抗生素对彩色马蹄莲愈伤组织诱导和生长的影响

通过研究两种抗生素,即卡那霉素与先锋霉素对红色马蹄莲的鳞片、叶片外植体的生长、发育的影响,旨在探讨红色马蹄莲用于筛选转化体时卡那霉素的浓度以及先锋霉素在作为抑菌剂时应选取的浓度。结果表明,卡那霉素筛选浓度为鳞片75mg/L;先锋霉素作为筛选转化体时浓度为鳞片200mg/L,茎段为100mg/L。     

黑林1号杨抗生素敏感性测定

以黑林1号杨叶片和茎段为材料,针对蜘蛛杀虫肽+Bt毒蛋白嵌合基因的遗传转化进行了抗生素筛选。结果表明,随2种抗生素浓度的增加,叶片分化率和不定芽率逐渐下降,卡那霉素和头孢噻肟钠临界浓度分别为15、600mg/L;在茎段生根筛选阶段,卡那霉素和头孢噻肟钠的适宜浓度分别为25、700mg/L。     

3种百合鳞片扦插技术的研究

以兰州百合、细叶百合、丹东布朗百合为试材,通过正交试验方法,研究了不同百合种类、扦插基质、植物生长调节剂种类及处理时间在百合鳞片扦插过程中,对扦插成活率、平均根数、平均根粗、平均根长、平均繁殖小鳞茎数、小鳞茎平均球径的影响,结果表明:影响百合鳞片扦插成活的主要因素是百合种类,用浓度为100mg/L的GA3处理0.5h,兰州百合鳞片扦插成活率可达90%以上,细叶百合扦插成活率也较高,约为63%,而丹东布朗百合在各试验处理中成活率都很低。     

宜兴百合组培快繁体系的建立

以宜兴百合鳞片为外植体进行试管培养,经试验筛选出各培养阶段适宜的培养基为:(1)小鳞茎诱导,MS 6-BA 0.5mg/L NAA 1mg/L KT 0.2mg/L;(2)分化及继代,MS 6-BA 0.2mg/L NAA 0.5mg/L;(3)生根,MS PP3331 mg/L NAA 0.1 mg/L。     

切花百合鳞片组织培养技术

选取切花百合靠近鳞茎盘的基部鳞片作为实验材料，采用组培方法进行繁殖实验，结果表明接种适宜的培养基为MS＋BA2mg／L＋NAA0．3mg／L，pH5．7，继代扩繁时可以对培养基进行再利用以降低成本，不同品种生根培养基不同。     

卷丹百合组培技术研究

以卷丹百合鳞片为外植体，通过调节不同激素的质量浓度，确定卷丹百合组织培养快繁体系。结果表明：用卷丹百合的内部鳞片作为外植体感染率最低，诱导培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L;增殖培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L;生根培养基配方为：1/2MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖60 g/L+琼脂7 g/L,为日后生理抗性研究及分子研究提供前期基础。     

西洋百合“卢浮宫”的组培技术研究

以鳞片为外植体、MS为基本培养基,以不同激素成分及不同质量浓度水平下诱导西洋百合"卢浮宫"的小鳞茎状突起,进行组培试验。结果表明:"卢浮宫"百合的诱导以取其完整的鳞片为外植体、并以鳞片背部突起处紧贴于MS 6 BA2 0mg·L-1 NAA0 2mg·L-1的培养基上诱导效果为最好。"卢浮宫"百合的诱导是由外植体(鳞片)产生小鳞茎状突起而分化成苗的,并不经愈伤组织分化产生。筛选出的最佳继代增殖培养基为MS 6 BA0 7mg·L-1 IBA0 3mg·L-1,生根培养基为1 2MS 6 BA0 3mg·L-1 IBA0 7mg·L-1。移植基质选择河泥和珍珠岩(体积比7∶3)混合,成活率达98%。     

影响细叶百合离体快繁的因素研究

以细叶百合鳞片为外植体,通过正交试验结果表明:影响百合分化的主要因素是植物生长素和分裂素,诱导细叶百合鳞片产生不定芽的培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+糖30g/L+琼脂6.5 g/L;诱导不定芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1mg/L+糖30 g/L+琼脂6.5 g/L,蔗糖对细叶百合的分化影响效果不明显。     

虎眼万年青离体快繁体系及无糖生根培养

以虎眼万年青的叶片为外植体,对不同激素浓度的愈伤组织和不定芽的诱导情况以及再生芽的无糖培养情况进行了研究.结果表明:适于愈伤组织诱导及不定芽分化的培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,适宜的继代培养基为MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L;用无糖培养体系进行生根培养时,基质中NAA浓度为0.1mg/L时,再生芽的生根率达94%,种苗质量优于常规组培.     

2种百合科植物离体鳞茎诱导

以大百合(Cardiocrinum giganteum)和龙牙百合(Lilium brownii)作为实验材料,采用组织培养技术,研究不同鳞片部位、激素组合和培养基类型对其鳞茎诱导的影响,以探究2种植物最佳的鳞茎诱导方案。结果表明:大百合作为外植体的最佳材料来源为中层鳞片的近鳞茎盘部位,最佳诱导培养基为:MS+BA 5.0mg/L+NAA 0.1 mg/L+ZT 0.08 mg/L;龙牙百合作为外植体的最佳材料来源为中层鳞片,最佳诱导培养基为改良MS+BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+ZT 0.01 mg/L。     

野百合及其变种百合的形态分类研究

对广东省内5个居群140个单株样品基部成熟叶的叶型性状分析结果表明,凡同时符合叶长／基宽距〈2．0以及叶长／叶宽〈5．0两个条件的样品为变种百合（Lilium brownii F．E．Brown ex Miellez vaur．virdulum Baker）,否则为原变种野百合（L．brownii F．E．Brown ex Miellez）。这一标准简单易操作,可作为野百合及百合形态分类的量化标准。     

一氧化氮对百合鳞茎的休眠解除效应

为研究一氧化氮(NO)在打破百合鳞茎休眠中的作用,用硝普钠(SNP)处理休眠的"哥德琳娜"百合(Lilium brownii var. viridulum 'Gondelina')鳞茎后,在25 ℃下进行培养,观测其萌发生长和测定不同解除休眠生长时期GA(赤霉素)、IAA(吲哚乙酸)、ZR(玉米素核苷)、ABA(脱落酸)4种内源激素的质量摩尔浓度变化.结果表明,NO能够促进"哥德琳娜"百合鳞茎休眠的解除,随处理体积摩尔浓度的增加,鳞茎发芽率呈先增大后减小趋势,其中10 mmol/L SNP体积摩尔浓度浸泡处理对休眠"哥德琳娜"百合鳞茎的解除效果最好,发芽率达58.2%,比对照增大37.9个百分点,且与对照差异显著(P<0.05);鳞茎质量和根生长量呈先增大后减小趋势,10 mmol/L SNP体积摩尔浓度浸泡处理下增加最大,分别比对照增大41.74%和102.03%,且与对照差异显著(P<0.05);用10 mmol/L SNP体积摩尔浓度浸泡处理下,鳞茎内源激素GA、IAA和ZR质量摩尔浓度随处理天数增加呈增大趋势,且均与对照差异显著(P<0.05),而ABA质量摩尔浓度随处理天数增加呈减小趋势,与对照之间差异不显著.NO能够促进生长素的快速生成,加速"哥德琳娜"百合鳞茎休眠解除的进程.     

细叶百合组培继代培养与生根移栽的研究

为建立细叶百合离体快繁的再生体系,对细叶百合组培苗的继代培养、生根培养及移栽条件进行了研究。结果表明:继代培养在MS 6-BA 2.0 mg/L NAA0.1 mg/L上培养基上鳞茎的增殖系数为6.95,且苗粗壮、长势良好;生根培养在1/2MS IBA 0.5 mg/L生根最快,生根率达100%,根粗壮,平均每个小鳞茎生根8.77条,平均根长为2.85 cm,苗长势较好;移栽基质以泥炭土效果最好。     

野百合组织培养的研究

以野百合鳞茎、叶片为外植体通过继代培养和生根培养,诱导不定芽的发生,进而获到再生植株。试验结果表明:用MS培养基培养野百合鳞茎、叶片组织,均能够诱导不定芽产生;在培养基中附加BA2.5mg/L和NAA0.2mg/L有利于鳞茎不定芽的诱导且芽苗长势好,而叶片则在培养基中附加BA1.5mg/L、NAA0.2mg/L的培养效果最佳;从不定芽诱导出根以1/2MS效果最好。     

AAT基因转化杂交构树叶片组培筛选研究

为了提高杂交构树的组培效率,以蒺藜苜蓿为研究对象,进行生物信息分析,克隆蒺藜苜蓿目的基因AAT,构建表达载体,通过农杆菌转化方法将目的载体转入杂交构树组培叶片中,优化组培相关体系配比,抗生素筛选配比,RT-PCR和定量PCR检验重组植株.结果表明:最佳灭菌体系为75％乙醇消毒20 s,0.3％HgCl2消毒15 min...     

黄色马蹄莲的组织培养研究

以黄色马蹄莲块茎为外植体组培试验结果:最适合的灭菌时间为0.1%的HgCl2消毒15min;在MS添加2.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1 NAA的培养基上可以很好的诱导产生愈伤组织,并且从愈伤产生丛生芽的数量也最多;在MS添加1.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA的培养基上经过初代培养的芽丛可以健壮生长同时继续增殖出新的愈伤组织;在不添加任何激素的MS培养基上马蹄莲生根率均可以达到90%以上,且试管苗根系良好,生长健壮。     

白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生

【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg ·L -1 )、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg ·L -1 )、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg ·L -1 )组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )、6-BA(0、0.5、1.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO 3和NH 4NO 3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS 、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS + 2,4-D 3.0 mg ·L -1 + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 0.2 mg ·L -1 + TDZ 1.0 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 1.0 mg ·L -1 + TDZ 0.5 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +谷氨酰胺100 mg ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO 3浓度提高1倍、NH 4NO 3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍;1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生长素与细胞分裂素组合及硝态氮和铵态氮的比例对体细胞胚的形成和发育具有调控作用,降低MS无机盐浓度可提高体细胞胚萌发率,本试验体系的再生植株移栽成活率达90%以上。     

不同因素对金线莲组织培养的影响

研究基本培养基MS、1/2MS、改良MS与不同浓度水平的6BA、NAA、马铃薯等方面对金线莲芽的增殖、长势方面产生的影响。在生根方面则主要是研究基本培养1/4MS、1/10MS、1/4改良MS以及添加物马铃薯对金线莲组培生根的方面影响。结果表明,金线莲增殖的最佳培养基为改良MS+6BA3.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+200 g/L马铃薯,最佳生根培养基组合为1/4改良MS+NAA0.5 mg/L+马铃薯200 g/L。     

Effects of antibiotics on plantlet regeneration via organogenesis in Populus euphratica

Four antibiotics, kanamycin, geneticin, carbenicillin and cefotaxime,were evaluated for their effect on the regeneration of adventitious buds, shoot differentiation, rooting from regenerated shoots of Populus euphratica as well as on their control of Agrobacterium -mediated transformations. Results showed that the optimum concentration ranges of kanamycin and geneticin were 15-20 and 10-15 mg·L-1 at the stage of transgenic plantlet selection. The inhibitory effects of cefotaxime and carbenicillin varied among different genotypes of Agrobacterium. The inhibition of cefotaxime on Agrobacterium C58 was stronger than that of carbenicillin. The optimum concentration of cefotaxime was 100 mg·L-1. Cefotaxime and carbenicillin had similar effects on Agrobacterium LBA4404 and their optimum concentrations were both 150 mg·L-1.     

百合试管鳞茎的培养技术研究初报

为提高百合试管小鳞茎的繁殖系数,设计了MS培养基中大量元素的不同用量、NAA和蔗糖不同浓度共15种培养基配方,培养百合无根试管苗。从试验结果看：1／2MS＋NAA0．2mg／L＋蔗糖50g／L配制的培养基,对小鳞茎数量增加和直径的生长效果最好。