病力试验,以便筛选出致病性大肠杆菌的优势血清型,从而为今后进一步制备灭活疫苗预防本地的大肠杆菌病提供科学依据.     

牦牛“奶渣”中乳酸菌的分离鉴定

本文对产自香格里拉的鲜＂奶渣＂和发酵＂奶渣＂中的乳酸菌进行分离鉴定。结果表明,从鲜＂奶渣＂中分离到27株乳酸菌,并鉴定出7种（亚种）,其中德氏乳杆菌、麦芽香乳杆菌、发酵乳杆菌和乳酸乳球菌4种菌被确定是鲜＂奶渣＂中的优势种群。从发酵＂奶渣＂中分离到40株乳酸菌,并鉴定出9个种（亚种）,其中德氏乳杆菌、麦芽香乳杆菌、发酵乳杆菌、嗜酸乳杆菌和乳酸乳球菌5种菌被确定是发酵＂奶渣＂中的优势种群。     

肉鸽大肠杆菌的分离与鉴定

为研究肉鸽大肠杆菌的生化特性、药敏情况、血清型和致病性。2010年1月江苏省某肉鸽场鸽群出现呼吸困难,死亡增多现象。对病死鸽剖检发现,以气囊炎和肺部坏死为主,无菌采集病料分离到1株细菌,经分离培养、染色镜检、生化特性鉴定,确定为大肠杆菌,微量凝集试验表明其血清型为O2。经过肺结节压片镜检,没有发现霉菌的菌丝;检测健康鸽和患病鸽各10只的鸽新城疫抗体,发现其抗体效价比较高且整齐度较好,两者之间的抗体无明显差异。对分离菌株进行药敏试验,结果表明对恩诺沙星等7种药物敏感,对阿莫西林等16种药物已产生了耐药性。将分离到的菌株接种21日龄雏鸽进行动物回归试验,死亡率达80%,说明该分离菌株对雏鸽具有较强的致病性。     

肉鹅大肠杆菌病的病原分离与鉴定

本试验旨在研究肉鹅大肠杆菌的生化特性、药敏情况、血清型和致病性。2010年12月江苏省某肉鹅场鹅群出现呼吸困难,死亡增多现象,对病死鹅剖检发现以气囊炎和肺部坏死为主,无菌采集病料分离到一株细菌,经分离培养、染色镜检、生化特性鉴定,确定为大肠杆菌,微量凝集试验表明其血清型为O₂。经过肺结节压片镜检,没有发现霉菌的菌丝;检测健康鹅和患病鹅各10只的鹅新城疫抗体,发现其抗体滴度比较高且整齐度较好,两者之间的抗体无明显差异。对分离菌株进行药敏试验,结果表明对氟苯尼考等7种药物敏感,对先锋Ⅴ等16种药物已产生了耐药性。将分离到的菌株接种21日龄雏鹅进行动物回归试验,引起80%死亡率,说明该分离菌株对雏鹅具有较强的致病性。     

隐性乳房炎乳汁中表皮葡萄球菌的分离鉴定

对邯郸某集贸市场早市上5个个体散装桶牛奶销售点的牛奶做细菌学检验和流行病学调查,采用北京亚临床乳房炎快速诊断液（BMT试剂）对其所养的奶牛进行检测,选取阳性奶牛的乳样做病原菌的分离和鉴定。研究发现,表皮葡萄球菌是该地区奶牛隐性乳房炎的重要病原,同时,进行体外西药抗菌素及中药复方制剂药敏试验,为临床用药提供指导。     

奶牛急性乳房炎病原菌的分离与鉴定

[目的]为了掌握奶牛急性乳房炎致病菌的种类.[方法]通过采集病牛乳汁样品3份,分别对其病原茵进行分离与鉴定.检测[结果]表明:检出4种共13株细菌,其中致病性金黄色葡萄球菌6株;停乳链球菌5株;大肠埃希茵1株,乳房链球茵1株.[结论]该场奶牛的急性乳房炎是由致病性金黄色葡萄球菌、停乳链球菌、乳房链球菌和大肠杆菌共同引起...     

我国部分地区乳房炎奶样中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解我国部分地区奶牛乳房炎奶样中大肠杆菌的耐药情况,以指导牛场合理使用抗生素,提高治疗效果和畜产品质量,从全国六个省市自治区采取158例奶牛乳房炎的奶样,对奶样中的大肠杆菌进行分离纯化与鉴定,并进行药敏试验。结果显示,158份奶样中,共分离出38株大肠杆菌,其中黑龙江18株(分离率为36.0%)、上海3株(分离率6.0%)、北京3株(分离率27.2%)、新疆10株(分离率33.3%)、山东4株(分离率26.7%)、陕西0株(分离率0)。药敏试验显示,磺胺异噁唑耐药率最高,为73.7%;环丙沙星、诺氟沙星、四环素、链霉素药物的敏感率最高,为100%。分离菌株最多耐13种药物,最少耐4种药物,呈现多重耐药性。不同种类的抗生素中,上海和山东对β-内酰胺类药物和氯霉素类药物以及黑龙江、上海和新疆对磺胺类药物的耐药情况比较严重,耐药率高达50%以上。结果表明,各地区分离株对多种抗菌药物产生了不同程度耐药性和多重耐药,临床兽医在治疗时应注意合理用药,提高疗效和畜产品质量,减少耐药性的产生。     

鹅源大肠埃希菌的分离与鉴定

从临盏床疑似大肠埃希菌感染的病雏鹅的组织分离到31株细菌,通过培养特性和生化试验确定其中27株为大肠埃希菌。血清学试验表明,其中7株（25．93％）为026型,6株（22．22％）为078型,4株（14．81％）为01型,3株（11．11％）为018型,2株（7．41％）为0117型,5株（18．52％）未能定型。应用PCR方法检测了27株大肠埃希菌的F1菌毛与毒力岛HPI基因,结果表明24株（88．89％）为F1^＋大肠埃希菌,7株（25．939／5）为HPI^＋大肠埃希菌（其中4株为F1^＋）。药敏试验表明,所有菌株均对头孢唑林、呋喃妥因敏感,部分菌株对庆大霉素、环丙沙星敏感,而对多黏菌素、四环素、林可霉素均为耐药。     

内蒙古地区乳样中牛支原体的分离及PCR鉴定

为检测内蒙古地区某牛场患乳房炎的奶牛乳样中是否存在牛支原体,同时建立直接提取乳样中牛支原体DNA进行PCR检测的方法,本研究无菌采集乳房炎乳样,通过支原体的分离培养、形态学观察和生化试验,初步鉴定分离株为牛支原体,然后提取液体培养基菌体DNA进行牛支原体特异性PCR鉴定,同时,采用Chelex-100法直接提取原乳样中菌体DNA进行PCR鉴定,并测序分析扩增片段序列。液体培养物提取DNA与Chlex-100法直接提取原乳样菌体DNA进行特异性PCR均扩增出目的条带,该片段序列与GenBank中牛支原体oppD/oppF基因的同源性达到99.8%,证实分离株为牛支原体。说明Chlex-100法可直接提取乳样中牛支原体DNA进行快速PCR鉴定。