不同有机废弃物作为假单胞菌YT3吸附载体的研究

以草炭为对照,研究了发酵鸡粪、蚯蚓粪和菇渣作为假单胞菌（Pseudomonas）YT3吸附载体的可行性。结果表明：鸡粪吸水率最低,有效菌体释放效率为93.08%;菇渣的吸水性最高,但其菌体释放效率仅为67.59%;菌体释放效率与载体的阳离子代换量呈极显著负相关。用浸提液培养苜蓿种子36 h后,鸡粪、蚯蚓粪和草炭处理的种子发芽指数均在80%以上,初步认定肥料浸提液对植物无毒。随着Pseudomonas YT3接种时间的增加,鸡粪、蚯蚓粪和草炭处理中的活菌数均有一个明显的增加过程;在接种后第30 d时,3种有机物料中的最大活菌数分别为8.9×108、7.5×108、5.9×108 CFU·g-1,分别为初始接种量的560%、326%和187%;在第180 d时,有效活菌数开始小于初始接种值。随着接种时间的延长,菇渣处理的有效活菌数呈一直下降趋势。鸡粪和蚯蚓粪,尤其是鸡粪是适宜的Pseudomonas YT3吸附载体。     

鸡粪堆肥过程中四环素类抗生素及抗性细菌的消减研究

通过实验研究了堆肥生产过程中,菌剂添加对鸡粪高温堆肥中四环素类抗生素(四环素和土霉素)降解、四环素抗性细菌和致病菌(大肠菌群和沙门氏菌)的影响。结果表明,菌剂添加可以提高鸡粪堆肥的高温期温度,促进肥料腐熟,并且能够提高土霉素的降解速率。实验组原料中76μg·kg-1的土霉素经过高温堆肥得到有效去除,而不接种菌剂的对照组中土霉素没有明显去除;原料中沙门氏菌在堆肥起始阶段(8 d)就能够杀灭,而大肠菌群一直持续检出,直到堆肥末期(47 d)才小于2 lg CFU·g-1。抗四环素细菌在堆肥过程中的数量总体呈下降趋势,堆肥成品分别比原料减少1.41 lg CFU·g-1(实验组)和1.60 lg CFU·g-1(对照组),抗性细菌占总菌数的比例呈现先上升再下降的趋势,最终比例分别为4.00%(实验组)和1.17%(对照组),均高于原料的抗性菌比例(0.40%和0.39%)。     

多功能农药降解基因工程菌剂保藏条件研究

应用多功能农药降解基因工程菌修复农药污染潜力巨大,但由于微生物菌剂的保存一直是个难题,直接影响到微生物菌剂的应用.本实验室构建的基因工程菌属于鞘胺醇单胞菌属,易受到污染而消亡,液态菌剂保藏效果不理想,因此找到一种吸菌量大,并能增加细胞密度和保持菌种存活力的载体显得尤为迫切.通过单一载体吸菌量的测定、不同剂型保藏试验、不同接种量保藏试验、保护剂选择试验等方法研究了不同剂型对微生物菌剂活菌数量及保存期的影响.结果表明草炭是一种优良的同体载体--吸菌量大,可达1011 CFU·g-1,并能促进工程菌的生长,109CFU·g-1接种量接种后120 d仍能使工程菌数量维持在109CFU·g-1水平.通过盆钵试验表明长期保藏后的微生物菌剂能在25 d内将甲基对硫磷和呋喃丹完全降解,应用效果不受保藏影响.本实验为工程菌剂的保存和应用提供了理论参考.     

鸡粪开发生产微生物肥料的探讨

探讨鸡粪作为微生物肥料载体的可行性.以干燥或发酵处理的鸡粪为载体经辐照处理后,分别接种固氮菌、解磷巨大芽孢杆菌、硅酸盐细菌和枯草芽孢杆菌制作微生物肥料.以煤渣为载体设对照组,通过测定有效活菌数和杂菌率,优化鸡粪处理的最佳方法;从保存时间、温度、光照、pH值几个因素探讨微生物肥料的稳定性.结果表明,经堆肥腐熟并辐照处理的鸡粪作载体效果最佳,固氮菌肥和硅酸盐细菌肥料的保质期在6个月,磷菌肥和枯草杆菌肥的保质期在9个月;阳光直射处保存3个月的菌肥有效活菌数低,杂菌率高,而室内暗处保存的活菌数高,杂菌率低;菌肥的保存温度超过30℃时,有效活菌数急剧下降,杂菌率上升;将菌肥的pH值调至7时,有利于提高有效活菌数.可见鸡粪可用作微生物肥料的载体,保存在避光阴凉干燥处可有效提高菌肥的有效活菌数,从而延长产品的保存期.     

不同微生物菌剂对甘蔗渣有机肥发酵质量的影响

以4种微生物菌剂为材料,比较4种菌剂的有效活菌数、纤维素酶活以及中性蛋白酶活;并以甘蔗渣为主要原料,添加合适比例牛粪进行高温堆肥试验,研究甘蔗渣有机肥中加入4种微生物菌剂后的有机质、总养分、酸碱度、速效氮、腐殖酸等营养指标,以及微生物菌群数量和蛔虫卵死亡率等变化。结果表明,4种微生物菌剂中,微生物菌剂B不仅有效活菌数达到国标中有效活菌数(cfu)≥0.5亿·g~(-1)的要求,且其纤维素酶和中性蛋白酶活力较强;添加微生物菌剂B的甘蔗渣有机肥发酵后,其有机肥中的各营养指标以及有效活菌数均明显增加,蛔虫卵死亡率为95.13%,大肠菌群数量为85个·g~(-1)。研究结果表明微生物菌剂B可在实际生产中推广应用。     

荔枝剪枝堆肥和蚯蚓粪作为巨大普里斯特氏菌载体的研究

为探讨荔枝茎秆堆肥与蚯蚓粪替代草炭作为巨大普里斯特氏菌载体的可行性,以荔枝剪枝堆肥、蚯蚓粪和草炭为原料构建6种微生物载体（ST1、ST2、ST3、ST4、ST5、ST6,三者质量比分别为6∶2∶2、4∶2∶4、2∶2∶6、6∶3∶1、4∶3∶3、2∶3∶5）,以草炭为对照,巨大普里斯特氏菌为目标微生物,动态监测载体中有效活菌数,获得适宜巨大普里斯特氏菌存活的载体;在此基础上,分别设置含水量20%、30%、40%,温度20、30、40、50℃和接种浓度10⁶、10⁷、10⁸cfu·mL^-1,动态监测载体中有效活菌数,优化载体含水量、温度和接种浓度。结果表明：随着培养时间的延长,各载体中活菌数均呈先降低后升高的趋势,其中ST2、ST5载体长期培养后活菌数高,且草炭添加量低,是适宜的巨大普里斯特氏菌载体。随着载体含水量、温度的升高,培养的60 d过程中ST2和ST5载体活菌数均呈先升高后降低的趋势,在30%含水量（ST2 2.46×10⁸ cfu·g^-1、ST5 1.81×10⁸ cfu·g^-1）以及30℃（ST2 3.44×10⁸ cfu·g^-1、ST5 1.87×10⁸ cfu·g^-1）、40℃（ST2 8.50×10⁷cfu·g^-1、ST5 7.13×10⁷cfu·g^-1）温度下的活菌数最高。此外,各培养时期的载体活菌数均随着接种浓度的升高而升高,培养60 d后,ST2、ST5载体活菌数分别达3.63×10⁸、3.33×10⁸cfu·g^-1。研究表明,载体ST2和ST5适宜代替草炭作为巨大普里斯特氏菌的载体,且在30%载体含水量、30~40℃温度和10⁸ cfu·mL^-1接种浓度下效果最佳。     

谷糠和堆肥作为微生物菌剂载体的研究

[目的]探讨堆肥和谷糠代替草炭作为功能性微生物载体的可行性。[方法]以湖南当地猪粪堆肥、谷糠和草炭等材料作为微生物菌体载体材料,通过制成不同配比的微生物肥料,比较载体中微生物数量以及p H等指标变化。[结果]经过自然风干的堆肥与草炭比较,吸附液体微生物菌剂后无论外观、手感还是微生物数量差异均不大。以75%堆肥添加25%谷糠,载体中微生物数量最高,且载体物理性状、p H、气味均达标。[结论]草炭是一种短期不可再生性的天然矿产资源,而自然风干的堆肥添加适量的谷糠可代替草炭,作为微生物菌剂载体的一种选择。     

铜绿假单胞菌菌剂载体的筛选

为将铜绿假单胞菌应用于重金属污染环境的生物修复,以硅藻土(1~3 mm)、硅藻土(3~6 mm)、活性炭和轻石为材料,通过测定不同材料的吸水率、菌体吸附与释放作用及制备菌剂的活菌数,筛选出适宜的菌剂载体.结果表明,在设定的载体浓度下(0~20 g·L-1),不同载体的菌体去除率随浓度提高而增大,Q值在4.90%~49.60%之间;载体负载量随浓度提高而减小,L值在923.33~82.83 mg·g-1之间;硅藻土、活性炭的Q值在30 min达到最大.硅藻土(1~3 mm)、硅藻土(3~6mm)、活性炭和轻石的吸水率依次为60.3%、43.3%、23.4%和33.1%;以上4种载体制备的菌剂(菌剂A、B、C和D)的活菌释放率依次为27.4%、28.8%、19.7%和37.1%.室温保存30 d后,菌剂A活菌数为6.25×108CFU·g-1,减少了78.4%,菌剂B活菌数为1.12×1010CFU·g-1,是初始值的5.38倍,菌剂C的活菌数为2.95×108CFU·g-1,减少了73.9%,菌剂D的活菌数为3.61×109CFU·g-1,增殖了127.0%.可见,载体浓度及吸附时间显著影响其对菌体的吸附作用,3~6 mm硅藻土的负载量适中,菌体存活率高,活菌释放率高,可作为铜绿假单胞菌的菌剂载体.     

家蝇幼虫生态处理对猪粪和鸡粪中微生物数量的影响

[目的]研究家蝇幼虫生态处理后猪粪、鸡粪中微生物(细菌、真菌、放线菌)数量的变化情况。[方法]猪粪、鸡粪经家蝇幼虫生态处理后,采用稀释平板计数法对样品中细菌、真菌及放线菌数量进行分析,设立未经幼虫处理的猪粪、鸡粪为对照。[结果]正常对照组猪粪在恒温、恒湿条件下放置3~5 d后,细菌、真菌及放线菌的数量达到最高峰,分别为1 378×109、3 352.0×106和3 48.81×107cfu/g。经家蝇幼虫处理后,猪粪中的各类菌数量增加幅度均较小,第5天相应的各类菌落数为158.40×109、185.0×106和4.6×107cfu/g,总体上呈较为平稳态势。正常对照组的鸡粪前5 d 3种微生物数量增加亦明显,而家蝇幼虫处理组变化均不大。[结论]家蝇幼虫处理猪粪、鸡粪后,能显著降低粪便中细菌、真菌、放线菌的数量。     

畜禽粪便堆肥前期理化及微生物性状研究

分别以鸡粪、猪粪、牛粪为原料进行堆肥试验,研究三种畜禽粪便堆肥启动期和高温期理化和可培养微生物数量及脱氢酶、蛋白酶和纤维素酶活性等指标变化规律,为筛选合适的微生物菌剂维持堆肥高温提供理论依据.结果表明,将新鲜的鸡粪、猪粪、牛粪含水量调节到55%左右,堆肥温度在2 d内均可升至50 ℃以上, 并维持此温度的时间均超过5 d,达到堆肥无害化的卫生标准.堆肥前期,三种堆肥的细菌、真菌、放线菌、纤维素分解菌数量变化趋势相同,表现为嗜温性微生物数量先升高再降低;嗜热菌数量随温度上升而增加.牛粪堆肥中真菌、嗜热放线菌及纤维素分解菌的数量显著高于鸡粪和猪粪(P≤0.05).三种堆肥的脱氢酶活性先上升后下降;蛋白酶活性随堆肥温度的升高而上升;猪粪和牛粪堆肥纤维素酶活性呈波动上升趋势,鸡粪堆肥则呈先上升后下降趋势.三种堆肥的温度与嗜热纤维素分解菌数量呈显著正相关(P≤0.05).