牛多杀性巴氏杆菌病病原的分离与鉴定

牛多杀性巴氏杆菌病,又称"牛出败",全称"牛出血性败血病",是由多杀性巴氏杆菌引起的一种以高热和败血症为特征的急性传染病[1].2003年10月初,湟源县某牛场的牦牛、犏牛等突然发病、死亡,前后共发病7头,发病率为0.87%(7801);死亡7头,致死率为100%(77).其临床症状:病初体温高达41～42 ℃,精神沉郁,口吐白沫,饮食欲减退或废绝,呼吸加快,有痛苦性干咳,流涎,肌肉震颤,腹痛,下痢,粪便初为粥状,后为液状,间或杂有黏液、黏膜碎片及血液,气味恶臭;随着病情的发展在颈部、咽喉部及胸前的皮下结缔组织出现弥漫性炎性水肿,可视黏膜发绀;肺部听诊有支气管音及水泡音,有的听到胸腹摩擦音.病理变化:脾有小点出血;肝肿胀,质脆,个别牛肝表面有坏死灶;肾稍肿;淋巴结明显水肿;肺脏表面有肝变区,呈大理石样花纹,有纤维素性胸膜炎变化;心冠脂肪、心内外膜出血明显,心包积水;咽喉、颈、四肢等部皮下有浆液性浸润,切开流出深黄色透明的液体,间或杂有血液,咽周围组织和会咽软骨韧带呈黄色胶样浸润,上呼吸道黏膜卡他性潮红.笔者于2003年10月初对其进行实验室检查,确诊为牛多杀性巴氏杆菌病,并采取了相应的预防措施,再无新病例发生,现将结果报告如下.     

鹅感染多杀性巴氏杆菌和大肠杆菌的分离鉴定

某地一鹅群发生一种以败血、高死亡率为特征的急性传染病．其临床表现为沉郁、不食、下痢等。病变特征以内脏器官充血、出血和坏死为主。本文从鹅体内分离到16株细菌．经鉴定为多杀性巴氏杆菌和大肠杆菌混合感染；并进行了毒力试验和药敏试验，结果表明多杀性巴氏杆菌致病性较强．大肠杆菌致病性稍弱．两菌混合感染致病性最强。恩诺沙星、单诺沙星和头孢氨苄西林对两种菌均为高敏。其余药物为中敏或不敏感。     

猪多杀性巴氏杆菌病病原的分离与鉴定

无菌采取病死猪的心、肝、脾、肺、肾等8份病料,进行细菌的常规分离培养与鉴定。结果:分离出多杀性巴氏杆菌,结合流行病学资料分析、临床症状、病理变化和实验室诊断,确诊为猪巴氏杆菌病。     

猪多杀性巴氏杆菌病病原的分离与鉴定

猪巴氏杆菌病也称“猪肺疫”、“锁喉风”和“肿脖子病”等，是由多杀性巴氏杆菌引起的猪的一种急性、散发性的热性传染病。随着我国养猪业的不断发展，多杀性巴氏杆菌感染的危害性日益表现出来，本病一年四季均可发生，尤其是在冬春寒冷、夏秋季闷热潮湿、下雨时温差大、运输产仔等应激情况下，会使抵抗力下降，病菌侵入机体而发病，它是养猪业中常见疾病之一，     

羔羊多杀性巴氏杆菌的分离鉴定

应用实验室细菌学分离技术，从以咳嗽、呼吸等临床症状为主要特征的，死亡羔羊的肺、肝、脾、肾等组织中分离到一株病原菌。经细菌形态和培养特性观察，染色镜检，生化实验，结合临床症状及流行病学特点，确定该病原分离株为多杀性巴氏杆菌。     

吉林地区鹅巴氏杆菌病病原分离鉴定及药敏试验

多杀性巴氏杆菌是鹅霍乱的病原体,给我国养鹅业带来了巨大的经济损失,但尚无有效的预防和控制措施。本试验对吉林地区分离的巴氏杆菌分离株的培养特性、生化特性、对化学消毒剂的敏感性、致病性、药敏试验进行了研究。结果为生化特性符合巴氏杆菌特性;1：10000稀释的百毒杀和1：5000稀释的过氧乙酸可有效杀灭该菌;对小鼠有较强致病性;药敏试验结果表明对氟苯尼考、氨苄西林、阿莫西林敏感,这将为研制巴氏杆菌灭活疫苗奠定了重要基础。     

狐狸巴氏杆菌病病原的分离与鉴定

巴氏杆菌病又叫出血性败血症，简称出败，主要是由多杀性巴氏杆菌所引起的各种畜禽和野生动物感染的一种传染病。临床特征急性病例主要表现为败血症和炎性出血，慢性特征表现为皮下组织、关节、各脏器的局灶性化脓性炎症。该病常在畜禽中发生，而在狐狸等经济动物方面报道相对较少。2006年秋，吉林左家某狐场的狐狸突然发病并陆续死亡，经流行病学调查、病理剖检和实验室检验，确诊为多杀性巴氏杆菌感染所致。     

一株鹅巴氏杆菌的分离及鉴定

从病死鹅心脏、肝脏、脾脏中分离并纯化细菌,根据其形态特征、培养特性、生化鉴定、16SrDNA基因序列分析和小白鼠攻毒试验等进行鉴定,确定是巴氏杆菌引起的急性传染病。药敏试验结果显示,该分离菌株对头孢曲松钠和头孢氨噻肟敏感,对大多数抗生素耐药。重庆某鹅场通过针对性用药,病情已得到控制,为鹅巴氏杆菌病的诊断与防治提供了科学的依据。     

一株鹅霍乱巴氏杆菌的分离和PCR鉴定

鹅巴氏杆菌病（AvianPasteurellosis）又叫鹅霍乱（Fowlcholera）,是由多杀性巴氏杆菌引起鹅的一种急性、败血性、高度接触性传染病。该病发病急,死亡率高,是影响养鹅业发展的重要传染病之一。2013年5月份,海南某鹅场所养的40—210日龄鹅陆续发病,食欲减退或废绝,先后采用青霉素、磺胺类药物饮水治疗,病情未见好转,且不断加重,死亡率高达40％。通过无菌采集病死鹅的肝脏、脾脏、心脏等组织病料,进行病原菌的分离、生化鉴定、PCR检测及测序分析,确诊为多杀性巴氏杆菌感染引起的鹅巴氏杆菌病。     

鹅链球菌的分离与鉴定

安徽某种鹅场70—120日龄种鹅发生以败血症为特征的急性传染病。从该鹅场采集病料对该病病原进行分离，细菌学检验，并进行生化试验，动物接种试验等，证实为链球菌病。     

仔猪巴氏杆菌病病原的分离与鉴定

采取病死猪的心、肝、脾、肺、肾、淋巴结等病料,进行巴氏杆菌病病原的分离培养与鉴定。根据流行病学资料、临床症状、病理变化和实验室检查结果,确诊为仔猪巴氏杆菌病。同时,通过药敏试验筛选出敏感抗生素并有效控制了疫情。     

小鹅瘟病毒分离与初步鉴定

取死于具有小鹅瘟典型症状的 7日龄吉林白鹅脾脏 ,制成乳剂 ,接种于未免疫小鹅瘟疫苗的健康母鹅所产种蛋的 12日龄鹅胚尿囊腔。结果当盲传至第 3代 ,鹅胚死亡 ,电镜负染尿囊液观察到细小病毒样粒子。雏鹅接种试验结果表明 ,试验组雏鹅表现出小鹅瘟临床症状和剖检特征。由此证明 ,该雏鹅死于小鹅瘟     

乌苏里貉巴氏杆菌的分离鉴定

吉林省松原市某养貉场发生疫病,对病死貉进行剖检,见有典型的巴氏杆菌病的症状,然后对细菌进行分离培养和生化鉴定,证实引起貉死亡的是巴氏杆菌病。     

鹅源大肠埃希菌的分离与鉴定

从临盏床疑似大肠埃希菌感染的病雏鹅的组织分离到31株细菌,通过培养特性和生化试验确定其中27株为大肠埃希菌。血清学试验表明,其中7株（25．93％）为026型,6株（22．22％）为078型,4株（14．81％）为01型,3株（11．11％）为018型,2株（7．41％）为0117型,5株（18．52％）未能定型。应用PCR方法检测了27株大肠埃希菌的F1菌毛与毒力岛HPI基因,结果表明24株（88．89％）为F1^＋大肠埃希菌,7株（25．939／5）为HPI^＋大肠埃希菌（其中4株为F1^＋）。药敏试验表明,所有菌株均对头孢唑林、呋喃妥因敏感,部分菌株对庆大霉素、环丙沙星敏感,而对多黏菌素、四环素、林可霉素均为耐药。     

Isolation,Identification and Genotyping of Pasteurella multocida from Fowl Cholera

In order to determine the suspected avian cholera pathogen and geneotypes, bacteria isolation technology was used to isolate and culture pathogenic bacteria, the isolated bacteria were identified by traditional methods and molecular biological methods. Geneotyping of the isolated bacteria were determined using PCR technology and gene sequence analysis. The results demonstrated that the isolated bacteria had typical culture characteristics of Pasteurella multocida (Pm),and the morphology of the colony, the characteristics of cell staining, the physiological and biochemical characteristics were consist with Pm; 457 bp fragment was amplified by PCR. Geneotyping results showed that only A primer amplified the target gene fragment of 1 050 bp, sequence analysis also showed that the isolated bacteria shared 97.6% to 100.0% sequence homology with reference strains, and phylogenetic tree analysis showed that the isolated bacteria and A type Pm were in a branch.The experimental results indicated that the isolated bacteria was identified as capsular serotype A of Pm, the results provided reference for the prevention and control of fowl cholera.     

2017年我国猪源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解2017年我国猪源多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida, Pm）的流行情况及其耐药情况,利用细菌分离培养和PCR方法分离鉴定Pm,对其荚膜血清型、地区分布和感染方式进行调查,并采用纸片法测定分离株对20种抗菌药物的敏感性。结果显示,从全国6288份临床病料中分离并鉴定出236株Pm,总分离率为3.75%。随机选取55株进行血清型分型,其中A型25株,D型27株,F型1株,未定型2株;分离率最高的省份为广东省（4.97%）,其次是河南省（3.69%）和湖北省（3.25%）;感染模式中,Pm单纯感染占比42.80%,混合感染占比57.2%,最常与链球菌和副猪嗜血杆菌共感染,比例分别为28.81%和12.29%。耐药性试验显示,Pm对强力霉素的耐药率高达83.64%,对卡那霉素、庆大霉素、链霉素和阿米卡星等氨基糖苷类药物的耐药率为43.64%～52.73%,对多粘菌素B和氧氟沙星最敏感（耐药率均为1.82%）。本研究表明我国猪群中Pm流行的主要血清型仍然是A型和D型,临床上Pm与其他细菌发生混合感染的情况普遍存在,并且对多种抗生素产生了耐药性。     

禽霍乱巴氏杆菌的分离鉴定及基因分型

为确定疑似禽霍乱病例病原种类及其病原基因型,本研究采用细菌分离技术对病原菌进行实验室分离培养,应用传统方法和分子生物学方法对分离细菌进行鉴定,并应用PCR扩增和基因序列分析对分离细菌进行基因分型。结果显示,分离菌具有多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida,Pm）典型培养特征,菌落形态和菌体染色特征、生理生化特性均与多杀性巴氏杆菌相符;PCR扩增到457 bp的基因片段。采用5对分型引物对分离菌进行基因分型显示,仅有A型引物扩增到大小1 050 bp的目的基因片段,序列分析也显示分离菌荚膜基因与A型多杀性巴氏杆菌参考菌株荚膜特异性基因同源性高达97.6%~100.0%,系统进化与A型多杀性巴氏杆菌处于同一进化分支。结果表明,疑似禽霍乱病例病原为A型多杀性巴氏杆菌,本研究结果将为禽霍乱的防控提供参考资料。     

鹅源沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验

为了对辽宁省某养鹅场10日龄患病鹅作出正确诊断和治疗,利用实验室诊断和药物敏感试验对病菌进行分离培养与鉴定。结果表明,该病病原为沙门氏菌,对培氟沙星、环丙沙星、痢特灵等药物高度敏感,对卡那霉素等药物中度敏感,对磺胺嘧啶钠等药物不敏感。选用敏感药物进行治疗,收到良好效果。     

鸭源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为鉴定临床疑似鸭多杀性巴氏杆菌感染肉鸭的病原菌,本试验通过细菌分离培养、菌体形态观察、细菌生化鉴定、16S rRNA基因测序分析、细菌种特异性鉴定、荚膜分型鉴定和动物回归试验进行鉴定,并通过药敏试验和耐药基因检测进行耐药性分析。结果显示,从患病鸭肝脏组织分离到的细菌在鲜血琼脂培养基中呈现表面光滑凸起、灰白色菌落,为革兰氏阴性短小杆菌,瑞氏染色呈两极浓染;生化鉴定结果显示,分离菌能发酵葡萄糖、蔗糖和甘露醇,硫化氢、氧化酶和吲哚等试验阳性;16S rRNA基因序列系统进化树分析显示,该分离菌与多杀性巴氏杆菌聚为一支,同源性 > 99%;细菌种特异性鉴定结果与多杀性巴氏杆菌相符;荚膜分型鉴定结果仅扩增到约为1 050 bp的目的基因片段,与荚膜血清A型相符;动物回归试验显示,该分离菌有较强的致病性;药敏试验结果显示,该分离菌对羧苄西林、氨苄西林、复方新诺明和四环素等12种药物耐药;经耐药基因PCR检测显示,该分离菌携带Sul1、Sul3、tet（X）和Intl1 4种耐药基因,与药敏表型相符。本试验成功分离到1株鸭源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌,为鸭多杀性巴氏杆菌病的防治提供参考依据。