DNA疫苗的特点及在不同动物中的应用

1特点 DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗，是编码免疫原或与免疫原相关的真核表达质粒DNA（或RNA）。可经一定途径进入动物体内，被宿主细胞摄取后转录和翻译，表达出抗原蛋白，此抗原蛋白能刺激机体产生非特异性和特异性免疫应答反应，从而起到免疫保护作用。     

动物预防用DNA疫苗的研究进展

动物预防用DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗，是编码免疫原或与免疫原相关的真核表达质粒DNA(有时也可是RNA)，它可经一定途径进入动物体内，被动物宿主细胞摄取后能转录和翻译表达出抗原蛋白，此抗原蛋白能够刺激机体产生非特异性和特异性两种免疫应答反应，从而起到免疫保护作用。     

增强DNA疫苗的免疫

核酸免疫指通过接种 DNA(虽然使用线性 PCR片段 ,但通常是环状质粒 )或 RNA诱导产生对其编码蛋白的免疫应答。核酸疫苗是疫苗领域较新的成员 ,目前还没有允许用于人医或兽医。然而 ,实验研究表明以质粒 DNA为基础的核酸疫苗可在人体内引起免疫应答 ,而且已有几例临床实验正在验证这种方法。这种方法具有许多优点 ,它不仅非常灵活 ,而且可针对许多动物模型产生保护性免疫 ,前景是非常乐观的。但是 ,还有许多方面有待提高 ,核酸疫苗一般不能引起与传统疫苗一样强的应答 ,因此 ,许多实验室都在研究以增强这种很有前途的疫苗的免疫原性。D…     

泛素介导的禽类病毒主要抗原基因DNA疫苗的构建与应用

泛素与抗原基因的共表达能够使DNA疫苗诱导机体产生更强的细胞免疫反应,从而增强疫苗免疫的效果。文章总结了应用泛素介导禽类几种重要病毒主要抗原基因共表达DNA疫苗平台的构建及其动物免疫应答的研究进展。     

新型免疫佐剂的研究进展

免疫佐剂是指先于抗原或与抗原同时应用,能非特异地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答,以及增强相应抗原的免疫原性或改变免疫反应类型,而本身无抗原性的物质.随着免疫学研究的不断深入和基因工程技术的迅速发展,针对不同疾病已开展了各种新型基因工程疫苗的研制,但这些疫苗普遍存在分子小、免疫原性弱、难以诱导机体产生有效免疫应答等不足,从而需要某种物质来协同这种作用,免疫佐剂就在这种情况下产生了.文章对近年来免疫佐剂的研究概况进行了综述,现介绍如下.     

DNA疫苗的免疫调节和接种方案的研究进展

1993年Ulmer等报道将含有流感病毒基因的质粒直接肌注于小鼠体内可诱导全面的免疫应答，并可抵抗流感病毒攻击。至此，被誉为“疫苗的第三次革命”的DNA疫苗技术应运而生。DNA疫苗与传统疫苗相比有多种优势：DNA疫苗生产简便，储运方便；能够诱导机体产生体液和细胞免疫；能够根据宿主细胞的表面蛋白．在细胞内表达天然的、     

用微小隐孢子虫子孢子表面蛋白DNA疫苗免疫小鼠的实验研究

为了探讨微小隐孢子虫子孢子表面蛋白 CP15 / 60重组质粒 pc DNA3 .1- 15 / 60 DNA疫苗诱导机体产生体液和细胞免疫应答的效果。用重组的 DNA疫苗于 BAL B/ c小鼠后腿胫骨前肌肉注射免疫 ,于 0、3、6周共免疫 3次 ,10 0 μg/次。免疫后不同时间检测体液和细胞免疫应答指标。并用 1× 10 6 卵囊进行攻虫试验。结果表明 pc DNA 3 .1- 15 / 60可诱导机体产生相应的特异性抗体 ,对 C.parvum卵囊攻击具有保护作用。微小隐孢子虫子孢子表面蛋白 CP15 / 60重组质粒 pc DNA3 .1- 15 / 60有可能作为侯选的隐孢子虫 DNA疫苗 ,值得进一步深入研究     

共表达C_(48-1)H基因和鸡IL-18基因重组DNA疫苗的免疫保护性

DNA疫苗虽然有其独特的优点,但是它诱导机体产生的抗体水平还不足以抵抗致死剂量病原体的攻击,如何增强DNA疫苗的免疫保护率成为人们研究的热点.     

DNA疫苗在动物医学中的应用

近年来，许多畜禽病毒性传染病已不能依靠传统疫苗如灭活疫苗、弱毒疫苗等对其进行防治，DNA疫苗的出现使得这一状况得到改善。编码病毒、细菌和寄生虫等不同种类抗原基因的质粒DNA，能够引起脊椎动物如哺乳类、鸟类和鱼类等多个物种产生强烈而持久的免疫反应。DNA疫苗被人们称为继灭活疫苗和弱毒疫苗、亚单位疫苗之后的“第三代疫苗”，具有广阔的发展前景。１DNA疫苗简介DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗，是编码免疫原或与免疫原相关的真核表达质粒DNA（有时也可是RNA），它可经一定途径进入动物体内，被动物宿主细胞摄取后能转录…     

DNA疫苗在动物医学中的应用

20世纪90年代,Wolff等〔1〕偶然发现给小鼠肌注编码基因的重组质粒(细菌染色体以外的环状双链DNA)后,可在体内检测到编码蛋白,同时诱导机体产生了特异性免疫应答,DNA疫苗由此而出现。在兽医领域,DNA疫苗已在各种动物中进行研究,由于该疫苗既具有减毒疫苗的长处,又无逆转的危险,     

禽用基因疫苗的研究进展

基因疫苗(genetic vaccine)又称核酸疫苗(nucleicacid vaccine)、DNA疫苗(D NA vaccine),是将带有目的编码蛋白抗原基因的真核重组表达载体直接注射到动物机体中,使外源基因在活体细胞内表达,诱导机体产生抗体并引起特异性的免疫应答,达到顶防和治疗传染病的目的。它包括D NA疫     

新型免疫佐剂研究进展

佐剂是指与抗原同时或预先应用,能增强机体针对抗原的免疫应答能力,或改变免疫反应类型的物质。其功能主要有：增强抗体应答;增强疫苗的黏膜传递;增进免疫接触;增强弱免疫原的免疫原性,如高度纯化的抗原或重组抗原;减少抗原接种剂量和接种次数;促进疫苗在免疫应答能力弱的群体中的免疫效果;加快免疫应答的速度和延长持续时间;改变抗原的构型;改变体液抗体的种类、IgG亚类和抗体的亲和性。     

产肠毒素大肠杆菌菌毛的DNA疫苗研究进展

肠毒素大肠杆菌是导致婴幼儿及旅游者急性腹泻,仔猪腹泻和水肿的主要病原菌之一。菌毛定居因子是该病原菌主要的致病因素。DNA疫苗既能激发机体的细胞免疫,也能诱导特异性的体液免疫。目前用于预防ETEC腹泻的DNA疫苗的研究已取得一定进展,作者从重组质粒的构建、免疫应答、疫苗的接种系统以及基因佐剂4个方面简单的概述了产肠毒素大肠杆菌菌毛的DNA疫苗的研究现状。     

寨卡病毒DNA疫苗pVAX-ZikaME构建及新型佐剂的筛选

选用1种递送载体与4种免疫刺激增强剂混合,与赛卡病毒DNA疫苗pVAX-ZikaME联合免疫BALB/c小鼠,观察新型佐剂对DNA疫苗抗原的免疫应答能力。首先构建表达ZikaME蛋白的DNA疫苗,然后将重组质粒转染至HEK293细胞,采用Western blot检测目的蛋白的表达。用配制的佐剂与重组的DNA疫苗联合免疫BALB/c小鼠,通过细胞亚群检测、淋巴细胞增殖试验和特异性抗体检测验证新型佐剂的增强免疫效果。结果显示,Western blot检测所构建的DNA疫苗表达68 000目的蛋白。用重组疫苗辅以佐剂免疫小鼠,免疫35 d时淋巴细胞增殖刺激组刺激指数、细胞亚群分化、特异性抗体水平均高于对照PBS组(P0.05)。结果表明,DNA疫苗pVAX-ZikaME辅以新型佐剂免疫小鼠可增强机体对该疫苗的免疫应答能力。     

动物病毒基因重组疫苗的研究现状

在 2 0世纪 5 0年代中期 ,采用鸡胚和组织培养细胞来生产病毒疫苗 ,直到 70年代 ,重组 DNA技术的发展对疫苗生产产生了一个新的飞跃 ,病毒的不同保护性抗原能在哺乳动物、昆虫细胞或细菌体内大量表达 ,这就是第二代亚单位疫苗。在过去 2 0多年里 ,虽花费了很大努力 ,由于这种方法对病毒蛋白产生的免疫反应不强 ,取得的成功很小。然而利用重组 DNA技术 ,能用安全病毒载体来表达危险病原体的保护性抗原 ,如重组载体疫苗。与重组亚单位苗不同 ,重组载体疫苗对外源蛋白能产生强的免疫原性反应。还有许多其他重组载体疫苗已在实验阶段证明有效…     

疫苗免疫佐剂的研究与应用

近年来,随着免疫学研究的不断深入及基因工程技术的迅速发展,活载体疫苗、DNA疫苗和合成肽疫苗等新型疫苗的研究也取得了可喜的进步。这些新型疫苗纯度高、特异性强,但免疫原性弱,诱导机体产生的免疫应答不够强,因此,应用佐剂来增强其免疫原性或增强宿主对抗原的保护性应答就显得尤为重要。文章就近年来免疫佐剂研究概况作一综述。1铝盐佐剂铝盐佐剂是一类含Al3 的无机盐,其中最常用的效果较好的是Al(OH)3和磷酸铝佐剂。Al(OH)3成本低、使用方便,是兽医生物制品生产中应用最广的一种佐剂,也是至今唯一被美国食品和药物管理局(FDA)批准…     

纹身法免疫增强DNA疫苗免疫效果的评价

为评价不同DNA免疫方法(皮内穿刺、肌肉注射)对DNA疫苗免疫效果的影响,将自行构建的表达传染性喉气管炎病毒gJ基因的真核表达载体pCDNA3.1-gJ和表达新城疫病毒F基因的真核表达载体pVAX1-F通过普通注射器裸DNA肌肉注射和纹身器皮下裸DNA纹身法投递,分别免疫BALB/c小鼠和SPF鸡,三免后2周用NDV强毒株进行攻毒.采集免疫后小鼠和鸡的血清,ELISA法检测抗体水平,并计算鸡攻毒后保护率,来评价这2种免疫途径的免疫效果.结果表明,纹身法皮下投递诱导的特异性免疫应答抗体水平显著高于DNA肌肉注射的抗体水平,而且通过纹身法投递质粒二免后产生的抗体水平显著高于肌肉注射三免后的抗体水平.此外,通过纹身法投递50μg质粒产生的抗体水平高于同一时期通过肌肉注射100 μg质粒产生的抗体水平}攻毒试验表明,和肌肉注射免疫相比,纹身法皮肤免疫的免疫保护效果更佳.以上结果表明,纹身法皮下投递DNA疫苗,能诱导产生更强大的免疫应答,而且还是一种经济实用的方法,它将满足实验室条件下产生更快更强大免疫应答的需要,也为今后DNA疫苗免疫方法和途径研究提供新的思路.     

家禽DNA疫苗研究进展(下)

5影响DNA疫苗免疫应答的因素5.1载体本身的因素对于载体本身而言,启动子强弱是决定免疫应答强度的最主要因素。由于DNA疫苗载体由细菌质粒DNA衍生而来,而细菌的DNA中富含CpG基因序列,因此,载体序列中CpG基因序列的有无及数量多少也成了影响免疫应答的因素。此外,质粒的存在形式也可能会对免疫应答造成影响,例如仅有Schubbert的一篇研究报道表明,将NDVF基因克隆入CMV极早期启动子和鸡β肌动蛋白基因启动子的下游,构建NDVDNA疫苗,环状质粒DNA肌肉接种1周龄小鸡并不能诱导产生针对F蛋白的抗体,也没有任何保护效果,而线性化质粒D…     

核酸疫苗的应用现状和发展前景

核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因（DNA）与质粒重组后直接导入动物细胞内，并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。因此，核酸疫苗也称基因疫苗。它包括DNA疫苗和RNA疫苗，其中DNA疫苗由于不需任何化学载体，故又称裸DNA疫苗。同单链RNA相比，双链DNA具结构稳定、操作简单等许多优点，所以DNA疫苗比RNA疫苗更受学者们的青睐。１核酸疫苗在疾病防治方面的应用自１９９０年，Wolff发现DNA能直接诱导机体产生免疫应答以来，通过国内外学者的不断努力，…     

禽流感DNA疫苗研究进展

禽流感（avian influenza,AI）是由禽流感病毒（AIV）引起的一种禽类烈性综合征,威胁动物和人类公共健康,严重影响中国养禽业发展,接种疫苗一直是控制禽流感病毒传播最有效的手段。基于基因工程技术的不断发展,各种新型疫苗相继研发并投入使用。其中,禽流感DNA疫苗具有安全性高、制备方法简单、易于储藏和运输等优点,受到了广泛关注。常见的禽流感疫苗有HA DNA疫苗、NA DNA疫苗、M DNA疫苗、NP DNA疫苗等。禽流感DNA疫苗是将含有目的基因序列的重组质粒导入动物细胞,诱导动物机体产生体液和细胞免疫应答。为了提高禽流感DNA疫苗的免疫效果,国内外学者通过添加合适的佐剂、将目的基因导入理想质粒载体、对抗原序列优化,增强DNA疫苗的转染效率和基因表达水平,取得了一定的研究成果。自DNA疫苗开始研发至今,H1、H3、H5、H7、H9等众多亚型禽流感DNA疫苗逐步研发。2018年,由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所研制的禽流感H5亚型DNA疫苗获得国家一类新兽药证书,是中国首个获得批准的禽流感DNA疫苗,极大地推动了DNA疫苗的发展。文章主要论述了禽流感DNA疫苗的载体构建、免疫机制、佐剂和载体选择以及疫苗研发等方面的研究进展和创新,并对其应用前景进行简要分析,旨在为科研工作者研制新型禽流感疫苗提供新的思路和参考。