瓦雷兹芽孢杆菌YH-20发酵液的抑菌特性初探

为掌握瓦雷兹芽孢杆菌YH-20发酵液的抑菌稳定性及其抑菌物质,采用生长速率法测定菌株YH-20发酵液对12株病原菌的抑制作用,以葡萄座腔菌为病原指示真菌测定发酵液在不同条件下抑菌稳定性,根癌农杆菌为病原指示细菌测定提取物质的抑菌活性;采用硫酸铵沉淀法和酸沉淀法提取发酵液中的蛋白类物质和脂肽类物质,并以特定培养基检测菌株产蛋白酶和纤维素酶的能力,以正丁醇、乙酸乙酯和石油醚对发酵液中的活性物质进行萃取。结果表明,菌株YH-20发酵液对供试的11种病原真菌和1株病原细菌均具有较好的抑制能力,该发酵液经普通光照和紫外光照处理后,发酵液的抑菌率保持稳定,经80℃处理120min后,抑菌率仍可达到49.24%,在pH6-9处理后,仍可保持较高的抑菌率。在4℃最少可储存30d而抑菌能力不发生改变。菌株YH-20可产生抑菌性蛋白和脂肽、蛋白酶、纤维素酶及嗜铁素。以极性较高的正丁醇和乙酸乙酯可萃取出发酵液中的抑菌活性物质。菌株YH-20对植物病原菌具有广谱抑菌能力和较好的抑菌稳定性,可产生多种抑菌物质。     

美洲大蠊乙酸乙酯提取物的分离和抑菌活性分析

采用活性追踪法和柱层析法,以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等5种细菌为供试菌种,对美洲大蠊乙酸乙酯提取物进行分离和抑菌试验.研究发现:美洲大蠊乙酸乙酯提取物对供试的革兰氏阳性菌具有一定的抑制作用,其中,对枯草芽孢杆菌的抑菌活性最好;经硅胶柱层析初分离后,从乙酸乙酯提取物获得了9个具有抑菌活性的组分,其中,组分Fr7对5种供试菌均显示了较好的抑菌活性;组分Fr7及其相邻组分Fr8经硅胶和凝胶柱层析进一步分离纯化后,得到了7个具有抑菌活性的不饱和脂肪酸类化合物,均对藤黄微球菌表现出最好的抑菌活性.结果表明:美洲大蠊乙酸乙酯提取物的抑菌活性物质为不饱和脂肪酸类化合物,对供试的革兰氏阳性菌的抑菌活性较强.     

杨树溃疡病拮抗链霉菌的筛选及鉴定

【目的】以生物防治防控杨树溃疡病发生与危害为目标,筛选能有效抑制杨树溃疡病且具有开发潜力的拮抗菌株,为杨树溃疡病的生物防治提供新的生防因子。【方法】从吉林省长白山国家级自然保护区横山保护站林下土壤样品中筛选获得1株对杨树溃疡病菌有良好抑制效果的链霉菌,编号为HS1。采用多重筛选法确定菌株HS1及其发酵液的抑菌活性,通过形态学、生理生化特征、16S r DNA序列分析等方法明确其分类地位,运用人工接种法测定菌株HS1发酵液对杨树溃疡病的预防和治疗效果。【结果】菌株HS1及其发酵液对供试植物病原菌均有抑制作用,抑菌谱广,其中对杨树溃疡病病原菌抑制作用最强,抑菌带宽达20.66 mm,发酵液抑菌圈直径达40.26 mm; 16S r DNA序列比对分析发现,菌株HS1与Streptomyces scopuliridis同源性最高;人工接种试验结果表明,菌株HS1发酵液对杨树溃疡病的预防和治疗效果分别为60.87%和71.74%。【结论】生防菌株HS1可有效预防和控制杨树溃疡病,且对多种农林重要病害病原菌的抑菌作用效果明显,具有广阔的开发应用前景。     

绿木霉菌株T43对松烂皮病菌的抑制效果及其抑菌机理

通过对峙培养和非挥发性代谢产物对病原菌生长的抑制]作用,对引进绿木霉(Trichoderma virene)菌株T43及其抑菌活性物质对松树烂皮病菌(Cenangium ferruginosum)的抑制效果进行了研究;从菌株T43发酵液乙酸乙酯提取物对松树烂皮病菌的3种保护酶(SOD、CAT和POD)活力影响的角度,初步探讨了提取物对病原菌的抑菌机理.研究结果表明:对峙培养48 h后,菌株T43对松烂皮病菌相对抑制效果为1.00,72 h后菌株T43与病原菌形成明显的拮抗线,并抑制病原菌的生长.菌株T43乙酸乙酯提取物对病原菌株的室内生长抑制率为60.50％.菌株T43发酵液乙酸乙酯提取物对病原菌的3种保护酶具有明显的抑制作用.     

乳酸链球菌素、榆耳发酵混合液对多粘芽孢杆菌抑菌作用的研究

以多粘芽孢杆菌作为指示菌,使用乳酸链球菌素（Nisin）、榆耳发酵液为实验材料,通过单项以及配比混合,进行抑菌实验。结果表明：乳酸链球菌素与榆耳发酵液混合后抑菌,其最佳组合为pH值4、榆耳发酵液含量60%、温度80℃。     

麻竹叶抑菌活性成分的分离鉴定

对麻竹叶抑菌活性成分进行了分离鉴定.结果表明:将麻竹叶干粉加70%乙醇抽提至色淡,抽提液浓缩后经石油醚萃取,水相过聚酰胺柱,用水和70%乙醇洗脱,醇洗部回收溶剂经60℃低温干燥,得红棕色结晶性粉末;该物质经真空层析、聚酰胺层析,得单一色斑;在聚酰胺柱色谱中呈单一吸收蜂,经高压液相色谱检验,单一主峰面积比例为97.75%;用盐酸镁粉检出其为黄酮化合物;经酸水解,用硅胶薄板层析检出有木糖;用UV-vis光谱法及化学法对其结构进行分析,其分子结构为黄酮醇类,该化合物具有较强抑菌活性,酸水解后抑菌活性升高.     

鹿角藤提取物的抑菌活性

采用生长速率法测定鹿角藤甲醇粗提物、石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇4种溶剂萃取物及氯仿萃取物的层析组分对6种靶标菌的抑菌活性。结果表明,在质量浓度5 mg·m L-1条件下,4种萃取物中,氯仿萃取物的抑菌活性最好,尤其是对香蕉炭疽菌及芒果炭疽菌,其抑制率达82.48%、71.57%;氯仿萃取物的进一步层析组分中,E组分的抑菌活性最好,且具有广谱抑菌活性,在质量浓度0.5 mg·m L-1条件下,组分E对香蕉炭疽菌的抑制率达74.12%,具有进一步研究开发的潜质。     

叶底红生根培养因子优选试验

在基本培养基单因子试验的基础上,采用L9(34)正交试验设计探讨了IBA、NAA、活性炭等物质的不同配比对叶底红生根培养的影响。结果表明,叶底红的最佳生根培养基为:花宝1号3 g·L-1+IBA 0.5 mg·L-1+活性炭1 g·L-1。     

5种常绿园林树种抑菌能力研究

研究了5种常绿树种叶片挥发性物质对真菌、细菌抑制能力,结果显示:所有供试植物叶片的挥发性物质均具有一定的抑菌活性,且5种常绿树种抑菌率的种间差异显著,其中油松、白皮松的抑菌能力个体差异也达到显著水平。对细菌的抑菌能力排序为:大叶黄杨>油松>龙柏>白皮松>石楠;对真菌的抑菌能力排序为:石楠>大叶黄杨>龙柏>油松>白皮松。另外,一般碎叶的抑菌率大于相同质量的整叶。     

抗生素对山茶愈伤组织诱导和生长的影响

研究了卡那霉素、潮霉素对浙江红山茶、大花红花油茶愈伤组织的生长及对攸县油茶幼苗叶片诱导愈伤的影响,确定作为选择压力的卡那霉素质量浓度为50～60mg·L-1,潮霉素为25～30mg·L-1。在3种抑菌性抗生素中,羧苄青霉素促进愈伤组织诱导,对愈伤组织的生长没有影响,头孢霉素则有抑制作用,而羟氨苄青霉素轻微抑制愈伤组织的生长,但对愈伤组织的诱导影响不大。考虑到抑菌效果,适于在转基因研究中使用的羧苄青霉素的抑菌质量浓度为250mg·L-1,羟氨苄青霉素为125mg·L-1。     

森林假单胞菌抑菌物稳定性及其成分分析

森林假单胞菌Pseudomonas silvicola菌株T1-3-2对杉木炭疽病具有较强的防治效果,为将其研发为林木炭疽病的生防制剂,需进一步探明该菌抑菌谱、抑菌物质稳定性以及主要成分等,以补充完善该菌的生防理论。文章通过平板对峙法、菌丝生长速率法、液相色谱/线性离子阱-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC/LTQ-Orbitrapa MS)和气相色谱-质谱法(GC-MS)分析了该菌的抑菌谱、抑菌物质的稳定性以及主要成分。结果表明,菌株T1-3-2对9株供试病原真菌均具有较好的抑菌活性,尤其对包括杉木炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides在内的多种林木炭疽病菌表现出较强的抑菌作用,抑制率均达到65%以上;其代谢产物粗提物对杉木炭疽病菌的孢子萌发和菌丝生长具有明显抑制作用;温度≤70℃、酸碱度以及紫外辐射对粗提物抑菌效果均无显著影响,但高温处理(T> 70℃)对抑菌效果影响显著;粗提物主要含有14种化合物,其中包含假单胞菌常见的4种吩嗪类抑菌物质,即吩嗪、1,6-二羟基吩嗪、10-乙酰基-3,7-二羟基吩嗪和绿脓菌素;挥发性气体(VOCs)中包含:苯类...     

树皮内酚类物质的含量及苯丙氨酸解氨酶的活性与杨树抗溃疡病的关系

本文通过不同含水量盆栽苗的接种试验,结果表明,水分亏缺是杨树溃疡病发生发展的诱因。在树皮含水量高的植株中,苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性强,邻苯二酚和对-羟基苯甲酸等酚类物质的含量高,且它们的活性(或含量)随着树皮含水量的降低而降低。室内抑菌试验及盆栽苗的注射试验证明了邻苯二酚是寄主活体内的重要抑菌物质。     

油茶炭疽病拮抗放线菌的筛选及其抑菌谱研究

从土样中分离到109株放线菌,采用对峙培养法、发酵产物活性测定及离体接种试验进行拮抗菌的筛选,结果表明:以油茶炭疽病菌作为指示菌,通过平板对峙培养初步筛选出抑菌效果较好的F1、F5、F9、F10、F22、F23、F38、F53 8个菌株,其抑菌带宽度在12.5～20.5 mm,占分离到放线菌总数的7.3%,其中F10抑菌效果最强;复筛表明8个菌株对供试的7种植物病原菌均有抑制作用,F9、F10对油茶炭疽病菌、油茶根腐病菌抑菌效果明显。菌株发酵产物的抑菌活性测定表明8个菌株的发酵液能完全抑制油茶炭疽病菌的生长,效果明显;发酵滤液抑菌率为5.6%～38.8%,效果不明显,抑菌率超过30.0%的只有F9、F10 2个菌株;发酵灭活液均无抑菌活性。离体接种试验表明F9、F10 2个菌株无伤接种防治效果达80%,而刺伤接种防治效果只有10%～20%,但发病程度轻。     

葡萄叶乙醇提取物的提取工艺及体外抑菌活性研究

为优选出葡萄叶乙醇提取物的最佳提取工艺条件,以采自吐鲁番市恰特喀勒乡的葡萄叶为材料,采用索氏提取器回流提取法提取葡萄叶乙醇提取物;工艺优化以乙醇浓度、提取温度、提取时间、料液比为影响因素,分别用大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌、枯草芽孢杆菌做抑菌试验,并以其中抑菌效果最明显的金黄色葡萄球菌为指示菌,以葡萄叶乙醇提取物的抑菌圈直径为指标,在单因素试验的基础上采用了正交试验,并用K-B琼脂扩散法测定其体外抑菌活性。结果表明,各因素对提取葡萄叶抑菌活性物质的影响顺序为,乙醇浓度浸提温度料液比浸提时间。最佳提取工艺为,乙醇浓度70%、浸提温度70℃、料液比1︰30、浸提时间3h。在最佳提取条件下获得的葡萄叶提取物对4种菌的抑菌作用大小为:金黄色葡萄球菌﹥大肠杆菌﹥白假丝酵母菌﹥枯草芽孢杆菌。葡萄叶中乙醇提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有较显著的抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌抑菌活性最大,而对枯草芽孢杆菌的抑菌作用不太显著。本文所建立的葡萄叶乙醇提取物的最佳提取工艺具有渐变快速、仪器设备简单、不污染环境等优点,可用于葡萄叶中具有抗菌活性物质的提取。     

无核葡萄胚挽救培养污染防治的初步研究

无核葡萄是当今国际葡萄消费和生产的重要方向之一,胚挽救技术是无核葡萄育种的重要手段;无核葡萄胚珠离体培养中,污染现象时有发生,严重阻碍了无核葡萄胚挽救育种的效率。以"皇家秋天"、"红宝石无核"、"无核翠宝"等种子败育型无核葡萄品种自然授粉幼果为材料,进行的无核葡萄胚挽救培养过程中胚珠内胚培养阶段污染影响因素及抑菌培养试验结果表明,75%乙醇浸泡30s+1%HgCl2溶液浸泡6min的消毒处理对无核葡萄胚珠内培养的效果较好;胚珠培养的接种密度对污染有一定的影响;胚形成培养基MM4+香蕉泥500mg·L-1添加0.1g·L-1高锰酸钾的抑菌效果较好。     

植物保健剂

植物保健剂植物保健剂是采用具有抑菌、诱导、保护及促生等各种功能的物质，经科学配比后研制成功的一种具有各种功能的新型系列混合剂。它对杨树溃疡病、根朽病及炭疽病菌有明显的抑菌作用，利用干型保健剂分别取得了８７％、９８％、５４％及６８％的抑菌效果。它对由弱...     

鸡腿蘑发酵液

鸡腿蘑多糖具有调节血糖的作用。三价络是葡萄糖耐量因子的重要组成成分。锌、钴、钒等微量元素和糖尿病均有一定的关系。肉碱等生化药物对降低血脂有特效。本项目用液体发酵方法生产鸡腿蘑发酵液(含鸡腿蘑多糖和其他有效成分),并在发酵培养基中添加有关微量元素,在发酵液中添加肉碱等生化药物。经动物试验和人体试食试验表明,能明显降低高血糖动物及人体的血糖水平。是糖尿病病人很好的保健食品。该产品广泛应用于医药、保健食品、普通食品。发酵液鸡腿蘑多糖含量:3克/升以上。发酵液吨成本4000元以下。     

野牡丹属植物对大肠杆菌的抑菌效果

以多花野牡丹(Melastoma.affine)为试验材料,以无菌水为提取剂,通过纸片扩散法对多花野牡丹水提取物进行大肠杆菌的抑菌试验。采用水浴时间、水浴温度、料液比3因素3水平正交试验筛选野牡丹属(Melastoma)植物叶抑菌物质的最佳提取条件,结果表明:提取温度60℃,浸提时间2 h,料液比1∶30为最佳提取条件;并采用最佳提取条件对部分野牡丹属植物叶水提取物的抑菌能力进行比较,结果表明:野牡丹属植物叶的水提取物抑菌能力大小为:毛菍(M.sanguineum)>枝毛野牡丹(M.dendrisetosum)>细叶野牡丹(M.intermedium)>多花野牡丹。     

斑马水塔花的组织培养和快速繁殖

试验筛选出斑马水塔花的诱导愈伤组织培养基MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1，愈伤组织诱导率达96.7%；继代增殖培养基MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1，增殖倍数达8～9倍；生根培养基MS+KT 0.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1，生根率达100%。幼苗经炼苗后，移栽到经菌肥处理的甘蔗渣∶泥炭土∶珍珠岩＝6∶3∶1的基质上，成活率达95%以上。     

几种化学调节剂及其组合对板栗雌花数量及结实性能的影响

用 BR、GA3 、PP3 3 3 、KH2 PO4 、H3 BO3 共 5种化学调节物质进行了叶面喷布试验 ,观察它们在板栗开花结果上的效应。结果表明 ,不同药剂、浓度及药剂组合对板栗母枝平均结果枝数、长度、每结果枝雌花序数 ,母枝平均雄花枝数 ,单果质量 ,三果率和空苞率的影响有明显的差异。综合考虑化学调节物质在提高板栗雌花量和果实产量 ,以及降低空苞率上的试验效果 ,最佳的化学处理为 BR0 .0 1mg· L-1 PP3 3 3 1g· L-1 KH2 PO4 7.5g· L-1 H3 BO3 5.0 g· L-1,可使板栗结果枝数目平均由 1.2个增加至 2 .833个 ,结果枝平均雌花数由 1.56 7个增加到 1.8个 ,平均空苞率由 30 .70 %降至 9.0 3%