大鲵人工催产与孵化技术研究

对大鲵(A ndrias davidianus)的人工催产和孵化技术进行了研究.结果表明,LRH-A2和HCG催产效果较好,经人为调控可使大鲵性腺成熟度状态良好;人工孵化时通过严格控制水温18～21℃、溶氧保持在5 mg/L以上、光照度300 lx以下,给予适当的流水刺激,孵化率可达76.4％.     

中国大鲵病害生态综合防控体系构建

在大鲵(Andrias davidianus)人工养殖过程中,系统构建完善的病害生态综合防控体系是防止和减少大鲵病害发生的技术关键。从大鲵养殖设施的选址,苗种种质,规范的养殖设施建设,分级饲养技术,饵料投喂,水质管理,检验检疫,"四定"、"四勤"、"一隔离"技术措施,信息档案管理,生产管理日志建立等方面进行了系统论述。     

黔南地区成体大鲵生长及生活习性的周年观察

对黔南地区成体大鲵(Andrias davidianus)进行了14个月喂养观察试验。结果表明,成体大鲵体长生长和体质量生长是两个完全不同的过程,二者之间反向关系明显;体长生长与水温呈正向关系;体质量生长与水温关系复杂,有高温和低温限制。大鲵喜欢阴暗安静的环境,食性范围较广;排出团状或细沙状粪便,且进食越多,排便次数就越多。大鲵具有蜕皮习性,蜕皮次数与体质量生长具有正向关系。黔南地区饲养的大鲵很少冬眠,在生长高峰期投喂充足饵料,能够有效促进增重率;用福寿螺配合饲料喂养鲤鱼,再用活鲤鱼喂养大鲵,可以显著提高人工养殖大鲵的经济效益。     

虹彩病毒和柱状黄杆菌混合感染大鲵的诊治

2012年7月,贵州省某大鲵养殖场发生了以大鲵体表和四肢多处溃烂、内脏器官出现充血、出血为特征的疾病,经过临床症状观察、病理剖检及实验室诊断,诊断为虹彩病毒(Iridovirus)和柱状黄杆菌(Flabobacterium columnare)的混合感染.通过采取综合有效的防治措施,大鲵疫情得到有效控制.     

大鲵亲鲵的培育研究

2003-2005年在西安市大鲵(Andrias daviddanus)生态繁育养殖基地对大鲵亲体进行培育,分别采取单池群养培育、单池单养培育、雌雄一对一隔网单养培育三种培育方式开展试验.三种方式培育结果显示,雌雄素鲵参繁率为雌雄一对一隔网单养培育＞单池单养培育＞单池群养培育,且雌鲵整体发育优于雄鲵;产卵量为雌雄一对一隔网单养培育＞单池单养培育＞单池群养培育;亲鲵产后成活率为雌雄一对一隔网单荞培育=单地单养培育＞单池群养培育.雌雄一对一隔网单养对亲鲵培育较为有利,可以减少干扰与伤残.     

不同方法对大鲵不同部位的蛋白质含量测定

采用考马斯亮蓝法、紫外分光光度法、福林—酚试剂法,对人工养殖大鲵(Andrias davidianus)的前胸、中胸、尾部的背部及腹部肌肉的蛋白质含量进行了测定。结果表明,大鲵肌肉中不同部位的蛋白质含量存在差异,考马斯亮蓝法、紫外分光光度法、福林—酚试剂法均测得大鲵中胸腹部肌肉的蛋白质含量最高,分别为214.58、219.20、251.41 mg/g;在尾腹部最低,分别为88.05、85.71、105.28 mg/g。尽管3种方法含量测定存在差异,但其均显示蛋白质含量在大鲵体中分布为中胸前胸尾部。     

不同育龄大鲵肌肉和皮肤营养成分测定研究

本研究分别提取3育龄、6育龄仿生态养殖大鲵的肌肉和皮肤,测定其营养成分、氨基酸含量及矿物质元素含量。结果表明,仿生态养殖大鲵营养丰富。大鲵皮肤平均粗蛋白含量高于肌肉3.3%,6育龄大鲵肌肉粗蛋白含量高于3育龄2.8%;仿生态养殖大鲵肌肉的平均EAA/TAA为41.61%,平均EAA/NEAA为71.31%,达到理想模式,且6育龄大鲵蛋白质优于3育龄大鲵;6育龄大鲵肌肉矿物质含量较3育龄大鲵高3.71%。由此看出,仿生态养殖大鲵具有重要的市场价值,6育龄大鲵肌肉营养丰富,口味鲜美,更适合进行深加工,应对其进行重点开发和利用。     

清热生肌膏治疗大鼠深II度烫伤试验研究

研究清热生肌膏对大鼠深Ⅱ度烫伤创面的保护作用及作用机制。将SD大鼠100只随机分成模型组、烧伤膏组、清热生肌膏高剂量组、清热生机膏低剂量组。模型组及治疗组采用烫伤仪持续烫伤大鼠股部8 s制成深Ⅱ度烫伤模型,伤后立即给药,每天1次,连续21 d,不同的时间点取材,测定创面的创面愈合率、组织含水量、血管内皮生长因子(VEGF)、羟脯氨酸(Hyp)、血清白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-β(TNF-β)含量。结果表明,清热生肌膏对大鼠深Ⅱ度烧伤具有良好的保护作用,其作用机制和增加创面VEGF、Hyp水平,降低血清IL-1、TNF-β含量有关。     

石斛抗氧化和滋阴作用的试验研究

[目的]研究金钗石斛、鼓槌石斛和铁皮石斛的抗氧化和滋阴药效异同,为其临床用药提供一定的科学依据。[方法]采用DPPH.清除率检测法评价其体外抗氧化活性;并采用氢化可的松建立阴虚大鼠模型,用试剂盒法测定血清中的超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和乳酸脱氢酶(LDH)的活力,并计算大鼠体重、进食量以及死亡率,评价石斛滋阴效果。[结果]体外抗氧化试验表明,3种石斛的抗氧化作用强弱为:铁皮石斛鼓槌石斛金钗石斛,铁皮石斛与鼓槌石斛抗氧化活性和Vc接近,金钗石斛次之;浙江产铁皮石斛和云南产鼓槌石斛抗氧化效果相当,均优于其他产地的。滋阴试验结果表明,铁皮石斛和鼓槌石斛滋阴作用等同,金钗石斛次之。[结论]铁皮石斛、金钗石斛和鼓槌石斛抗氧化和滋阴有差异,在临床使用时可有选择的使用。     

不同矿山化学药剂对水体COD贡献和影响的试验研究

矿山选矿药剂的使用已经引起了严重的水体污染,为了可持续利用矿区水资源,选择了常见的5种浮选药剂和3种起泡剂进行了其对水体化学需氧量（COD）贡献和影响的试验研究。研究结果表明：不同浓度范围的乙黄原酸盐（乙黄）、丁黄原酸盐（丁黄）、聚丙烯酰胺（PAM）、乙硫氮、Ds对水体COD的贡献不一样,并且同一种浮选药剂在不同浓度条件下对应的c0D并不呈现线性关系。总体来看,5种药剂中丁黄对COD贡献最大,而乙硫氮对COD贡献最小。不同来源起泡剂对水体COD的贡献有较大差异,总体来看GY2”要比SD2”及ZLZZ2”的COD贡献大。起泡剂的GC—MS仪器分析结果显示起泡剂中多环化合物或者杂环化合物占的比例越大,其对废水COI）贡献越多,因此研制以直链状为主要成分的“环保型”起泡剂显得尤为迫切。     

张家界大鲵国家级自然保护区功能分区研究

对张家界大鲵国家级自然保护区功能分区进行调查,分析了该区域1995年功能分区及存在的问题,以及2015年功能分区调整的意义与不足。提出了对该自然保护区功能分区调整的思路,建议将有野生大鲵栖息区域划分为核心区,缓冲区调整到核心区外围,将可以通过生态恢复进行大鲵种群恢复的区域划分为实验区,将主城区、集镇等人口密集区域或农田毗邻河段划出保护区,为自然保护区功能分区的调整提供借鉴。     

Effects of Water Quality on the Distribution of Chinese Giant Salamander (Andrias davidianus) in Guizhou Province,China

13 water quality parameters were tested from 38 reaches of 34 counties in Guizhou where Chinese giant salamander (Andrias davidianus ) distributed over the past 30 years. Dissolved oxygen and pH were found to be significant determinants of the species distribution in recent years (P<0.05). There was no Chinese giant salamander distribution in the recent five years in rivers with dissolved solids of greater than 415 mg/L, conductivity of greater than 639 us/cm, salinity of greater than 0.31 ppt and total hardness of greater than 150 mg/L. Sensitive to environment, the Chinese giant salamander is an important indicator for environmental quality, so it could be used as one of the environmental indicator. Eutrophication, chemical fertilizer, pesticides and inorganic pollutants may be one of reasons driving wild CGS into extinction.     

Collected Data of Local Ecological Knowledge to Predict Current Status and Potential Threats of salamander (Andrias davidianusin) in Zhengan County of Guizhou Province,China

Chinese giant salamander (CGS, Andrias davidianus ) is experiencing the threat of extinction. It is disappearing gradually, because of overharvesting, environmental pollution, specially river pollution, activity of human exploitation, and so on. We conducted community interview fieldworks to collect respondent data from Xieba Country (not reserve) situated in Zhengan County of Guizhou Province, where one of the places known by historical giant salamander records in Guizhou. Through the analysis of the collected data, we created quantitative data of use for conservation management on the local status of salamander populations, and we compared our data with those available data of Y. Pan et al., who investigated the status of CGS in 3 reserves in Guizhou Province in 2015.The conclusions have a similar trend, which proved that the collected data were creditable. Through statistical analysis of the comparison data, the number of wild CGS decreased actually followed the increase of artificial framing. Because of the source of breeding to catch wild CGS, overharvesting was likely the most reason to make wild CGS decline.     

高效液相色谱法测定中药复方透皮软膏中绿原酸和咖啡酸的含量

建立了同时测定中药复方透皮软膏中绿原酸和咖啡酸含量的高效液相色谱方法.采用Shim-pack VP-ODS( 150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈和0.1％磷酸溶液(体积比为9∶91)为流动相,等度洗脱,327 nm处检测,绿原酸和咖啡酸分别在0.078～0.786 μg/mL(R2=0.9997)和0.042～0.420 μg/mL (R2=0.999 5)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.95％和100.06％,RSD分别为0.42％和1.35％.结果表明,此方法灵敏度高、操作简便、结果准确、重复性好,可用于中药复方透皮软膏中绿原酸及咖啡酸含量测定.     

大鲵虹彩病毒主要衣壳蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

根据大鲵虹彩病毒(Chinese giant salamander iridovirus,GSIV)主要衣壳蛋白(Major Capsid Protein,MCP)基因设计引物,PCR扩增得到MCP基因编码框全长序列1 392 bp,将其克隆到原核表达载体p ET-32a中,构建了重组原核表达载体p ET-32a-MCP,并在大肠杆菌BL21中得到了表达,融合表达的重组蛋白分子量约为70 ku,与预期大小一致,主要以包涵体的形式存在。对IPTG浓度,诱导温度等诱导表达条件进行优化,确定0.5 mmol/L的IPTG于37℃的条件下诱导6 h重组蛋白的表达量最佳。纯化GSIVMCP重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备了GSIV-MCP多克隆抗体,ELISA检测抗体效价大于1∶50 000。Western blot检测显示该抗体可以特异性识别重组蛋白。间接荧光免疫结果表明,该多克隆抗体可与由GSIV感染引起细胞病变的EPC细胞(GICB)发生特异性的结合。研究为建立GSIV免疫诊断方法以及为研究GSIV MCP基因编码蛋白的功能奠定了前期基础。     

中草药复方制剂对肉鸡新城疫的防治研究

将300只大小适中,健康无病的肉仔鸡,用鸡新城疫疫苗首次免疫后,随机分为6组,其中1、2、3、4、5组免疫后5周内在饮水中按0.5%剂量分别添加不同配比的中草药金银花、板蓝根、连翘、黄芪、柴胡等,空白对照组0组饮水中不添加任何药物,在免疫后14、28 d时,检测鸡新城疫HI抗体效价。结果显示,大多数试验组鸡的新城疫抗体效价都显著高于空白对照组,其中以黄芪、柴胡组方和以金银花、柴胡、连翘、黄芪四种中草药为主的组方效果最为显著。     

酸枣活性成分分析及药理作用研究进展

对酸枣中的主要活性成分黄酮类、皂苷类、生物碱类物质、脂肪酸、氨基酸及矿物质等进行分析,并对其主要药理作用的研究进展进行综述,为酸枣仁的进一步开发利用提供依据。     

2株奶牛乳房炎分离菌的耐药性检测及中草药体外抑菌试验

对陕西省某奶牛场的临床型乳房炎病牛奶样中分离的金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌进行了14种常用抗生素的耐药性筛选和中草药体外抑菌研究.2株致病菌对青霉素类药物(除氧哌嗪青霉素外)、复达欣和磺胺类药物有耐药性,而对庆大霉素和万古霉素等敏感.所选的中草药石榴皮和连翘对金黄色葡萄球菌的效果最好,最低杀菌浓度(MBC)均为31.25 mg/mL,穿心莲次之为62.50 mg/mL;对表皮葡萄球菌抑菌效果,石榴皮MBC为7.81 mg/mL,大黄为31.25 mg/mL,穿心莲、金银花和连翘为125.00 mg/mL,白附子和紫花地丁为62.50 mg/mL.自拟复方对金黄色葡萄球菌的抑菌环大小为18.58 mm,MBC为62.50 mg/mL;对表皮葡萄球菌的抑菌环大小为23.82 mm,MBC为31.25 mg/mL.筛选的中草药复方可以作为治疗乳房炎的药物.     

分子佐剂鞭毛素对弓形虫SAG1蛋白抗体应答的影响

将沙门氏菌鞭毛素和弓形虫免疫优势表面抗原1(SAG1)融合表达,研究其在小鼠上激发的体液免疫应答.首先,采用PCR扩增SAG1片段.其次,将SAG1连接到原核表达载体pET-28a中构建表达质粒pET-28a-SAG1;连接到实验室已有的pET-28a鞭毛素质粒中构建表达质粒pET-28a-F-SAG1;质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株中并进行表达.将纯化后的蛋白免疫小鼠,每隔2周免疫一次,共免疫3次,第3次免疫后15 d取小鼠血清.最后,采用蛋白印迹检测蛋白的大小;用酶联免疫吸附方法检测血清中多克隆抗体的效价.结果表明,诱导出的SAG1蛋白大小为30 ku,F-SAG1大小为70 ku.酶联免疫吸附方法检测的D450 nm均为阴性对照的两倍,表明该多克隆抗体具有较高效价.可见,鞭毛素可以作为分子佐剂促进弓形虫亚单位疫苗的体液免疫应答.