2021年青海省兽医系统实验室检测能力比对结果分析

为评估青海省兽医系统实验室检测能力，2021年9月，青海省动物疫病预防控制中心组织全省开展能力比对工作，共有8个市（州）、39个县（市）的47个兽医实验室参加，分别开展了非洲猪瘟病毒核酸检测、高致病性禽流感H5/H7亚型鉴别诊断、口蹄疫病毒O型抗体检测、布鲁氏菌抗体检测和细菌染色镜检。全省8个市（州）、39个县（市）动物疫控中心兽医实验室全部参加了能力比对，共检测盲样700份，检测结果准确559份，总准确率为79.86%(559/700)，其中准确率为100%的实验室有12个，占参与比对实验室总数的25.53%(12/47)。结果表明，青海省兽医系统实验室检测能力总体良好，部分县（市）级兽医实验室因人员不固定、基础设施薄弱、资金支持不足等原因导致检测能力较弱。     

2022年湖南省兽医实验室检测能力比对及非洲猪瘟检测能力验证

实验室检测能力比对与能力验证是评估实验室检测质量的重要手段。2022年4月,按照农业农村部关于检测能力比对的工作部署和要求,湖南省组织全省14个市级77个县级兽医系统实验室开展了检测能力比对,267个实验室开展了非洲猪瘟能力验证。市级开展禽流感病毒H5/H7亚型核酸鉴别检测、非洲猪瘟病毒核酸检测、O型口蹄疫病毒抗体检测3个项目,县级开展非洲猪瘟病毒核酸、O型口蹄疫病毒抗体以及布鲁氏菌抗体检测3个项目,非洲猪瘟检测实验室开展非洲猪瘟病毒核酸检测项目,每个项目各5份盲样。结果显示:12个市级和59个县级系统实验室所有比对项目检测结果全部准确,实验室整体准确率为78.02%,1 355份样品中1 317份样品检测结果准确,样品整体准确率为97.20%;267个参加非洲猪瘟能力验证的实验室中,224个实验室核酸检测结果准确,实验室整体准确率为83.90%,1 335份样品中1 265份样品结果准确,样品整体准确率为94.76%,其中屠宰企业样品准确率最低(93.30%)。结果表明:湖南省兽医实验室检测能力整体良好,但部分县级兽医系统实验室及屠宰企业实验室检测能力有待加强。各地应继续加强实验室检...     

2019～2020年攀枝花市县（区）兽医实验室检测能力比对分析

为全面提升基层兽医系统实验室检测能力和动物疫情监测预警水平,推进各级兽医实验室重视实验室检测工作。2019～2020年,攀枝花市动物疫病预防控制中心组织全市5个县(区)级兽医实验室开展了H5亚型禽流感抗体、O型口蹄疫抗体、猪瘟抗体、小反刍兽疫抗体和非洲猪瘟病毒核酸共5项项目的检测能力比对。结果显示:2019年全市各县(区)检测准确率平均为94%,其中H5-AI Ab检测准确率为88%,猪瘟和小反刍兽疫抗体检测准确率均为100%;2020年全市各县(区)检测准确率平均为95.7%,其中H5-AI Ab检测准确率为96%,O-FMD Ab检测准确率为100%,ASFV核酸检测准确率为90%(其中有一县区不具备检测能力,未开展此项检测)。本研究表明,2019～2020年全市县(区)级兽医实验室的整体检测水平稳步提升,其中用ELISA方法测抗体的技术掌握较好,用HA-HI方法检测的能力也有一定提升,而运用荧光定量PCR检测病毒核酸的技术还有待提高。     

2020年务川自治县秋季畜禽重大动物疫病免疫抗体监测分析

为评估务川仡佬族苗族自治县2020年秋季畜禽重大动物疫病的疫苗免疫效果,对来自德康公司、江一公司及16个乡镇的秋防和"飞检"畜禽血清样品进行禽流感病毒(H5、H7亚型)、猪瘟病毒、O型口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒的免疫抗体监测.结果:(1)禽流感病毒H7亚型检测样品240份,平均抗体合格率为91.67％;禽流感病毒H5亚...     

鉴别禽流感病毒H5、H7、H9亚型及N1-N9亚型RT-PCR方法的建立

快速检测和鉴定禽流感病毒(AIV)亚型对该病的防控具有重要意义。参考文献报道设计合成引物,采用二步RT-PCR方法,从H5/H7亚型AIV血凝抑制抗原和H9鸡胚尿囊液中提取病毒RNA,建立禽流感病毒通用、H5/H7/H9亚型和N1-N9亚型鉴定方法。结果表明:针对AIV基质蛋白基因(M)和核蛋白基因(NP)的通用检测方法能有效扩增出目的条带;鉴别H5/H7/H9亚型的复合PCR扩增结果与预期目标一致;鉴别N1-N9亚型PCR方法扩增出N1/N2/N6/N9亚型目的条带;与其他4种常见病原无交叉反应。初步应用该方法检测样品,证明该方法对禽流感快速诊断和亚型鉴定具有潜在的应用价值。     

农业部组织开展兽医系统实验室检测能力比对工作

为了加强兽医系统实验室能力建设,近期农业部组织完成了省级兽医实验室检测能力比对工作。本次比对共设置了H5亚型禽流感抗体检测、O型口蹄疫抗体检测和高致病性猪蓝耳病病毒检测等3个比对项目。全国32个省级兽医实验室全部参加了比对,均在规定时间内完成了检测并提交了检测结果。     

农业部组织开展兽医系统实验室检测能力比对工作

为了加强兽医系统实验室能力建设,近期农业部组织完成了省级兽医实验室检测能力比对工作。本次比对共设置了H5亚型禽流感抗体检测、O型口蹄疫抗体检测和高致病性猪蓝耳病病毒检测等3个比对项目。全国32个省级兽医实验室全部参加了比对,均在规定时间内完成了检测并提交了检测结果。     

农业部组织开展兽医系统实验室检测能力比对工作

2011年7月,农业部组织完成了省级兽医实验室检测能力比对工作。本次比对共设置了H5亚型禽流感抗体检测、O型口蹄疫抗体检测和高致病性猪蓝耳病病毒检测等3个比对项目。全国32个省级兽医实验室全部参加了比对,均在规定时间内完成了检测并提交了检测结果。     

全国省级兽医实验室检测能力比对结果分析

对全国32个省级兽医实验室开展了检测能力比对,比对项目包括H5亚型禽流感抗体(H5-AI Ab)检测、口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体(FMD-3ABC Ab)检测、高致病性猪蓝耳病病毒检测(HP-PRRSV)、新城疫病毒(NDV)检测。比对结果表明,有24个实验室的比对结果全部准确,8个实验室部分项目的比对结果存在较大偏差。其中H5-AI Ab检测项目的合格率为81.3%,FMD-3ABC Ab检测项目的合格率为87.5%,HP-PRRSV检测项目的合格率为96.9%,NDV检测项目的合格率为100%。比对结果说明省级兽医实验室对RT-PCR检测病毒的技术掌握较好,而用ELISA和HI方法检测抗体的技术能力有待提高。     

2016～2020年内江市兽医实验室检测能力比对结果分析

为确保兽医实验室检测结果的科学性和准确性,内江市市级兽医实验室积极参与全省兽医系统实验室检测能力比对试验。2016～2020年,开展了16个比对项目检测,项目类型包含:禽流感病毒抗体检测、口蹄疫病毒抗体检测、猪瘟病毒抗体检测、禽流感病毒核酸检测、口蹄疫病毒核酸检测、非洲猪瘟病毒核酸检测。结果显示:内江市兽医实验室比对结果 5年的准确率均为100%。结果表明,内江市兽医实验室检测水平较高,稳定性也较好,具备较强实验室检测能力。     

2019年山东省兽医系统实验室检测能力比对

2019年山东省动物疫病预防控制中心组织全省98个兽医系统实验室开展检测能力比对工作,比对项目包括非洲猪瘟病毒核酸检测、禽流感病毒核酸检测、H5亚型禽流感病毒抗体检测和口蹄疫非结构蛋白抗体检测。比对结果显示:总体实验室正确率为70.41%(69/98),其中市级兽医系统实验室正确率为93.75%(15/16),国家动物疫情测报站正确率为68.75%(11/16),县级兽医系统实验室正确率为65.15%(43/66);非洲猪瘟病毒核酸检测、禽流感病毒核酸检测、H5亚型禽流感病毒抗体检测以及口蹄疫非结构蛋白抗体检测结果正确率分别为87.76%、85.71%、93.88%和97.96%。比对结果提示基层兽医系统实验室应提升检验人员的素质,加大实验室设施设备的投入和管理,结合开展社会化服务来推进实验室建设,确保检测结果客观准确。     

贵州省黔南州动物疫病免疫抗体飞行检查效果分析

2019年上半年,春防免疫工作结束后对黔南州12个县市中小规模养殖场开展免疫抗体"飞行检查",共采集到畜禽血清543份。通过监测,在州级水平上H5和H7亚型禽流感、猪O型口蹄疫、牛/羊O型口蹄疫和小反刍兽疫群体免疫抗体平均合格率大于70%,达到农业农村部要求,个别县市H5和H7亚型禽流感、牛/羊O型口蹄疫免疫抗体不合格",飞行检查"对评估全州春防免疫效果、督促县市、乡镇重视春防工作起到了重要作用。     

鸡免疫重组禽流感(H5+H7)二价灭活疫苗效果评价

为了掌握重组禽流感(H5+H7)二价灭活疫苗在鸡中的免疫效果,分别在东莞选取5个规模养殖场和14个镇(街)散养鸡免疫疫苗21天后,采集血清样品进行H5亚型和H7N9亚型禽流感病毒抗体检测,结果为H5亚型禽流感病毒(Re-8株)抗体阳性率为79.23%(683/862),H7N9亚型禽流感病毒抗体阳性率为64.15%(553/862)。结果表明,该疫苗在鸡群中能够产生比较好的应答,H5亚型禽流感病毒(Re-8株)抗体阳性率均能达到免疫规范要求的70%以上。H7N9亚型禽流感病毒抗体阳性率,在种鸡场和肉鸡场能到70%以上,但散养鸡抗体阳性率较低,有不能抵御野毒侵袭的风险,还需要进行二次免疫。     

广西玉林市规模化禽场禽流感病毒检测

为了解广西玉林市2020年规模禽场禽流感病毒感染状况,采用荧光RT-PCR方法,对广西玉林市7个县(市、区)42个规模化禽场采集的1260份禽喉/泄殖腔棉拭子样品进行了通用型禽流感病毒核酸检测(荧光PCR),并对检测为阳性的样本进行H5、H7亚型(双重荧光PCR)和H9亚型(荧光PCR)分型鉴定.结果显示:在42个规模...     

2014年辽宁省市县兽医系统实验室检测能力比对结果分析

2014年,对全省14个市和58个县级兽医实验室开展了检测能力比对,比对项目包括H7N9亚型流感抗体检测、猪瘟抗体检测、高致病性猪蓝耳病病毒核酸检测、鸡白痢抗体检测。比对结果表明,有11个市级实验室和47个县级实验室比对结果全部正确。其中H7N9亚型流感抗体检测项目实验室正确率为95.77%,猪瘟抗体检测项目实验室正确率为100%,高致病性猪蓝耳病病毒核酸检测项目实验室正确率为75.68%,鸡白痢抗体检测项目实验室正确率为100%。比对结果说明市县级兽医实验室HI、ELISA和平板凝集方法检测抗体的技术掌握较好,而用荧光RT-PCR检测病毒核酸的技术能力有待提高。     

应用三重荧光RT-PCR方法检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒核酸

为了验证三重荧光RT-PCR方法检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒核酸的可行性,应用建立的方法分别检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒和新城疫病毒抗原,验证该方法的特异性、敏感性和重复性,并用建立的方法检测临床样品。结果为,三重荧光RT-PCR方法能分别特异检出H5、H7和H9亚型禽流感病毒抗原。最低的检出限为H5亚型禽流感抗原(Re-11株)10-7的稀释度,变异系数(CV)为1.25%。检测100份鸡喉拭子,H5、H7亚型禽流感病毒核酸均为阴性,H9亚型禽流感病毒核酸13份阳性,阳性率为13.00%。结果表明,建立的三重荧光RT-PCR方法通过一个反应体系可以检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒核酸、具有快速、灵敏、特异的特点,适合对禽类的大规模监测。     

北美H7亚型禽流感病毒RT-PCR检测方法的建立

本研究通过分析NCBI数据库中H7亚型禽流感病毒HA基因序列,根据该基因设计引物,建立了针对北美H7亚型禽流感病毒HA基因的一步法RT-PCR检测方法,并对反应条件进行了优化。该方法可特异地检出北美H7亚型禽流感病毒HA基因,而未检出欧亚分支H7亚型禽流感病毒H7N2和H7N9、其他亚型流感病毒(H1N1、H3N2、H5N1、H5N8和H9N2),以及新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒;检测方法的灵敏度可达0.1 pg/μL。该检测方法的建立为监测北美H7亚型禽流感病毒提供了良好的技术支撑,可用于外来禽流感病毒的检测。     

禽流感病毒H5、H7和H9亚型一步法多重RT-PCR检测方法的建立

为了建立能同时检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒(AIV)的方法,参考GenBank中H5、H7和H9亚型AIV的HA基因序列的保守区域,利用Primer 5.0软件设计3对分别针对AIV H5、H7和H9亚型的特异性引物,预期特异扩增H5AIV片段大小为380bp、H7AIV为501bp、H9AIV为732bp。经过反应条件的优化,建立了同时检测H5、H7和H9亚型AIV的一步法多重RT-PCR方法。该方法特异性强,对其他亚型AIV和禽呼吸道病原体检测结果为阴性;敏感性高,H5、H7和H9亚型AIV RNA的最低检出量分别为10-4、10-4、10-2拷贝/μL。初步建立了快速、敏感、特异地鉴别检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒的分子生物学诊断方法。     

2022年玉溪市禽流感监测与分析

为掌握玉溪市禽流感在养殖场和活禽市场流行情况，2022年采集玉溪市9个县(市、区)32个乡(镇)62个村90个养殖场(户)及21个活禽市场2 280份样品进行监测。采用荧光RT-PCR方法对A型禽流感病毒检测并进行H5/H7/H9亚型禽流感病毒核酸分型。2022年全市共检出A型禽流感病毒核酸阳性240份，样品阳性率为10.53%,其中H9亚型233份、不确定型7份，未检出H5/H7亚型。活禽市场A型禽流感病毒核酸阳性率(31.47%)显著高于养殖场阳性率(0.27%),差异具有统计学意义(P<0.01);秋冬季节样品阳性率较高，差异具有统计学意义(P<0.01)。结果：玉溪市禽流感病毒主要分布于活禽市场，且以H9亚型流行为主，污染面较广，不同季度阳性率差异明显，但季节性差异缩小。结果提示：活禽市场是当前禽流感防控的重点，继续加强活禽市场的监测，同时强化活禽市场的检疫监管，严格执行消毒和休市制度，防止活禽市场禽流感病毒进入养殖环节。     

贵州省部分地区H7亚型禽流感监测与分析

为了解贵州省H7亚型禽流感感染情况,采用HI试验对全省9个地区家禽血清样本进行血清抗体检测,PT-PCR方法对家禽咽-肛拭子、养禽场环境样本和野鸟粪便进行病原核酸检测。结果显示:在1570份家禽血清样本中,H7亚型禽流感血清抗体阳性率为0.45%(7/1570);在350份家禽咽-肛拭子和310份养殖场环境样本中,均未检测出H7亚型禽流感病毒核酸;在160份野鸟粪便中,有1份为H7亚型禽流感病毒核酸阳性,阳性率为0.63%(1/160)。试验提示,在贵州省养禽场中不存在H7亚型禽流感感染,但迁徙野禽中可能存在H7亚型禽流感隐性感染,应当引起重视。