种籽和花粉传播植物病毒状况及存在问题

本文综述了国内外有关种籽和花粉传播植物病毒的重要资料，指出种籽传播病毒的特征，目前已知的在分类上属于２３群的１０８种和未归类的９种传植物病毒中，我国已见报道的１７种；花粉传播的植物病毒共１０种，９中分属于３个分类群，另有１种尚未归类，对存在的问题提出了讨论，这些问题包括多种过去被误认为是种传的病毒、同物异名的种传病毒、隐性病毒、未经证实的种传病毒以及通过花粉和种籽传播的“类病毒”等。     

种籽和花粉传播植物病毒状况及存在问题

本文综述了国内外有关种籽和花粉传播植物病毒的重要资料,指出种籽传播病毒的特征．目前已知的在分类上属于２３群的１０８种和未归类的９种种传植物病毒中,我国已见报道的有１７种,花粉传播的植物病毒共１０种,其中９种分属于３个分类群,另有１种尚未归类．对存在的问题提出了讨论．这些问题包括多种过去被误认为是种传的病毒、同物异名的种传病毒、隐性病毒、未经证实的种传病专以及通过花粉和种籽传播的“类病毒草”等．     

蚜虫传毒专化性与病毒附着蛋白的关系

用免疫荧光标记研究发现,桃蚜下颚口针有非持久性病毒ＷＭＭＶ－２和ＴＥＶ的病毒附羊位点,距口针尖端４５～６０μｍ,结合区全长约４５～５５μｍ,病毒随着蛋白含有α－Ｄ－甘露糖残基。用０．２％ＤＯＣ溶液处理１ｈ可破坏病毒附着位点。用０．２％ＤＯＣ处理蚜虫后,分别饲取ＰＡＶ和ＧＰＶ,结果禾谷缢管蚜传播ＧＰＶ和ＰＡＶ的能力显著降低,麦长管蚜和麦二叉蚜则不能传播ＧＰＶ和ＰＡＶ。从禾谷缢管蚜虫体提取的ＲＰ１和Ｒ     

PFT-α对鸡传染性喉气管炎病毒侵染宿主细胞的影响

[目的]研究抑癌基因p53小分子抑制剂PFT-α对ILTV侵染宿主细胞的影响。[方法]用PFT-α处理LMH(鸡肝癌细胞),通过结晶紫染色技术检测细胞感染ILTV 24 h后的细胞死亡情况,通过流式细胞术检测PFT-α对ILTV吸附、进入LMH细胞的影响,通过倒置荧光显微镜和高内涵细胞筛选系统检测PFT-α对ILTV在细胞间扩散的影响。[结果]结晶紫染色表明,PFT-α促进了ILTV感染后的细胞死亡,流式细胞术结果表明,PFT-α对ILTV吸附细胞没有影响,但是促进了ILTV进入细胞。同时,倒置荧光显微镜和高内涵细胞筛选系统检测结果表明,PFT-α对ILTV在细胞间扩散没有影响。[结论]研究初步检测了PFT-α对ILTV侵染LMH细胞过程的影响,为进一步研究ILTV与宿主互作过程提供了理论补充。     

一种改进的对虾白斑综合征病毒提纯方法

对虾白斑综合征病毒(WSSV)的囊膜蛋白在提纯的过程中易脱落,用传统的密度梯度离心方法不易获得完整的病毒粒子,对传统的蔗糖密度梯度离心方法加以改进后,可以获得大量完整的病毒粒子.用患白斑综合征病毒病的中国对虾鳃制备WSSV粗提液,感染螯虾(Cambarus proclarkii),选取25%的蔗糖溶液用作病虾鳃的匀浆液,然后经蔗糖密度梯度离心,分取各带负染后电镜观察,大量完整的病毒位于46% ～52% 蔗糖梯度之间,病毒粒子末端带有很长的尾;而病毒裸露的核衣壳位于40%～46%蔗糖梯度之间;在57%～62%之间观察到较多完整病毒粒子和少量细菌.实验结果表明改进的病毒提纯方法较好,可得到大量完整的带嚢膜的病毒颗粒.     

怎样及早发现病毒性肝炎

只要有肝病的一般知识,平时又有所警惕,充分注意以下几个方面,早期发现病毒性肝炎是完全可以做到的。1．近半个月至半年曾与病毒性肝炎患者密切接触,或吃过半生不熟的海产贝类食物,或输过血,或用过消毒不严格的注射器,或接受过针灸、文身,或有过不洁性接触等,都有被传染上病毒性肝炎的可能。     

引起菌草病毒的病毒种类研究

对自然状态下能侵染烟草的病毒种类及其研究状况进行了概述，这些病毒分别来自7科10属23种、未定科4属8种和分类地位至今尚未确定的1种，共计32种。     

新城疫病毒F48E8株cDNA文库的构建

以ＳＰＦ鸡胚繁殖我国标准新城疫病毒Ｆ４８Ｅ８强毒株，经蔗糖密度梯度超速离心纯化病毒。再以酚－ＳＤＳ法提取病毒基因组ＲＮＡ，作为反就模板，采用Ｐｒｏｍｅｇａ公司商品试剂合成双股ｃＤＮＡ。以同聚物加尾的方法将ｃＤＮＡ克隆 粒ｐＧＥＭ ３Ｚｆ中，经ＡＩＸ平板筛选，限制性内切酶分析和Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的核酸探针检测，共获得插入外源片段大小在０．６－４．８ｋｂ的阳性克隆７５个，初步构建了Ｆ４８Ｅ８株     

展示犬瘟热病毒抗原表位的犬细小病毒样颗粒构建

为探索同时预防犬细小病毒病和犬瘟热的新型重组疫苗,将犬瘟热病毒F基因的B、T细胞抗原表位融合入犬细小病毒衣壳蛋白构建重组VP2蛋白,利用大肠杆菌表达载体pET-28a(+)表达重组VP2蛋白,电镜观察可见表达产物能组装成病毒样颗粒,血凝性检测其与天然犬细小病毒粒子相似,其血凝效价为1:1024,重组蛋白免疫BALB/c...     

鸡4种主要RNA病毒病多重感染复合PCR检测方法的建立

依据Gen Bank中注册的禽流感病毒(AIV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、新城疫病毒(NDV)和传染性法氏囊病毒(IBDV)基因组核苷酸序列,通过序列比对获得AIV、IBV、NDV、IBDV的相对保守序列。根据每种病毒的保守序列利用生物学软件分别设计3对特异性引物,4种病毒共设计12对引物,并对12对引物进行模拟筛选,获得匹配最佳的4对引物。对获得的最佳匹配引物进行单项PCR验证,优化复合PCR反应条件,确定最佳的退火温度、引物浓度和Taq DNA聚合酶使用量;经特异性、敏感性及简化PCR试验,最终建立了简易复合PCR检测方法。结果表明,建立的检测方法可同时扩增出4条大小与设计相符的特异性片段,即IBV(146 bp)、NDV(215 bp)、IBDV(345 bp)、AIV(435 bp);建立的复合PCR方法具有较强的敏感性和特异性,能检测出100 pg AIV、IBV、IBDV的cDNA和100 fgNDV的cDNA;将三温热循环改进为二温热循环,即将退火和延伸过程合为一步(62℃),大大缩短了反应时间。     

鸭病毒性肝炎病毒细胞培养技术的研究

采用“带毒一同步培养”新技术和特殊培养条件，延长病毒吸附时间，提高犊牛血清灭能温度，降低犊牛血清用量，在维持液中添加１００ｍＭ，ＮａＣｌ等，成功地将鸭病毒性肝炎标准Ⅰ型病毒ＡＴＣＣ株适应鸡胚成纤维细胞。连续传代至第６代时出现ＣＰＥ，第９代时，ＣＰＥ呈出规律性，接毒后４６小时ＣＰＥ达９０％，其特征是细胞变圆凝固性坏死，脱落。     

云南发现的几种昆虫病毒资源

从云南森林害虫中采集到多种自然罹病虫体,经分离鉴定,发现6种昆虫病毒,即西昌杂毛虫 NPV、昆明小毛虫 NPV,栎毒蛾 NPVC,南华松叶蜂NPV,油杉吉松叶蜂 GV,铆扇舟蛾 GV。     

猪细小病毒VP2基因与猪圆环病毒2型ORF2基因共表达对PPV病毒样颗粒形成的影响

将扩增得到的PPV SC-1株VP2基因产物插入真核表达载体pPI-2.EGFP中,得到了重组质粒pPI-2.EG-FP.VP2。再以含有PCV2 SC株全基因组的重组质粒pMD-PCV2为模板扩增PCV2ORF2基因,进一步将其插入pPI-2.EGFP.VP2中,构建含有PPVVP2基因、PCV2ORF2基因及EGFP报告基因的真核表达载体pPI-2.EG-FP.VP2.ORF2。用脂质体介导法将pPI-2.EGFP.VP2.ORF2 DNA转染Vero细胞,观察绿色荧光蛋白的融合表达,采用ELISA方法检测转染液与PPV、PCV2高免血清的反应特性,同时将转染出现绿色荧光明显的Vero细胞制备电镜样品。结果显示,VP2基因、ORF2基因与绿色荧光蛋白得到融合表达,转染液与PPV、PCV2高免血清具有良好的抗原抗体反应特性,电镜观察到重组病毒样颗粒的形成。