豌豆植物瞬时表达酸性成纤维细胞生长因子研究

为探索豆科植物豌豆作为生物反应器瞬时表达外源重组蛋白的可行性,选择豌豆作为宿主植物,构建了含有酸性成纤维细胞生长因子基因的植物瞬时表达载体,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,并以叶片注射法进行接种,在豌豆植株中瞬时表达了人酸性成纤维细胞生长因子,接种后在紫外灯下跟踪观察绿色荧光蛋白的表达情况.研究结果表明,接种后8～10 d在紫外灯下可观察到GFP的表达,12～14 d GFP表达量最大.蛋白质杂交检测结果表明,酸性成纤维细胞生长因子在豌豆植物中成功表达,说明豌豆植物可作为植物瞬时表达外源蛋白新的选择平台.     

壳聚糖对铬胁迫下豌豆种子萌发的影响

以豌豆(Pisum sativum L.)为材料,研究了铬对水培豌豆的胁迫作用及壳聚糖(chitosan,CTS)对铬胁迫的缓解效应。结果表明:0～200 mg.L-1铬胁迫浓度范围内,随铬胁迫浓度的增加,豌豆种子的发芽率、发芽指数和活力指数等下降,下胚轴丙二醛含量和相对电导率增加;显著抑制豌豆种子萌发的铬胁迫浓度为100mg.L-1,极显著抑制豌豆种子萌发的铬胁迫浓度为200 mg.L-1。0.5%壳聚糖可缓解铬对豌豆种子萌发的毒性。     

不同处理对豌豆和萝卜芽苗菜生长、产量及品质的影响

研究了浸种时间、栽培温度、播种密度和采收时间等因素对豌豆和萝卜芽苗菜的生长、产量以及营养品质的影响.通过分析不同处理条件下萝卜和豌豆发芽率、苗长、产量、维生素C及纤维素含量发现:豌豆芽苗菜在播种密度为2.4 kg/m2、浸种24 h、温度20～25℃左右、培养8 d后采收的经济产率和品质最佳;萝卜芽苗菜在播种密度为0.5 kg/m2、浸种6 h、温度25℃左右、培养7 d后采收的经济产率和品质较为理想.     

成纤维细胞生长因子（FGF）研究进展

介绍了成纤维细胞生长因子（FGF）的种类和作用机理。同时,对国内外对FGF在胚胎发育、器官形成及毛囊发育过程中的作用等方面的研究进展进行了综述。     

豌豆子粒的力学性能试验分析

利用材料力学万能试验机进行了豌豆(Pisum sativum L.)压缩、剪切力学性能试验,并采用针尖压入法对豌豆子粒进行硬度试验分析。结果表明,破碎负载、弹性模量、剪切力、剪切强度随着含水率的增加均有明显下降;在相同含水率下,破碎负载、弹性模量、剪切力、剪切强度在平放时最大,侧放时次之,立放时最小;硬度与含水率呈显著性负相关,而与压痕深度相关性不明显。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子对神经细胞损伤的保护作用

目的建立谷氨酸损伤模型并探讨重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对谷氨酸损伤神经细胞的干预作用。方法利用流式细胞仪观察rhaFGF对正常培养的神经细胞细胞周期的影响,建立细胞损伤模型,将实验分空白组、模型组和rhaFGF保护组,通过形态观察以及MTT法检测各实验组的细胞活力。结果rhaFGF能促进DNA的合成,谷氨酸对细胞损伤程度随浓度的增大而增大,rhaFGF能够拮抗谷氨酸的神经毒。结论rhaFGF能促进神经细胞生长同时拮抗谷氨酸兴奋性毒性而发挥神经保护作用。     

高温胁迫对豌豆HSP70和抗坏血酸代谢及膜脂氧化的影响

通过测定热驯和高温胁迫下3个豌豆品种幼苗根热激蛋白70(HSP70)、抗坏血酸(AsA)和丙二醛(MDA)含量,探讨高温胁迫对豌豆生理的影响.结果表明:在热驯和高温胁迫下,HSP70的表达在品种之间存在差异;3个品种在高温胁迫下都表达了HSP70,但表达量有差异.高温胁迫还导致AsA含量下降和MDA含量升高;先热驯再高温胁迫的AsA含量明显高于直接高温胁迫者,MDA则低于后者.     

重组人酸性成纤维细胞生长因子促进跟骨骨折术后创面愈合15例临床分析

目的探讨重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)促进跟骨骨折术后切口创面愈合的疗效。方法选取30例(33足)跟骨关节内骨折术后发生切口愈合不良患者,随机分为实验组和对照组,实验组清除创面内分泌物及坏死组织,采用rhaFGF喷涂和纱布覆盖;对照组清除创面内分泌物及坏死组织,采用生理盐水喷涂和纱布覆盖,观察两组创面愈合速度、质量。结果实验组与对照组比较,创面肉芽生长状况更佳,愈合时间更快,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 rhaFGF能促进跟骨骨折术后创面皮肤生长,有效缩短愈合时间,提高愈合质量。     

猪成纤维细胞的简易分离培养

比较了不同来源、不同状态组织和不同分离方法对猪成纤维细胞的影响,结果表明,离体组织长时间乙醇预处理和长时间储运会降低细胞活力,使生长速度减慢;初始原代细胞种类比较多,生长不均匀,只有传代培养3代以上,才能得到比较纯的成纤维细胞。     

兔成纤维细胞的分离与体外培养

用Ⅰ型,Ⅳ型胶原酶消化分离兔皮肤细胞,Ⅰ型胶原酶消化皮肤块获得的细胞数显著高于Ⅳ型胶原酶。用组织块直接培养法,也可以得到皮肤的原代培养细胞,２．５ｇ／Ｌ胰酶消化胎儿组织,可获得足够原代增减２的细胞量。结合使用酶消化法和反复贴壁法,经２－３代后,可获得纯化的成纤维细胞。     

EST-SSR荧光标记毛细管电泳检测法在豌豆上的应用及评价

试验采用MegaBACE 1000 DNA 分析系统,利用荧光标记豌豆EST-SSR引物,建立豌豆EST-SSR荧光标记毛细管电泳检测法,并对该检测法的特点进行了分析和评价。结果表明,试验所建立的毛细管电泳荧光标记检测法能准确地识别片段大小、重复性好,可以明确区分不同等位基因;同时,通过采用两种不同颜色的荧光标记,可使检测192个样本的时间缩短在2 h之内。可见,本试验所建立的毛细管电泳荧光标记检测法具有高通量、高效率、高精确性等优点。     

蒜氨酸酶的分离纯化条件分析

采用（NH4）2SO4盐析、Sephadex G-200凝胶过滤对蒜氨酸酶进行了部分纯化。结果表明,蒜氨酸酶的含量和酶活性在（NH4）2SO4为30％～50％时较高,40％时蒜氨酸酶活性最高;经Sephadex G-200凝胶过滤获得的酶液纯化倍数为34．45,回收率为1．72％。     

我国豌豆品种状况及天津豌豆新品种引种

对豌豆的原产地和习性、我国豌豆的种植简况和发展豌豆生产的必要性以及我国目前豌豆的育种和引种状况作了介绍。对天津豌豆生产状况、引种的必要性和天津豌豆新品种引进的方向做了简单介绍和分析,并指出豌豆品种的利用应侧重于高质量品种的引进与推广。     

Response of Endogenous Salicylic Acid and Jasmonates to Mechanical Wounding in Pea Leaves

The roles of on endogenous jasmonates （JAs） and salicylic acid （SA） in wounding response were investigated. Pea （Pisum sativum L.） seedlings were treated with three different methods including mechanical wounding, JAs application, and SA application. The contents of endogenous JAs and SA, as well as the activities of the related enzymes were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）, high performance liquid chromatography （HPLC）, and spectrophotometer, respectively. The results showed that endogenous JA rapidly accumulated within 30 min after wounding. The increase in the activities of both lipoxygenase （LOX） and allene oxide synthase （AOS） lagged behind JAs burst. A second slight increase in JAs level was observed at 24 h after wounding treatment, and at the same time point, higher activities of LOX and AOS were also detected. Endogenous free SA content decreased accompanied with JAs burst. Effects of exogenous JA application were similar to those of wounding treatment on endogenous SA level and phenylalanine ammonia lyase （PAL） activity, whereas exogenous SA application led to the significant inhibition of LOX and AOS activities and the decrease of endogenous JAs level at the early stage of treatment. It is thus suggested that JAs burst and SA decrease in early response to wounding may constitute an important mechanism by which plant starts the related defense reaction and adapts to wounding stress.     

世界栽培豌豆(Pisum sativum L.)资源群体结构与遗传多样性分析

【目的】评价国家种质库长期保存的国内外栽培豌豆(Pisum sativum L.)资源的遗传多样性水平,揭示其遗传多样性、等位基因和群体结构差异,据此评估其重要程度及价值,为中国豌豆资源研究策略和方向的正确选择、国内外资源的充分发掘利用和深入研究提供理论依据。【方法】利用21对豌豆多态性SSR引物,对来自国外五大洲66个国家和中国28个省(区、市)的1984份栽培豌豆进行SSR标记遗传多样性和群体结构分析;采用Structure2.2软件完成资源群体结构剖析、推断参试材料的合理组群数、确定每份参试材料的适当群体划入及其相关参数计算;利用NTSYSpc2.2d软件估算其遗传距离,进行主成分分析(PCA)并绘制三维空间聚类图;采用PopgeneV1.32估算种质群的等位位点分布等参数,利用FstatV2.9.3.2进行种质群间遗传多样性差异显著性测验。【结果】通过对国、内外栽培豌豆资源群间SSR等位基因数(NA)、有效等位基因数(NE)、有效等位基因所占比重(NE/NA)、等位基因丰度(AR)、基因多样性指数(GD)、Shannon's信息指数(I)的比较,发现除等位基因数(NA)外,国内资源的其它5个遗传多样性指标全面高于国外资源。在21个SSR基因位点中,国内、外资源群在7个位点间存在等位基因种类的差异。群体结构分析将1984份世界栽培豌豆资源划分成三大组群。组群A包含96.49%的国外栽培豌豆参试资源,可代表典型的国外栽培豌豆资源类型;组群B的资源88.18%来源于陕西和内蒙古,可代表中国典型的春播区栽培豌豆资源类型;组群C的资源52.05%源于中国秋播区,47.44%源于中国春播区,可代表中国秋播区和除陕西、内蒙古外的春播区栽培豌豆资源类型。组群间遗传多样性差异达到显著水平。PCA作图分析也明确显示世界栽培豌豆资源群体中存在3个边界明显的资源富集区(基因库I、II、III),且与三大组群的群体结构分析结果精确对应。【结论】国内资源的遗传多样性程度整体上超过国外资源,国外资源群体内个体间的差异程度平均高于国内资源。群体结构分析侦测到世界栽培豌豆资源中存在A、B、C共三大资源类群,类群间的遗传多样性差异达到了显著水平,且与PCA做图分析显示的3个边界明显的基因库间存在着精确对等关系:"类群A"几乎等同于"基因库I","类群B"几乎等同于"基因库II",而"类群C"几乎等同于"基因库III";基因库I由国外资源富集而成,基因库II由中国陕西和内蒙古资源富集而成,基因库III由中国秋播区资源和陕西、内蒙古以外的春播区资源富集而成,由此得出世界栽培豌豆由3个基因库构成的结论。国外栽培豌豆种质资源构成了"基因库I",国内栽培豌豆种质资源构成了"基因库II"和"基因库III",表明国内、外资源均很重要,但国内资源甚于国外。     

叠氮化钠对豌豆诱变效应的初步研究

豌豆种子在蒸溜水中预浸24h 后,放入0.000,0.002、0.020、0.200、2.000 m molL~(-1)叠氮化钠溶液处理24h,研究叠氮化钠对豌豆的诱变效应。试验所用的测定指标包括 M_1代的发芽率、田间出苗率、萌发延滞时间、根长、染色体畸变率、过氧化物酶、淀粉酶和蔗糖转化酶活性及 M_2代叶绿素缺失突变率.试验结果表明:(1)高浓度叠氮化钠溶液(≥0.020mmolL~(-1))降低种子萌发率和田间出苗率,抑制根的生长,延滞种子萌发,抑制酶活性随萌发过程的增高;(2)低浓度叠氮化钠溶液(0.020mmol L~(-1))处理刺激根的生长和酶活性的增高;(3)叠氮化钠有效诱发 M_2代叶绿素缺失突变。所有突变体中,黄绿苗突变体发生频率最高.0.200 mmol L~(-1)叠氮化钠溶液处理,叶绿素缺失突变频率高达50.53%;(4)叠氮化钠不诱发根尖染色体畸变。     

育亨宾生物总碱的分离与纯化

本实验旨在将低含量的育亨宾生物碱纯化、富集,并分离其多种成分。选用8.00%育亨宾盐的粗品,先用酸溶碱沉和有机物萃取的提取方法得到较高含量的育亨宾生物碱,即纯化的育亨宾生物碱。然后用紫外分光光度法粗略的测定纯化的育亨宾生物碱的含量,再通过超高效液相色谱法精确的测定纯品的育亨宾生物碱含量。其分离可通过配置合适的洗脱液,过碱性氧化铝的柱子实现。最终获得纯度较高的育亨宾生物碱,并收集到其在柱层析过程分离开的各条带,即育亨宾生物碱的各种同分异构体,将其各种成分成功的分离开。经过碱性氧化铝的柱层析,将纯化的育亨宾生物碱分离为两条色谱带。     

茶黄素的提取分离与纯化研究进展

综述了国内外茶黄素的提取和分离纯化方法的研究成果和研究现状，并分析评价了柱层析法和高速逆流色谱法的优缺点，认为两者结合是理想的分离纯化工艺。