鉴别显色培养基在奶牛乳房炎病原菌快速鉴定中的应用

为研发用于奶牛乳房炎常见病原菌分离鉴定的鉴别显色培养基,并检验其与普通分离鉴定培养基辅以生化鉴定和16S rRNA核酸序列测定两种传统方法鉴定结果的一致性,笔者以生物信息学方法筛出各种属细菌的特异性酶、可作为唯一碳源发酵产酸的碳源,然后合成酶显色底物,连同碳源、酸碱指示剂制备显色培养基,将各种属标准菌株、野生型菌株涂布培养,评估菌落形态、菌落颜色及培养基基质颜色变化。采集隐性乳房炎(CMT法检测)及临床型乳房炎病例的牛奶样品(絮状物、凝块、清亮状或血乳)共计482份,用鉴别显色培养基和两种传统方法进行病原菌的分离、鉴定。鉴别显色培养基上菌落纯化后提取DNA用于16S rRNA序列扩增,产物送去测序(n=194)。以两种传统方法为参考,判定鉴别显色培养基鉴定病原菌的可靠性,用SAS 9.4的FREQ程序计算鉴别显色培养基的简单科恩κ系数。鉴别显色培养基上常见乳房炎病原菌不同种属的菌落形态和培养基基质颜色明显不同,肉眼即可辨别。鉴别显色培养基与两种传统方法鉴定结果的一致性参数分别为κ=0.70、κ=0.96。鉴别显色培养基能够作为常见奶牛乳房炎病原菌的标准鉴定方法。     

猪流行性腹泻病毒变异毒株与传统毒株RT-PCR鉴别诊断方法的建立

为建立猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异毒株和传统毒株RT-PCR鉴别诊断方法,本研究根据GenBank中PEDV变异毒株(JN381492.1)和传统毒株(JN599150.1)S基因序列,设计两对特异性引物,进行反应条件优化。结果显示:建立的RT-PCR鉴别诊断方法能够特异性区分PEDV变异毒株和传统毒株,能扩增出变异毒株442 bp的目的片段,而传统毒株是270 bp的目的片段,并且与猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪呼肠孤病毒、猪瘟病毒、猪脑心肌炎病毒、轮状病毒均无交叉反应;敏感性结果表明该方法能检测出变异毒株和传统毒株的底限均为4×104 copies;利用该方法对42份临床腹泻样品进行检测,PEDV阳性率为69%(29/42),变异毒株占总PEDV毒株的93.1%(27/29),传统毒株占总PEDV毒株的6.9%(2/29)。该RT-PCR方法为PEDV的病原鉴别诊断和流行病学调查提供了技术手段。     

警犬双向鉴别模式的探讨

<正>鉴别的稳定性一直是困扰警犬技术工作者的难题,我们探索了一种双向鉴别模式,经过近10个月的单犬实验,证实了该模式的可行性。一、传统鉴别模式缺陷分析(一)警犬鉴别模式有肯定、否定两种。传统肯定鉴别训练,要求警犬经过嗅认嗅源、分辨被鉴物罐组并反应所求物罐的过程,而否定鉴别训练,要求警犬嗅认嗅源、分辨被鉴物罐组,确认无所求物并回到训导员身     

保护遗传学方法在生物多样性监测和评价领域的应用研究(英文)

根据环境保护部文件《中国生物多样性保护战略和行动指南(2010-2030)》,遗传资源的持续丢失已经成为威胁中国生物多样性的三大问题之一,因此遗传多样性监测计划的重要性需要在将来的环境监测工作中得到体现。在两条环境保护部标准《区域生物多样性评价标准(HJ623-2011)》和《生物遗传资源采集技术规范(HJ628-2011)》开始贯彻实施后,遗传资源的鉴别和收集工作成为生物多样性评价项目中不可缺少的内容。本文综述了细胞学标记技术和DNA分子标记技术在植物品种鉴别研究中的前沿性应用,并在此基础上讨论了DNA标记技术在生物多样性监测与评价工作中大规模应用的可行性。     

超声弹性成像技术鉴别犬肿块良恶性的应用

选取宠物临床符合要求的犬肿块病例108例进行超声影像学研究,然后进行组织病理切片检查,最后对结果进行统计学分析。研究结果为应用超声弹性成像技术诊断肿块良恶性的准确率为94.4%(102/108);应用传统超声技术(即二维灰阶超声、彩色血流多普勒超声)判定肿块良恶性的准确率分别为33.3%、55.5%,传统超声技术与超声弹性成像技术结果比较差异极显著(P0.01)。结果表明,超声弹性成像技术在鉴别犬肿块良恶性方面与传统超声技术相比有着明显的特异性和准确性,该技术可作为今后宠物临床犬肿块良恶性的一种重要鉴别方法。本试验为提升宠物临床肿块性疾病的鉴别诊断水平有着一定的参考价值。     

追踪犬发展现状及原因探析

正伴随着我国警犬技术的飞速发展,我们看到了一个较为奇特的现象,一些新兴的警犬技术科目(搜毒、搜爆、治安巡逻等)迅速发展,而传统的警犬技术使用科目(追踪、鉴别、搜捕等)则有所弱化,这一现象不得不引起我们深思。统计情况表明,我国公安机关一线使用的追踪犬,仅占工作犬数的12.7%,与20世纪90年代末的78%(多数犬追踪、鉴别、搜捕科目集于一身)相比有了较大幅度的回落(所占比例逐年降低),并     

DGGE技术在瘤胃微生物多态性研究中的应用

利用传统的方法很难鉴别瘤胃微生物的差异,变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术就很好地解决了该问题.DGGE是一种新型的用于检测核酸变异和点突变的电泳方法,具有可靠性强、重现性高、方便快捷等优点,可应用于瘤胃微生物群落多样性和动态性分析.     

近红外光谱结合线性判别快速无损鉴别婴幼儿和中老年奶粉

应用近红外光谱分析技术(NIRS)并结合线性判别,对中老年和婴幼儿2种不同年龄阶段奶粉品种进行鉴别。对奶粉样本的原始光谱进行一阶微分处理后,采用Kennard-Stone法对80个样本进行挑选,选出60个作为训练集,剩余的20个作为预测集。采用留一交叉验证评价算法,选取最优主成分数2建立模型,并对测试集进行预测,正确率为100%。说明提出的方法具有很好的分类和鉴别作用,为婴幼儿奶粉的品种快速无损鉴别提供了一种新方法。     

口蹄疫病毒感染与免疫鉴别诊断及免疫评价二联试纸的优化

【目的】建立口蹄疫病毒(FMDV)感染与免疫鉴别诊断及免疫评价二联试纸稳定的生产工艺,促进其产业化生产及临床应用。【方法】本研究以胶体金免疫探针结合猪IgG,FMDV结构蛋白(SP)及非结构蛋白(NSP)的表位多肽偶联载体蛋白制备人工抗原,设置两条检测线精准拦截抗体的检测模式,以试纸条特异性及敏感性为评价指标,对胶体金免疫探针用蛋白、试纸拦截用多肽抗原、检测线位置及喷膜缓冲液、金标蛋白保存液、样品垫缓冲液以及样品稀释液等参数进行优化。采用优化后的试纸检测266份田间猪血清样品,并与口蹄疫O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒(LPB ELISA)和3ABC阻断ELISA抗体检测试剂盒(3ABC ELISA)检测结果进行对比,计算该试纸与商品ELISA试剂盒的符合率。【结果】经优化后,口蹄疫感染与免疫鉴别诊断及免疫评价二联试纸生产工艺参数如下：以胶体金标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)为免疫探针;选择混合多肽的形式设置拦截线,以非结构蛋白多肽(BSA-NSPs)喷涂T1线,结构蛋白多肽(BSA-SPs)喷涂T2线,以0.1 mol/L Tris-HCl为喷膜缓冲液;以ddH₂     

警犬平台鉴别的训练方法及效果分析

警犬鉴别平台这一设备因其在气味载体、操作方式等方面明显区别于传统的平面鉴别或罐内鉴别，故有其相应的、独特的训练方法。本文旨在通过对平台鉴别的训练方法和效果进行研究，进而总结出一套适合警犬进行平台鉴别的训练方法。