多指标优选丹参提取工艺研究

优选丹参中丹酚酸B和丹参酮类的最佳提取工艺。以丹酚酸B和丹参酮类包括丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ和隐丹参酮为综合评价指标,采用单因素试验和正交试验考查溶剂体积分数、溶剂倍数、提取温度、提取时间对提取工艺的影响。最佳提取条件为6倍量70%乙醇在80℃下提取3次,每次2 h。稳定性研究和中试验证结果表明所得工艺合理可行,可作为丹参中丹酚酸B和丹参酮类的提取工艺。     

丹参趁鲜加工关键技术与质量影响研究

为探究丹参产地趁鲜加工与传统加工对丹参饮片质量的影响,并寻找最佳初加工方法.对阴干、自然干燥、60℃烘干加工的不同含水率的丹参进行切制后60℃烘干,比较丹参外观性状,测定不同加工下丹参水分、浸出物和丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA的含量.结果 表明,阴干至含水率20.27％～28.26％时切制,60℃烘干后丹参含水率均在4.13％～4.49％,水溶性浸出物含量均在66.04％～66.50％,醇溶性浸出物均在13.73％～14.49％.且此时丹参饮片断面与传统加工相似,均为黄色.丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ及丹参酮ⅡA含量也高于传统阴干.因此,丹参趁鲜加工可代替传统加工,用于大规模生产.     

丹参高效栽培关键技术

正丹参为唇形科鼠尾草属植物,丹参的干燥根及根茎在中医处方中属主药,具有祛瘀止痛、活血调经、养心除燥之功效,主要活性成分有水溶性酚酸类化合物(如丹参素、原儿茶醛、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C),脂溶性酮类化合物(如丹参酮ⅡA、丹参酮I、丹参酮ⅡB、隐丹参酮)等,是目前治疗冠心病、心绞痛、高血压、颈椎病所用中药的主要成分,能增加冠状动脉血流量、降低血脂、抑制血栓形成或抗血栓、改善微循。丹参是     

不同品种丹参质量比较

为了比较4个丹参新品种（系）（99-2、99-3、‘陕黄’和山东丹参）的质量,本研究采用HPLC-UV方法（Venusil ASB-C18柱）,分别以甲醇-水、乙腈-0.01%磷酸水为流动相等度洗脱,流速为0.8 mL/min,检测波长为270 nm和286 nm,测定了丹参中的6种成分（丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮IIA、原儿茶酸、迷迭香酸、丹酚酸B）的含量。结果表明不同品种的丹参质量差异显著,所测6种成分中除迷迭香酸外,其余5种均在99-3中含量最高,迷迭香酸的含量也仅次于99-2;‘陕黄’中只检测到4种成分（隐丹参酮、原儿茶酸、迷迭香酸、丹酚酸B）,其含量均低于其他3个品种;99-2的4种（丹参酮IIA、原儿茶酸、迷迭香酸、丹酚酸B）成分含量高于山东丹参。HPLC-UV方法测定丹参化学成分含量简便可靠;4个丹参品种（系）中99-3品质佳,质量优于其他品种,具有较高的商业价值。     

鲁西南黄河冲积平原丹参玉米间作高效栽培技术

丹参与玉米间作高效栽培技术是一种适合鲁西南黄河冲积平原气候条件和土壤环境的新型种植模式，能充分利用该区域土地、光能、空气、水肥等自然资源，有效提高单位面积产量。经检测，采收的丹参中丹参酮Ⅱ A、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ的有效成分总含量为0.609%，丹酚酸B 的含量为6.5%，均高于药典规定的含量，具有较好的药用价值。该高效栽培技术年均种植纯收益73980 元/hm2，远高于目前该区域主要种植模式小麦- 玉米种植的收益，可以在鲁西南黄河冲积平原区域推广种植。     

丹参有效成分含量与土壤因子的关系研究

摘 要：为研究丹参有效成分含量与土壤因子的关系,进行多点田间试验结合室内成分含量分析,所得数据用SPSS 11.0软件进行分析。试验结果得到：同一产地不同丹参品种及同一品种在不同产地种植其有效成分的含量有明显的差异。（系）99-2中丹参酮Ⅰ的含量与土壤细粉粒的比例呈极显著性正相关,与土壤中全氮的含量呈显著正相关;隐丹参酮的含量与土壤细粉粒的比例及全氮的含量呈极显著性正相关,丹参酮ⅡA的含量与土壤细粉粒的比例呈显著性正相关;丹酚酸B与土壤黏粒呈显著负相关。品种（系）99-5中丹参酮Ⅰ的含量与土壤细粉粒的比例呈显著性正相关,与全氮的含量呈极显著正相关;隐丹参酮的含量与土壤细粉粒比例呈显著性正相关,与土壤全氮含量呈极显著性正相关;丹参酮ⅡA的含量与土壤中细粉粒比例呈极显著性正相关;迷迭香酸的含量与土壤中细沙粒比例呈显著负相关。土壤中细粉粒比例及全氮含量的提高有利于丹参脂溶性成分的积累,而黏粒比例的增加不利于水溶性成分的积累,因而,在丹参种植过程中,针对不同类型有效成分,需要选择不同的土壤类型来生产。     

HPLC法测定丹参地上部分中丹酚酸B和迷迭香酸的含量

建立了使用HPLC同时测定丹参地上部分中丹酚酸B和迷迭香酸含量的分析方法。在流动相甲醇(A)-0.8%冰乙酸水溶液(B)梯度洗脱,流速1mL/min,柱温35℃,检测波长250nm色谱条件下测定结果表明,丹酚酸B和迷迭香酸的质量浓度分别在14.0~700.0μg/mL(r=1.0000)和12~600μg/mL(r=0.9996)的线性范围内,有良好的线性关系;丹酚酸B和迷迭香酸的检出限LOD(S/N=3)分别为0.2,0.3μg/mL,定量限LOQ(S/N=10)分别为1.0,1.0μg/mL。丹酚酸B和迷迭香酸的平均加样回收率分别为99.16%(RSD=0.735%)和101.11%(RSD=2.11%)。该方法操作简便、分析效果好、灵敏度高,具有良好的重复性和回收率,可同时测得丹参地上部分中水溶性成分丹酚酸B和迷迭香酸的含量。     

丹参活性成分丹酚酸B对运动性心肌损伤的保护作用及机制

本研究旨在探索从丹参中提取的最丰富的水溶性酚类化合物丹酚酸B在运动性心肌损伤中的保护作用以及其机制。结果显示,丹酚酸B剂量依赖性地改善了大鼠心功能,减轻了心肌损伤,并降低了血清中的心肌损伤标志物的水平。此外,丹酚酸B还抑制了心肌细胞凋亡和氧化应激反应,并调节了心肌组织中铁稳态。试验证实,丹酚酸B通过抑制铁死亡途径发挥了心肌保护作用。本研究结果表明,丹酚酸B可能成为一种天然药物,用于预防和治疗运动性心肌损伤。     

丹参酮ⅡA不同生育时期动态积累规律研究

为了解丹参酮ⅡA的积累规律,初步探索其合成机理。本研究选用7份丹参材料,测定了其不同生育时期丹参酮ⅡA含量及相对应的叶片中的叶绿素含量及过氧化物酶活性。结果表明：按照丹参酮ⅡA含量0.2%为标准,不同材料丹参酮ⅡA的积累规律略有不同;根中丹参酮ⅡA含量与相对应的叶片中的叶绿素a含量显著相关（rca＝0.458）,与类胡萝卜素含量极显著相关（rxc=0.623）,而与叶绿素b含量不相关（rcb＝0.069）;根中丹参酮ⅡA含量与相对应的叶片中POD酶活性的相关系数为0.577,呈现极显著相关性。花期丹参酮ⅡA含量有无下降现象与丹参酮ⅡA的合成效率有关;推测丹参酮ⅡA的合成途径的起始步骤可能与类胡萝卜素的合成更为类似,部分基因也与叶绿素a的合成相关基因相类似,与叶绿素b的起始步骤相差较远;丹参酮ⅡA可能与植物体内的生长素氧化有关,而POD可能也间接或直接参与了丹参酮ⅡA的合成调控。     

甘草离体培养物中总黄酮提取工艺的优化

【研究目的】对甘草离体培养物中总黄酮提取和测定工艺进行优化,以建立在室内筛选高产细胞系和试管苗株系的方法;【方法】采用超声波提取技术,对提取液、浸泡时间、提取温度等进行优化;【结果】将样品以75%甲醇浸泡6h后在32℃下超声提取两次,比色法测定总黄酮含量,加样回收率为95.3%～101.4%,相对标准偏差为1.61%。测得甘草初代愈伤组织中总黄酮含量为0.0012%～0.05%,子叶愈伤组织调控后含量高达0.08%,试管苗中总黄酮含量为1.04%～1.31%,移栽后高达4.5%。【结论】此工艺准确度较高、稳定性好、简便可行,为优良细胞系的筛选和试管苗的早期鉴定奠定了技术基础。     

干旱胁迫对盆栽“川丹参1号”生理指标及主要活性成分含量的影响

采用聚乙二醇（PEG-6000）对盆栽“川丹参1号”（CDS-1）模拟长期干旱胁迫,研究干旱胁迫对其生长情况、生理指标及主要活性成分积累的影响。结果表明,干旱胁迫显著降低CDS-1叶片中叶绿素含量,可溶性蛋白、可溶性糖和脯氨酸含量随干旱程度增加呈上升趋势,干旱胁迫下丙二醛含量显著增加,抗氧化酶（SOD、POD和CAT）活性随干旱胁迫程度增加而增加。活性成分分析表明,干旱胁迫后CDS-1根中酚酸和丹参酮类含量均有所上升,迷迭香酸和丹酚酸A含量在PEG-6000浓度为150g/L时最高,分别为CK的145%和175%,丹参酮类含量在PEG-6000浓度为50g/L时最高,增幅超60%。CDS-1在干旱胁迫下表现出适应性变化,轻度和中度干旱胁迫（PEG-6000浓度为50~100g/L）有利于CDS-1中酚酸和丹参酮类活性成分的积累,在实际生产中可通过科学控水保证和提高丹参药材的品质。     

丹参毛状根生物反应器大规模培养的研究

以总丹参酮(脂溶性成分)的含量为监测对象,利用10L的球状气升式反应器进行了丹参毛状根培养的初级放大试验,发现球状气升式反应器培养50d时丹参毛状根的增殖倍数为241．71倍,高于三角瓶摇瓶培养的丹参毛状根的增殖倍数,其总丹参酮的含量接近三角瓶摇瓶培养的丹参毛状根总丹参酮的含量。接着,以原儿茶醛和丹酚酸B这两种水溶性成分为监测对象,利用75L的气升式反应器进行了进一步的放大培养,发现它们的含量在75L的气升式反应器培养50d时所获得的丹参毛状根中与10L的球状气升式反应器培养50d时所获得的丹参毛状根中相当。这些结果表明,利用气升式反应器进行丹参毛状根初级放大和中试规模的培养是可行的,它为今后丹参毛状根的工业化生产奠定了基础,有望为象丹参这样的名贵植物资源的持续开发与利用以及绿色原料药的生产开辟一条新途径。     

旋毛虫肌幼虫总RNA提取方法研究初报

【研究目的】探索高质量的旋毛虫(Trichinella spiralis)肌幼虫总RNA提取方法；【方法】利用Trizol试剂采用三种方法提取旋毛虫肌幼虫总RNA。(1)液氮预冷的研钵中研磨新鲜虫体至样品快融化时，加入适量的Trizol，继续研磨至液状后转移到离心管中；(2)A将新分离的虫体放到-20℃预冷的研钵中，在研磨过程中不断地添加液氮以保持虫体冷冻，之后对冷冻状的样品粉末继续操作；B把液氮冻存的新鲜旋毛虫肌幼虫取出，放到-20℃预冷的研钵中重复A的操作；(3)新鲜虫体放入匀浆器中，加适量Trizol，在冰水混合物中研磨20分钟。虫体破碎后按Trizol说明书继续抽提。最后通过凝胶电泳和紫外吸收光度值检测。【结果】用液氮和Trizol结合的方法，使用新鲜样品提取旋毛虫肌幼虫总RNA，在纯度和得率上都较为理想；【结论】使用新鲜的样品，且液氮与裂解液结合，是获得高质量RNA的可行方法。     

磷和根际土壤菌群调控川丹参有效成分含量的机理

磷肥和根际土壤微生物是影响药用植物有效成分含量的关键因素,探明施磷和根际土壤微生物群落对川丹参有效成分含量的调控机理,为川丹参高产栽培提供科学依据。以过磷酸钙(Ca(H₂PO₄)₂·H₂O)为磷源,采用大田随机区组设计试验,设置了磷肥的4种施用梯度,研究川丹参收获后有效成分含量和根际土壤微生物群落组成的变化,并分析这些指标间的相关性。施磷后,丹参酮ⅡA含量逐渐降低,且不同处理间差异达显著水平(P<0.05),但丹酚酸B含量的变化不显著(P>0.05);P1和P3的细菌和真菌α多样性均低于P0,P2的细菌和真菌的α多样性高于P0。同时,变形菌门(Proteobacteria)、芽单胞菌门(Gemmatimonadota)、拟杆菌门(Bacteroidota)、蓝藻菌门(Cyanobacteria)、子囊菌门(Ascomycota)和被孢霉门(Mortierellomycota)的相对丰度总体呈上升趋势,绿弯菌门(Chloroflexi)、髌骨菌门(Patescibacteria)、疣微菌门...     

丹参多倍体开花前后丹酚酸生物合成关键酶活性的变化

为探讨开花对丹参多倍体丹酚酸积累的影响,以丹参多倍体为材料,探讨花蕾期、盛花期、衰败期叶片中丹酚酸合成关键酶活性的变化。结果表明,可溶性蛋白随着丹参花期的进行,表现出先升后降,在盛花期达到峰值,而5号丹参可溶性蛋白含量在各时期均较其他丹参高。从酪氨酸氨基转移酶(TAT)、肉桂酸-4-羟化酶(C4H)和苯丙氨酸裂解酶(PAL)酶活性变化看,不同丹参在花蕾期TAT酶活性比开花后高,尤其是在盛花期时酶活性明显降低;PAL酶活性基本呈逐渐上升趋势;C4H酶活性变化随着花期的进行先降低后升高;但5号丹参比其他丹参的3种酶活性在各时期高,这可能是其丹酚酸含量较其他丹参高的原因之一。     

种植密度对丹参产量和品质的影响

以四川丹参作为试验材料，通过设置不同的种植密度，检测丹参根部干物质以及有效成分积累动态，明确种植密度对丹参产量和品质的影响。结果表明，移栽后185 d前单位面积丹参根部干物质量为密度Ⅲ(18万株/hm²)>密度Ⅱ(15万株/hm²)>密度Ⅰ(12万株/hm²)，后期密度Ⅲ下丹参营养和生长空间受限，移栽后215 d时单位面积丹参根部干物质量为密度Ⅱ>密度Ⅲ>密度Ⅰ。种植密度对不同的有效成分影响不同，丹参素、原儿茶醛、隐丹参酮含量与种植密度负相关，丹参酮ⅡA含量与种植密度正相关。研究表明，密度Ⅱ(15万株/hm²)下丹参产量、品质较高。     

欧李叶片中多酚的提取工艺优化

【研究目的】以欧李叶片为试验材料,多酚提取率为评价指标,探讨欧李叶片多酚提取的工艺条件。【方法】以丙酮为提取剂,选定浸提时间、溶剂浓度、料液比、浸提温度为考察的4个因素,以L9（34）正交试验设计,采用常规提取法和微波提取法研究提取欧李叶片中多酚的最佳条件。【结果】利用常规法从欧李叶片中提取多酚各因素对多酚提取率影响的主次顺序为：浸提温度＞浸提时间＞固液比＞提取剂浓度,得出最优方案为A1B3C3D3,与试验中最佳处理组合A1B3C3D3相一致;利用微波法从欧李叶片中提取多酚各因素对提取率影响的主次顺序为：提取剂浓度＞固液比＞辐射时间＞辐射功率,得出最优方案为A1B2C3D2,与试验中最佳处理组合A1B2C2D2不一致。【结论】欧李叶片中多酚提取的最佳工艺为70%丙酮溶液,固液比1︰450,浸提时间1.5 h,浸提温度70℃。     

发芽提高南瓜籽油提取率和亚油酸含量的研究

【研究目的】研究发芽条件对南瓜籽油提取率和亚油酸含量的影响．【方法】以发芽率为80％的南瓜籽为原料,采用CO2超临界萃取法提取南瓜籽油,采用气相色谱法对南瓜籽油中的亚油酸含量进行测定,对发芽前后提取的南瓜籽油中亚油酸的含量进行对比;【结果】在发芽温度为22℃,发芽时间为2d．浸泡时间为1h的条件下,南瓜籽油提取率提高了18．1％;当发芽温度为28℃,发芽时间为4d,浸泡时间为5h时,其游离脂肪中的亚油酸含量提高了13．23％。【结论】采用发芽的方法可提高南瓜籽油的提取率及亚油酸的含量。     

酶解油菜蜂花粉抑制超氧阴离子自由基的研究

【研究目的】探讨油菜蜂花粉中水溶性有效组分的抗氧化能力及其在黄嘌呤氧化酶体系中抑制O2-.的机理。【方法】采用酶解技术和膜分离技术提取分离油菜蜂花粉中水溶性抗氧化有效组分,用黄嘌呤氧化酶体系测定酶解物的不同相对分子质量级分淬灭超氧阴离子自由基(O2-.)的能力。【结果】实验结果表明,经酶解和超滤后得到的相对分子质量大于1000的组分抑制O2-.的效果非常显著【结论】酶解和膜分离技术是提高花粉抗氧化功效成分含量的有效途径。     

酶解油菜蜂花粉抑制超氧阴离子自由基的研究

【研究目的】探讨油菜蜂花粉中水溶性有效组分的抗氧化能力及其在黄嘌呤氧化酶体系中抑制O2-.的机理。【方法】采用酶解技术和膜分离技术提取分离油菜蜂花粉中水溶性抗氧化有效组分,用黄嘌呤氧化酶体系测定酶解物的不同相对分子质量级分淬灭超氧阴离子自由基（O2-.）的能力。【结果】实验结果表明,经酶解和超滤后得到的相对分子质量大于1000的组分抑制O2-.的效果非常显著【结论】酶解和膜分离技术是提高花粉抗氧化功效成分含量的有效途径