牡蛎抗氧化活性肽的酶解工艺研究

以木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为工具酶,利用正交试验法确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备牡蛎抗氧化活性肽的最佳酶解工艺。结果表明:当时间为150 min、酶用量为6%、温度为45℃、pH为7.0时,木瓜蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强;当时间为110 min、酶用量为3%、温度为65℃、pH为6.0时,中性蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析分析的结果表明,木瓜蛋白酶酶解液中最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1 191和826左右,中性蛋白酶酶解液最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1 074和735左右,其抗氧化活性峰值与蛋白肽在280 nm下的吸收峰值分别相吻合。     

牡蛎抗氧化活性肽的酶解工艺研究

以木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为工具酶,利用正交试验法确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备牡蛎抗氧化活性肽的最佳酶解工艺。结果表明：当时间为150min、酶用量为6％、温度为45℃、pH为7．0时,木瓜蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强;当时间为110min、酶用量为3％、温度为65℃、pH为6．0时,中性蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析分析的结果表明,木瓜蛋白酶酶解液中最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1191和826左右,中性蛋白酶酶解液最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1074和735左右,其抗氧化活性峰值与蛋白肽在280nm下的吸收峰值分别相吻合。     

鲤鱼鱼鳞蛋白的酶解制备工艺及其抗氧化活性

[目的]确定鲤鱼鱼磷蛋白的酶解制备工艺,并分析所得的鱼磷抗氧化肽的抗氧化性能。[方法]以鲤鱼鱼鳞为原料,选用胰蛋白酶考察其加酶量、反应温度、酶解时间、pH、底物浓度等因素对鱼鳞蛋白水解程度的影响,用单因素及正交试验的方法优选出鱼鳞蛋白酶解的最佳条件并测定其抗氧化活性。[结果]试验得到鲤鱼鱼磷抗氧化肽酶法制备的最佳工艺条件为pH 8.4、酶解温度45℃、加酶量4000 U/g、酶解时间3 h、底物浓度15%,此条件下得到的鱼磷抗氧化肽水解度较佳(29.97%),抗氧化能力较好。[结论]胰蛋白酶有溶解鲤鱼鱼鳞蛋白的能力,并且酶解产物的抗氧化活性与水解度有关。     

双酶分步酶解蚕蛹蛋白及其产物抗氧化活性的研究

以蚕蛹蛋白作为原料,选择出一种中性蛋白酶,与酸性蛋白酶结合,组成复合蛋白酶对蚕蛹蛋白进行了联合分步酶解。从总抗氧化能力、清除DPPH·能力、抑制羟基自由基能力、抗超氧阴离子自由基能力等方面分析了酶解产物蚕蛹蛋白肽的抗氧化活性,表明混合蛋白酶分步水解蚕蛹蛋白所得产物具有良好的抗氧化活性。     

龙须菜蛋白质的提取及其酶解产物的抗氧化特性

以干燥后的龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)粉为原料,采用超声辅助碱提酸沉法提取龙须菜蛋白质。首先通过单因素实验选择了影响龙须菜蛋白质提取率的因素及水平范围,然后以Box-Behnken中心组合设计原理建立二次响应面回归模型,确定了最佳提取条件为:碱浓度0.2 mol·L^-1、液固比24:1 (mL·g^-1)、超声时间70 min、超声功率482 W,在此条件下的龙须菜蛋白质提取率为73.78%。此外,对提取得到的龙须菜蛋白质进行了酶解,分别研究了木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、植物蛋白复合酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶对酶解产物抗氧化活性和分子量的影响。结果表明,在酶解4 h后,碱性蛋白酶酶解产物的抗氧化活性显著高于其他4种酶酶解产物和龙须菜蛋白质,其铁离子还原能力(ferric reducing antioxidant power, FRAP)、1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基清除率和2,2'-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除率分别为81.88 μg·mL^-1、63.29%、64.25%,分子量主要集中在1 500 u以下。本研究可为龙须菜蛋白质的提取及其高值化利用提供一定参考。     

丝胶蛋白及其木瓜蛋白酶酶解产物的保湿性与抗氧化活性

以全天然丝胶茧为原料提取丝胶蛋白,经木瓜蛋白酶酶解,考察丝胶蛋白及其酶解产物的保湿性,并从清除DPPH自由基能力、总抗氧化能力、抑制烃基自由基能力和抗超氧阴离子自由基能力等方面分析抗氧化活性,为开发利用优质的丝胶蛋白资源的更广泛应用提供理论依据。结果表明,丝胶蛋白经木瓜蛋白酶酶解后获得5~12 kDa的酶解产物,其优良的保湿性能优于丙二醇;丝胶蛋白及其酶解产物均具有较好的抗氧化活性,其中以酶解产物的抗氧化活性更强。抗氧化能力与浓度呈明显的正相关性。     

双酶水解麦胚制备抗氧化肽的工艺优化

以麦胚为原料,制备具有抗氧化活性的麦胚肽。对碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L与胰蛋白酶双酶组合酶解麦胚的工艺进行优化。以水解度和1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除率为考察指标,探讨酶与底物浓度的比值([E]/[S])、酶降温度和酶解时间对制备麦胚抗氧化肽工艺的影响,采用Box-Behnken中心组合设计和响应面法(RSM)优化了麦胚双酶水解的工艺条件。结果表明:双酶水解麦胚制备抗氧化肽的工艺条件为底物浓度10.0%、碱性蛋白酶与胰蛋白酶酶活比1∶1、[E]/[S]为0.041 3、酶解温度50.3℃、酶解时间2.03 h、pH8.0。验证试验表明,在此条件下,麦胚水解度和抗氧化肽对DPPH自由基清除率分别为16.65%和50.16%;其抗氧化活性小于10 mg/ml VC。     

非洲山毛豆蛋白质酶解工艺及产物抗氧化活性的研究

以非洲山毛豆脱脂粉末为原料制备富含多肽的酶解液,并对其抗氧化活性进行了研究.以水解度和清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-Diphenyl-1-（2,4,6-trinitrophenyl）hydrazyl,DP-PH）自由基为指标,选择最佳水解酶,在酶解时间、温度、pH、酶与底物比例、底物与水比例等单因素试验基础上,利用正交试验对最佳的酶解工艺条件进行优化,同时对酶解产物对DPPH.、.OH和O2-.的清除能力和抗脂质过氧化反应能力进行了研究.结果表明,碱性蛋白酶为最佳水解酶,其酶解最佳条件为：50℃pH 8.0、m（酶）∶m（底物）=2∶100、m（底物）∶m（水）=5∶100,酶解4 h;酶解液清除自由基能力大小顺序为DP-PH.〉.OH〉O2-.和抗脂质过氧化作用,最高清除率分别是91.58%、90.19%、43.56%和44.73%;当质量浓度大于0.6 g/L,酶解液抗脂质过氧化作用高于2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚（Butylated hydroxytoluene,BHT）.     

牡蛎酶解产物促进皮肤软组织创伤愈合的作用

通过动物实验,比较牡蛎酶解产物低、中、高3个灌胃剂量组与2个对照组在皮肤创伤愈合过程中的照片、创伤愈合率、瘢痕缩小率、IL-6、IL-10和TGF-β等指标。结果显示:第6、10天低、高剂量组创伤愈合率均高于两个对照组(P0.05),第14天,低、高剂量组的愈合率较阴性对照组显著提高(P0.05);牡蛎酶解产物能够有效抑制炎症因子IL-6生成,并促进IL-10分泌(P0.05);低剂量组FGF-2含量高于其他组,但无显著性差异(P0.05),与阴性对照组TGF-β含量相比,其他组皆呈现显著差异(P0.05),3个剂量组CCND1含量皆显著高于2个对照组(P0.05),低、高剂量组EGF含量显著高于其他组(P0.05);第7天低剂量组羟脯氨酸含量较阴性对照组显著提高(P0.05),第14天,各给药组均能显著提高皮肤组织中的羟脯氨酸含量且低剂量组提高了瘢痕缩小率(P0.05)。牡蛎酶解产物能够加快小鼠软组织开放性创伤愈合,对浅表瘢痕增生具有一定的抑制作用。     

牡蛎酶解产物改善睡眠作用效果研究

为探究香港牡蛎Crassostrea hongkongensis酶解产物(enzymatic products of oysters, EPO)改善睡眠的作用效果,将试验小鼠分为阴性对照组(灌胃等体积蒸馏水)、阳性对照组(灌胃地西泮2 mg/kg体质量)及EPO低、中、高剂量组(分别灌胃250、500、1 000 mg/kg体质量,分别记为EPO-L、EPO-M、EPO-H),每天灌胃一次,连续灌胃30 d后进行直接睡眠试验、延长戊巴比妥钠睡眠时间试验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠试验和戊巴比妥钠潜伏期试验,并采用ELISA试剂盒检测小鼠下丘脑和大脑皮层中5-羟色胺(serotonin, 5-HT)、γ-氨基丁酸(gamma aminobutyric acid, GABA)、褪黑素(melatonin, MT)、去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)和多巴胺(dopamine, DA)的含量。结果表明:牡蛎酶解产物3个剂量组均无直接睡眠作用,但与阴性对照组相比,均能显著延长小鼠睡眠时间(P<0.05),缩短睡眠潜伏期(P<0.05),且EPO中剂量组能显著提高小鼠入睡率(P<0.05);与阴性对照组相比,EPO低、中剂量组均能显著提高下丘脑5-HT、GABA含量(P<0.05),且显著降低下丘脑DA、NE含量(P<0.05),高剂量组能显著降低下丘脑DA含量(P<0.05);EPO低剂量组能显著提高大脑皮层GABA含量(P<0.05),中剂量组能显著提高大脑皮层GABA、MT含量(P<0.05),且显著降低大脑皮层DA含量(P<0.05),高剂量组能显著提高大脑皮层MT含量(P<0.05),且显著降低大脑皮层DA、NE含量(P<0.05)。研究表明,牡蛎酶解产物通过提高脑内抑制性神经递质5-HT、GABA、MT含量,降低兴奋性神经递质DA、NE含量,缩短睡眠潜伏期,提高睡眠发生率,延长睡眠时间,起到改善睡眠的作用,且灌胃EPO中剂量500 mg/kg体质量时改善睡眠效果最佳。     

菲律宾蛤仔木瓜蛋白酶水解物抗氧化活性研究

以菲律宾蛤仔蛋白为原料,用木瓜蛋白酶对其进行水解,采用正交实验方法研究酶解温度、酶解时间,加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH自由基清除、超氧阴离子自由基清除率和还原力评价水解物的抗氧化性。结果表明：水解度与抗氧化性之间没有正反相关系,当温度为45℃,时间为6 h,加酶量为1 500μg/g,pH为7.0时,水解度最大;温度为45℃,时间为2 h,加酶量为2 000μg/g,pH为7.0时,水解物的抗氧化活性最强;水解物对羟自由、DPPH自由基和超氧阴离子自由基均有很好的清除作用,并呈现浓度依赖性。因此,菲律宾蛤仔蛋白的木瓜蛋白酶水解物具有很好的抗氧化性。     

核桃蛋白中性蛋白酶水解物的制备及其抗氧化活性研究

[目的]研究制备核桃蛋白水解物的最佳工艺条件及水解物的抗氧化活性。[方法]以核桃蛋白为底物,采用正交试验研究制备其中性蛋白酶水解物的工艺条件,通过测定自由基清除能力研究酶水解物的抗氧化活性。[结果]制备核桃蛋白酶水解物的最优工艺条件为:温度40℃、底物浓度4%、酶浓度4 000 U/g、pH值8.0;核桃蛋白酶水解物的水解度与其对羟自由基(OH.)和超氧阴离子自由基(O2.)的清除能力有关,其水解度为24.2%时对羟自由基(OH.)和超氧阴离子自由基(O2.)的清除率分别为17.0%和52.0%。[结论]采用Sephdex G-25凝胶柱层析对水解度为24.2%的酶水解物进行分离,得到了A、B、C和D 4种肽混合物,其中,肽混合物C的自由基清除能力最大,肽混合物D最小。     

骨蛋白水解物抗氧化活性及其作用模式

 【目的】研究骨蛋白水解物的抗氧化活性及其抗氧化作用模式。【方法】将骨蛋白用碱性蛋白酶水解0.5～6 h,测定骨蛋白水解物的还原能力、金属螯合能力、清除自由基能力来综合分析骨蛋白水解物的抗氧化作用模式。【结果】骨蛋白水解物的自由基清除能力、Cu2+和Fe2+螯合能力以及还原能力均随水解时间的延长而增大,而且抗氧化活性随着水解物浓度的增加而增加。底物浓度为7％、水解5 h的骨蛋白水解物与其它水解条件下的水解物相比,具有较高的抗氧化活性和较强的清除自由基能力,且具有丁基羟基茴香醚（butylated hydroxyanisole,BHA）、没食子酸丙酯（proply gallate,PG）等抗氧化剂所不具备的金属螯合能力。7%的骨蛋白水解物与0.02% PG的抗氧化能力相近。尽管未水解的骨蛋白也有一定的抗氧化性,但其活性远低于骨蛋白水解物。【结论】骨蛋白水解物具有较高的抗氧化活性,可以作为金属离子螯合剂、氢供体和自由基稳定剂来抑制脂肪氧化。     

大豆蛋白复合酶解法研究

[目的]研究大豆蛋白复合酶解法的最佳工艺条件。[方法]以大豆粉为原料,采用复合酶解法研究了大豆蛋白水解度随酶解时间、加酶量、复合酶加酶间隔时间等的变化规律。[结果]大豆蛋白复合酶解法的最佳工艺条件为温度45℃,pH7.5,液固比7∶1,加酶量各0.2 g,反应时间8 h,间隔加酶时间3 h。[结论]此工艺对大豆蛋白的工业化生产具有积极的参考价值。     

芝麻肽的制备及抗氧化活性

为探明芝麻蛋白肽的抗氧化活性,采用Box-Behnken设计响应面试验优化碱性蛋白酶水解芝麻蛋白条件,研究芝麻肽清除DPPH自由基的能力、还原能力以及抑制猪油和冷藏熟肉糜的氧化活性.结果表明,较优水解条件为:底物与酶的质量比为12.24,底物浓度6.91%、水解时间6.82 h,在此条件下水解度为30.2%.芝麻肽具有较强的抗氧化活性和还原能力,0.2 mg/ml 芝麻肽对DPPH自由基的清除率为98.55%;0.8 mg/ml 时,还原能力的吸光度为1.267,并达到稳定.0.02%的芝麻肽能明显抑制猪油的过氧化,144 h时能将其过氧化值从126.6 meq/kg降至43.0 meq/kg;芝麻肽浓度高于0.02%时抑制效果不明显.0.08%的芝麻肽对冷藏熟肉糜氧化的抑制率达到80%.     

分步酶解法提取扁桃仁油及水解蛋白研究

以扁桃仁为原料,采用水酶法提取扁桃仁油及水解蛋白。经比较,选用纤维素酶、碱性蛋白酶进行分步酶解。通过单因素试验和正交试验,确定最佳工艺条件为:料水比1∶5,纤维素酶用量2%,pH值5,温度45℃,时间4.5 h;碱提pH值8.5,温度55℃,时间30 min;碱性蛋白酶用量1.5%,pH值9.5,温度50℃,时间2 h。在此条件下,扁桃仁油与水解蛋白提取率分别为76.03%和84.39%。     

Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

[目的]研究Alcalase蛋白酶对大豆分离蛋白的水解作用及水解物的性质。[方法]通过单因素试验,研究pH值、温度、酶浓度、底物浓度等因素对Alcalase蛋白酶酶解大豆分离蛋白的影响,通过正交试验确定Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解条件。[结果]Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解条件是pH值8.0、温度60℃、酶浓度1000U/g、底物浓度3%,水解时间2h,大豆分离蛋白水解度为46.13%。[结论]酶解后大豆分离蛋白的水解度达到了制备大豆多肽的要求。     

不同还原糖与小麦水解蛋白Maillard反应的比较研究

[目的]探讨还原糖种类对Maillard反应的影响。[方法]以小麦水解蛋白为混合氮源,分别与葡萄糖、果糖和木糖于相同条件下反应制备反应型香料,以铵态氮损失率为指标考察3种还原糖的Maillard反应活性,并对反应产物的醚溶性成分进行分析,同时对加入3种反应物的参比卷烟进行感官评价。[结果]3种还原糖与小麦水解蛋白的Maillard反应活性依次为木糖〉葡萄糖〉果糖;葡萄糖反应产物中主要含呋喃类化合物及2-乙酰吡咯,果糖反应产物中主要含取代吡嗪类化合物和呋喃甲醇,木糖反应产物中主要含呋喃类化合物等。[结论]果糖和木糖与小麦水解蛋白的反应产物可较好的改善参比卷烟的感官品质。     

花生蛋白酶解条件及酶解产物功能特性的研究

[目的]研究花生蛋白酶解条件、酶解产物的功能特性。[方法]采用酶解法,从花生饼粕粉中提取花生蛋白,通过单因素试验,考察了不同条件下花生饼粕粉中蛋白质的提取情况,并对其功能特性进行了研究。[结果]最佳的蛋白质提取率的条件为花生饼粕粉在55℃水热处理6 h,固液比为1∶20,溶液pH为12,加酶量为0.5%,在此条件下花生蛋白的提取率为74.62%。[结论]酶解花生蛋白具有较高的提取率。酶解产物具有较好的乳化性、起泡性及保水性。