樟树叶提取物对木材霉菌的防治效果及防霉机理研究

为探明樟树叶提取物对木材霉菌的防治效果及防霉机理,采用牛津杯法,探讨了不同质量分数的提取物对3种木材常见霉菌(桔青霉、绿木霉、黑曲霉)的抑菌性,之后通过光学显微镜和分光光度法对防霉机理进行分析,探讨了其在木材中的霉菌防治效果。结果表明:樟树叶提取物对桔青霉、绿木霉以及黑曲霉均有一定的抑制作用,且其通过破坏霉菌菌丝结构,扰乱霉菌生长周期,从而抑制3种霉菌生长。质量分数为12.50%的提取物对3种霉菌的抑菌效果最佳,对应的抑菌圈直径分别为:桔青霉14.2 mm,绿木霉14.9 mm,黑曲霉20.1 mm。提取物对3种霉菌的最低抑菌质量分数为:桔青霉0.50%~1.00%,绿木霉0.50%~1.00%,黑曲霉0.25%。对不同菌种,分别采用如下处理方式可使平均感染值达到最小,防治效力达到最大:桔青霉(涂刷处理)、绿木霉以及混合菌(浸渍处理)、黑曲霉(任意一种处理方式均可),其中浸渍处理方式适用霉菌最为广泛。      

羊栖菜提取物对食用菌竞争性杂菌生长的抑制作用

采用生长速率法和孢子萌发法对羊栖菜提取物的抗真菌活性进行了筛选,结果表明：Rf 0．47（10g·kg^-1、1g·kg^-1）和Rf0．81（100g·kg^-1、1g·kg^-1）对圆弧青霉菌丝生长抑制率分别为35％、50％和85％、25％,羊栖菜乙醚提取物乙酸乙酯相的薄层分离带Rf0．30（100g·kg^-1）对绿色木霉及黑曲霉抑制率分别为75．67％、83．46％。相关系数分析显示：不同浓度的3个处理组存在极显著的正相关。双因素方差分析表明：分离带和浓度两因素对绿色木霉、圆弧青霉、黑曲霉菌丝生长抑制率的影响极显著。在3种质量浓度下,羊栖菜乙醇Rf0．47、Rf0．81、羊栖菜乙醚Rf0．00对圆弧青霉孢子萌发以及羊栖菜乙醇乙酸乙酯相、羊栖菜乙醚乙酸乙酯相、羊栖菜乙醚Rf0．30对黑曲霉孢子萌发均有显著的抑制作用。     

马尾松叶提取物的抗菌活性

采用滤纸片法,检测不同质量浓度马尾松Pinus massoniana叶提取物对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus,大肠杆菌Escherichia coli,枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis,八叠球菌Sarcina ventriculi,木霉Trichoderma viride,青霉Penicillium chrysogenum和黑曲霉Aspergillus niger等的抑制效果。结果表明,马尾松叶的水、丙酮、乙醇溶液提取物对细菌的抑菌圈直径随着提取物质量浓度的增大,对各种菌的抑菌效果越好,马尾松叶乙醇提取物质量浓度为100.0 g.L-1时,大肠杆菌抑菌圈直径为25.6 mm;对3种霉菌的抑菌效果与质量浓度的大小不成正比;3种提取物中以乙醇提取物的抑菌效果最好,而水提物的抑菌效果较差。     

姜黄素的体外抑菌活性研究

[目的]考察姜黄素的体外抑菌活性。[方法]以最小抑菌浓度、抑菌圈为指标对姜黄素的体外抑菌效果进行考察。[结果]姜黄素在体外条件下对枯草杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别是0.100 0、0.200 0、0.100 0 g/ml,对大肠杆菌、青霉、木霉和黑曲霉均无最小抑菌浓度;以最小抑菌浓度作抑菌圈试验,其对上述各菌的抑菌圈直径分别为12.0、10.0、12.0、6.0、6.0、6.0、6.0mm。[结论]姜黄素在体外对枯草杆菌、沙门氏菌和金黄葡萄球菌敏感,而对大肠杆菌、青霉、木霉及黑曲霉均不敏感。     

白薇提取物的抗氧化和抑菌活性

分别用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和蒸馏水提取白薇粉末,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基法、铁离子还原能力(FRAP)测定法研究其抗氧化活性;通过杯碟法测定不同溶剂提取物对意大利青霉的抑菌效果;用生长速率法研究白薇乙醇提取物对其他15种植物病原菌的抑菌活性。抗氧化试验表明:白薇粉末蒸馏水、丙酮、乙醇提取物的抗氧化活性较好,其清除DPPH自由基的IC50分别为15.66、25.37、28.27 mg/m L,其总酚含量分别为70.19、63.20、53.84 mg/g,可见抗氧化活性与总酚含量密切相关。抑菌活性试验表明:白薇粉末乙酸乙酯、丙酮、乙醇乙醇提取物对意大利青霉有抑菌活性,且乙醇提取物抑菌圈直径最大,为31.50 mm;乙醇提取物对其他15种植物病原菌均有一定的抑菌活性,其中对枣拟茎点霉、辣椒疫霉菌、西瓜尖镰孢菌活性最强,EC50分别为0.194、1.019、4.185 mg/m L。研究结果表明,白薇乙醇提取物具有较好的抗氧化活性和较强的抑菌活性,可用于植物源保鲜剂的开发。     

人参锈腐病及疫病生防放线菌筛选

为获得对人参锈腐病、疫病具有拮抗活性的土壤放线菌,利用平板稀释培养法从黑龙江省人参基地和西北地区分离获得578株放线菌,用琼脂块法初筛,用生长速率法、悬滴法对抑菌效果较好的菌株进行抑菌活性复筛。结果获得5株对病原菌具有显著拮抗性的生防放线菌,其中Act11、Act12菌株的拮抗效果尤为显著,Act12最大抑菌圈直径达20.15 mm,其发酵液对病原菌菌丝的抑制率最大为83.4%,对人参锈腐病孢子萌发抑制率最高为99.8%。     

旋覆花不同部位提取物对辣椒疫霉菌的生物活性研究

为明确旋覆花对辣椒疫病的控制效果,分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇对旋覆花根、茎、叶、花进行浸渍超声提取,采用菌丝生长速率法和载玻片上孢子萌发法测定各提取物对辣椒疫霉菌的离体活性,并测试了盆栽防效.结果表明,在0.1g·mL-1供试条件下,旋覆花的花提取物对辣椒疫霉菌菌丝生长抑制活性最强,4种溶剂提取物抑制率分别为81.19％,93.15％,100％和95.43％;叶提取物抑菌活性次之,抑制率分别为81.17％,88.29％,95.43％和87.16％;除茎的氯仿提取物外,其它茎、根不同溶剂提取物抑制率均大于62.79％.在0.05 g·mL-1质量浓度下,叶和茎的石油醚提取物对供试病菌孢子释放的抑制率分别为83.33％和66.67％,其它提取物抑菌活性均较弱.在1.0g·mL-1处理剂量下,旋覆花花的氯仿提取物对辣椒疫病的治疗和保护作用分别为46.35％和52.18％,均与对照药剂相当.     

滤纸片法测定黄花蒿提取物对霉菌的抑制活性

应用滤纸片法测定了黄花蒿对霉菌的抑制活性.结果表明,黄花蒿提取物浓度为50mg·mL-1时对霉菌具有较强的抑制活性,抑菌圈直径为10～15mm,其对霉菌的最小抑制浓度为9～12 mg·mL-1.     

海头红提取物抑制食用菌竞争性杂菌的研究

用纸片法和玻片法检测了海头红的4种有机溶剂提取物及极性分离物对食用菌4种竞争性真菌的抑制作用。结果表明:海头红的无水乙醇和甲醇∶甲苯(3∶1)提取物(0.1 mg/g)对黑曲霉和圆弧青霉的抑制作用明显,乙酸乙酯和苯提取物对4种真菌无抑制活性,4种溶剂提取物对绿色木霉和红色链孢霉均无抑制作用。无水乙醇提取物通过不同的极性溶剂(石油醚、苯、乙醇)分离并对其进行抗菌活性检测,结果表明,在3种分离组分中,只有乙醇极性分离物对4种真菌的孢子萌发具有不同程度的抑制作用,乙醇极性组分浓度为0.05 mg/g和0.002 mg/g时对黑曲霉和圆弧青霉的孢子萌发抑制作用明显。     

4株拮抗细菌对番茄叶霉病菌的抑制作用

从辽宁省蔬菜种植区分离筛选出的4株拮抗细菌R14、H402、H403和H404对番茄叶霉病有较强的抑制作用。牛津杯法试验结果表明,H404抑菌作用最强,抑菌圈直径达35.7 mm,H402抑菌圈直径为29.6 mm,而H403及R14抑菌作用较差,抑菌圈直径分别为23.8 mm和22.2 mm。孢子萌发法试验结果显示,H404及H402抑制孢子萌发作用最强,抑制率达100%,R14的抑制效果次之,抑制率达到90%,H403的抑制作用最弱,抑制率仅为20%。盆栽试验结果表明,H402对番茄叶霉病的抑制率为96%,H404的抑制率为84%,H403的抑制率为68%,R14抑制率为76%。     

15种中药材提取物对3种食用菌致病菌孢子萌发生长的影响

以食用菌栽培生产过程中为害大、传染性高的木霉、青霉和脉孢霉3种竞争性病菌孢子作为测试对象,以丙酮为提取溶剂分别对小蓟、柴胡、白鲜皮、金银花、黄柏、徐长卿、苦参、大黄、荆芥、黄芪、板蓝根、土荆皮、石榴皮、黄连和大蒜共15种中药材中的脂溶性成分进行浸渍提取,采用平板涂布法考察了15种中药材提取物对3种病菌孢子萌发生长的影响,并与山梨酸钾和多菌灵对照比较,结果显示这些药材提取物对3种病菌孢子萌发生长的抑制性能存在明显差异,其中大蒜对3种病菌孢子均呈强抑制作用,抑制性能及抗菌谱强于山梨酸钾和多菌灵;徐长卿对青霉孢子和脉孢霉孢子呈高效抑制,但对木霉孢子无抑制作用却能明显促进木霉孢子的萌发生长。小蓟对3种病菌孢子均有效,对青霉孢子和脉孢霉孢子效果较好,但对木霉孢子效果差;金银花仅对青霉孢子和对脉孢霉孢子有抑制作用,但能显著促进木霉孢子的萌发生长;黄柏、土荆皮和石榴皮提取物仅对青霉和脉孢霉孢子抑制性能好;黄芪和黄连提取物仅对木霉有显著的抑制作用,但对青霉和脉孢霉无抑制效却能促进其萌发生长。阳性对照山梨酸钾仅对青霉孢子抑制性能好,对木霉孢子效果差,对脉孢霉孢子几乎无效;多菌灵对木霉和脉孢霉孢子抑制性能好,但是对青霉孢子几乎无效。     

海头红提取物的抑菌活性及其抗菌成分的初步分离研究

以假单胞菌Pseudomnas aeruginosa、绿色木霉Trichoderma viede为供试食用菌病原菌,评价海头红提取物的抑菌活性,并采用生物活性追踪法对其中抑菌有效成分进行初步分离。结果表明,海头红乙醇提取物经萃取分离得到的石油醚萃取相、氯仿萃取相、乙酸乙酯萃取相中,氯仿萃取相和乙酸乙酯萃取相对假单胞菌具有较好的抑制作用,100mg·mL-1浓度下抑菌圈直径分别为14.3mm和8mm;石油醚和氯仿萃取相对绿色木霉的菌丝生长的抑制作用较好,72h抑制率分别达54.57%和36.55%。对乙酸乙酯组分通过2次硅胶柱层析分离,得到一个具有抑菌活性的组分D,其对假单胞菌的抑菌圈为13mm(100mg·mL-1),对绿色木霉的菌丝生长72h抑制率为48.53%(50mg·mL-1)。对组分D进行GC-MS分析,初步判定其中抑菌有效成分为4-羟基苯甲醛,有关其抑菌有效成分的纯化与鉴定有待进一步研究。     

多花木蓝抑菌活性及其化学成分研究

采用超声波提取法,选取石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇为提取溶剂,得到豆科植物多花木蓝根、茎、叶、籽不同溶剂的提取物.采用抑制菌丝生长法,选取稻瘟病菌、辣椒枯萎病菌、小麦赤霉病菌、油菜菌核病菌、梨黑星病菌5种植物病原真菌为测试菌,测试多花木蓝各提取物抑制真菌的活性.结果显示,多花木蓝茎、叶各溶剂提取物均没有显示抑菌活性,根、籽提取物有一定的抑菌活性,籽提取物的活性强于根部提取物,根部提取物随着提取溶剂极性的增加活性亦增加,其甲醇的生物活性最好,抑制率分别为65.31％、69.09％、72.50％、61.06％、64.95％;与此不同,籽石油醚提取物的抑制率高于其他溶剂提取物,其抑制率分别为71.43％、72.73％、79.04％、74.34％、74.02％.采用牛津杯法,选取大肠杆菌、青枯菌为测试菌,测试多花木蓝各提取物抑制细菌的作用,结果显示,根、茎、叶不同溶剂提取物均没有抑制细菌的活性,籽石油醚提取物显示出一定的抑菌活性,其对青枯菌的抑菌圈直径平均值为1.45 cm,对大肠杆菌的抑菌圈直径平均值为1.41cm,但籽其他溶剂提取物亦没有显示出抑菌活性.GC-MS分析籽石油醚提取物的化学成分,结果共鉴定出其中17种成分,占精油色谱峰总面积的99.065％,其中亚油酸含量最高,达到37.569％.     

竹荪多糖的抑菌活性研究

[目的]为竹荪的开发利用提供理论依据。[方法]采用DEAE-纤维素柱层析法分离纯化竹荪多糖,用抑菌圈法测定竹荪多糖的抑菌效果,研究竹荪多糖的体外抑菌活性。[结果]将含有竹荪多糖的纸片置于涂布黑曲霉、草酸青霉、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的平板上,均出现抑菌圈,且真菌的抑菌圈直径大于细菌的抑菌圈直径;竹荪多糖对5种菌的最小抑菌浓度分别为2.50、2.50、5.00、5.00、2.50 mg/ml。[结论]竹荪多糖对黑曲霉、草酸青霉、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有一定的抑制作用,且对真菌的抑制作用强于细菌。     

7种美容中药水煎液的抑菌作用

为了研究7种美容中药(竹茹、芦根、白芍、白术、茯苓、白芷、薏苡仁)水煎液对腐败菌的抑菌效果,为研制天然化妆品防腐剂提供依据,采用牛津杯法测定抑菌圈直径,采用液体稀释法测定最低抑菌浓度(MIC).结果显示,芦根水煎液对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的抑制作用最大,抑菌圈直径分别为(16.33±0.58)、(15.00±1.00) mm,MIC分别为31.25、62.5 mg/mL;白术水煎液对大肠杆菌的抑制作用最大,抑菌圈直径为(16.00±1.00) mm,MIC为31.25 mg/mL;竹茹水煎液对黑曲霉的抑制作用最大,抑菌圈直径为(13.00±1.00) mm,MIC为62.5 mg/mL.7种中药水煎液对热、紫外线和pH值均具有较好的稳定性,其抑菌活性仅在pH值9处理后呈现不同程度的下降.说明芦根、竹茹、白术、茯苓水煎液对4种菌均有较好的抑菌效果,白芍和白芷次之,薏苡仁水煎液抑菌效果最差.     

蛹虫草抗菌活性物质的初步研究

利用平板对峙法,从实验室保藏的20株蛹虫草菌株中筛选出抗菌效果较强的CF2菌株；采用蒸馏水和95％乙醇作为提取剂,提取液作用于指示菌,发现水溶性提取物抑菌效果明显优于脂溶性提取物；经Sevage法脱蛋白后抑菌效果消失,初步分析该活性物质为蛋白质.在90℃水浴10 min后抑菌物质才失去活性,表明该抑菌物质对温度不敏感.对芽孢杆菌和酵母菌的抑制率分别为97.1％、30.9％,对黑曲霉菌落生长抑制率为18.4％.     

两种生防制剂对食用菌杂菌的抑制作用

利用生长速率法和悬滴法,测得生防药剂多粘类芽孢杆菌剂和枯草芽孢杆菌剂对食用菌常染杂菌脉孢霉和青霉菌丝的生长速率和孢子萌发的抑制效果。试验结果显示,两种生防制剂对脉孢霉和青霉有一定的抑制作用,其中,多粘类芽孢杆菌药剂对脉孢霉和青霉孢子萌发的抑制作用明显,抑制率分别为90.44%和65.04%;而枯草芽孢杆菌药剂对脉孢霉和青霉的菌丝生长的抑制效果在处理中表现为最高,抑制率分别为36.29%和46.66%。因此,多粘类芽孢杆菌药剂可以作为杂菌孢子抑制剂,枯草芽孢杆菌药剂可以作为杂菌菌丝生长的抑制剂。     

铁钉菜乙醇提取物对真菌生长的影响

铁钉菜乙醇粗提物通过薄层层析法分离活性物质,分别采用纸片法和菌饼法测定了铁钉菜提取物及薄层层析带对3种真菌的菌丝生长的影响,用玻片法测定了对孢子萌发的抑制作用。实验结果表明:乙醇提取物对3种真菌孢子萌发的抑制作用最强,其中,浓度在0.005 mg/mL时对绿色木霉和黑曲霉孢子萌发的抑制率均达到99%。     

日本凹顶藻的活性物质对姬松茸病原菌的抑制作用研究

通过对日本凹顶藻以不同溶剂的粗提、乙醇提取物的极性分离、不同极性的薄层层析和多糖的提取,进行抗菌试验的研究,发现95%乙醇和V甲醇:甲苯为3∶1的提取的活性物质具有较强的抗姬松茸的病原细菌活性,乙酸乙酯相对病原细菌的抑菌强于乙醇的粗提物,而水相基本无抑菌效果,乙酸乙酯相的两个带(Rf0.57、Rf0.63)浓度为0.1g/ml具有较强抗姬松茸病原细菌的活性,对假单孢杆菌抑菌圈达到19.3mm,水相层析带的抑菌活性较弱,多糖的粗提物配成0.25g/g的水溶液对姬松茸病原真菌有较好的抑菌效果对黑曲霉、桔青霉和绿色木霉的抑菌圈分别达到10.8mm、7.9mm、5.3mm。     

深绿木霉T1和哈茨木霉T21抑菌活性及对番茄幼苗促生效果研究

为探究深绿木霉（Trichoderma atroviride）T1和哈茨木霉（Trichoderma harzianum）T21对7种植物病原真菌的抑菌活性及对番茄幼苗的促生效果,利用平板对峙法、平板对扣法、固体稀释法和凹玻片法研究其抑菌活性,并通过灌根法研究木霉菌对番茄幼苗的促生效果,平板对峙试验结果表明：2株木霉对7种病原菌均具有抑菌活性,其中深绿木霉T1的抑菌率为31.81%～86.16%,哈茨木霉T21的抑菌率为80.53%～91.82%;深绿木霉T1挥发性代谢产物对7种病原菌均具有抑菌活性,抑菌率为39.78%～76.78%,而哈茨木霉T21的挥发性代谢产物对7种病原菌均无抑菌活性。固体稀释法结果表明：2株木霉的无菌发酵液对7种病原菌均具有抑菌活性,其中深绿木霉T1的抑菌率为59.22%～75.22%,哈茨木霉T21的抑菌率为49.89%～79.21%。凹玻片法结果表明：2株木霉菌对病原菌孢子萌发均有抑制活性,其中深绿木霉T1无菌发酵液对病原菌孢子萌发抑制率达到44.66%～76.69%,哈茨木霉T21无菌发酵液对病原菌孢子萌发抑制率达到49.87%～100%。经2株木霉孢子...