黄花芥蓝游离小孢子培养和植株再生

以黄花芥蓝自交品系ZBo-1和ZBo-6为供体材料,研究了培养基添加激素、热激时间、取材时期以及供体植株生长条件对小孢子胚状体产量的影响.结果表明,在32℃热激1 d小孢子胚产量最高,培养基中添加NAA 0.1 mg/L、IAA 0.1mg/L和6-BA 0.1mg/L能促进芥蓝小孢子胚状体的形成.不同时间取材,胚状体产量存在明显差异,胚状体诱导成功率在60%～80%.2个材料在人工春化温室栽培和自然春化温室栽培2种生长条件下都有子叶形胚和鱼雷形胚形成的 能力;ZBo-6在自然春化温室栽培条件下胚产量显著高于人工春化条件下的胚产量,而ZBo-1的胚产量以人工春化条件下较高.试验获得了黄花芥蓝的小孢子再生植株.     

低温预处理和基因型对甘蓝型油菜小孢子胚胎发生的影响

以生长在大田自然环境下的16个甘蓝型油菜品种(系)和杂交组合为材料进行游离小孢子培养,探讨材料的低温预处理方式、处理时间、花序长度及其基因型对油菜小孢子胚胎发生的影响。结果表明,冷冻处理的油菜花序,其小孢子无胚胎发生能力;30～40cm长的花序冷藏处理10d,小孢子仍有一定的胚胎发生能力;花序长度在0～40cm时,用于处理的花序越长,则能进行小孢子胚胎发生的花序的有效处理时间越长;但随着花序处理时间的延长,小孢子产胚率有下降的趋势。此外,材料的基因型对小孢子产胚率有重要影响。     

2个甘蓝F1小孢子培养中高出胚率的诱导技术研究

以2个优良的F1甘蓝为试材,探讨了高温热激、蔗糖浓度、添加和更换培养液培养、激素种类与浓度配比等因素对提高甘蓝小孢子诱导胚产量的影响.结果表明,2个F1甘蓝材料经24 h 、33℃高温热激处理对小孢子胚胎发生是必要的;小孢子在13%蔗糖浓度培养基(NLN-13)中培养胚产量最高,为1.89胚/蕾;高浓度蔗糖的培养基(NLN-17)培养3 d后添加低浓度蔗糖培养基(NLN-10)培养能大幅度提高胚产量,比一直在13%蔗糖的培养基(NLN-13)培养的胚状体增加255.2%;NLN-13培养基中添加0.1 mg/L 6-BA和0.05 mg/L NAA能够诱导出高胚产量.     

甘蓝型油菜基因型对离体小孢子染色体加倍的反应

采用秋水仙碱处理甘蓝型油菜不同基因型的离体小孢子,研究了小孢子再生植株的染色体加倍特性 及其与基因型的关系。将发育到单核晚期一双核早期的小孢子分别接种于含10、20、50、100 mg／L秋水仙碱的 NLN液体培养基中处理24 h或48 h进行染色体加倍,然后将处理过的小孢子转接于不含秋水仙碱的相同培 养基中诱导胚状体。21种基因型小孢子再生植株中双单倍体比率为23．94％～99．42％。方差分析的结果表 明,基因型相似的品系和杂种之间染色体加倍率差异不显著,基因型不同的一些品系和杂种间差异显著。由 此说明,基因型对秋水仙碱处理离体小孢子诱导染色体加倍的反应不同。     

预处理对萝卜离体小孢子发育的影响

研究了低温、甘露醇、秋水仙素预处理对5个萝卜品种离体小孢子发育的影响。结果表明,单纯的花枝低温预处理对小孢子发育没有影响,而低温结合甘露醇和秋水仙素预处理可提高萝卜离体小孢子的膨大率、成胚率及胚状体的再生率,且不同品种适宜的处理方式不同。B5-13培养基中添加15 g/L甘露醇预处理花药1 d或3 d,或B5-13培养基中添加10 mg/L秋水仙素预处理花药1 d或3 d均可不同程度地促进萝卜离体小孢子培养的成胚率。诱导出的胚状体除极少数没有形成再生植株外,大部分均获得了再生植株,有的再生率高达100%。     

不同十字花科食物饲养的小菜蛾生长发育试验观察

试验采用京丰1号甘蓝、四月蔓油菜、露头青萝卜、雪白60号菜花、津绿75白菜五种十字花科植物幼苗饲养小菜蛾,饲养条件:日平均温度30±1℃,RH75%～85%,每日光照按室内自然光条件;饲养时间:7月16日至8月16日。试验结果表明:用上述5种食物饲喂的小菜蛾幼虫历期分别为8.5,6.7,7.6,7.9,8.2d,蛹历期均在3.5d左右;每雌产卵量分别为124,94.9,106,103.5,92.8粒。经方差分析,在0.05水平无显著差异。     

甜瓜品种‘GT-1’基于体细胞胚发生的植株再生体系研究

以甜瓜(Cucumis meloL.)品种‘GT-1’5 d苗龄的子叶为外植体,建立了基于体细胞胚发生的植株再生体系.结果表明:在MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L的培养基上,胚状体发生的频率可达81.7%.以葡萄糖为碳源,子叶块以间接方式发生胚状体;以乳糖为碳源,子叶块则以直接方式发生胚状体.剥离成熟体细胞胚置于MS培养基上可萌发生长出完整植株.     

不同游离方式辣椒小孢子的胚胎发生

以甜椒、牛角椒、羊角椒、线椒和朝天椒5个不同类型的10个辣椒品种为试材,研究通过直接机械游离、看护培养自然游离和先花药预培养再机械游离3种不同的小孢子游离方式的胚胎发生情况。结果表明,先花药预培养再机械游离小孢子的胚胎发生最好,看护培养自然游离小孢子的胚胎发生次之,直接机械游离小孢子的胚胎发生最差,仅获得少量球形胚;小孢子在培养前期需要花药壁的存在,高温预处理之后则需要花药壁及时破裂。     

甘蓝类蔬菜花培再生体系的研究进展

文章综述诱导花粉植株的小孢子方面的工作,并分析了花培存在的问题和发展前景;甘蓝类蔬菜游离小孢子培养的意义、小孢子培养操作流程,胚胎发生的影响因素、提高产胚率的培养技术和目前的应用研究;指出现存在的问题及今后的研究方向。     

大白菜游离小孢子培养研究进展

对影响大白菜游离小孢子培养的主要因素,包括基因型、小孢子发育时期、供体植株生长的外界环境、培养基成分、培养条件和培养方式以及胚状体诱导及植株再生的研究情况进行了综述。展望了这项技术在研究和生产实践中的应用前景,并提出了该领域存在和需要解决的问题。     

结球甘蓝游离小孢子培养胚发生能力的研究

试验对20个基因型的结球甘蓝材料进行游离小孢子培养,探讨基因型、蔗糖浓度、激素配比与浓度、活性炭等因素对结球甘蓝小孢子胚发生能力的影响。实验结果表明:基因型、蔗糖浓度对胚发生能力影响最大,除个别基因型对蔗糖浓度有较高的要求外,蔗糖浓度在13%、激素组合NAA(0.05 mg/mL) BA(0.1 mg/mL)的培养基适合较多基因型的小孢子胚发生。在培养基中滴加活性碳(10 mg/L)每皿1~2滴,诱导效果明显优于不加活性炭。实验中共有11个基因型的甘蓝材料获得了胚状体,并成功筛选出基因型G 8小孢子胚高频发生的最佳蔗糖与激素浓度配比。     

不同熟性大白菜小孢子植株倍性变异及倍性鉴定方法

对不同熟性的大白菜小孢子植株群体的倍性变异进行观察,研究利用DNA流式细胞仪测定、形态学特征鉴定大白菜小孢子植株群体的倍性变异.结果表明,小孢子植株是倍性水平不同的混合群体;不同熟性的大白菜小孢子植株群体的倍性分布不同,中晚熟大白菜小孢子植株双单倍体比例最高,春大白菜最低;单倍体植株在组培无性繁殖中部分会自然加倍;DNA流式细胞仪和形态学方法均可以鉴定群体的倍性水平.     

大白菜细胞核雄性不育甲型“两用系”细胞学观察

以大白菜细胞核雄性不育甲型"两用系"为材料,对其可育与不育株的花器结构进行比较,并进行细胞学观察来明确该雄性不育类型的败育时期及败育原因。结果表明,大白菜细胞核雄性不育甲型"两用系"可育株的萼片长、花瓣长、花瓣宽、雄蕊长和雌蕊长都极显著高于不育株对应部位;不育植株和可育植株花蕾大小与花发育时期相对应;不育花蕾在2.5mm后就已经败育,败育时期可能发生在减数分裂后期到四分体时期,该时期绒毡层细胞液膨大、呈现液泡化,将四分体挤压到药室的中间,致使四分体大量发育异常,小孢子得不到营养,不能形成正常的小孢子,导致小孢子完全解体,在开花前败育。     

地被菊直接体细胞胚发生研究

该文建立了地被菊品种‘玉人面’直接体细胞胚受体体系。试验以‘玉人面’叶片为外植体,研究了培养基、生长调节剂等因子对其直接体细胞胚诱导的影响,同时还进行了抗生素敏感性试验。结果表明:①在相同浓度下,KT诱导体胚的效果优于6-BA;②体胚诱导培养基为MS＋KT 20 mg/L＋2,4-D 2.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L,诱导10 d后,转入去除2,4-D的体胚发育培养基MS＋KT 2.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L中培养30 d,体胚发生率最高为93.0％,平均每外植体分化的体胚数为13.6个; ③MS基本培养基对‘玉人面’体胚发生的效果优于N 6、B5 培养基;④‘玉人面’直接体胚发生途径的基因转化的卡那霉素选择压为10 mg/L,头孢霉素前期（3～4周内）选择压为300 mg/L,后期（4周后）为100 mg/L。      

A Co-Dominant Marker BoE332 Applied to Marker-Assisted Selection of Homozygous Male-Sterile Plants in Cabbage (Brassica oleracea var. capitata L.)

The dominant genic male sterility (DGMS) gene CDMs399-3 derived from a spontaneous mutation in the line 79-399-3 of spring cabbage (Brassica oleracea var. capitata L.), has been successfully applied in hybrid seed production of several cabbage cultivars in China. During the development of dominant male sterility lines in cabbage, the conventional identification of homozygous male-sterile plants (CDMs399-3/CDMs399-3) is a laborious and time-consuming process. For marker-assisted selection (MAS) of the gene CDMs399-3 transferred into key spring cabbage line 397, expressed sequence tag-simple sequence repeats (EST-SSR) and SSR technology were used to identify markers that were linked to CDMs399-3 based on method of bulked segregant analysis (BSA). By screening a set of 978 EST-SSRs and 395 SSRs, a marker BoE332 linked to the CDMs399-3 at a distance of 3.6 cM in the genetic background of cabbage line 397 were identified. 7 homozygous male-sterile plants in population P1170 with 20 plants were obtained finally via MAS of BoE332. Thus, BoE332 will greatly facilitate the transferring of the gene CDMs399-3 into the key spring cabbage line 397 and improve the application of DGMS in cabbage hybrid breeding.     

预处理工艺参数对脱水甘蓝加工品质的影响

以甘蓝为原料,通过考察Vc含量、色泽变化,研究常压热风干燥下浸渍、漂烫、护绿等预处理工序中不同工艺参数对脱水甘蓝加工品质的影响。经单因素、正交实验研究,结果表明:所得脱水甘蓝品质最佳为:NaHCO3溶液浓度0.25mol/L,漂烫温度为90℃,漂烫时间45 s,护绿剂最佳配比为200mg/LZn(AC2)0∶.3%CaCl28∶00 mg/LMgCl21∶00mg/LEDTA=33∶2∶1∶,护色时间为30 min。     

油菜小孢子培养以有效产生纯合两倍体植株

SincehaploidembryoidswerefirstobtainedfrommicrosporecultureofBrassicanapustherehasbeenarapidprogressintheapplicationofthistechniqueingeneticstudiesandbreedingutilizationofrapeseed.Therelativesimplicityofthecultureprotocolandhigh-frequencyrecoveryofdoubledhap-loidplantsmakesmicrosporecultureapotentiallypowerfultechniqueforvarietaldevelopment.Never-theless,therearestillsomeobstaclesintheefficientuseofthistechniquesuchasrecalcitrantgeno-types,secondaryembryogenesisofembryoids,andthelackofefficien…     

培养基成分对黔白大白菜杂交种小孢子胚诱导的影响

以2个黔白大白菜杂交组合为材料,进行游离小孢子培养,探讨了培养基成分对小孢子成胚率的影响。结果表明:NLN培养基添加13%蔗糖的培养效果最好;添加0.05 mg/L 6-BA和0.10 mg/L NAA的培养基显著提高了小孢子胚的诱导率和成熟胚的比例;NLN-13液体培养基中添加适量活性碳可明显促进小孢子胚状体的形成,对胚胎发育的同步性也有很好的作用。     

超声波处理对大白菜花粉管通道法转基因的影响

[目的]探索提高花粉管通道法对大白菜转化率的途径。[方法]以大白菜品种03号和玉青的花粉为材料,对其萌发的缓冲液和超声波处理的各参数进行筛选。[结果]大白菜花粉萌发的最佳缓冲液为蔗糖200g/L＋硼酸100mg/L＋硝酸钙200mg/L,较理想的超声波处理参数为功率150W、工作时间5s、间隔时间5s、处理次数8s;经浓度为200mg/L的卡那霉素筛选,获得3株T1代单株。[结论]为进一步进行大白菜的基因转化奠定了基础。     

脂肪酶水解菜籽油脚料工艺条件的优化

[目的]优化脂肪酶水解菜籽油脚料的工艺,提高菜籽油脚料水解率。[方法]以菜籽油脚料为原料,选用黑曲霉脂肪酶水解菜籽油脚料,通过单因素试验、Box—Benhnken中心组合设计和响应面法对该脂肪酶水解油脂的工艺条件进行优化分析。[结果]单因素试验得出,黑曲霉脂肪酶水解菜籽油脚料的最适酶添加量为200u／ml,底物浓度75mg／ml,酶解pH7．0,酶解温度40℃,酶解时间45min以及摇床转数150r／min,此时菜籽油脚料水解率为16．4％。利用Box—Benhnken中心组合设计和响应面法确定了最优工艺条件是：酶添加量245U／ml,底物浓度为75mg／ml,酶解pH7．0,酶解温度是41℃,优化后的菜籽油脚料水解率达（26．92±0．86）％。[结论]研究可为菜籽油脚料的进一步开发利用提供参考依据。