猪脾生长抑素阳性细胞和免疫细胞的发育

用免疫组织化学技术研究猪脾生长发育过程中生长抑素 (SS)阳性细胞、IgA阳性细胞和酸性非特异性脂酶(ANAE)阳性细胞数量的变化。结果表明 ,出生时 ,猪脾SS阳性细胞数量较少 ,3日龄时数量显著增加 (P <0 0 5 ) ,2 0日龄则极显著增加 (P <0 0 1) ,并维持到 90日龄 ,12 0日龄时SS阳性细胞数量显著减少 (P <0 0 5 )。出生时 ,猪脾内就分布有IgA阳性细胞和ANAE阳性细胞 ,IgA阳性细胞数量于 2 0日龄呈显著上升趋势 ,4 5日龄达最高峰 ,于 90日龄极显著降低 (P <0 0 1) ;ANAE阳性细胞数量在 2 0日龄开始增加 ,4 5日龄时极显著增加 (P <0 0 1) ,12 0日龄时又显著降低 (P <0 0 5 )。以上结果表明 ,猪脾中SS阳性细胞的发育对免疫细胞的发育具有重要的调节作用     

卵形鲳鲹生长抑素家族基因的全基因组鉴定及组织表达特征分析

【目的】明确卵形鲳鲹生长抑素（SST）家族基因的种类及其组织表达特征,为进一步揭示SST家族基因在其生长发育过程中的作用机制打下基础。【方法】采用HMMER 3.1对卵形鲳鲹全基因组数据进行搜索,然后通过Pfam、SMART及NCBI CDD等数据库确认搜索获得的基因是否属于SST家族基因;采用ProtParam和PSORT等在线软件进行生物信息学分析,并以实时荧光定量PCR检测SST家族基因在卵形鲳鲹不同组织中的表达情况。【结果】从卵形鲳鲹全基因组中共鉴定出4个SST家族基因（SST1、SST3、SST5和SST6）,分别编码122、127、106和110个氨基酸残基,对应的编码蛋白分子量介于12249.3~14316.1Da,理论等电点（pI）介于6.51~7.43,均定位于细胞外。4个卵形鲳鲹SST基因结构较简单且相似,均包含2个外显子和1个内含子;SST1和SST3基因位于7号染色体上,SST6和SST5基因则分别位于8号和23号染色体上;4个卵形鲳鲹SST氨基酸序列相似性的平均值为33.42%,以SST5氨基酸序列与SST6氨基酸序列的相似性最高（39.78%）,SST3氨基酸序列与SST5氨基酸序列的相似性最低（28.16%）。SST家族基因在卵形鲳鲹脑、胃、性腺和肌肉等组织中均有不同程度的表达,SST1、SST3和SST6基因在脑组织中显著高表达（P<0.05,下同）,而SST5基因在性腺和肌肉组织中显著高表达;此外,SST3、SST5和SST6基因在卵形鲳鲹卵巢中的相对表达量均显著高于在精巢中的相对表达量。【结论】从卵形鲳鲹基因组中鉴定出4个SST家族基因（SST1、SST3、SST5和SST6）,其表达分布存在组织特异性和种属特异性,可能介导卵形鲳鲹的神经调节、性腺发育及性二型性等多种生理功能,且不同物种的SST基因功能可能存在差异。     

泌乳二花脸猪和大白猪下丘脑-垂体-性腺轴功能的比较研究

泌乳期母猪的生殖机能一般处于抑制状态。但生产实践已观察到二花脸猪与大白猪的差异,前者相当部分在泌乳期可看到发情现象。因此,比较两种猪在特殊生理状态下的生殖神经内分泌变化,显然有助于其机理的揭示。1　材料与方法1.1　试验动物经产纯种二花脸母猪5头,平均产仔为14头;经产纯种大白猪4头,平均产仔9头,早晚各饲喂1次混合精料,其组成为:玉米16%,次粉30%,米糠40%,豆饼10%,石粉2%,骨粉1%,食盐1.5%,单圈饲养。1.2　方法1.2.1　试验设计　母猪产后15d安装颈静脉血管瘘管,术后第5天早晨8∶00开始采样,每间隔15min取1次,持续6h。血浆样品于-2…     

二花脸猪ABCG8基因的蛋白功能与组织表达分析

ABC转运蛋白8 (ABCG8)基因与家畜抗逆性相关,为探究猪ABCG8编码的蛋白功能及其在各组织中的表达,通过PCR技术克隆二花脸猪ABCG8基因,使用在线生物信息学方法分析ABCG8质结构与功能,利用qRT-PCR检测其组织差异性表达分析。结果表明：该蛋白子式为C3638H5712N982O1027S35,编码730个氨基酸,分子量为80 761.43 kD,pI值为8.73,GRAVY值为0.071,属于疏水蛋白。该蛋白存在109个潜在的N-磷酸化位点和6个O-糖基化位点,不存在信号肽序列,二级结构主要由α螺旋（43.01%）、β-转角（6.16%）、延伸链（14.52%）和无规则卷曲为（36.30%）组成,主要定位在细胞膜和内质网,是定位于细胞膜上的多次跨膜蛋白,可能与ABCG5、NPC1L1、CYP7A1、NR1H3、SCARB1、SREBF2、APOA1、NR1H2、SQLE、NR1H4等蛋白存在相互作用关系。此外,ABCG8基因在二花脸猪各组织中的表达谱分析表明,ABCG8基因在肝脏组织中的表达量最高,小肠次之,在其他组织中几乎不表达。研究结果为进一步研究ABCG8在猪生...     

二花脸猪Smad4基因的克隆与卵巢组织mRNA的表达水平

[目的]了解二花脸猪Smad4(common-mediator Sma4)基因的序列特征和组织表达特征,分析二花脸猪与商品猪卵巢组织中Smad4基因mRNA表达水平的差异.[方法]采用克隆测序技术获得二花脸猪Smad4基因cDNA序列,利用生物信息学方法分析二花脸猪Smad4基因的序列特征和蛋白的理化性质、高级结构,RT-PCR检测其组织表达特征,并采用real-time PCR技术检测二花脸猪与商品猪卵巢组织中Smad4基因mRNA的表达水平.[结果]二花脸猪Smad4基因编码区序列全长1 659 bp,编码一个含有5 52个氨基酸残基的蛋白质,氨基酸序列与其它哺乳动物的同源性均在98％以上;二花脸猪Smad4也包括3个典型的结构域(MH1、SAD和MH2).二花脸猪Smad4基因在所检测的组织中均有表达,且卵巢组织中mRNA的表达水平极显著高于商品猪(P＜0.01).[结论]二花脸猪Smad4基因可能拥有其它哺乳动物Smad4基因相同的功能及其可能与猪高繁殖力间有一定相关.     

二花脸猪和大白猪产仔数加性—显性遗传模型以及基因效应的研究

对二花脸猪，大白猪及其杂交一代和回交一代4种群体共计2010窝产仔数的资料进行了加性一显性遗传模型以及基因效应的研究，方差分析结果显示，窝产仔数（总产仔数和活产仔数）具有极显的群体间差异，表明不同群体的遗传结构不同，多元回归结果表明：加性效应平方和占总产仔数和活产仔数总遗传变异平方和的比较分别为75．4％和69．8％，可见加性效应是群体间遗传变 异的主导因素，显性效应平方和占总仔数和活产仔数总遗传变异平方和的比例分别为18．3％和23．7％，表明显性效应在群体间遗传变异中是相当重要的，上位效应平方和点总产仔数和活产仔数总遗传变异平方和的比例分别为6．3％和6．5％，可见上位效应对窝产仔群体间遗传差异作用不大，猪总产仔数和活产仔数的群体平均值分别为13．01和12．42，二花脸猪总仔数和活产仔数基因加性值比大白猪分别高2．77和2．49头，二花脸猪高的总产仔数和活产仔数基因对大白猪等位基因均为显性，显性度分别为0．91和0．97，适合性检验结果表明，窝产仔数符合加性一显性遗传模式。     

猪Cathepsin B基因和Cystatin B基因mRNA表达的发育性变化及组织差异

 【目的】研究猪肉嫩度性状候选基因-组织蛋白酶B（cathepsin B,CTSB）和半胱氨酸蛋白酶抑制素B（cystatin B,CSTB）在体内不同组织、不同发育阶段的表达变化规律,为研究嫩度性状的遗传调控机理提供依据。【方法】采用荧光探针RT-PCR,定量分析CTSB和CSTB mRNA在两个品种猪的多个组织、多个发育时间点的表达量。【结果】RT-PCR结果表明,CTSB和CSTB mRNA表达量最高的组织为肾脏,心肌和骨骼肌中表达丰度低,股四头肌CSTB mRNA表达量极显著高于背最长肌。CTSB mRNA表达量在0～5月龄长白猪和梅山猪背最长肌中表现出先升高后降低的变化趋势,梅山猪峰值出现较早,并在4月龄后再次出现急剧上升。CSTB mRNA表达量在梅山猪中表现出生初期较高,随后逐渐降低的表达模式,长白猪的表达模式则为出生后表达量急剧升高,2月龄达到峰值,随后逐渐降低。2品种猪背最长肌组织CTSB和CSTB mRNA表达量表现出显著正相关。【结论】CTSB和CSTB mRNA表达量受到组织、发育阶段和品种影响,2基因mRNA表达量呈显著正相关。     

二花脸猪和大白猪背最长肌中肌肉生长抑制素和生肌调节因子基因的表达及其性别特点

用相对定量RT—PCR方法研究大白猪和二花脸猪背最长肌中肌肉生长抑制素（Myostatin）和生肌调节因子（Myo—genin）基因表达的发育性变化并进行品种及性别间比较。研究结果表明：大白猪公猪Myostatin mRNA表达水平在20日龄时达到高峰且显著高于相同日龄二花脸公猪（P〈0．05）,而二花脸公猪在45日龄时才显著升高,其他日龄品种间差异不显著。二花脸公猪和母猪出生后Myostatin mRNA表达水平均表现为上升,45日龄时达到高峰,120日龄时公母猪间差异显著（P〈0．05）。二花脸公猪与大白猪公猪Myogenin mRNA的表达发育模式基本相同,均在20日龄达到最高值,品种问差异不显著。90日龄二花脸母猪Myogenin mRNA表达水平较公猪显著下调（P〈0．05）。结果提示,猪背最长肌中Myostatin和Myogenin基因表达水平在猪出生后早期均较高,但没有出现随着日龄的增加而一直升高或降低的趋势;两种基因的表达在20日龄出现品种间差异;性成熟前后二花脸公母猪间表达有差异。     

3种猪孕酮受体基因(pgr)多态性分析

采用混合基因组DNA池PCR扩增和测序技术,对小梅山猪、枫泾猪、大白猪pgr基因的外显子区域进行扫描,共发现1个单核甘酸多态性位点(SNP)。外显子1序列中1 319 bp处发生C→T的碱基突变,即C1319T,未引起氨基酸的变化,属于同义突变;针对突变位点,建立错配PCR–限制性长度多态性(RFLP)方法进行检测,发现3种猪的pgr基因可以分为AA、BB、AB 3个基因型,小梅山和枫泾猪有AA、AB 2种基因型,大白猪中有BB、AB 2种基因型。     

GM-CSF与生长抑素融合表达质粒对小鼠肌肉组织GHR和IGF-I mRNA表达的影响

选择70只小白鼠,随机分为7组,每组10只,雌雄各半。其中第1组为对照组,第2-4组分别肌肉注射pcS/2SS、pGM-CSF/SS和pGM-CSF+pcS/2SS DNA疫苗;第5～7组分别口服以减毒沙门氏菌为载体的pcS/2SS、pGM-CSF/SS和pGM-CSF+pcS/2SS DNA疫苗,以β-actin作为内参,利用相对半定量RT-PCR,检测小鼠肌肉组织GHR和IGF-I mRNA的表达。结果表明:第3、5和6组的GHR mRNA表达显著高于1组和7组(P<0.05),第5和6组的IGF-I mRNA表达显著高于1组、2组、4组和7组(P<0.05),GM-CSF与SS的融合表达质粒(pGM-CSF/SS)的GHR和IGF-I mRNA表达高于pGM-CSF+pcS/2SS共同免疫,同种DNA疫苗,口服免疫组的GHR和IGF-I mRNA表达总体上比肌肉注射组要高。这些结果证明,GM-CSF可促进SS DNA疫苗的免疫效果,提高肌肉组织中GHR和IGF-I mRNA的表达;pGM-CSF/SS效果优于pGM-CSF+pcS/2SS,口服免疫组要优于肌肉注射免疫组。     

The Developmental Patterns of Somatostatin Gene Expression in Gastric Tissue of Erhualian and Large White Pigs

In present study, the developmental patterns of somatostatin (SS) gene expression in gastrictissue were compared between Erhualian and Large White pigs. A semi-quantitative RT-PCR was applied todetermine the levels of SS mRNA. The results indicated that : (1) The gastric SS mRNA expression was high atbirth, followed by a significant decrease (P＜0.05) at 3 days of age in both breeds of pigs; (2) From 3 to 30days of age, the expression of SS mRNA in gastric tissue exhibited remarkable up-regulation in both breeds,after which a strain difference in the developmental pattern was observed. In Erhualian pigs, SS mRNA ex-pression reached a peak at 90 days of age, declined thereafter towards 180 days of age. In Large White pigs,however, the expression of SS mRNA remained constant from 30 days of age onwards; (3) In general, Erhual-ian pigs expressed higher levels of SS mRNA in gastric tissue compared with Large White pigs at the same age.The strain difference was significant from birth to 90 days of age, but vanished at 120 and 180 days of age.The results suggest that the gastric expression of SS in the pig is regulated following an instinct timetable in astrain-specific manner, its relationship with the development of gastric function as well as its interactions withenvironmental factors are to be elucidated.     

二花脸和大约克夏公猪不同发育时期睾酮分泌特性

随机选取 3,2 0 ,30 ,90 ,12 0和 180日龄纯种二花脸和大约克夏公猪各 4头 ,屠宰后采取血样和睾丸组织样 ,测定血清和睾丸组织中睾酮含量。结果表明 ,90日龄前 ,两品种公猪血清睾酮水平均维持在较低水平 ,血清睾酮水平从 90日龄开始 ,随日龄增加二花脸公猪极显著升高 (P〈0 0 1) ,而大约克夏公猪的则从 12 0日龄开始显著上升 (P〈0 0 5 )。二花脸公猪的血清睾酮水平显著高于大约克夏公猪 (P〈0 0 5 )。不同日龄的公猪睾丸组织中睾酮含量的变化与血清睾酮水平的变化趋势相反 ,3日龄时睾丸组织中睾酮含量最高 ,以后随日龄增加而下降 ,二花脸公猪在 2 0和 90日龄时急剧下降 (P〈0 0 1) ,大约克夏公猪 90日龄前随日龄显著降低 (P〈0 0 5 ) ,90日龄后保持相对稳定。睾丸组织中睾酮含量二花脸公猪极显著低于大约克夏公猪 (P〈0 0 1)。     

太湖猪分娩后一周乳中若干酶与激素的动态变化

 试验对8头太湖猪(二花脸)分娩后一周及第20天乳中酶及激素进行研究,结果表明,分娩后第1天r-GT和AM在猪奶中的活力最高,分别为7.89±1.07,227.69±32.58u/ml,以后呈下降趋势,前4天水平均显着高于第20天(p<0.01).LP活力在1～4天内急剧上升达191.00±35.34u/ml,然后逐渐下降。AM和LP活力呈高度负相关(r=-0.905,p<0.01).GH和INS水平以分娩后第1天最高,分别为7.69±0.81,337.69±33.49ng/ml,第4天均出现一个小峰,之后呈下降趋势。而PRL只在分娩后1～4天的奶中检测到。     

兰尼定受体基因(RYR1)在藏猪背最长肌组织中的差异表达

兰尼定受体(rynodine receptor 1,RYR1)基因又称氟烷基因,已证明为猪应激综合征发生的主效基因.该基因的表达常常和猪肉质性状劣变相关联,因而具有较重要的研究前景.为了研究该基因在个体不同发育时期表达的规律性变化,为进一步深入研究该基因和肉质性状间的关系,本研究采用实时荧光定量PCR方法检测了藏猪背最...     

生长抑素对大鼠乳腺斯钙素基因表达的影响

将泌乳期大鼠分为对照组、CS组和SS组,利用RT-PCR法对大鼠乳腺组织斯钙素基因进行检测,分析生长抑素对大鼠乳腺斯钙素基因表达的影响。结果表明:乳腺中有STC1表达,无STC2表达。生长抑素对泌乳期大鼠乳腺斯钙素基因表达起下调作用,半胱胺作用相反。以上结果提示生长抑素和半胱胺可能参与乳腺钙代谢的调节,且通过STC1发挥作用。     

二花脸仔猪与皮特兰仔猪肌纤维类型特性的比较及其与肉质的关系

选用性情温顺、肉质好的二花脸猪和胴体瘦肉率高,但肉质欠佳的皮特兰猪为试材,运用组织学和组织化学的方法对2种猪半腱肌、背最长肌和腰大肌的肌纤维进行分型,并对肉质进行了测定.结果表明:(1)二花脸猪各型肌纤维面积均小于皮特兰猪;(2)2种猪半腱肌各型纤维所占比例相近,背最长肌快收缩糖酵解型纤维所占比例最大,而腰大肌则是慢收缩氧化型纤维所占比例最大;(3)二花脸猪背最长肌pH45 min、pH24 h均高于皮特兰猪,pH45 min品种间差异极显著(P<0.01).可见,二花脸猪较小的肌纤维面积与其优良的肉质相关.     

生长抑素主动和被动免疫及基因免疫研究进展

生长抑素(somatostatin,SS)是下丘脑释放的14肽激素,在动物体内具有广泛的抑制作用,特别是对生长及免疫反应具有明显的影响,通过耗竭或免疫中和体内的SS水平相应提高生长激素(GH)等水平促进动物生长。文中简要介绍了生长抑素主动和被动免疫的研究进展及基因免疫的作用机理、特点及增强基因免疫的途径;阐述了生长抑素基因疫苗的研究和应用发展前景。