豚鼠对猪细小病毒弱毒苗抗体反应的研究(摘要)

用不同批次、不同剂量、不同保存时间的猪细小病毒Ｎ株弱毒苗接种豚鼠 ,观察豚鼠对ＰＰＶＮ株弱毒苗的抗体反应。其结果如下 :用 4种不同剂量的ＰＰＶＮ株弱毒苗免疫豚鼠 ,免疫后 14天均产生抗体反应 ,ＰＰＶＨＩ价分别为 :0 1ｍｌ剂量为 1:16～ 1:6 4;0 2ｍｌ为1:8～ 1:32 ;0 5ｍｌ为 1:16～ 1:32 ;1 0ｍｌ为 1:16～ 1:6 4,而对照豚鼠抗体反应为阴性 ,可见仅需 0 1ｍｌＰＰＶＮ株弱毒苗便可引起豚鼠产生抗体反应。同时比较了不同批次的ＰＰＶＮ株弱毒苗接种豚鼠产生抗体反应的情况 ;3批ＰＰＶＮ株弱毒苗接种豚鼠后 14天全部出现抗体反…     

猪细小病毒N株弱毒疫苗免疫产生期最小免疫量和安全性测定

猪细小病毒N株弱毒疫苗（PPVN株）是广西兽医研究所蒋玉雯等从广西初产母猪所产死胎脏器中分离出的一株PPV自然弱毒株,经生物学与免疫学特性研究证明该弱毒株具有良好的免疫原性和安全性,可作为弱毒疫苗用于预防猪细小病毒感染的发生。本研究对该弱毒疫苗进行了最小免疫量、免疫产生期和安全性测定,现将结果报告为下：     

猪细小病毒生物学特性研究

应用ＰＫ－１５传代细胞复制猪细小病毒（ＰＰＶ）参考株ＮＡＤＬ－２和云南分离株ＫＭ，研究得出细胞培养物半数细胞感染量分别为１０＾－７．９／ｍｌ和１０＾－６．８／ｍｌ经ＣｓＣｌ密度梯度离心，两种病毒颗粒其浮力密度值分别为１．３３ｇ／ｃｍ＾３和１．３９／ｃｍ，电镜观察病毒粒子呈圆形，直径约２０ｎｍ。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析，表明纯化的ＰＰＶ细胞培养毒，主要含两种蛋白成分，分子量     

狂犬病 犬肠炎 犬瘟热 犬腺病毒病犬副流感五联弱毒冻干疫苗的研究

从国外引进的犬瘟热病毒（ＣＤＶ）、犬细小病毒（ＣＰＶ）、犬腺病毒－２型（ＣＡＶ２）和犬副流感病毒病毒（ＣＰＩＶ）四联弱毒样品中，分离筛选出增殖性良好的ＣＰＶ０ＸＮ１，ＣＡＶ２－ＸＮ３和ＣＰＩＶ－ＸＮ４株。另外还通过离体异种细胞交叉传代，获得的ＣＤＶ－ＸＮ１１１２弱毒株；从狂犬病毒株疫苗样品中筛选出ＥＲＡ８３６株。经试验证明这５株病毒在５代以内可作为制苗用种毒。采用静置和旋转培养法高滴度扩增这５株弱     

猪细小病毒N株弱毒苗田间试验

猪细小病毒感染普遍流行于世界各地猪群,为了有效防制该病,我们研制出能预防该病感染的猪细小病毒N株弱毒疫苗(PPV-N株)[1].该弱毒苗具有良好的免疫原性和安全性[2].我们按要求制备三批PPV-N株弱毒疫苗对三个规模化猪场的后备母猪进行田间试验,现将结果报告如下.     

用豚鼠检测猪细小病毒N株弱毒苗的血凝抑制抗体

由于猪细小病毒（ＰＰＶ）血清型单一及其高免疫原性,使得疫苗接种成为控制ＰＰＶ感染行之有效的方法。但检测ＰＰＶ疫苗的效力要求使用ＰＰＶ血清阴性的母猪,不仅成本高,而且管理和操作费时费力,同时不容易找到ＰＰＶ血清阴性的母猪,为了解决这一问题,国外曾试图寻找一种实验动物模型作为ＰＰＶ疫苗效力检测。Ｊｏｏ等［１］曾报道用豚鼠、兔和猪对ＰＰＶ灭活苗的抗体反应,证明豚鼠和兔对ＰＰＶ疫苗的血清学反应与猪相似,提供了用实验动物作为ＰＰＶ疫苗效力试验的可能性。国内潘雪珠等［２］也证明了豚鼠对ＰＰＶ灭活苗的抗体反应…     

猪细小病毒灭活苗免疫豚鼠和猪抗体反应比较

猪细小病毒灭活苗对预防由ＰＰＶ引起的母猪繁殖障碍效果良好，Ｊｏｏ等（１９８４）报告了灭活苗接种豚鼠可产生抗体反应，本研究旨在观察豚鼠接种ＰＰＶ灭活苗后的抗体产生规律及特异性。我们用１３批ＰＰＶ灭活苗免疫３９只ＰＰＶ阴性豚鼠和猪，每批次各３只，免疫后阳性率１００％，平均ＨＩ价豚鼠为３２０－１２８０，猪为２０－３２０。     

猪细小病毒灭活苗免疫豚鼠和猪抗体反应比较

猪细小病毒（ＰＰＶ）灭活苗对预防由ＰＰＶ引起的母猪繁殖障碍效果良好，Ｊｏｏ等（１９８４）报告了灭活苗接种豚鼠可产生抗体反应．本研究旨在观察豚鼠接种ＰＰＶ灭活苗后的抗体产生规律及特异性．我们用１３批ＰＰＶ灭活苗免疫３９只ＰＰＶ阴性豚鼠和猪，每批次各３只，免疫后阳性率１００％，平均ＨＩ价豚鼠为８２０～１２８０，猪为２０～３２０。     

猪细小病毒四川毒株的免疫原性研究

用兔和猪两种动物模型结合猪的繁殖性能生产指标综合主人了猪细小病毒（ＰＰＶ）四川毒株ＳＲ－１、ＳＲ－２和ＳＲ－３的免疫原性。试验结果表明，ＰＰＶ ＳＲ－１和ＳＲ－３免疫兔和猪后期抗体效介上升最快，下降也较为缓慢；免疫母猪窝总产仔数高，不出现死产和干尸化现象，窝分散率为０；ＳＲ－２株在仔猪原代肾细胞上的产毒量较高，可以作为疫苗毒株。     

聚合酶链反应检测猪细小病毒的研究

本研究成功地建立了检测猪细小病毒（ＰＰＶ）的聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术。以１６个核苷酸引物对首次完成了ＰＰＶＤＮＡ结构蛋白ＶＰ１编码区２２８ｂｐ片段的扩增。同样数目的另一引物对，也成功扩增了Ｖｐ２编码区１５８ｂｐＤＮＡ片段。ＰＰＶＢＭ－１株与其它国内分离株（广西株、天津株和哈尔滨株）均出现相同扩增结果。琼脂糖凝胶电泳显示了特异条带（ＶＰ１２２８ｂｐ．Ｖｐ２１５８ｂｐ），而伪狂犬病病毒、犬细小病毒均未扩增，表明了本方法的特异性。同时，限制性内切酶分析（Ｖｐ１２２８ｂｐ及Ｖｐ２１５８ｂｐ分别含单一ＰｖｕⅡ、ＥｃｏＲⅠ位点），也证实了特异性。本方法敏感性高，可检出１０ｆｇ模板ＤＮＡ。既可作样品的快速检测，又能检查细胞系的污染。具有特异、简便、快速的优点。     

地高辛标记猪细小病毒核酸探针的研制

利用ＰＳｔⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切及低熔点琼脂糖凝胶电泳技术，从重组质粒ＰＵＰ中回收３．０ｋｂ猪细小病毒ＤＮＡ片段。以地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ）标记后制备探针。运用该探针对作者分离并鉴定的７株猪细小病毒及ＰＰＶ－ＢＭ１株、四川株、Ｚ株、广西株、天津株进行打点杂交，并以具有相同临床症状的猪病毒性疾病的猪瘟病毒、日本乙型脑炎病毒、伪狂犬病病毒以及ＰＵＰ质粒、ＰＫ－１５为对照。结果探针与猪细小病毒ＤＮＡ、ＰＵＰ质粒的杂交呈阳性反应，而对照病毒、ＰＫ－１５呈阴性反应，探针的最低检出限量为４０ｐｇＤＮＡ。结果表明，该探针具有特异性强、敏感性高，可用于猪细小病毒的检测     

抗小鹅瘟病毒中和性单克隆抗体研制及实验防治效果

用淋巴细胞杂交瘤技术研制出１１株抗小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）单克隆抗这些单抗仅与ＧＰＶ反应，与其它细小病毒（ＰＣＰＶ、ＦＰＶ、ＰＰＶ）和其它禽病毒（ＮＤＶ，ＩＢＤＶ，ＤＨＶ、ＤＰＶ）均不反应，腹水单抗的ＥＬＩＳＡ效价达１０＾－５－１０＾－７，琼扩沉淀效效价达１：２０－１：５１２，鹅胚中和效价达１：３０－１：１２２，鹅体中和效价为１：５４－－１：９６。ＧＰＳ１和ＧＰＧ５２株单抗对人工感染ＧＰＶ的雏鹅具有良     

猪细小病毒病弱毒冻干疫苗预防猪细小病毒病

猪细小病毒 (ＰＰＶ)是引起母猪繁殖障碍的重要病因之一 ,可引起母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔等 ,对养猪业造成严重的经济损失。 1 987年 ,我所研制成功的猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗 ,对于预防ＰＰＶ引起的母猪繁殖障碍起到了积极的作用 ,并于 1 994年荣获了国家级新兽药证书。当前养猪业正趋向规模化、集约化 ,根据综合防疫的需要 ,除了有猪细小病毒病灭活疫苗外 ,还十分需要有猪细小病毒病弱毒冻干疫苗 ,供用户选择应用 ,为此 ,我们又致力于弱毒疫苗的研究工作。将ＰＰＶ接种易感细胞 ,并连续传代 ,成功培育了一株安全性和免疫原性良…     

应用地高辛探针诊断猪细小病毒病

利用地高辛标记的ＰＵＰ重组质粒探针,分别对了株猪细小病毒（ＰＰＶ）分离毒及ＰＰＶ－ＢＭ１株细胞培养物的ＤＮＡ抽提物进行斑点杂交,结果均为阳性,而对照的猪瘟产为狂犬 病病毒ＰＲＶ）、乙型脑炎病毒及ＰＫ－１５细胞为阴性;对７份自然感染病料进行处理,杂交结果为阳性反应,对照健康猪组织,猪瘟病料、猪伪狂犬病病料则为阴性。     

新城疫病毒弱毒株分子生物学特性的研究

于１９９６年从长春地区一养鸡场分离到一株新城疫病毒（ＮＤＶ长春株）,经过病毒生物学特性的研究表明该ＮＤＶ毒株为弱毒株。将ＮＤＶ长春株纯化培养后,提取病毒ＲＮＡ,经ＲＴ－ＰＣＲ扩增Ｆ基因,并测定出Ｆ基因的全部核苷酸序列为１７５８ｂｐ,编码有５５３个氨基酸残基。与国内外发表的部分ＮＤＶ病毒的强毒株和弱毒株的相同序列进行比较,其核苷酸同源性在８８．２％￣９６．７％之间,氨基酸同源性在９０．１％￣９８．１％之间,并与所有弱毒株Ｆ蛋白裂解位点区（１１２￣１１７）氨基酸序列Ｇｌｙ－Ａｒｇ／Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－Ｇｌｙ／Ｓｅｒ－Ａｒｇ－Ｌｅｕ相同,从基因和分子水平上进一步证明ＮＤＶ长春株为ＮＤＶ弱毒株。     

猪细小病毒感染症在广西的流行与防制研究

猪细小病毒感染症在广西的流行与防制研究蒋玉雯，黄安国，郑儒标，冯军，白安斌，陈西宁，盘宝进猪细小病毒感染是由猪细小病毒（ＰｏｒｃｉｎｅＰａｒｖｏｖｉｒｕｓ．简称ＰＰＶ）引起的一种猪的繁殖障碍性疾病、以胎内感染、胚胎和胎儿死亡以及胎儿木乃伊化为特征，造...     

猪细小病毒和乙型脑炎病毒感染的防制对策探讨

猪细小病毒（ＰＰＶ）和乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）感染是我国猪繁殖障碍性疾病的两大主要病原，它们引起妊娠母猪胚胎死亡、重吸收、死胎、木伊胎、弱产等。近年来我国猪细小病毒和乙型脑炎病毒感染报道大量增加，给养猪生产造成了严重的经济损失，为了阐明ＰＰＶ和ＪＥＶ感...     

猪细小病毒病及研究进展

猪细小病毒（简称ＰＰＶ）是引起猪繁殖障碍的病原体之一，主要引起母猪的繁殖障碍，以胎儿感染死亡，产出死胎，木乃伊化胎，畸形胎和不孕为主要症状，而母猪本身并不表现临床症状，其他猪感染后也无明显的临床症状。猪细小病毒是Ｍａｙｒ和 Ｍａｈｅａｌ于 １９６６年首次发现，并证实了其病原作用。此后许多国家相继分离到该病毒，我国于１９８２年由中监所成功分离到该病毒，虽然各地所分离的ＰＰＶ来源不同，名称各异，但均是同一型，血清学上无差别。目前在我国该病污染十分严重，阳性率可达９０％以上［１］。１病原学 猪细小病毒属…     

猪细小病毒N株弱毒苗的田间试验

用猪细小病毒N株弱毒苗对广西11个猪场的后备母猪,在配种前进行了田间免疫试验,共免疫1713头猪,并于免疫前后检测了247头猪的细小病毒血凝抑制抗体,结果显示免疫后有95.6％的猪HI抗体上升。效检与田间试验的结果相一致。观察了121头免疫猪产仔成绩,免疫猪比对照猪平均每窝多产活仔2.9头,少产死胎、木乃伊、弱仔3.6头。近年来我们的研究证明,广西猪群普遍存在并广泛流行猪细小病毒病。为了更有效的防制本病,我们研究出一自然弱毒苗,并对其安全性和免疫原性进行了研究。现将猪细小病毒N株弱毒苗的田间试验结果报告如下。     

抗小鹅瘟病毒中和性单克隆抗体研制及实验防治效果

用淋巴细胞杂交瘤技术研制出１１株抗小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）单克隆抗体。这些单抗仅与ＧＰＶ反应，与其它细小病毒（ＣＰＶ、ＦＰＶ、ＰＰＶ）和其它禽病毒（ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＤＨＶ、ＤＰＶ）均不反应。腹水单抗的ＥＬＩＳＡ效价达１０－５—１０－７，琼扩沉淀效价达１∶２０—１∶５１２，鹅胚中和效价达１∶３０—１∶１２２，鹅体中和效价为１∶５４—１∶９６。ＧＰＡ１和ＧＰＣ５２株单抗对人工感染ＧＰＶ的雏鹅具有良好防治效果。