Life circle and bionomics of Lymantria dispar L.

Studymethods10IntheMayof1997,theoverwinteredeggsofLymantriadisparwerecollectedinfield,immersedinformalin,anddriedincoolplace.Theeggsweredividedinto4groupswith500eggsineachgroup,putinglassbottles.Theratesofhatchingprogresswereinvestigatedeveryday(LanandWan1996;Zhang1988).Afterhatching,thefirst,secondandthirdinstarlarvaewereraisedwiththeneedlesoflarchinglassbottles.Thelarvaeolderthanthethirdinstarwereraisedoutdooringauzecagesinwhichthebranchesoflarchwereprovided.Thelarvaedevelopedintonextinst…     

甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫解毒酶及其体内蛋白质表达的影响

为研究甲氧虫酰肼(RH-2485)对舞毒蛾幼虫的杀虫活性,采用叶片药膜法测定该药剂对舞毒蛾不同龄期幼虫的生物活性及对其体内解毒酶活性的影响,并通过SDS-PAGE对舞毒蛾幼虫不同组织的蛋白质表达进行检测。结果表明:甲氧虫酰肼对舞毒蛾2～6龄幼虫均表现出较高活性,其中对2,3龄幼虫毒性最强,说明甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫的影响存在明显的龄期差异。该药剂对2,4,6龄幼虫体内的羧酸酯酶、多功能氧化酶O-脱甲基和谷胱甘肽S-转移酶等主要解毒酶存在显著影响,表现为诱导、抑制作用;在不同的处理时间,对这些酶的影响存在明显差异。舞毒蛾4龄幼虫经甲氧虫酰肼处理后,血淋巴、中肠及表皮组织中均发现与对照组有差异的蛋白,其中处理12h和24h时,对血淋巴和中肠组织中的蛋白质影响比较明显,48h后,对表皮组织中的蛋白质表达的影响较为显著。甲氧虫酰肼作为非甾醇类蜕皮激素竞争物中的新型化合物,能干扰舞毒蛾幼虫体内主要解毒酶活性,诱导血淋巴、中肠和表皮组织中产生特异蛋白,从而影响舞毒蛾正常的生理代谢,起到毒杀作用,可有效防治舞毒蛾。     

舞毒蛾化蛹阶段自然控制作用初步调查

舞毒蛾是世界范围内的重要森林食叶害虫,取食多种阔叶和针叶树木。为了解舞毒蛾在我国危害较轻的原因,作者在林间设立样方,调查下树将要化蛹的舞毒蛾老熟幼虫的死亡率及致死因素,蛹的死亡率及致死因子。发现病毒是导致老熟幼虫死亡的主要因子,死亡率高达96.6%。蛹的致死因子较多,其中一种皮蠹取食导致的致死率较高,达到58%,舞毒蛾黑瘤姬蜂的致死率也较高。研究表明,舞毒蛾化蛹阶段致死因子及死亡率较高,可能是舞毒蛾发生危害较轻的原因之一。     

舞毒蛾寄生天敌昆虫及其自然控制研究

通过采集舞毒蛾卵块、幼虫、蛹在实验室内培育,共发现舞毒蛾寄生性蝇类6种、寄生蜂类4科8种。其中,幼虫期寄生天敌有金小蜂科1种,即黑青小蜂Dibrachys cavus;广肩小蜂科2种,即粘虫广肩小蜂Eurytomaverticillata和Eurytoma sp.;以及茧蜂科3种,姬小蜂科2种和寄蝇类,平均寄生率12.89%。蛹期的寄生天敌有毛瓣奥蜉寄蝇Austrophorocera hirsuta、日本追寄蝇Exorista japonica、条纹追寄蝇Exorista fasciata等,平均寄生率是13.30%。卵期未发现任何寄生性天敌。从幼虫到蛹期,寄生性天敌平均可降低舞毒蛾种群数量22.17%。     

舞毒蛾标本DNA提取和COI基因扩增

[目的]探讨适合舞毒蛾标本的保存和DNA提取方法,分析舞毒蛾标本的保存时间和保存方式对基因序列扩增的影响。[方法]利用SDS法、磁珠法以及E.Z.N.A.TM昆虫DNA提取试剂盒3种方法对舞毒蛾新鲜样本、干燥成虫标本和福尔马幼虫林标本进行DNA提取,并对3种方法提取DNA的浓度和纯度进行分析比较。利用1956年至1996年收集的舞毒蛾干燥成虫标本和福尔马林幼虫标本分析并比较保存时间和保存方式对15对COI基因(cytochrome oxidase subunit I)引物(目的片段长度为216 bp^977 bp)扩增成功率的影响。[结果]表明与SDS法和磁珠法相比,E.Z.N.A.TM昆虫DNA提取试剂盒对舞毒蛾3种标本的DNA提取效果最好,提取过程中未对标本DNA产生额外损伤。标本保存时间越久扩增长序列目的片段的成功率越低,福尔马林幼虫标本总体扩增成功率比干燥成虫标本的略高。[结论]E.Z.N.A.TM昆虫DNA提取试剂盒更适合舞毒蛾新鲜样本、干燥成虫标本和福尔马林幼虫标本的DNA提取。舞毒蛾标本的保存时间和保存方式均会对基因序列扩增产生影响。     

刺槐种子凝集素对舞毒蛾幼虫营养代谢影响的初步研究

在室内饲养舞毒蛾的条件下，用刺槐种子凝集素处理的叶片喂食舞毒蛾幼虫，对幼虫取食叶片后的死亡率、消化率、转化率和利用率进行了研究，结果表明：与对照相比，取食处理叶片的幼虫，有较高的死亡率，达59％；刺槐种子凝集素对舞毒蛾幼虫的营养代谢有较强的抑制作用。     

舞毒蛾核型多角体病毒PCR检测技术的建立

根据舞毒蛾核型多角体病毒(LdMNPV)的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因(egt)设计一对特异性引物.成功建立了LdMNPV的PCR检测技术体系,其对LdMNPV基因组的灵敏度可达到1fg·mL-1.应用该技术体系从舞毒蛾带毒幼虫、卵、蛹的基因组中扩增出目的片段,证明了这一技术的可行性.对不同浓度的多角体悬液的扩增结果显示:其检测最低量为5 OBs·mL-1.形态学研究表明:从内蒙舞毒蛾体内分离到的LdMNPV中,少数表面有凹陷的孔洞,病毒粒子从这些孔洞中游离出来,这也阐明了此技术能够从多角体悬液中扩增出目的片段的原因.在将来LdMNPV的检测中,可用虫体进行研磨过滤离心得到的组织液作为模板进行扩增.     

珙桐DiZF-CCCH1基因的克隆及表达分析

【目的】珙桐Davidia involucrata有性生殖能力弱是限制其自然更新的主要原因。为研究珙桐种子发育的分子机制,本课题组前期完成了珙桐种子转录组分析,筛选到1个编号为c37849.graph_c0的转录本,其在正常种子中高量表达,而在发育异常的种子中表达量很低,差异表达显著,因此将其作为研究目标。【方法】使用PCR克隆该转录本的全长序列,并利用在线分析工具对其编码氨基酸的序列特征、蛋白结构和系统进化等进行生物信息学分析预测,采用qRT-PCR检测目标基因在珙桐不同组织部位以及种子不同发育阶段中的表达情况。【结果】序列分析确定目标基因为一个编码CCCH型锌指蛋白转录因子的基因,将其命名为DiZF-CCCH1,该基因开放阅读框全长为711 bp,编码236个氨基酸,无内含子,相对分子量26.74 kDa,为不稳定蛋白,其氨基酸序列含有植物特有的RR-TZF结构域,与来源于甜橙Citrus sinensis的CCCH蛋白同源性最高。基因表达模式分析显示,DiZF-CCCH1在种子发育前期的表达量最高,后期表达量降低,在其他组织中仅有微量表达,推测其可能在种子发育过程中发挥重要作用。【结论】对珙桐DiZF-CCCH1基因进行了克隆与初步生物信息学分析,发现其编码的蛋白属于RR-TZF型锌指蛋白,且DiZF-CCCH1可能是珙桐种子发育过程中的重要调控基因,为进一步探索该基因在珙桐生殖发育过程中的功能奠定基础。     

Über die Wirkung zweier Virusstämme auf Raupen und Puppen des Schwammspinners,Lymantria dispar L. (Lep., Lymantriidae)

Zusammenfassung Die Wirkung zweier Virusstämme (NPV), die sich in Form und Größe ihrer Polyeder unterscheiden, wurde bei Raupen und Puppen des Schwammspinners(L. dispar) untersucht. Es zeigte sich, daß der Virusstamm mit kubischen Einschließungskörpern eine deutlich höhere Virulenz besitzt als das Virus mit sphärischen Polyedern.Bezüglich der Übertragungsweise von Generation zu Generation konnte bei beiden untersuchen Virusstämmen kein Unterschied festgestellt werden.

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The effect of two different virus strains on the larvae and pupae of the Gipsy Moth,Lymantria dispar L. (Lep., Lymantriidae)

The effect of two virus strains (NVP), which are different relative to the shape and size of their polyhedra, was tested on larvae and pupae of the Gypsy Moth(L. dispar). It was shown that a virus strain with cuboidal inclusion bodies was much more virulent than a strain with spherical polyhedra. No difference was observed in the mode of trans-ovum transmission of the two investigated virus strains.

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Mit 4 Abbildungen und 3 Tabellen     

Insecticidal activities and active components of the alcohol extract from green peel of Juglans mandshurica

The extract of green peel of Juglans mandshurica Maxim was extracted by common method for studying its insecticidal activities and analyzing the active components. Results showed that the alcohol extract and the chloroform part of extract （separated with chloroform from alcohol extract） form green peel of J. mandshurica have insecticidal activities in contact toxicity and stomach toxicity against larvae of Lymantria dispar L.. After application of the extracts for five days, the corrected mortality of larvae of Lymantria dispar for both extracts was more than 50% in contact toxicity and stomach toxicity at the concentration of ≥ 5 g·L^-1. The insecticidal activity for both alcohol extract and chloroform part of extract is more effect in contact toxicity than in stomach toxicity, but no significant difference in the insecticidal activities was found between alcohol extract and chloroform part of extract. The active components in the chloroform part of extract from green peel of.J. mandshurica were analyzed by GC-MS. The analyzed results showed that the active components in the chloroform part of extract are： （1） joglone （5-hydroxy-1,4- naphthaoquinone）, the relative content 27.11%, （2） 1,5-Naphthalenediol, the relative content 9.52%, （3） 7-Methoxy-1-tetralone, the relative content 6.81%, （4） Benzofuran, 2,3-dihydro-, the relative content 6.76%, （5） 4-Hydroxy-2-methoxycinnamaldehyde, the relative content 3.99%, （6） 2-Methoxy-4-vinylphenol, the relative content 3.05%.     

松毛虫质型多角体病毒RT—PCR检测技术的建立

为研究DsCPV在松毛虫种群中的垂直传递及对松毛灾害的持续控制作用,转录聚合酶链式反应（RT－PCR）建立了DsCPV的早期检测技术。依据家蚕质多角体病毒（BmCPV）质型多角体蛋白的核苷酸序列设计一对引物，从纯化的DsCPV、BmCPV和舞毒蛾质型多角体病毒（LdCPV)的基本组dsRNA可成功地扩增出长614bp的目的片段，从提取的健康松毛虫幼虫肠组织的DNA、舞毒蛾核型多角体病毒（LdNPV)基因组核酸、以及棉铃虫质型多角体病毒（HaCPV)基因组核酸，未能扩增出目的片段。DsCPV基因组dsRNA的增片段的序列与BmCPV相应基因序列具有87％的同源性，检测敏感度为1pg的DsCPV基因组dsRNA。由于松毛虫与家蚕、舞毒蛾相互之间食性不同，而且BmCPV和LdCPV对松毛虫无感染性，即在松毛虫体内不会有BmCPV病毒和LdCPV病毒的感染，因此该结果一方面从分子水平上证实了DsCPV与BmCPV、LdCPV存在基因同源性，同时也表明了依据BmCPV的基因序列设计引物对DsCPV基因组核酸建立的RT－PCR扩增体系，可以作为松毛虫种群中DsCPV的一种敏感、特异、早期、快速的检测手段。     

Nanocarrier-mediated transdermal dsRNA-NPF1 delivery system contributes to pest control via inhibiting feeding behavior in Grapholita molesta

Grapholita molesta, a worldwide fruit-boring pest, is difficult to be effectively controlled due to the larvae feeding habit inside fruits. Neuropeptide F (NPF) is the crucial molecule modulating feeding behavior of insects. Herein, two genes, NPF1 and NPF2, were identified and cloned from G. molesta. GmolNPF1 had a higher expression in newly hatched larvae than in other developmental stages and mainly in the midgut (major expressive organ). Coincidentally, the stage of newly hatched larvae was the best control period to prevent larvae from entering the fruits. Further study demonstrated that only GmolNPF1 expression increased significantly after starvation and declined after refeeding. After GmolNPF1 knockdown by RNA interference (RNAi), the feeding amount, weight, body size and drill holes rate of larvae decreased significantly, and the number of larvae that ate food within 5 min declined significantly. The pET30-NPF1-BL21(DE3) RNase III system was successful constructed and produced large batch dsRNA (double stranded, ds) of GmolNPF1. The nanocarrier-mediated transdermal dsRNA delivery system enhanced the RNAi efficiency of dsNPF1, significantly decreased the fruit damage and increased the mortality of newly hatched larvae via spraying method. Our research not only revealed the regulation function of GmolNPF1 involved in the feeding behavior of G. molesta, but also showed the NPF1 as a molecular target combined the transdermal dsRNA delivery system will a potential control strategy for pest management in the field.

     

27种杀虫剂对美国白蛾幼虫的室内毒力比较

美国白蛾(Hyphantria cunea)始发于北美,属鳞翅目,灯蛾科(Liuetal.,2006),为害行道树、花卉、果树和大田作物等。1979年中朝边境首次发现后,由北向南逐年扩展,京、津、辽、冀、鲁均有暴发历史(魏晓棠等,2006)。由于成虫具有较强飞行扩散能     

狼毒根提取物的生物活性测定

狼毒是我国北方普遍生长的一种有毒植物,其根是一种传统中药材。20世纪90年代中期以来,作为一种植源性农药资源,狼毒的开发研究受到重视。本研究表明不同狼毒根提取物都能表现出一定的生物活性,利用狼毒根水浸液与乙醇提取物对舞毒蛾幼虫的拒食作用最高达99％,7d的校正死亡率最高达100％,室内毒力测定中防后5d的校正死亡率最高达100％;不同有机溶剂对狼毒根乙醇提取物萃取分离得到的有效成分对油松毛虫的拒食作用最高达92．39％,7d的校正死亡率最高达100％。不同有机溶剂的萃取物对杨树溃疡病原菌表现出抑制生长的作用,而对仙客来尖镰孢基本没有效果。     

应用白僵菌防治竹镂舟蛾的试验

采用不同剂量白僵菌对不同代数竹镂舟蛾进行防治试验,结果表明：白僵菌可作为福建省永春县一都镇竹镂舟蛾第1代和第3代的优良无公害生物防治药剂,其防治效果较好,尤其对第1代防治15 d后其校正死亡率最高可达95.52%,但第2代防治效果较差,可能与试验期间温度、湿度等因素影响有关,在防治时应考虑选择其他药剂。     

黄斑星天牛人工饲料研究

本文对6种人工饲料的配方作了详细比较、分析和讨论,找出了用于饲养黄斑星天牛幼虫的饲料最佳配方,其主要成分是干酪素、纤维素、蔗糖、黄豆粉;利用此种饲料饲养,黄斑星天牛幼虫期缩短、存活率达86.2％,蛹重增加,产卵量提高,寿命延长;试脸还表明,不同成分的饲料不仅影响幼虫存活率和生长发育,而且还明显影响其物质与能量代谢活动。     

Influences of the Populus deltoids seedlings treated with exogenous methyl jasmonate on the growth and development of Lymantria dispar larvae

Introduction The interplant signal transduction has been hypothesized for many years (Baldwin and Schultz 1983; Rhoades 1983). It has been found that the resistance to insects is induced not only in damaged plants but also in the neighboring undamaged ind…     

毒死蜱对舞毒蛾食物利用和解毒酶及AChE活性的影响

采用质量法和酶活性测定法研究了毒死蜱对舞毒蛾(Lymantria dispar)3龄幼虫食物利用的影响,并测定了其毒力及解毒酶、乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。用亚致死浓度(1.5 mg·L^-1)毒死蜱处理小黑杨叶片,饲喂舞毒蛾3龄幼虫,其幼虫生长率(RGR)、食物利用率(ECI)和食物转化率(ECD)均显著低于对照,而近似消化率(AD)显著高于对照,相对取食量(RCR)处理和对照间差异不显著。毒死蜱对舞毒蛾幼虫24 h致死中浓度(LC₅₀)为5.86 mg·L^-1,其毒力低于三氟氯氰菊酯而高于氧化乐果。毒死蜱对舞毒蛾3龄幼虫体内羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和AChE均有抑制作用,抑制程度为CarE＞AChE＞GSTs。毒死蜱通过影响舞毒蛾食物利用和抑制酶活性而表现出杀虫活性,为一种有效防治舞毒蛾的有机磷杀虫剂。