文蛤不同群体的同工酶分析

采用聚丙烯酰胺垂直电泳技术(PAGE)对来自山东野生、江苏野生、浙江养殖、广西野生白色壳4个文蛤M eretrix m eretrix群体两种组织(消化腺、闭壳肌)的EST、MDH、ME、ADH、SOD、CAT等6种同工酶进行了分析。结果显示:文蛤不同组织之间、不同群体之间、养殖群体和野生群体之间的同工酶酶谱均有较明显的差别;广西白壳群体的多种同工酶酶谱与其它几个群体相比有较大差异,说明该种群与另外3个群体种质差异较大,亲缘关系较远。对山东野生、广西普通壳色和广西白色壳色3个群体的4种同工酶(EST、AMY、MDH、SOD)进行了研究,结果表明:广西普通壳色群体和山东群体的酶谱相似,而与广西白色壳群体差异明显,初步推测广西白色壳群体为文蛤属的其他种类;在文蛤各群体中均找到了特征性酶带,可以作为区别于文蛤不同群体的蛋白标记,用于文蛤种质资源的分析鉴定,并可为选育优良品种文蛤提供遗传依据。     

油松天然群体酯酶同工酶的变异分析

用酯酶同工酶对陕西油松４个产地、１２个林分天然群体的遗传结构进行了研究,油松群体酯酶同工酶由ＥＳＴ－Ａ、ＥＳＴ－Ｂ、ＥＳＴ－Ｃ３个多态位点组成。１２个林分的多态位点百分率为１００％,等位基因平均数为３．９１７,平均期望杂合率０．５９４。表明油松天然群体间在酯酶同工酶各基因位点具有较高的遗传变异水平。     

红壳色文蛤选育群体遗传多样性的微卫星分析

【目的】了解群体选育过程中红壳色文蛤（Meretrix meretrix）选育群体的遗传多样性变化及世代遗传分化情况,为文蛤育种计划的可持续性提供理论依据。【方法】以江苏黄文蛤原种（SY）、江苏红文蛤原种（SR）及5个红壳色文蛤选育群体（SRF₁~SR5F₅）为研究对象,利用15对微卫星引物对各文蛤群体基因组DNA进行PCR扩增,然后通过Gel-Pro32 4.0、PopGen 32和MEGA 6.0等在线软件分析7个文蛤群体的遗传多样性。【结果】从7个文蛤群体中共检测出766个等位基因,每个微卫星位点在每个群体中检测出3~18个等位基因,且等位基因数（Na）随选育世代增加呈下降趋势。15个微卫星位点的平均多态信息含量（PIC）在0.575~0.630,均属于高度多态性位点。7个文蛤群体的平均观测杂合度（Ho）为0.442~0.502,平均期望杂合度（He）为0.629~0.680,群体中63.81%的微卫星位点偏离Hardy-Weinberg平衡,表明各微卫星位点存在一定程度的杂合子缺失;群体内近交系数（F_is）范围为-0.0157~0.7409,平均为0.2777,表明文蛤群体内存在一定程度的近交水平;群体间遗传分化系数（F_st）平均为0.0455,即文蛤群体变异中仅有4.55%是由不同群体间的基因差异所产生,而95.45%的变异来源于群体内部;各群体的基因流（Nm）为0.9002~18.9478,平均为8.8065,说明7个文蛤群体间的遗传分化较低。UPMGA聚类分析发现7个文蛤群体聚类呈两大支,江苏红文蛤原种及其选育群体聚为一支,而江苏黄文蛤原种（SY）独自聚为一支。【结论】经过5代人工选育的红壳色文蛤选育群体虽然较基础群体其遗传多样性指数略有下降,但并未导致各选育群体的遗传结构发生改变,仍具有较高的遗传多样性。在连续的选择育种计划中,应增加亲本养殖环境多样化,避免因人工繁育的亲本和养殖群体规模较小引起遗传漂移或近交衰退而致使某些等位基因缺失,导致后代的遗传结构发生改变。     

4个群体文蛤的RAPD分析

用建立的高重复性RAPD优化体系,对文蛤Meretrixmeretrix4个不同地理群体(广西文蛤Gh、白壳文蛤Gb、山东文蛤S、江苏文蛤J)的个体进行RAPD分析,获得了较好的重复性条带。从20个随机引物中筛选出6个引物进行RAPD扩增,结果显示:Gb群体有11条特征带,Gh群体有2条,这些特征性RAPD扩增带可以作为这两个群体的RAPD分子标记;J群体和S群体没有明显特征带,可能预示这两个群体间遗传渐渗导致种质资源趋向同质化;Gh、S、J群体多态比例差别不大,为61.54%⁶2.86%,而Gb群体仅为33.33%。采用修正后的Shannon多态性指数方程进行遗传多态性分析,结果显示:Gh、S、J群体多态性指数分别为0.189、0.195、0.200、Gb群体仅为0.115。研究结果表明,文蛤不同群体的遗传地理分化明显,Gh、S、J群体遗传多样性水平较高,而Gb群体的遗传多样性较低,可能预示该群体分布范围较小、群体数量不大,应加强对其资源的保护。Gh与Gb群体为同一栖息地,除壳色和壳形态差异外,遗传多态性差距悬殊,已超出种内变异范围,二者是否为不同种或具生殖隔离的地理亚种,还待于深入研究。     

4个群体文蛤的RAPD分析

用建立的高重复性RAPD优化体系,对文蛤Meretrix meretrix4个不同地理群体（广西文蛤Gh、白壳文蛤Gb、山东文蛤S、江苏文蛤J）的个体进行RAPD分析,获得了较好的重复性条带。从20个随机引物中筛选出6个引物进行RAPD扩增,结果显示：Gb群体有11条特征带,Gh群体有2条,这些特征性RAPD扩增带可以作为这两个群体的RAPD分子标记;J群体和S群体没有明显特征带,可能预示这两个群体间遗传渐渗导致种质资源趋向同质化;Gh、S、J群体多态比例差别不大,为61．54％-62．86％,而Gb群体仅为33．33％。采用修正后的Shannon多态性指数方程进行遗传多态性分析,结果显示：Gh、S、J群体多态性指数分别为0．189、0．195、0．200、Gb群体仅为0．115。研究结果表明,文蛤不同群体的遗传地理分化明显,Gh、S、J群体遗传多样性水平较高,而Gb群体的遗传多样性较低,可能预示该群体分布范围较小、群体数量不大,应加强对其资源的保护。Gh与Gb群体为同一栖息地,除壳色和壳形态差异外,遗传多态性差距悬殊,已超出种内变异范围,二者是否为不同种或具生殖隔离的地理亚种,还待于深入研究。     

用同工酶研究胡杨天然群体遗传结构

通过对胡杨８个天然群体的ＭＤＨ,ＥＳＴ,ＡＣＰ和ＳＫＤ４种酶系统的分析。结果表明,在胡杨群体被测定位点中,多态性位点百分率为５９．３８％,等位基因平均数为１．８１,平均期望杂合度为０．３２９。有效等位基因平均数为１．３８２。由遗传距离得知,吉木萨尔和尉犁不同的亲缘关系最近。     

巴山松天然群体同工酶遗传变异性分析

以巴山松大配子体为酶源材料,应用同工酶电泳技术,分析了巴山松３个地理群体的谷氨酸草酰乙酸转氨酶（ＧＯＴ）同工酶。结果表明：巴山松天然群体ＧＯＴ同工酶由３个多态基因位点组成,分别定名为ＧＯＴ－Ａ,ＧＯＴ－Ｂ和ＧＯＴ－Ｃ;３个地理群体不论在酶谱表型,还是各位点等位基因频率分布上,都表现出较高的变异水平。     

林芝云杉天然群体同工酶遗传多样性分析

采用水平切片淀粉凝胶电泳试验对西藏林芝云杉12个群体的10个酶系统进行测定,共获得20个谱带清晰、分离良好的位点,对这20个位点的统计分析表明:林芝云杉群体的多态位点百分率(P)=55.00%,每个位点的等位点基因数(Na)=1.900 0,每个位点的有效等位基因数(Ne)=1.609 3,观测杂和度(Ho)=0.229 1,期望杂和度(He)=0.2648,遗传一致度(I)=0.4168;这些指标在12个群体的均值略低于种级水平。对12个群体的遗传分化进行研究,群体间遗传分化系数(Gs,t)=7.406 5%,有92.593 5%的变异存在群体内;群体间的遗传分化度(Fs,t)=8.424 7%,仍远远小于群体内的91.535 7%;基因流(Nm)=7.011 9>4,可以代替遗传漂变防止群体间分化的发生。对12个群体两两之间的遗传距离进行研究,遗传一致度(I)的变动幅度为0.9475～0.997 9,平均值为0.980 1;遗传距离(D)变动幅度为0.002 1～0.054 0,均值为0.019 1。     

陕西栓皮栎天然群体同工酶遗传多样性研究

利用凝胶电泳法研究了陕西省境内3个栓皮栎天然群体的遗传变异和分化情况,测定和分析过氧化物酶（POD）,酯酶（EST）,苹果酸脱氢酶（MDH）和乙醇脱氢酶（ADH）的多态位点百分率、等位基因平均数、等位基因频率、平均期望杂合度和基因分化系数,结果表明：陕西栓皮栎天然群体的遗传变异绝大部分在群体内,占总变异的95．1％,群体间变异仅占总变异的4．9％,多态位点百分率为75％,等位基因平均数为2．708,平均期望杂合度为0．388．     

不同地理种源诸葛菜的POD同工酶分析

对不同地理种源诸葛菜成年植株叶片的过氧化物酶同工酶研究表明,种源之间的酶谱带和相对酶活力差异显著,它们有两条基本谱带,最多谱带为１０条,最少为６条,这些特征为形态多样性提供了依据。有利于选择高产、抗病植株。     

文蛤工厂化育苗技术

1998年至2001年就文蛤亲贝能肥促熟、诱导产卵、孵化、幼虫和稚贝培育、稚贝生态习性等开展研究。研究发现，养殖文蛤可以通过室内控温强化培育促熟，比自然海区提早近2个月；通过阴干-充气的催产方法，能使亲贝集中大批排放精卵。在水温26-32℃，pH7.8-8.5，盐度15-30的条件下，幼虫生长及变态最快。试验结果表明：采用无附着基质的方法进行采苗及稚贝培育是可行的；文蛤稚贝对干露、海水盐度、温度、pH、氨氮等具有较强的耐受性，适应范围：海水盐度9.6-32,水温4-34℃，pH7.0-8.5，在pH=7.9时，能忍受10mg/L的总氨氮浓度。1999年至2001年，共育出1.02-1.75mm（壳长）的文蛤稚贝2.2亿颗，单位面积出苗28.01-44.60万颗/m^2，达到产业化的要求。     

文蛤工厂化育苗技术

1998年至2001年就文蛤亲贝能肥促熟、诱导产卵、孵化、幼虫和稚贝培育、稚贝生态习性等开展研究。研究发现，养殖文蛤可以通过室内控温强化培育促熟，比自然海区提早近2个月；通过阴干-充气的催产方法，能使亲贝集中大批排放精卵。在水温26-32℃，pH7.8-8.5，盐度15-30的条件下，幼虫生长及变态最快。试验结果表明：采用无附着基质的方法进行采苗及稚贝培育是可行的；文蛤稚贝对干露、海水盐度、温度、pH、氨氮等具有较强的耐受性，适应范围：海水盐度9.6-32,水温4-34℃，pH7.0-8.5，在pH=7.9时，能忍受10mg/L的总氨氮浓度。1999年至2001年，共育出1.02-1.75mm（壳长）的文蛤稚贝2.2亿颗，单位面积出苗28.01-44.60万颗/m^2，达到产业化的要求。     

文蛤稚贝生产性室内越冬暂养试验

2000年10月－2001年4月，在盘山县水产局双良公司的1500m^3水体育苗室内，将30个底面积各为22.8m^2的水泥池作为文蛤稚贝越冬培育池，10个相同面积的水泥池作为水处理池，投放体长0.56-1.24mm的文蛤稚贝4.3808亿枚，在平均水温4℃、pH8.15、溶解氧7mg/L以上、盐度26、白天照度1000lx的试验条件下，进行生产性室内水泥池越冬培育试验。结果越冬培育的文蛤稚贝成活数量达3.6253亿枚，成活率为82.8%，文蛤稚贝在越冬培育过程中，其体长不增长，不摄食，亦不运动。     

文蛤染色体的研究

采用PHA和秋水仙素体内注射法，以鳃组织为材料，低渗-空气干燥法制片，对文蛤的染色体进行了分析研究。结果表明，文蛤染色体绝对长度较小，为0.91-1.96μm；其二倍体数目为2n=38，核型公式为N=18m 14sm 6t，染色体总臂数NF=70。同时，本文还对帘蛤科种类的核型演化关系进行了初步探讨。     

文蛤染色体的研究

采用PHA和秋水仙素体内注射法，以鳃组织为材料，低渗-空气干燥法制片，对文蛤的染色体进行了分析研究。结果表明，文蛤染色体绝对长度较小，为0.91-1.96μm；其二倍体数目为2n=38，核型公式为N=18m 14sm 6t，染色体总臂数NF=70。同时，本文还对帘蛤科种类的核型演化关系进行了初步探讨。     

文蛤稚贝虾池中间育成技术的研究

对文蛤稚贝虾池中间育成技术进行了研究，结果表明，稚贝经164d中间育成，贝苗平均壳长达6.51mm，最大个体25mm，成活率达60.18%。报道了文蛤稚贝中间育成的主要技术环节，尤其是稚贝虾池网箱育成技术；介绍了提高育成稚贝的生长速度、育成成活率的方法与措施，以及稚贝在高温期间如何度夏等技术。     

文蛤池塘养殖密度调控效果比较

应用种群生长与密度关系的规律,对文蛤池塘养殖密度、产量和产品规格的关系进行了比较试验,依据密度制约方程,当养殖密度随个体增长而增大至一定程度并抑制生长速度时,分塘疏养。结果揭示在单位面积毛产量、净产量、总产值、净利润、产量/投放量比等方面,以放养密度8 840粒/m2(680 g/m2)组最好。分塘疏养以放养密度1 253粒/m2(1 724 g/m2)组为好。密度低的池塘内文蛤平均壳长、壳高、壳宽,增重量和增长率均比高密度组大。对文蛤池塘养殖产量、产品规格和产值进行比较分析,对养殖密度调控技术进行了探讨。     

两种壳色文蛤壳形态性状对活体质量的影响

为了解文蛤Meretrix meretrix壳形态性状对活体质量的影响,获得具有优良遗传性状的群体,以经过7年群体选育的F_4代黑斑文蛤和红色文蛤为试验对象,采用相关性分析、主成分分析和通径分析等统计方法,对两种文蛤进行了壳长(X_1)、壳高(X_2)、壳宽(X_3)对活体质量(Y)的影响分析,建立了壳形态性状对活体质量影响的最优回归方程。结果表明:两种文蛤表型性状差异不大(P0.05),但壳性状对活体质量的主要影响因子不同,壳高和壳宽是决定黑斑文蛤活体质量的主要因素,而壳长是决定红色文蛤活体质量的主要因素(P0.01);多元逐步回归分析得到最优回归方程Y_(黑斑)=-8.308+0.361X_2+0.391X_3,Y_(红色)=-8.389+0.500X_1,回归关系和偏回归系数均达极显著水平(P0.01)。本研究结果对生产实践中两种文蛤的选育具有较高的参考价值。     

文蛤池塘养殖密度调控效果比较

应用种群生长与密度关系的规律,对文蛤池塘养殖密度、产量和产品规格的关系进行了比较试验,依据密度制约方程,当养殖密度随个体增长而增大至一定程度并抑制生长速度时,分塘疏养。结果揭示在单位面积毛产量、净产量、总产值、净利润、产量/投放量比等方面,以放养密度8 840粒/m2(680 g/m2)组最好。分塘疏养以放养密度1 253粒/m2(1 724 g/m2)组为好。密度低的池塘内文蛤平均壳长、壳高、壳宽,增重量和增长率均比高密度组大。对文蛤池塘养殖产量、产品规格和产值进行比较分析,对养殖密度调控技术进行了探讨。