两种酶快速检测有机磷农药残留条件优化研究

比较了快速测定蔬菜中有机磷农药残留的两种酶抑制法,即胆碱酯酶抑制法和植物酯酶抑制法,通过正交试验优化了两种酶抑制法的测定条件。结果表明:动物酯酶中的苍蝇酶、蝇蛆酶与植物酯酶中的小麦酯酶活力和被农药抑制程度相近;玉米酯酶的活力远低于小麦酯酶的活力,不适于用来检测残留农药;动物酯酶在pH值7.0时活力最高,小麦酯酶在pH值6.0时最高。     

酶活性抑制测定农药残毒技术研究

根据有机磷和氨基甲酸酯两类农药的毒理机制，利用离体乙酰胆碱酯酶ＡＣｈＥ（从敏感品系的家蝇头部提取）与食品中微量的农药残留作用，用比色法确定ＡＣｈＥ受抑制的程度，据此计算出农药残留的相当量。该项检测技术不需昂贵的仪器设备，方法快速、准确，能满足测定农药残留量的要求，适合基层推广应用     

自制酯酶对甲胺磷农药残留的快速检测研究

利用猪肝提取酶水解碘化硫代丁酰胆碱后形成的硫代胆碱,与二硫双对硝基苯甲酸发生化学反应测定酶、底物的添加量以及保温温度和保温时间对酶活力的影响,并研究了不同浓度与保温时间的甲胺磷对胆碱酯酶活力的抑制情况。结果表明自制胆碱酯酶对甲胺磷比较敏感,其样品最低检出浓度为2.0mg/kg,适合对蔬菜中高残留农药的快速检测。     

豆类酯酶的提取及其在有机磷农药检测中的应用

研究了多种豆类酯酶的提取及酶活力的测定,并根据酶抑制法原理,研究了各种不同豆类来源的酯酶对有机磷农药的敏感性。结果表明:不同豆类来源的酯酶对敌敌畏、甲胺磷等8种农药的敏感性不同,其中以绿豆、黑豆来源酯酶的总酯酶活力和敏感性为最好。     

猪肝酯酶农药敏感性及其与胆碱酯酶的对比研究

【目的】探讨猪肝酯酶(PLE)对农药的敏感性,为农药残留快速检测提供新的敏感酶源。【方法】以乙酸-1-萘酯为底物,考察PLE酶促反应的最适温度、p H及几种农药的最佳作用时间,同时比较了PLE对几种特异性酶抑制剂的敏感性;以电鳗乙酰胆碱酯酶(ACh E-ee)、马血清丁酰胆碱酯酶(BCh E-hs)为对照酶源,采用酶抑制法,绘制5种有机磷农药(敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、辛硫磷、毒死蜱)和5种氨甲酸酯类农药(灭多威、克百威、丁硫克百威、残杀威、涕灭威)的抑制曲线,并计算相关半抑制率(IC50),比较各种酶的农药敏感性。【结果】猪肝酯酶酶活测定方法的最佳温度、时间、p H分别为35℃、15 min、7.0;农药最适作用时间为15min;猪肝酯酶对双(4-硝基苯基)磷酸酯敏感性最高,毒扁豆碱次之,盐酸多奈哌齐最低;与胆碱酯酶相比,猪肝酯酶对供试的多数有机磷农药和氨甲酸酯类农药的IC50更低,,敏感性更好。【结论】猪肝酯酶具有良好的农药敏感性,可以作为酶抑制法农药残留快速检测的候选酶源。     

采用酶抑制法检测大枣中的农药残留

目的:大枣中可能含有有机磷及氨基甲酸酯类的农药残留成分,使用酶抑制法测其农药残留。方法:大枣样品经乙酰胆碱酯酶水解后,在分光光度计412nm处测定吸光度求得抑制率,判断是否含有农药残留。结果:经检测,五种大枣样品的抑制率均小于70%,为阴性。结论:该方法具有操作简便、快速、测定方法易于掌握的优点。     

蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的检测方法

胆碱酯酶对底物分解反应的催化能力与其活性成正相关。而蔬菜中农药对胆碱酯酶的活性起抑制作用,抑制程度的大小与农药残留毒性成线性相关。因此,通过测试蔬菜样品与胆碱酯酶作用前后催化反应的速率变化,即可测试胆碱酯酶的活性变化,从而测试出样品中的农药残留。     

农药残留快速检测方法有哪些特点?

<正>酶抑制法农药残留快速检测,是利用一些农药对酶的抑制作用进行农药分析的方法。常用的酶类有胆碱酯酶和羧酸酯酶等。主要检测有机磷或氨基甲酸酯类农药,具有简单、方便、快捷、成本低廉的特点,检测过程只需30min左右,是一种定性(半定量)的检测方法,适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的残留检测,不适用于蔬菜中其他类型农药,对某些种类农     

不同来源的乙酰胆碱酯酶对农药灵敏度的影响

通过提取苍蝇、鸡肝、蚯蚓血清、牛肉和马鲛鱼中的乙酰胆碱酯酶,配合农药残留检测仪,比较5种不同来源的乙酰胆碱酯酶对农药残留快速检测灵敏度的影响.结果表明:5种不同来源的乙酰胆碱酯酶对农药的灵敏度存在较大差异,蚯蚓血清中的乙酰胆碱酯酶对农药的灵敏度较强,对辛硫磷的灵敏度达0.2mg/kg,对敌百虫的灵敏度达0.1mg/kg.     

有机磷水解酶对不同有机磷农药降解功效的评价

通过2种检测方法测定了有机磷水解酶对不同有机磷农药的降解功效,一种方法是通过气相色谱法直接检测降解产物中农药的残留量来评价有机磷水解酶对不同农药的降解功效;另一种方法是利用有机磷类农药可以抑制乙酰胆碱酯酶的活性,受抑制的胆碱酯酶不能将靛酚乙酸酯(红色)分解为靛酚(蓝色)和乙酸的原理,通过测定有机磷水解酶降解后有机磷农药的残留量对胆碱酯酶的抑制作用来评价有机磷水解酶对不同有机磷农药的降解功效。研究结果发现:有机磷水解酶对甲基对硫磷、对硫磷、喹硫磷和敌敌畏具有高效降解作用,降解率在82.2%～98.7%;其次是氧乐果、久效磷和敌百虫,降解效率在28.1%～45.4%;其他的降解效率均在20%以下。     

鸡血液中乙酰胆碱酯酶的提取研究

[目的]为了研究硫酸铵盐析法在乙酰胆碱酯酶分离纯化中的效果,从而利用乙酰胆碱酯酶的活性变化反映农药的污染情况。[方法]采用硫酸铵盐析和等电点区分的方法从鸡血中提取乙酰胆碱酯酶,并探讨其适宜的pH值范围。[结果]结果表明:pH值4.5左右大量的杂蛋白能被除去,可获得较高乙酰胆碱酯酶得率;采用饱和度为50%~60%的硫酸铵盐析效果较好,据此得出较佳的提取工艺。[结论]该研究结果为后续鸡血AChE的提取、分离、纯化等工作提供了相应的参考,同时为利用乙酰胆碱酯酶指示环境受有机磷和氨基甲酸酯类农药污染的后续研究和应用提供了理论依据。     

深圳市龙岗区德国小蠊野生品系相关抗性酶活性研究

[目的]比较深圳市龙岗区德国小蠊野外品系与敏感品系主要抗性酶比活力的差异。[方法]采用分光光度法检测了德国小蠊野外品系和敏感品系各种抗性酶的比活力。[结果]野生品系与敏感品系德国小蠊GSTs、ACP、AchE酶比活力分别为3 750.49和1 781.95、450.71和156.73、5.61和2.86 U/mgpro。野外品系中GSTs、ACP、AchE酶比活力较敏感品系显著升高,而ALP、Na^＋-K^＋-AT-Pase、SOD酶比活力较敏感品系差异不显著。[结论]从生化水平上看,深圳市龙岗区野生品系德国小蠊已产生抗药性,可能与GSTs、ACP、AchE酶的解毒代谢活性提高密切相关。     

三硝基甲苯对斑马鱼组织ATP酶·乳酸脱氢酶和谷胱甘肽活性的影响

[目的]探讨三硝基甲苯(TNT)对斑马鱼(Danio rerio)组织中酶活性的影响,为评价TNT的毒性效应提供参考。[方法]采用毒性试验方法研究了不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0 mg/L)的TNT对斑马鱼肝和鳃中ATP酶、头中乳酸脱氢酶(LDH)和肝中谷胱甘肽(GSH)活性的影响。[结果]肝和腮组织中的ATP酶活性随浓度的升高而降低;肝中GSH的活性随浓度的升高而升高;头中LDH活性随浓度的升高而降低。酶活随时间的变化规律和随不同浓度的变化规律相同,但变化缓慢。[结论]用斑马鱼肝和腮组织中酶活性作为毒理学指标能较好地评价TNT的毒性效应。     

纳米有机二氧化硅对土壤-青菜系统六六六迁移的影响

[目的]研究纳米有机二氧化硅对小青菜吸收土壤中六六六的阻抑作用。[方法]采用盆栽试验,研究六六六污染土壤中添加不同比例（0（CK）、1％、2％、4％）纳米有机二氧化硅对小青菜鲜重、土壤中六六六残留量和小青菜六六六含量的影响。[结果]纳米有机二氧化硅可促进小青菜生长,添加量为1％、2％的处理小青菜鲜重相等,且最大,对照鲜重最低;4个处理土壤中六六六残留量在1．25～1．80μg／g,对照残留量最高,添加1％纳米有机二氧化硅的土壤残留量最低。纳米有机二氧化硅添加比例为1％、2％和4％时,小青菜中的六六六含量分别较对照下降8．46％、67．47％和62．32％。[结论]土壤中纳米有机二氧化硅的添加比例为2％时,既有利于小青菜生长,又有利于抑制其对六六六的吸收。     

防治卫生害虫喷撒剂与涂抹剂名录

收集编排了1995－1998年在我国曾取得农药登记的防治卫生害虫的喷撒剂与涂抹剂商品共11个，其中喷撒剂商品105个，涂抹剂商品6个。喷撒剂商品中有单剂77个，二元混剂24个，三元混剂4个；涂抹剂商品中有单剂5个，二元混剂1个。它们隶属农药有效成分40种，其中扩除虫菊酯23种，有机氯1种，有机磷4种，氨基甲酸酯3种，其它9种。     

寄主植物对小菜蛾田间种群抗药性衰退及其酯酶活性的影响

通过毒力测定和生化分析,研究小菜蛾[Plutella xylostella(L.)]田间种群对12种杀虫剂的抗性稳定性,探讨花椰菜(Brassica oleraceavar.botrytisDC)、芥兰(B.alboglabraBailey)、上海青[B.campestrisL.ssp.Chinensis(L.)M ak ino]、甘蓝(B.oleraceaKale)等4种不同寄主植物对抗药性衰退的影响,以及在此过程中小菜蛾幼虫乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的活力变化.结果表明,在脱离选择压力的条件下,用花椰菜饲养4代后,小菜蛾对氯氰菊酯、杀虫双、灭多威、杀灭菊酯、毒死蜱、辛硫磷、甲胺磷抗性水平较快下降,抗性衰退比达1.65-3.68,而对阿维菌素、氟虫腈、虫螨腈、氟啶脲和刺糖菌素的敏感性变化相对较小,抗性衰退比为0.90-1.19.小菜蛾取食不同寄主植物4代后对甲胺磷敏感性变化显著,以取食上海青的小菜蛾种群最为敏感,其次为取食芥兰、甘蓝和花椰菜的种群,F1代与F5代的LC50比值分别为3.68、4.43、5.18、7.70.衰退过程中,不同种群乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶活力均有所下降,F5代各种群间乙酰胆碱酯酶比活力差异不显著,而羧酸酯酶比活力间则有显著差异,比活力大小顺序依次为花椰菜、芥蓝、甘监、上海青的小菜蛾种群,F1代与F5代活力比值分别为1.72、1.90、2.70、5.14;F1种群的米氏常数(Km)值明显高于F5种群,为F5种群的1.61-2.10倍,而F5代各种群变化不大,F1代种群的最大反应速率Vm ax与F5各种群相比没有明显差异.     

重金属复合污染对青菜生长和生理生化指标的影响

通过盆栽试验,研究了不同浓度的重金属复合污染对青菜生长及其生理生化指标的影响,结果表明:(1)随着污染浓度的增加,青菜的叶面积呈逐渐下降的趋势,2倍国标处理显著低于其他处理;2倍国标处理的株高显著低于其他处理;对照的地上部分鲜重显著高于其他处理,0.5倍国标和1倍国标处理显著高于1.5倍国标和2倍国标处理。(2)在重金属复合污染下,青菜维生素C含量有一定的下降,但随着污染浓度的增加而呈逐渐升高的趋势,且各处理之间差异不显著。(3)随着污染浓度的增加,青菜的过氧化氢酶活性呈逐渐下降的趋势,对照组显著高于复合污染处理组,0.5倍国标处理显著高于1.5倍国标处理。(4)青菜的脯氨酸含量随着污染浓度的增加而呈先增加后下降的趋势,但是各处理之间的差异不显著。     

云南东方蜜蜂Apis cerana Fabricius的研究

 本文通过对云南省17个地(州、市)92个县124个点的东方蜜蜂进行形态测定及生物学特性观察,论述了东方蜜蜂在云南的地理分布、形态分化、地理变异和生产性能等方面的问题,确立了云南省的东方蜜蜂有3个亚种:印度亚种Apis cerana indica Fabricius,西藏亚种Apis cerana skorikovi Maa和指名亚种Apis cerana cerana Fabricius,同时提出了资源的利用意见。     

防治卫生害虫气雾剂与烟雾剂名录

收集编排了１９９５￣１９９８年在我国曾取得农药登记的防治卫生害虫的气雾剂与烟雾剂商品共１８０个,其中气雾剂商品１３０个、烟雾剂商品５０个。气雾剂商品中有单剂７个、二元混剂９０个,三元混剂３３个;烟雾剂商品中有单剂４０个、二元混剂１０个。它们隶属农药有效成分２５种,其中除早菊酯１种、拟除虫菊酯２０种、有机氯１种、有机磷２种、氨基甲酸酯１种。     

意大利蜜蜂蜂王与工蜂幼虫甲基供体S-腺苷甲硫氨酸合成与代谢的差异

【目的】研究意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)蜂王与工蜂幼虫甲基供体S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)合成与代谢的差异,为探索DNA甲基化与蜜蜂级型分化的关系提供理论依据。【方法】试验选用890只1日龄雌性蜂幼虫,分别来自5群姐妹蜂王群。其中445只进行人工育王(89只/群);剩余445只培育成工蜂(89只/群)。取3、4、5日龄蜂王和工蜂幼虫,测定其体内SAM合成与代谢关键酶基因表达和酶活性的差异。【结果】蜂王幼虫SAM含量随日龄的增加变化不显著(P0.05);工蜂幼虫SAM含量随日龄增加呈上升趋势(P0.05)。蜂王幼虫SAMS基因表达量随日龄增加呈梯度下降的趋势(P0.01),而工蜂幼虫SAMS表达随日龄变化不显著(P0.05);3日龄与4日龄时,蜂王幼虫SAMS表达量显著高于工蜂(P0.05),5日龄时,工蜂幼虫SAMS表达量显著高于蜂王(P0.05)。Dnmt1a与Dnmt3表达在两级型间差异不显著(P0.05),其中蜂王幼虫Dnmt1a表达随日龄增加无显著变化(P0.05),但其酶活性呈下降趋势(P0.05);工蜂幼虫Dnmt1a表达随日龄增加呈下降趋势(P0.05),其酶活性呈上升趋势(P0.01),其中3日龄与4日龄时,蜂王幼虫Dnmt1酶活性显著高于工蜂幼虫(P0.05),而5日龄时,工蜂幼虫Dnmt1酶活性显著高于蜂王幼虫(P0.05)。蜂王Dnmt3表达量随日龄增加呈下降趋势(P0.05),工蜂幼虫Dnmt3表达随日龄增加变化不显著(P0.05);蜂王幼虫Dnmt3酶活性随日龄变化不显著(P0.05),工蜂幼虫Dnmt3酶活性随日龄变化显著(P0.05),但蜂王幼虫Dnmt3酶活性在3、4、5日龄均显著高于工蜂幼虫(P0.01)。【结论】3—5日龄意大利蜜蜂蜂王幼虫与工蜂幼虫体内活性甲基供体SAM的合成与代谢存在差异。在4日龄之前,蜂王幼虫SAM的合成比工蜂活跃,4日龄之后,工蜂幼虫的SAM合成与蜂王幼虫相近;在4日龄之前,SAM参与DNA维持甲基化的代谢过程,蜂王幼虫比工蜂活跃,4日龄之后,工蜂幼虫比蜂王幼虫活跃;在3—5日龄,SAM参与DNA从头甲基化的代谢活性,蜂王幼虫始终不低于工蜂幼虫。