禽流感灭活抗原与佐剂配合鼻腔免疫对鸽呼吸道抗体分泌细胞的影响

通过禽流感灭活抗原配合黏膜免疫佐剂鼻腔免疫乳鸽,研究鸽呼吸道各段抗体分泌细胞的分布和数量。结果显示,首免后第3、5周,应用CpG免疫后肺IgG分泌细胞面积显著高于对照组（P〈0.05）,首免后第5,7周,应用CpG免疫后肺IgA分泌细胞面积显著高于对照组（P〈0.05）;首免后第3、5、7周,应用灭活禽流感抗原免疫后,鸽呼吸道各部位IgG分泌细胞和IgA分泌细胞面积与对照组无显著差异;应用禽流感抗原配合CpG和胆酸钠免疫后鸽呼吸道各部位单位面积中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞面积均显著或极显著高于对照组（P〈0.01,P〈0.05）。结果表明,灭活禽流感抗原配合黏膜免疫佐剂通过鼻腔免疫能够提高呼吸道中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞的面积,增强局部呼吸道体液免疫应答水平。     

3种消毒剂对H5N1和H9N2亚型禽流感病毒灭活作用

采用悬浮灭活试验，以鸡胚感染法，研究奇露、卫可、泛福露益选3种消毒剂在一系列浓度下，分别与H5N1和H5N2亚型禽流感病毒作用5，10min，对禽流感病毒的灭活作用。结果表明：1：200、1：280、1：400、1：800、1：1000浓度的卫可，1：320、1：600、1：800、1：1000浓度的泛福露益，1：200、1：400、1：600浓度的奇露对四亚型禽流感病毒可完全灭活31：200、1：280、1：400、1：800浓度的卫可，1：320、1：600、1：800浓度的泛福露益，1：200、1：400浓度的奇露对比亚型禽流感病毒可完全灭活。     

H9N2亚型禽流感病毒灭活苗最小免疫剂量及抗体消长规律的初步研究

H9N2亚型禽流感疫苗在我国普遍使用,在强大免疫压力下,H9N2亚型禽流感病毒变异加快,现有商品化灭活苗无法完全保护免疫鸡免受H9N2亚型禽流感病毒流行株的感染。为此,本研究以从近期流行毒株中筛选出的一株H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Shanghai/441/2009(H9N2)(简称为SH441)为种毒,制备灭活苗,进行了最小免疫剂量及抗体消长规律的初步研究。将制备的H9N2亚型禽流感灭活苗以0.01、0.02、0.04、0.05、0.08 mL/只的不同剂量,胸部肌肉途径免疫3周龄SPF鸡只,并于免疫后21天静脉感染SH441病毒,结果显示该疫苗最小免疫剂量为0.02 mL/只。以0.05 mL/只剂量免疫SPF鸡只,该疫苗能刺激SPF鸡只产生较高的HI抗体滴度,且在免疫后第5周达到峰值(12 Log2以上),随后稍有下降但保持相对稳定,且在免疫后29周时依然保持在7 Log2以上。这些结果为为该疫苗的进一步开发奠定了良好的基础。     

鼻腔免疫禽流感灭活疫苗对鸡呼吸道肥大细胞分布的影响

用添加CpG的禽流感病毒（H5亚型）灭活疫苗对7日龄罗曼公鸡进行鼻腔免疫，14日龄加强免疫一次；分别于首免后第3、5、7周剖杀，取鼻腔、喉部、气管、气管叉及肺组织，通过甲苯胺蓝染色法显示肥大细胞，观察呼吸道各部位肥大细胞的分布及数量变化。结果显示，首免后第3周气管和气管叉黏膜中的肥大细胞数量显著增加（P〈0．05），第5周时喉部和气管叉黏膜中的肥大细胞数量显著增加（P〈0．05），气管黏膜中肥大细胞数量也极显著增加（P〈0．01），第7周肺中的肥大细胞数量显著增加（P〈0．05）；肥大细胞的数量在喉部最多，气管叉次之，气管和肺较少。试验结果表明，局部黏膜免疫可增加呼吸道肥大细胞的数量，肥大细胞可能参与黏膜免疫反应。     

鸭免疫H5N1亚型禽流感油乳剂灭活苗的免疫动态研究

本研究用不同剂量禽流感H5N1油乳剂灭活疫苗对各种周龄肉鸭、种鸭进行免疫接种,检测其相应的HI抗体水平,用酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)反应标记淋巴细胞的细胞化学方法测定其外周血中T、B淋巴细胞比值.探索肉、种鸭体液免疫和细胞免疫动态规律,为免疫防制禽流感制定最佳免疫程序提供科学依据.研究结果表明免疫接种小鸭,1周龄免疫接种效果不良,2、3周龄二次免疫效果优于2周龄一次免疫.种鸭对禽流感免疫应答反应良好;雏鸭H5N1母源抗体在出雏后3日龄达到峰值,5日龄开始下降,直至19日龄消失.     

H9N2亚型禽流感病毒细胞灭活疫苗的免疫效果评价

由于经济和技术因素的制约,尚未有成功的禽流感细胞疫苗产品上市.为此,本研究在细胞扩增而来的含有H9亚型禽流感病毒(AIV)HA和NA基因的SH441HANAPR8(NS mutant)重组病毒里加入终浓度为0.1％的甲醛进行灭活.结果显示,37℃条件下灭活24 h的效果最佳.灭活好的H9 AIV SH441HANAPR8(NS mutant)与佐剂Montanide ISA 70VG乳化制备成灭活苗,以0.05、0.1、0.2、0.3 mL/只的剂量,分别胸部肌肉注射免疫3周龄的SPF鸡,并于免疫后21d静脉感染A/Chicken/Shanghai/441/2009 (H9N2) AIV.结果显示,该疫苗的最小免疫剂量为0.2 mL.此外,研究还发现,当HI抗体效价≥25时,疫苗对鸡只的攻毒保护率达到100％.     

雏鸭重组禽流感(H5+H7)三价灭活苗母源抗体消长规律

为探究雏鸭重组禽流感(H5+H7)三价灭活苗母源抗体消长规律,确定最佳首免日龄,将试验分为A组(种鸭免疫H5N1 Re-11+Re-12株、H7N9 H7-Re-2株、H5N2疫苗)和B组(种鸭免疫H5N2 rSD57株+rFJ56株、H7N9 rGD76株疫苗);选其孵化后的雏鸭各300羽,分别于1、7、14、21、...     

瘟疫消散对禽流感H5N1亚型灭活苗免疫后抗体产生的影响

试验通过给21日龄不免疫鸡注射H5N1亚型禽流感灭活苗0.35 mL,同时每只鸡每天口服瘟疫消散0.5 g,分别于接种疫苗1,3,5,7,14,21天采血测抗体效价,与只用疫苗组相比较,现将结果报道如下。1材料及方法1.1试验动物21日龄不免疫鸡60只,由哈药集团黑龙江省生物制品一厂提供。1.2疫苗H5N1亚型禽流感灭活苗,哈尔滨兽医研究所生产,批号20050104。1.3试剂血凝抑制试验用H5N1亚型血清和血凝素,哈尔滨兽医研究所生产。1.4分组将60只鸡随机分成3组,每组20只。1.5疫苗接种Ⅰ组每只鸡颈部皮下注射H5N1亚型禽流感灭活苗0.35 mL,同时口服瘟疫消散颗粒;Ⅱ组…     

用于禽流感灭活抗原的鼻腔免疫复合佐剂

专利申请号:CN200710024385.5公开号:CN101085348申请日:2007.06.18公开日:2007.12.12申请人:南京农业大学本发明涉及一种用于禽流感灭活抗原的鼻腔     

重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型）对鸭和鹅的免疫效果观察

由H5N1亚型禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）引起的高致病性禽流感（highly pathogenic avian influenza, HPAI）是禽类的一种烈性传染病,疫苗免疫是禽流感防控中的重要环节。本试验采用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1,Re-5株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1、Re-5株+Re-4株）进行了鸭和鹅的免疫试验,对免疫鸭和鹅的抗体水平进行了动态监测。试验结果表明,两种疫苗对鸭和鹅均具有良好的免疫效果。基于试验结果提出了鸭和鹅禽流感免疫程序：2 w左右首免,4~5 w时二免,开产前三免,此后每隔4~5个月加强免疫一次。     

禽流感、新城疫、传染性支气管炎三联没乳剂灭活疫苗的研制

以禽流感病毒（AIV）H5N4株，新城疫病毒（NDV）LaSota株与传染性支气管炎病毒（IBV）M41株为抗原研制了AI－ND－IB三联油乳剂灭活疫苗，并对疫苗的物理性状，安全性，免疫效力，保存期及抗体消长规律进行了检测，结果表明，疫苗在免疫后3周后6个月内，对AIV－H5N4，NDV－北京株的攻击均获全部保护，在免疫后52周内，免疫鸡箅清中AIV－N5N4，MDV，IBV的HI抗体也保持较高的水平，疫苗在4℃保存15个月，其免疫力没有下降。     

H5亚型禽流感灭活疫苗免疫后鸡血凝抑制抗体动态变化观察

选择国家指定的两个厂家生产的禽流感灭活疫苗(H5亚型,N28株)进行无母源抗体来航鸡的免疫试验.通过鸡免疫后血凝抑制(HI)抗体的动态性检测,对两个疫苗的免疫效果进行了观察.研究结果表明,两个疫苗均具有良好的免疫效果,但也存在一定程度的差异;加强免疫可以明显提高抗体水平,延长免疫保护时间.     

鸭坦布苏病毒病-H9亚型禽流感二联灭活疫苗免疫佐剂筛选

为筛选出理想的鸭TMUV-AIV(H9亚型)二联灭活疫苗免疫佐剂,将灭活的坦布苏病毒液和禽流感病毒(H 9亚型)尿囊液分别与白油佐剂、卡波姆佐剂、铝胶佐剂、蜂胶佐剂制成抗原含量相同的TMUV-AIV二联灭活疫苗.应用阻断ELISA方法和血凝抑制方法测定免疫鸭血清中坦布苏病毒和禽流感病毒抗体,比较不同佐剂疫苗对试验鸭的免...     

H9亚型禽流感病毒和鸭坦布苏病毒二重PCR检测方法的建立

本试验旨在建立一种能同时快速检测H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)和鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)的二重PCR检测方法。根据GenBank中H9亚型 AIV的HA基因和DTMUV的NS2基因序列,分别设计了1对针对H9亚型AIV和DTMUV保守基因序列的引物。利用这2对引物对混有H9亚型AIV和DTMUV的cDNA模板进行二重PCR扩增,得到了2个大小与试验设计相符的特异性扩增条带。利用本试验建立的二重PCR对其他鸭病病原体进行PCR扩增,结果均为阴性。利用这2对引物对H9亚型AIV和DTMUV进行敏感性检测,结果显示最低检测极限分别为6.3和 6.6 pg。对临床235份样品检测的结果表明该二重PCR检测方法具有快速、敏感、特异等优点,适用于临床检测的应用。     

不同规模养鸡场禽流感灭活疫苗免疫效果的调查

对不同规模养鸡场接种禽流感疫苗的免疫效果进行了调查,结果表明:大中型种鸡场的禽流感抗体水平较高,群体几何平均效价为27.4,免疫保护率平均达93.3%。农村小型肉鸡场的禽流感抗体水平较低,群体几何平均效价为23.5,免疫保护率平均达37.2%。农村散养鸡群的禽流感抗体水平最低,群体几何平均效价为21.8,免疫保护率平均达26.1%。同时,对不同免疫状况下,鸡群接种禽流感疫苗后免疫抗体的消长动态进行了测定。     

H7亚型禽流感病毒灭活疫苗的研制及其免疫效果研究

以H7N3亚型禽流感病毒接种鸡胚,收取鸡胚液为抗原研制禽流感病毒灭活疫苗,并对制苗抗原以及疫苗的物理性状、安全性、免疫效力、免疫剂量和保护期等进行了试验,结果表明,该灭活疫苗安全性好,对28日龄鸡的最佳免疫剂量为0.5 mL/只,抗体临界保护值为5log2,免疫后6周HI效价达到高峰值9.4log2,以后逐渐下降,第20周抗体仍能维持较高水平。此外,交叉免疫保护试验表明,同一亚型之间具有良好的免疫保护作用,而亚型间缺乏坚强的交叉保护作用。     

不同NA亚型H5禽流感疫苗在鸭群的免疫效力及母源抗体对免疫效力的影响

研究以H5N2和H5N1两种油乳灭活疫苗免疫鸭群对高致病性禽流感H5N1 AIV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明，在同等免疫剂量下，从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律三项指标综合评价来看，H5N1疫苗免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保护效率较H5N2免疫组理想，故针对高致病性禽流感H5N1流行的情况，宜采用H5N1禽流感疫苗。水禽禽流感母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。     

禽流感病毒番鸭分离株对不同禽类致病性的研究

将禽流感病毒番鸭分离株ZM的感染性鸡胚尿囊液静脉或肌肉接种不同禽类,同时设鸡源JC株对照,以了解毒株的致病特点。结果显示ZM株与同期分离JC株致病能力相当,两毒株均对鸡、鹅、番鸭、鹌鹑和鹧鸪显示了很强的致病能力,致死率50％-100％,死亡禽类的肝、肾、肺、脾、胰腺等多个组织器官均存在严重的损伤。鸽子,肉鸭和绍鸭(除zM株致死一只绍鸭外)均未发生死亡,外观健康。     

HVJ-E作为禽流感H9亚型灭活苗免疫佐剂的展望

近年来,禽流感已经成为各国动物疾病防控的重中之重,其中H9N2亚型虽然是一类低致病性禽流感病毒,但其感染范围广,发病迅速,可造成重大损失。现阶段,使用灭活苗是预防H9亚型禽流感的主要方法,虽然该类疫苗可以使免疫鸡在临床上不表现发病症状,但并不能阻止其感染后的排毒和对肌肉品质造成一定的影响。研究发现,HVJ-E具有双重免疫调节作用,有希望作为H9亚型灭活苗免疫佐剂应用于临床。     

H9亚型禽流感病毒感染引起MDCK细胞内抗氧化功能的变化

将传代MDCK细胞以8×10⁴/cm²的密度接种于6孔细胞培养板,H9亚型禽流感病毒以不同剂量0(对照组)、10^-3(高剂量组)、10^-4(中剂量组)、10^-5×EID₅₀(低剂量组)分别接种,检测H9亚型禽流感病毒对MDCK细胞内抗氧化功能的影响。结果表明,与对照组相比,高剂量H9亚型禽流感病毒接种MDCK细胞使细胞内过氧化氢(H₂O₂)和羟基自由基(·OH)含量均显著增加(P>0.05),细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力均显著下降(P>0.05),细胞内的丙二醛(MDA)含量显著增加(P>0.05)。说明H9亚型禽流感病毒可显著提高MDCK细胞内活性氧自由基(ROS)含量,并降低抗氧化酶活力,阻碍ROS在细胞内的清除机制,引起细胞脂质过氧化作用,从而损伤细胞。