两种补体结合反应对马来因阳性马骡血清抗体检测的比较

本文对鼻疽固相补体结合反应的条件进行了筛选,建立了术式。通过对417匹马来因点眼阳性马骡血清抗体检测证明,建立的固相补反的敏感性高,其阳性反应占29.5％,疑似反应占23％,阴性反应占47.5％;而常规补体结合反应则分别为14.7％、3.8％、81.5％。对10匹其它传染病血清和20匹马来因点眼呈阴性的健康马血清检测结果,除类鼻疽血清外,均呈阴性反应,证明固相补反具有一定的特异性。     

鼻疽固相溶血试验的研究

研究确定用1:2.5～1:3补体与1:2鼻疽血清等量混合后,滴加于含1:5鼻疽抗原致敏红细胞的琼脂糖凝胶反应盘的相应孔中,置于4℃或15～29℃下感4～12h,可以产生直径在8.1mm以上的溶血环。对健马及马传贫等6种传染病马血清做检测,则不引起溶血反应。以31匹M~+马血清的CFT结果和扑杀10匹鼻疽马血清的CFT及病理组织学变化做依据,确定了固相溶血试验(S_p—HLT)的判定标准,即溶血环直径在6.0～7.0mm的为阴性,7.1～3.0mm的为疑似,8.1mm以上的为阳性。以此标准检测了411匹马(来自鼻疽疫区的368匹.鼻疽清净区健马43匹)。结果,疫区马血清CFT阳性率为5.2％,Sp—HLT阳性率为7.6％;43匹健马血清的CFT和Sp—HLT均为阴性。Sp—HLT检测方法简便,快速,检出率较CFT略高,从病理组织学角度考虑并非假阳性。由此认为,用Sp—HLT代替CFT进行鼻疽检疫是可行的。     

固相补体结合反应及间接血凝试验对鼻疽马骡诊断的比较研究

以18匹鼻疽马的病理组织学变化为主要依据,结合常规补体结合反应(CFT)的检查结果,确定了间接血凝试验(IHA)的判定标准,即血清凝集1:800或以上呈现“++”为阳性,1:400呈现“++”为疑似,1:200以下凝集为阴性反应。进而为比较固相补体结合反应(SP—CFT)与IHA检测鼻疽的敏感性,以CFT作对照,对内蒙和吉林两省(区)的1244匹马骤血清进行了检测,CFT、SP—CFT和IHA的阳性率依次为10.8％、16.8％和7.3％,阴性率为84.8％、71.2％和85.4％。用这三种血清学反应检查供作对照的20匹健康马血清及14匹其它6种传染病血清,均未出现影响结果判定的类属反应。1244匹马骡血清中鼻疽菌素试验呈阳性反应的血清540匹份,三种血清学反应阳性率依次为15.9％、30.9％和3.2％,阴性率依次为77.4％、44.8％和35.9％。由上可见,在三种血清学反应中,不论对大面积的鼻疽疫区,还是对鼻疽菌素试验阳性(M~+)马群的检疫,SP—CFT均表现了最高的敏感性,至于IHA的检出率,则较SP—CFT低,但可用于鼻疽的早期诊断,以弥补在此期间补体结合性抗体尚未出现,补体结合反应不能检出的缺陷。     

吖啶橙玻微吞噬试验对鼻疽马细胞免疫功能的研究——Ⅱ 鼻疽杆菌人工感染马及不同类型自然感染马的检测结果

本文应用吖啶橙玻片微量吞噬试验对7匹鼻疽杆菌死菌和活菌人工感染马进行了连续检测,无论是死菌接种还是活菌接种,噬菌率(PR％)、噬菌指数(PI)和杀菌指数(BcI)三项指标的变化趋势均一致;对自然感染马79匹(鼻疽马11匹、马来因马17匹,双阴转马51匹)也进行了检测。人工感染马和自然感染马的检测结果与健马正常值相比,三项指标相差均非常显著(P<0.01),从而认为三项指标均可作为观察鼻疽免疫状态的指标。     

马鼻疽弱毒菌苗对马体的免疫试验

应用鼻疽杆菌C67-4060Co(7)兼高温178代和C67-40高温180代两株弱毒菌株,对8匹马进行了免疫试验,其中安全试验组2匹,免疫试验组4匹,对照试验组2匹。安全试验组马经70d左右的观察后,人工迫杀进行病理剖检和组织学检查,均未发现鼻疽性病变,细菌学检查阴性,表明该弱毒菌苗安全性好。免疫试验组马经3个月左右的观察后,以不同剂量强毒菌株攻击,除1匹马出现一侧性鼻漏外,其余马匹均无临床症状,细菌学检查4匹马均为阴性,人工迫杀后经病理学和免疫组织学检查等综合性判定,免疫马有3匹耐过强毒菌的攻击而获得保护。而强毒菌攻击的2匹对照马均发病,经病理剖检和组织学检查均有鼻疽性病变,细菌学检查阳性。     

鼻疽免疫机理的研究

本试验以鼻疽常规检疫法为基础,采用多种新型体液免疫和细胞免疫检测法,结合病理组织学及临床血液学检查,通过定期检测健马、各种类型鼻疽马与鼻疽强毒菌人工接种感染马,对鼻疽免疫机理进行了研究。试验结果:首先,建立了用于马鼻疽的三种体液免疫检测法和四种细胞免疫试验法;第二,代表保护性免疫检测法的NBT,在检测鼻疽免疫功能上获得了明显的效果;第三,证明了鼻疽体液抗体无杀鼻疽菌的特异功能;第四,阐明了死菌抗原与活菌抗原的免疫机理;第五,证购了鼻疽杆菌属胞内寄生菌,鼻疽免疫马的保护性反应以细胞免疫为主,马来因马及马来因与补体结合反应双阴转马有显著的免疫功能。综合上述试验结果,提出了鼻疽免疫机理的分型规律,即体液免疫属Ⅰ型,细胞免疫属Ⅱ型,外周血白细胞分类计数的变化亦属Ⅱ型。以上试验所获,突破了多年来鼻疽研究的岑寂局面,为今后鼻疽的研究指出了方向,提供了新的资料。     

微孔塑板四唑氮蓝试验对鼻疽马免疫状态的探测

为了寻求适用于马体的四唑氮蓝(NBT)试验方法,进而探测该试验与鼻疽马免疫状态的关系。本实验进行了NBT定性方法的比较和试验条件的筛选,并通过对健马62匹和各种类型鼻疽马88匹的测定以及对7匹鼻疽菌接种马长达9个月的定期检测,初步获得了鼻疽马免疫状态的检测指标,对鼻疽免疫机理的研究提供了新的手段。     

马骡非特异性鼻疽菌素眼反应研究——Ⅲ、引起非特异性眼反应物质的免疫化学特性

自从应用鼻疽菌素诊断鼻疽马骡以来,经历了将近一个世纪。期间,不少学者都曾发现它的非特异反应性。某些阳性反应马骡经病理学、细菌学和血清学检查,不能确证其就是鼻疽病马。1912年就发现了类鼻疽杆菌与鼻疽病马血清有交叉反应,等证实了鼻疽和类鼻疽菌细胞膜上的脂多糖为共同抗原。 李普霖等的研究否认了我国某岛相当多的鼻疽菌素阳性反应马骡为鼻疽病;他并在其肺脏病灶中发现有酵母样真菌。杨、郑等人成功地从病灶材料分离到白色球拟     

免疫荧光间接染色法与酶联免疫吸附试验、补体结合试验对马鼻疽诊断的比较

马鼻疽的血清学诊断,过去一直采用补体结合试验(cF)。近几年来,我们又相继建立了微量间接血凝试验、乳胶凝集试验、免疫荧光间接染色法(IFA)及酶联免疫吸附试验(ELISA)等比较敏感的检测方法。为了比较IFA、ELISA、cF三种方法对鼻疽马检测的敏感性,我们对31匹鼻疽马及10匹经病理学确诊的鼻疽马进行了检测,现将结果报道如下。     

对国家现代五项队马场鼻疽检疫情况的分析

应用国外国内不同厂家生产的鼻疽菌素,对同群54匹马进行两次鼻疽点眼检疫第一次检疫检出阳性马35匹,阳性率67.3%,第二次检出阳性马3匹,阳性率5.6%。通过两次点眼结果和另10匹马的不同鼻疽菌素点眼比较实验的分析,两次检疫结果有极大的差异,不同厂家生产的老鼻疽菌素和提纯鼻疽菌素、荷兰和国内生产的提纯鼻疽菌素的点眼反应强度不一。两次检疫结果存在极大的差异,鼻疽菌素标准化的问题急待解决。     

应用单克隆抗体鉴别鼻疽和类鼻疽血清抗体的研究

应用淋巴细胞杂交瘤技术制备了2个类鼻疽菌的McAbs。特异性实验结果表明,这些McAb仅同类鼻疽菌反应,而与包括鼻疽菌在内的其它细菌不发生反应。应用其中的一个McAb—3Al,以ELISA抑制试验检测了49份鼻疽血清和16份类鼻疽血清,结果发现,McAb 3Al的类似抗体是类鼻疽血清的特异性抗体,以此可使两病的血清学诊断得到明确的鉴别。     

马骡鼻疽、类鼻疽交叉免疫反应的研究

用血清反应和变态反应方法研究鼻疽马骡与类鼻疽马骡对鼻疽、类鼻疽抗原的反应,发现它们之间呈现明显的交叉反应,反应效价显著相关;并显示有同源性抗原抗体反应强于异源性抗原抗体反应的趋势。本文还报告了在完全排除鼻疽感染的前提下,生活在类鼻疽疫源地的马骡鼻疽检疫阳性率甚高的原因,是由于类鼻疽的隐性感染而导致对鼻疽抗原的交叉反应,从而干扰了鼻疽检疫。     

应用间接荧光抗体法检测IgG抗体诊断马传贫的研究

应用间接荧光抗体法(IFA)检测114匹份补体结合反应(CF)或琼脂扩散反应(ID)阳性马、骡血清,结果全为阳性,而单用CF和ID,其阳性率分别为47.4％和71％;检测1000匹份健康马骡和27匹份类症病马血清,结果全为阴性。在传贫检疫中,同时以ID和IFA对3625匹马、骡血清进行检测,结果IFA多检出4匹。对此4匹马、骡经多次用CF追试,其中3匹为阳性,1匹经调查曾注射疫苗,未再继续追试。应用上述三种方法对100匹注射疫苗的马、骡、驴的抗体阳性率进行了测定,结果IFA44％,CF25％,ID％。IFA法最终判定以需2小时,节省抗原材料,具有快速、简便的优点。     

免疫酶斑点试验在马传贫检疫中的应用

我们对哈尔滨市历史上马传贫重实区中的8个乡、2个国营场的马匹以免疫酶斑点试验(DB)与琼脂扩散试验(ID)相结合的方法进行了马传贫弱毒疫苗免疫马和自然感染马的鉴别。在65匹马(骡)中,斑点试验阳性反应62匹(含骡8匹),阳性反应马3匹;琼脂扩散试验阳性反应3匹,阴性反应62匹。据BD和ID试验结果,DB试验阴性的62     

J亚群白血病病理学观察及抗原定位

通过病理组织学和免疫组织化学技 术对1日龄感染鸡定期进行病理组织学观察 及gp85病毒糖蛋白检测,确定病理变化和J 亚群白血病的组织学嗜性及二者的关系。结 果在3周龄时出现第1只发病鸡,以后所有 鸡发病且病变随着日龄的增加而加重,主要 在骨髓、肝脏、脾脏、肾脏、卵巢、心肌等组织 中出现瘤细胞增生,并有炎性反应;免疫组在 3周龄时,肝脏、心脏、肺脏、小肠、肾脏、卵巢、 骨骼肌开始出现阳性反应,抗原主要在胞浆 中出现,呈深蓝色颗粒。在10周龄～14周龄 时,骨髓呈中度的阳性反应,而其它组织的阳 性信号出现的程度未见大的变化;在23周龄 时,肝内肿瘤呈较强阳性反应,信号主要集中 在细胞核;整个实验过程中,法氏囊、脑始终 呈阴性反应。研究发现,骨髓及肿瘤的抗原 性较强,并且肿瘤的抗原性要强于骨髓;另外 还发现,在阳性反应强的组织中,病变较明 显,肿瘤细胞增生明显,即阳性反应的组织器 官易形成肿瘤转移灶。     

马鼻疽与马腺疫临床上的鉴别诊断

对出疆马、驴鼻疽病检疫的同时,也常发现马腺疫的疫畜。经检疫1100匹马时鼻疽阳性马6匹,腺疫阳性马19匹,检疫4000匹驴时,鼻疽阳性驴16匹,腺疫阳性驴3匹。鼻疽和腺疫是马、骡、驴的主要传染性疾病,二者在临床上所表现出的某些症状既有相似处,亦有不同处,现就马鼻疽与马腺浸在临床上所表现出的典型症状浅叙如下。1马鼻腔鼻疽临床症状颌下淋巴结肿胀,如果是一侧的鼻腔发病则表现为同侧的颌下淋巴结肿胀。肿胀程度达核桃大和鸡蛋大,不移动,很少出现化脓或破溃。严重的鼻腔界疽可发生鼻中隔穿孔,导致病畜衰竭死亡。鼻腔内流出脓性分…     

应用单克隆抗体技术分析鼻疽菌与类鼻疽菌表面抗原的初步研究

应用7个抗鼻疽菌的单克隆抗体(McAb)对17株鼻疽菌与29株类鼻疽菌的表面抗原作了初步分析。结果:(1) 鼻疽菌表面抗原的表达比较急定,大多数菌株趋于一种类型;(2)类鼻疽菌的表达变异性较大,用McAb 2A_5和1A_3可将其分成三个群,用McAb 1A_(10)和4D_4又能将其中的一群和二群再各分成二个亚群(1a、1b和2a、2b),(3)只有1a亚群与鼻疽菌表面抗原的表达类型交叉(占13.85％),因而使类鼻疽菌与鼻疽菌的鉴别率可达到86.15％。     

应用间接ELISA方法检测马鼻疽抗体

为了验证间接ELISA方法检测马鼻疽抗体的可行性,在东莞市4个马场采集马血清,应用间接ELISA方法进行检测,同时对这些马匹进行鼻疽菌素滴眼反应检疫。结果为间接ELISA阳性对照血清和阴性对照血清结果均成立,采集51份马血清马鼻疽抗体均为阴性,鼻疽菌素滴眼反应检疫结果均为阴性。结果表明,应用间接ELISA方法检测马鼻疽抗体可行,东莞市的马匹未发现有马鼻疽的感染。     

土霉素引起马骡不良反应的教训

1976年上级配发给我们一些已接近失效期的兽用土霉素粉。1977年2月恰逢春节,农民多习惯在春节前给牲畜治病或啖药。因此,给服用土霉素的马、骡较多。用量一般为40克,同时配合其它药物,加水用胃管投服,据统计服用土霉素的24匹马、骡(马9匹、骡15匹),15匹发生反应,占62.5％;死亡7匹(马3匹、骡4匹),占29.1％。     

间接血凝试验在马鼻疽诊断上的应用

从76年开始,应用间接血凝试验进行马鼻疽诊断的研究。采用鞣酸法将鼻疽抗原吸附在醛化血球上,先后对健康马、马来因马、鼻疽马(包括开放性鼻疽马和马来因点眼与补反均呈阳性的马)及人工感染马等762份血清中相应的抗体进行了检测,并与补体结合反应作了比较,现将结果报告如下。