金龟子绿僵菌、球孢白僵菌不同菌株对星天牛成虫的生物测定

在测定8株虫生真菌产孢量的基础上，选用4株金龟子绿僵菌和1株球孢白僵菌菌株，采用爬行接种法对星天牛成虫进行生物测定，旨在筛选出对星天牛成虫具有强致病力的生产菌株。星天牛成虫在产孢充分的平皿上爬行后所接触到的孢子量差异不显著。接种后不同菌株对星天牛成虫的致死趋势较一致，死亡高峰期在9～15d。通过死亡率一时间几率值分析发现，MaYTTR04，MaZPTR01，t3083个菌株的LT50分别为9．14，9．48，9．67d，较另2个菌株要短。最高僵虫率的菌株是MaZFrrR01，为53．3％；其次是MaYTTR04，为40．0％；其余3个菌株均较低。试验结果表明MaYTTR04，MaZPTR012个菌株对星天牛有较高的致死率，僵虫率也较高，可以作为优良菌株进一步的研究、推广。     

不同球孢白僵菌菌株对星天牛幼虫的致病力

为筛选出可用于星天牛生物防治的高致病力菌株,测定了8株球孢白僵菌菌株(Bb Ma A-01、Bb MQ-04、Bb MQ-07、Bb QZ-01、Bb QZ-02、Bb YXTR-03、Bb TK-02、Bb XJ-11)的生长速度和产孢量及其对星天牛幼虫的致病力。结果表明:不同球孢白僵菌菌株的生长速度、产孢量和对星天牛幼虫致病力差异十分显著。采用浸渍法接种15 d后,不同球孢白僵菌菌株对星天牛幼虫累计致死率(幼虫死亡率)在70%~100%之间,其中Bb XJ-11、Bb QZ-02菌株对幼虫的累计死亡率最高,均达100%;且接种后星天牛幼虫的僵虫率(感染率)也分别高达90%、80%;致死中时(LT50)较短,分别为5.38 d、5.83d。研究结果表明Bb XJ-11、Bb QZ-02菌株对星天牛幼虫的致病力较强,同时2个菌株的生长速度快、产孢量高,故可作为防治星天牛的优良菌株加以推广应用。     

松褐天牛成虫高毒力菌株的筛选试验

松褐天牛不仅本身对树木的生理和工艺造成损害,而且是松材线虫在松林间传播的媒介昆虫,对松木造成巨大危害。该文选用了7株虫生真菌对松褐天牛成虫进行了生物测定,结果表明不同菌株的毒力存在差别,其中以金龟子绿僵菌Ma83菌株的毒力最强,天牛的校正死亡率及感染率都最高,分别10 0 %和79% ,致死中时也最短,LT5 0为5 .2 4d ,致死中浓度LC5 0为1.3 8×10 - 6 孢子 ml.松墨天牛成虫虫体不同部位与无纺布菌条的接触感染实验表明,触角、口器、足和腹的感染率依次升高,致死中时依次下降。     

4株绿僵菌的鉴定及对松褐天牛成虫致病效果比较

【目的】为筛选对松褐天牛毒力更高的微生物资源,开展生物防治通过培养性状、分生孢子形态及系统发育树鉴定4个绿僵菌菌株,比较测定各自对松褐天牛的毒力。【方法】对4株绿僵菌的培养性状和分生孢子形态特征进行描述,并对4株绿僵菌的EF-1α基因进行克隆和测序,构建系统进化发育树,综合鉴定4株绿僵菌的分类地位。测定了不同孢子浓度及接种方法(浸虫、浸枝和无纺布)对松褐天牛成虫的致病效果,构建4个菌株对松褐天牛的毒力方程。【结果】1)菌株WTKH和WP08鉴定为平沙绿僵菌;菌株LV2鉴定为金龟子绿僵菌;菌株qc1401鉴定为瘿绵蚜绿僵菌。2)平沙绿僵菌WP08菌株和金龟子绿僵菌LV2菌株对松褐天牛校正死亡率较高,瘿绵蚜绿僵菌qc1401菌株次之,平沙绿僵菌WTKH菌株最低。4个菌株对松褐天牛的致死速度依次为WP08LV2qc1401 WTKH,LT50分别为5. 52、10. 38、16. 93和20. 80天。3)以平沙绿僵菌WP08为供试菌株,在1. 0×108、1. 0×107、1. 0×106个·m L-1共3个浓度下,孢子浓度越高则松褐天牛校正死亡率越高、半数死亡时间越短,孢子浓度为1. 0×108、1. 0×107时,试验期内校正死亡率均达到100%;半数死亡时间LT50分别为11. 38、16. 44和24. 22天。4)以平沙绿僵菌WP08为供试菌株,3种接种方法 40天内松褐天牛死亡率均为100%,LT50浸虫法为5. 52天,浸枝法为11. 38天,无纺布法为17. 21天。【结论】4株绿僵菌均可侵染松褐天牛致其死亡,其中,平沙绿僵菌WP08的致死率和致死速度较快,为防治松褐天牛的优良菌株。     

白僵菌和绿僵菌林间感染星天牛成虫试验

应用白僵菌和绿僵菌的菌条,在林间通过星天牛成虫在木麻黄树干的菌条上自由爬行接触的方法,对星天牛成虫进行感染试验。结果表明:林间星天牛成虫接触白僵菌和绿僵菌菌条13 d后,死亡率达100%(对照组死亡率仅为16.7%),致死中时(LT50)分别为6.77 d和5.93 d;感染白僵菌和绿僵菌菌条的天牛成虫存活期分别为7.9 d(3～13 d)和7.1 d(3～13d),极显著低于对照的26.1 d(8～43 d)。说明利用白僵菌和绿僵菌菌条林间防治星天牛成虫效果显著,可进一步推广应用。     

不同来源绿僵菌对油桐鹰尺蠖幼虫的致病力比较

油桐鹰尺蠖Biston suppressaria (Guenée) 是一种杂食性食叶害虫,近年来在速生桉树林分中大 面积发生,造成较大的损失。文中研究了不同来源金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae 菌株生长与产孢 特性及对油桐鹰尺蠖幼虫的致病力,旨在筛选出高效防治该虫的生物资源。试验结果表明：不同来源的 绿僵菌菌株间菌落生长速度和产孢量差异显著,MaZPTR-01 菌株15 d 的菌落直径为6.5 cm,显著较其它 菌株大;MaFZ-13 和MaZPTR-01 菌株培养15 d 产孢量最高,分别为1.33×108 孢子· cm-2 和1.28×108 孢 子· cm-2。致病力测定结果表明：不同菌株对油桐鹰尺蠖幼虫的致病力存在显著差异,其中接种MaFZ-13 和MaZPTR-01 菌株的幼虫校正死亡率、僵虫率均较其它菌株高,接种后15 d 幼虫校正死亡率分别达到 94.5%、92.7%,僵虫率分别为75%、61.7%;这2 个菌株的致死中时（LT50）显著比其它菌株短,分别为 4.34 和4.52 d。绿僵菌MaFZ-13 和MaZPTR-01 菌株对油桐鹰尺蠖幼虫的致病力强,且具有良好的生产性 状,可作为该虫的生物防治资源进一步开发应用。     

筛选球孢白僵菌菌株的试验

为防治松褐天牛筛选致病性强的白僵菌菌株，把来自不同寄主的１４株球孢白僵菌分离，纯化后，分别接种在ＰＤＡ和松褐天牛虫体增减基上进行生长速度，产孢能力测定，从中选出８株培养性状好的进行致病性试验。再选出致病力较强的菌株Ｂ１和Ｂ２生产高孢粉，用于做室内松褐天牛致病力及防治方法的比较试验。     

球孢白僵菌对光肩星天牛幼虫的毒力

从自然感病的光肩星天牛虫尸上分离出球孢白僵BF菌株,在室内用109孢子/mL、108孢子/mL和107孢子/mL3种浓度的孢子液侵染光肩星天牛低龄幼虫。试验结果表明:感染天牛幼虫累积死亡率分别为73.3%、64.8%、14.4%,接种前2种浓度的天牛幼虫第6 d后死亡率显著增大,而107孢子/mL没有出现急速死亡现象。在野外试验中,用108孢子/mL菌液喷于木段表面并将天牛成虫置于罩网木段上产卵。结果显示,皮下大量天牛幼虫及少量卵感染了白僵菌致死,防治效果可达76.8%。     

筛选球孢白僵菌菌株的试验

为防治松褐天牛筛选致病性强的白僵菌菌株，把来自不同寄主的１４株球孢白僵菌分离、纯化后，分别接种在ＰＤＡ和松褐天牛虫体培养基上进行生长速度，产孢能力测定，从中选出８株培养性状好的进行致病性试验。再选出致病力较强的菌株Ｂ１和Ｂ２生产高孢粉，用于做室内对松褐天牛致病力及防治方法的比较试验。结果显示，Ｂ１致病力优于Ｂ２，注射菌液法的防治效果优于撒菌粉法     

增效剂对球孢白僵菌产孢量及对光肩星天牛致死速率的影响

在应用昆虫病原菌防治光肩星天牛（Ａｎｏｐｌｏｐｈｏｒａ ｇｌａｂｒｉｐｅｎｎｉｓＭｏｔｓｃｈ）的试验中，筛选出一种增效剂，可使病原菌的产孢量增加，光肩星天牛的致死速率加快。在生产病原菌的培养基内加入０．０２％的增效剂培养５天，产孢量比对照增加一倍多。在含孢量１０＾８／ｍｌ的球孢白僵菌的菌悬液中加入０．０２％的增效剂，以每头光肩星天牛幼虫接种１ｍｌ菌悬液，使光肩星天牛幼虫第６天开始发病，第１６天死亡     

球孢白僵菌和金龟子绿僵菌对红火蚁工蚁的致病力测定

为了评价白僵菌和绿僵菌对红火蚁的致病力,寻找其生物防治菌株资源,采用浸液法测定了11株球孢白僵菌(Beauveria bassiana Balsamo)和9株金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae Metschnikoff)菌株对红火蚁工蚁的致病力。结果表明:以浓度1×10^7个孢子·mL-1接菌红火蚁工蚁,10 d后,白僵菌和绿僵菌对其校正死亡率范围分别为(6.47±0.98)%^67.14±0.22%和(35.13±1.25)%^81.93±0.94%;白僵菌BSX-PC和绿僵菌MaWys-01菌株对红火蚁的致病力较强,致死速度较快,致死中时(LT50)分别为(5.64±0.52)d和(4.78±0.46)d。测定不同浓度对红火蚁的致病力,白僵菌BSX-PC和绿僵菌MaWys-01菌株以浓度1×10^8个孢子·mL^-1接菌后10 d,其校正死亡率分别为(79.59±0.5)%和(99.20±0.80)%,僵虫率为(63.24±0.51)%和(81.92±1.39)%,两菌株对红火蚁6 d的致死中浓度(LC50)分别为1.01×10^6和2.42×10^5个孢子·mL^-1。通过时间-剂量-死亡率模型分析,两个菌株致死效应最强的时间均是接菌后3~5 d。综合分析,白僵菌BSX-PC和绿僵菌MaWys-01菌株在红火蚁生物防治中有较大应用潜力。     

白僵菌和绿僵菌感染榕管蓟马成虫试验

采用孢悬液浸渍法测定了3株金龟子绿僵菌和3株球孢白僵菌对榕管蓟马的致病力。结果表明:筛选出MaZPTR-01-01和MaQZ-02为优良菌株,在接菌9 d后,此两菌株对榕管蓟马的校正死亡率均超过了80%,僵虫率分别为68.68%和73.96%,LT_(50)分别为6.08 d和5.25 d,均好于其他菌株。这两株绿僵菌感染榕管蓟马效果良好,在生物防治中将有重要的应用价值。     

Effect of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae on the Trialeurodes vaporariorum-Encarsia formosa system

The virulence of three strains of Beauveria bassiana and one of Metarhizium anisopliae was tested against Trialeurodes vaporariorum and its parasitoid Encarsia formosa in laboratory assays. These strains were previously selected for their virulence against Galleria mellonella and Tenebrio molitor. The commercial B. bassiana strain ATCC 74040, both as pure fungal culture and formulated myco-insecticide (Naturalis), was included in the assays as positive control. First, the entomopathogenic fungal strains were tested for their virulence against T. vaporariorum nymphs on tomato leaf disks. Then, the E. formosa development was evaluated under treatment with the entomopathogenic fungal strains at five different time points from the parasitization of T. vaporariorum nymphs. The virulence of our entomopathogenic fungal strains was superior to that of ATCC 74040, although not significantly, resulting in a cumulative mortality (CM) of T. vaporariorum nymphs 7 days after inoculation (DAI) greater than 86 %. Our M. anisopliae strain CIST8 was the most effective (96.6 % CM 7 DAI), even superior to the myco-insecticide Naturalis (94.2 %), which was more effective than the ATCC 74040 pure strain (85.6 %). The entomopathogenic fungal strains, and especially Naturalis, negatively affected E. formosa development and its parasitization activity of T. vaporariorum nymphs. This effect was more pronounced when the fungal strains were applied before parasitization. Results suggest that the application of entomopathogenic fungi is incompatible with E. formosa release on crops.     

应用绿僵菌和白僵菌林间防治木麻黄毒蛾的初步研究

采用绿僵菌和白僵菌并采取施放粉炮和喷菌液2种方式,对木毒蛾进行林间防治。2 a试验结果表明:2009年,施放粉炮15 d后,粉炮用量60个.hm-2的木毒蛾校正死亡率:绿僵菌为(54.1±3.7)%、白僵菌为(51.8±1.8)%,显著高于粉炮用量30个.hm-2的处理;2010年,粉炮用量45、60个.hm-2处理15 d后,绿僵菌处理木麻黄毒蛾校正死亡率分别为(90.1±3.6)%、(90.3±3.1)%,白僵菌处理分别为(88.5±8.1)%、(85.6±4.1)%,2种粉炮用量间防治效果差异不显著,但显著高于30个.hm-2处理。使用绿僵菌和白僵菌菌液喷雾12 d后,木毒蛾校正死亡率分别达到(93.9±6.3)%、(89.7±3.8)%。施菌后木毒蛾的化蛹率显著降低。林间湿度是影响防治效果的重要因素,干旱少雨天气防治效果较差,阴雨湿度大的环境防治效果较好。     

木麻黄毒蛾高致病力绿僵菌和白僵菌菌株的筛选

木麻黄毒蛾是我国东南沿海防护林主要树种木麻黄的主要害虫之一。通过8株绿僵菌和2株白僵菌菌株对该木毒蛾进行室内生物测定,综合考虑产孢量、校正死亡率、LT50等多项指标,筛选出M aYDTR03和BbSMYXTR03为优良菌株,此2菌株对木毒蛾的校正死亡率均超过了95%,僵虫率分别为72.5%和80%,LT50分别为6.68,6.57d,均好于其它菌株。同时,分析了绿僵菌产孢量与LT50间的相关性,结果表明,两者之间存在显著的线性回归关系。     

Biological control of the tick fowl Argas persicargas persicus by the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae

The pathogenicity of the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae against the tick fowl Argas persicargas persicus was studied. Bioassays revealed significant differences between the two fungi and the A. persicargas persicus stages exposed. The first nymphal instar was more highly susceptible to both fungi than the second nymphal instar. The unfed female of A. persicargas persicus was significantly less susceptible to both fungi than the engorged female. Application of M. anisopliae to sackcloth naturally infested with the tick fowl A. persicargas persicus induced mortality which reached 100?% three weeks after treatment under field conditions. The present study suggests that entomopathogenic fungi have good potential for tick fowl, A. persicargas persicus, control.     

Potential of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana in the control of tea termite Microtermes obesi Holmgren in vitro and under field conditions

Two strains of Metarhizium anisopliae (Metschnikoff) Sorokin and two strains of Beauveria bassiana (Ballsamo) Vuillemin were evaluated for their potential use as biological control agents against the tea termite Microtermes obesi Holmgren. The strains were screened for relative pathogenicity, and the median lethal time eliciting 50% mortality (LT₅₀) was calculated. In general, the M. anisopliae strains were more virulent with lower LT₅₀ values than B. bassiana strains. The LT₅₀ values ranged from 1.6 to 3.7 days. The median lethal concentrations (LC₅₀) of all the isolates were also determined. The M. anisopliae strains had low LC₅₀ values compared to B. bassiana strains. The LC₅₀ values ranged from 35 to 140 conidia per termite. The strains were also tested for survival under laboratory nest conditions. All the isolates exhibited the ability to grow, sporulate and produce an epizootic in treated nest material. Field applications of the isolates also produced promising results.     

绿僵菌侵染光肩星天牛幼虫过程的透射电镜观察

应用透射电镜观察并研究光肩星天牛幼虫感染绿僵菌后体壁和中肠发生的病理变化。结果表明:接菌后16h,寄主表皮层中观察到少量菌丝段,至24h菌丝已普遍侵入,芽管在穿透过程中表现了机械压力和酶活性。36～48h菌丝即可穿透体壁进入血腔。菌丝和菌丝段经血淋巴循环侵入各器官组织。48～72h,随着菌丝和菌丝段在肠壁细胞中迅速大量增殖,肠壁组织逐渐被破坏,中肠微绒毛脱落,肠壁细胞形成空泡,围食膜被分解消失,最终中肠组织崩溃、解体。     

不同宿主的白僵菌菌株分离及特性研究

以9株白僵菌菌株为材料,对其进行分离鉴定并探讨菌株的生物学特性。结果表明:有1株为布氏白僵菌(Beauveria brongniartii),8株为球孢白僵菌(B.bassiana)。结合白僵菌菌落特征、营养生长情况和产孢量来看,2号和3号菌株比较适合应用于生产。