3种植物多糖对鸡外周血和脾脏淋巴细胞体外增殖作用的影响

本试验旨在比较3种植物多糖对鸡外周血T淋巴细胞和脾脏B淋巴细胞体外增强免疫活性的研究.通过酶学检测法测定3种植物多糖对鸡胚成纤维细胞的安全浓度,MTT法比较3种植物多糖单独刺激和PHA协同刺激对鸡外周血T淋巴细胞增殖指数的影响,同时比较3种植物多糖单独刺激及与LPS协同刺激对鸡脾脏B淋巴细胞增殖率的影响.结果显示,黄芪多糖和桑叶多糖具有较高的细胞安全浓度,在64~512 μg/mL时,3种植物多糖对鸡外周血T淋巴细胞和脾脏B淋巴细胞的增殖作用较强.结果表明,3种植物多糖对鸡外周血和脾脏淋巴细胞都有不同程度的体外增殖作用,其中黄芪多糖的增殖作用最强,桑叶多糖其次,山药多糖最差.     

九种中药成分对体外培养小鼠淋巴细胞功能的影响

为进一步探索黄芪多糖等9种中药成分免疫增强活性的作用机理并比较各成分之间免疫增强活性的强弱，在体内试验的基础上，用脾淋巴细胞增殖反应和抗体夹心酶联免疫吸附试验测定了它们对体外培养的小鼠淋巴细胞功能的影响。结果表明，人参皂甙、蜂胶黄酮、黄芪多糖、淫羊藿黄酮、淫羊藿多糖都能显著地直接或协同ConA刺激脾和外周血淋巴细胞增殖，也能显著增加LPS诱导的脾淋巴细胞增殖活性和显著升高体外培养的小鼠脾淋巴细胞产生的IgG水平；当归多糖能协同ConA和LPS的诱导活性，提高小鼠脾淋巴细胞体外培养系统的IgG水平；黄芪皂甙能直接和协同LPS刺激淋巴细胞增殖，板蓝根多糖则仅能促进LPS的诱导活性，蜂胶多糖的作用则均不明显。     

玉屏风散总多糖对小鼠派氏结淋巴细胞活化及功能影响的研究

通过研究玉屏风散总多糖对体外培养小鼠派氏结(Peyer's patches,PPs)淋巴细胞活化和功能变化的影响,探讨其对小鼠肠黏膜免疫应答的作用机制。体外培养小鼠PPs淋巴细胞,MTT法检测PPs淋巴细胞加入Con A协同不同浓度玉屏风散总多糖(0. 5、1、2、4、8 mg/m L)在作用不同时间(0、8、12、16、24、36 h)后的增殖变化; ELISA试剂盒检测细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ的含量变化;流式细胞术研究PPs淋巴细胞中T、B淋巴细胞的比例变化,进行T淋巴细胞的亚群分析。结果发现,不同浓度的玉屏风散总多糖均能增强PPs淋巴细胞的活性,单独作用时,浓度达到1 mg/m L以上,差异极显著(P 0. 01);与Con A刺激组比较,Con A与玉屏风散总多糖协同作用时,浓度达到2 mg/m L以上差异极显著(P 0. 01),且对PPs淋巴细胞增殖活化有明显促进作用(P 0. 01)。同时,玉屏风散总多糖可明显促进小鼠PPs淋巴细胞产生和分泌IL-2、IL-4、IFN-γ,改变PPs淋巴细胞中T、B淋巴细胞的比值,且可显著提高CD4+/CD8+的比值。结果表明,玉屏风散总多糖能显著提高小鼠PPs淋巴细胞活性,增强肠黏膜免疫功能。     

黄芪杂多糖对仔猪IL-6和PR-39表达的影响

通过运用细胞的分离培养技术、MTT法、ELISA检测和实时荧光定量PCR技术,比较不同剂量黄芪杂多糖(AHPS)注射组与空白对照组的仔猪血液内的T淋巴细胞和单核细胞的增殖活性、IL-6含量;骨髓中抗菌肽PR-39基因的表达水平,研究AHPS对仔猪内源性抗菌肽PR-39的表达调控作用。试验结果表明,AHPS对仔猪血液中的单核细胞和T淋巴细胞有促进作用;IL-6含量在同一时间内呈剂量依赖性增加,随着注射时间的延长逐渐增多;AHPS对PR-39的表达呈显著地上调作用且呈剂量依赖性。根据相关文献和本试验结果推测,黄芪杂多糖可能通过调控IL-6和PR-39的表达提高仔猪的免疫力。     

黄芪多糖和灭活H9N2亚型禽流感病毒对C57BL/6小鼠外周血T、B淋巴细胞影响的研究

为了评价黄芪多糖作为疫苗佐剂的潜力,试验用黄芪多糖和灭活的H9N2亚型禽流感病毒免疫C57BL/6小鼠,将20只小鼠均分为4组,第1组为黄芪多糖组(免疫黄芪多糖),第2组为灭活H9N2亚型禽流感病毒组(免疫灭活H9N2亚型禽流感病毒),第3组为混合组(免疫黄芪多糖和灭活H9N2亚型禽流感病毒),第4组为生理盐水组(注射生理盐水),通过淋巴细胞增殖试验和流式细胞术对C57BL/6小鼠外周血淋巴细胞的增殖反应、B淋巴细胞和T淋巴细胞的变化及T淋巴细胞亚群比值变化进行研究。结果表明:混合组对小鼠外周血淋巴细胞的增殖有促进作用,可以提高小鼠外周血B淋巴细胞和CD~+_3CD~+_4T淋巴细胞亚群比例,并对小鼠外周血T淋巴细胞亚群有调节作用。说明灭活H9N2亚型禽流感病毒与黄芪多糖混合时具有协同作用。     

黄芪多糖对小鼠免疫细胞信号转导相关分子的影响

为探讨黄芪多糖(APS)免疫调节的作用机理，观察了黄芪多糖对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮(NO)生成、对体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞内游离钙离子水平和蛋白激酶C(PKC)活性的影响。结果显示黄芪多糖能明显促进小白鼠腹腔巨噬细胞NO生成，显著升高小鼠脾淋巴细胞内游离钙离子的水平，引起细胞PKC活性明显升高。提示黄芪多糖通过NO介导信号传递通路，调节脾淋巴细胞内游离钙离子的浓度，升高细胞蛋白激酶活性而影响机体免疫细胞的信号转导，发挥其免疫调节作用。     

4种中药多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

本试验旨在研究黄芪多糖(APS)、芦荟多糖(AP)、银耳多糖(TFPS)、黑木耳多糖(AAP)4种中药多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.将4种多糖体外作用于小鼠脾淋巴细胞;采用MTT法测细胞增殖活性.结果显示,与对照组相比较,4种多糖在浓度为400 μg/mL时均能促进静止态淋巴细胞增殖;多糖协同ConA或LPS作用于淋巴细胞,4种多糖表现不同程度的增殖促进作用.在静止态淋巴细胞增殖以及协同丝裂原作用于淋巴细胞的增殖试验中,芦荟多糖所表现的促进增殖作用较强于其他3种多糖.     

枸杞多糖对雏鸡淋巴细胞体外增殖及分泌IL-2的影响

为探讨枸杞多糖(LBP)对雏鸡T、B淋巴细胞体外增殖的影响,将不同浓度的LBP分别加入到用植物血凝素(PHA)刺激的体外培养的雏鸡胸腺、外周血、脾脏淋巴细胞中,以及用细菌脂多糖(LPS)刺激的体外培养的雏鸡法氏囊、外周血、脾脏淋巴细胞中,分别用MTT比色法和ELISA法测定淋巴细胞增殖的变化以及IL-2的分泌量.结果显示:(1)LBP在一定浓度范围内时,均能刺激T、B淋巴细胞的增殖和促进IL-2的分泌,且随着多糖浓度的增加而增加；(2)LBP对同一器官来源的T、B淋巴细胞的OD值随着雏鸡日龄的增长均呈现增长趋势；(3)同浓度LBP对相同日龄雏鸡胸腺T淋巴细胞和法氏囊B淋巴细胞的OD值均高于外周血和脾脏的T、B淋巴细胞OD值.结果表明LBP能够促进雏鸡淋巴细胞的增殖和IL-2的分泌,并且对淋巴细胞增殖的促进作用有一定的量效、时效关系和组织相关性.     

天门冬多糖对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响

本试验旨在研究天门冬多糖对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响。从正常小鼠分离脾脏淋巴细胞体外培养,在细胞培养体系中分别加入终浓度为50、100、200、400 mg/L天门冬多糖或配合刀豆素(5 mg/L)作用24、487、2 h,以MTT法测定细胞的增殖程度。结果表明,天门冬多糖可显著促进体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞增殖,并与ConA有协同作用。     

玉屏风多糖对小鼠脾脏形态结构及免疫功能的影响

为观察玉屏风多糖(Yupingfeng Polysaccharides,YPF-P)对小鼠脾脏组织结构的影响,探讨玉屏风多糖的复方效应,试验将80只SPF级小鼠随机分成5组(玉屏风多糖组、黄芪多糖组、白术多糖组、防风多糖组、生理盐水组),每天分别按体重200 mg/kg剂量灌服玉屏风多糖及其组方内的黄芪多糖、白术多糖和防风多糖以及生理盐水,连续灌服7 d,第8天剖杀,首先测定脾脏质量和脾脏指数,观察脾脏形态结构和组织学变化;再进行脾脏淋巴细胞体外培养,研究脾脏淋巴细胞活性的变化。结果表明:与生理盐水组相比,除白术多糖组外,其余多糖组小鼠脾脏均呈现不同程度的体积增大、脾脏指数升高,但无显著性差异(P0. 05);而玉屏风多糖组和黄芪多糖组在脾脏淋巴组织增生和淋巴细胞活性增强的变化上与其他3组间差异极显著(P0. 01),其中以玉屏风多糖增强作用最为明显。说明玉屏风多糖可促进小鼠脾脏组织增生,增强淋巴细胞活性,能有效增强脾脏免疫功能,且作用优于其组方内各单方多糖。