丰香草莓叶片离体再生不定芽的研究

本试验以丰香草莓组培苗叶片为试材,研究了离体再生过程中激素配比、叶龄、放置方式、暗培养等对不定芽再生效率的影响。     

高丛越橘离体叶片再生植株研究初报

用越橘组培苗的叶片作为外植体 ,进行不定芽再生植株的研究。以改良的 WPM为其基本培养基 ,添加玉米素5 mg· L- 1 ,不定芽再生率高达 90 %。所用品种中除乔治亚姆外均有相当高的再生率。培养基中的玉米素浓度低于 5mg· L- 1时 ,不定芽的再生率也随之下降 ;基本培养基中加入 TDZ和 BA,再生率只为 0 %～ 30 %。不定芽的增殖、生根、温室锻炼、大田移栽均已获得成功     

美女樱叶片离体培养研究

以美女樱品种"Quartz"离体叶片为外植体,探讨了不同细胞分裂素、暗培养、硝酸银质量浓度以及不同植物生长调节剂组合对不定芽再生的影响。结果表明:6-BA的诱导效果好于TDZ。在培养基MS+6-BA4.0mg/L+IBA0.15mg/L+蔗糖30g/L上可以使美女樱叶片不定芽的再生率达26.8%。2mg/LAgNO3可以将美女樱叶片的不定芽再生率提高到31.3%,并缩短不定芽发生时间。暗培养5d可以促进美女樱叶片不定芽的再生,活性炭对美女樱叶片离体再生有一定抑制作用。     

抗生素对梨离体叶片不定芽再生的影响

以沙梨‘金花’和西洋梨‘丰产’两个品种的无菌苗幼叶为试材，研究了卡那霉素、头孢霉素和羧苄青霉素对梨离体叶片不定芽再生的影响。用新梢顶端1～3节新展开的叫‘片制备外植体，分别接种在NN69 BA5mg／L NAA0．3mg／L CH300mg／L的培养墓上，附加不同浓度的抗生素，黑暗处理20d，结果表明：500mg／L的浓度下，头孢霉素完全抑制供试品种叶片的再生；400mg／L的浓度下，羧苄青霉素完全抑制供试品种叶片的再生。丰产和金花对卡那霉素均敏感，5mg／L就极显著的抑制不定芽再生；10mg／L时不定芽不能正常生长，白化死亡，同浓度下供试品种不能分化不定根。     

皇家夏天葡萄离体叶片再生体系的建立

叶片再生效率的高低直接影响目的基因转化的成功率,为建立稳定、高效的葡萄离体叶片不定芽再生体系,以优良无核葡萄品种皇家夏天为试材,取试管苗顶端1￣3叶位幼嫩叶片,研究了基本培养基成分、生长调节物质的种类和浓度、碳源等因素对叶片不定芽再生的影响。结果表明:供试WPM、1/2MS、B5和NN694种基本培养基,均可诱导其叶片再生不定芽,差异不显著;碳源以添加10￣20g/L的葡萄糖或食用白砂糖较好;培养基中附加3.0mg/L的6-BA与0.05mg/L的IAA配比利于出芽和成苗,应用TDZ虽出芽较多,但芽丛多畸形、出苗困难,不宜使用。     

离心叶片离体培养初探

以雄性不育株的幼嫩叶片作为外殖体,以ＭＳ为基本培养基,附加ＢＡ５ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ,诱导形成愈伤组织并直接分化出芽,其分化率为３．８％,将芽转移至附加ＢＡ５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上,形成芽丛,繁殖系数为１１．２,经过不断切割芽丛进行继代培养,短期内获得大量试管苗。     

草莓叶片离体再生技术的研究

以红颊、章姬、丰香叶片为试材,对影响草莓叶片不定芽再生的主要因素进行了试验研究,建立了草莓离体叶片的再生体系。试验结果表明,基因型、不同激素种类和配比、叶龄直接影响了草莓叶片再生芽的发生。基因型是影响草莓叶片再生能力的决定因素,叶片四周刻伤处理能有效地提高不定芽的诱导率,适度的暗培养有利于不定芽的发生。叶片愈伤组织的诱导培养基以MS＋TDZ2～3mg/L较理想,芽伸长的理想培养基为MS＋6-BA0.3～0.5mg/L,生根培养基以1/2MS＋I-BA0.3mg/L较适宜,移栽成活率可达90%以上。     

不同处理对丰水梨离体叶片不定芽再生的影响

采用多因素组合试验设计,研究了噻重氮苯基腺(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)浓度组合、外植体类型、叶片放置方式、暗培养时间以及乙烯抑制剂AgNO3处理等因素对丰水梨离体叶片再生体系建立的影响.结果表明,NN69 TDZ 2.0 mg·L-1 IBA 0.1 mg·L-1处理的叶片再生频率和再生芽数分别达到86.7%和2.92,为丰水梨最佳培养基与植物生长物质组合.同一叶片的基部和中部比顶端更容易产生愈伤并再生形成不定芽.叶片远轴面向下接触培养基比近轴面向下利于叶片不定芽再生.AgNO3质量浓度在0.1～1.5 mg·L-1范围内对离体叶片再生有显著促进作用, NN69 TDZ 2.0 mg·L-1 IBA 0.2 mg·L-1 AgNO3 1.0 mg·L-1以及NN69 TDZ 1.5 mg·L-1 IBA 0.3 mg·L-1 AgNO3 0.1 mg·L-1使丰水梨叶片再生频率均达到100%.     

不同处理对丰水梨离体叶片不定芽再生的影响

采用多因素组合试验设计,研究了噻重氮苯基腺(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)浓度组合、外植体类型、叶片放置方式、暗培养时间以及乙烯抑制剂AgNO3处理等因素对丰水梨离体叶片再生体系建立的影响.结果表明,NN69+TDZ 2.0 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1处理的叶片再生频率和再生芽数分别达到86.7%和2.92,为丰水梨最佳培养基与植物生长物质组合.同一叶片的基部和中部比顶端更容易产生愈伤并再生形成不定芽.叶片远轴面向下接触培养基比近轴面向下利于叶片不定芽再生.AgNO3质量浓度在0.1～1.5 mg·L-1范围内对离体叶片再生有显著促进作用, NN69+TDZ 2.0 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1+AgNO3 1.0 mg·L-1以及NN69+TDZ 1.5 mg·L-1+IBA 0.3 mg·L-1+AgNO3 0.1 mg·L-1使丰水梨叶片再生频率均达到100%.     

花椰菜叶片离体再生技术的研究

以花椰菜叶片为外植体,经消毒处理后在不同激素浓度的培养基上进行诱导再生。结果表明:在附加3mg/L6-BA和0.2mg/LNAA的MS培养基上培养,芽分化率最高,达100%,平均每块外植体产生5.71个芽。     

樱桃远缘杂交种离体叶片再生植株的研究

在F14培养基蔗糖浓度由原来2%增加到8%培养下,F8继代试管苗增殖倍数由2-3增加到15-20,叶片由黄绿色变为浓绿油亮,保持天数由原来的15d增加到70d。经过4步骤程序培养可以获得小叶片再生,即:①将普通继代试管苗接入F14(附加6-BA0.5mg/L IBA0.05mg/L GA30.2mg/L 蔗糖6% 琼脂7.0g/L,pH5.8)继代培养30d,获得小叶型高分化试管苗。②剪取苗顶端未展开小叶片并且横切至叶中脉2-3刀后将小叶片,先在0.1%VC无菌水中浸泡5到30m in,然后接入MS或F14或WPM(附加6-BA2.0mg/L 2,4-D2.0mg/L 蔗糖4% 琼脂7.0g/L,pH5.8)进行光照培养3-4d,获得剪切口组织脱分化的小叶片。③转接1/2大量元素的WPM培养基(附加6-BA2.0mg/L IAA2.0mg/L 蔗糖4% 琼脂7.0g/L,pH5.8)及在环境控制(15h/24h光周期变化,光照2000 lx,温度20℃;黑暗,温度15℃)下培养20-30d,得到诱导出红色愈伤组织(含有花色苷)的小叶片。④转接F14培养基(附加6-BA0.5mg/L IBA0.05mg/L GA32.0mg/L 蔗糖6% 琼脂7.0g/L,pH5.8)培养20d后得到由红色愈伤组织中萌发出不定芽,同时颜色变淡。小叶片再生不定芽率可达87.1%。     

不同光质对中国樱桃叶片离体再生的影响

以中国樱桃(Prunus pseudocerasus Lindl.)组培苗为试验材料,采用新型照明光源—T5(28 W蓝光和红光)处理,日光灯为对照,对中国樱桃叶片再生的形态指标、叶绿素含量、POD活性、MDA含量、可溶性蛋白含量进行测定,分析新型照明光源(蓝光、红光、蓝光∶红光=1∶2)对中国樱桃叶片再生各项指标的影响。结果表明,新型照明光源处理的组培苗各项形态指标与日光灯光照处理具有明显差异,叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总量、类胡萝卜素含量、可溶性蛋白含量均高于对照组。POD活性、MDA含量与日光灯光照处理差别不大。新型照明光源对中国樱桃叶片再生具有一定的有利影响,值得推广应用。     

甜樱桃枝类组成及其对产量形成的影响

为探明甜樱桃枝类组成对产量的影响,并为整形修剪和丰产栽培提供依据。采用常规方法,调查了14个甜樱桃品种的坐果率、短果枝比例、花束状果枝比例等树体参数及单株产量,并对调查数据进行了相关分析、二次多项逐步回归分析等。结果表明,坐果率与甜樱桃产量之间呈正相关关系,相关系数达极显著水平;坐果率,中、长果枝及花束状果枝比例对产量起正效应作用;花芽叶芽比例对产量起负效应作用。研究证明,选择栽培坐果率高的优良品种是甜樱桃获得高产的先决条件;培育足够多的短果枝和花束状果枝才能使甜樱桃获得高产;在丰产树的树体结构中,长果枝∶中果枝∶短果枝∶花束状果枝的优化结构比例关系约为3∶1∶8∶40。     

聚乙烯醇在大樱桃砧木吉塞拉组织培养中的作用

以樱桃砧木吉塞拉为试材,研究了不同质量浓度聚乙烯醇(PVA)对樱桃砧木吉塞拉组织培养不同阶段的影响。结果表明,1 g/L的聚乙烯醇可有效提高吉塞拉丛生芽的诱导率,2 g/L的聚乙烯醇不但可以降低其玻璃化率、提高其分化数量,还可以提高其移栽成活率。因此,聚乙烯醇在吉塞拉砧木的初代诱导、继代增殖和生根培养中均有良好的促进作用。     

欧洲甜樱桃茎段离体培养污染率控制方法的研究

以欧洲甜樱桃红灯5年生健壮植株为试材,研究了培养基中蔗糖及不同抗生素配比对外植体茎段培养污染率的影响。结果表明：无蔗糖培养基能显著降低染菌率,外植体在无糖培养基中最佳培养时间为7天,利福平和氯霉素能很好地抑制菌类物质活性,降低茎段培养的污染率,二者浓度均为100mg／L时获得无菌成活苗的几率最高,氯霉素、利福平最佳浓度组合为100mg／L利福平＋50mg／L氯霉素。100mg／L利福平＋50mg／L氯霉素的无糖培养基处理外植体时,污染率为0,成活率为90％。     

昌红苹果离体叶片不定芽的诱导及植株再生

 以昌红苹果的组培苗为试材,研究建立叶片的离体再生体系。用30~40 d继代的新梢顶部1~3节新展开的叶片作为外植体,分别接种在分化的培养基上,黑暗处理15 d, 昌红苹果叶片不定芽的最高再生率为100%。在6号培养基上,昌红苹果叶片的再生能力最高; 诱导叶片不定芽适宜的培养基为MS+TDZ 1.0 mg /L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖 30 g/L+ 琼脂 5.5 g/L。     

硒对甜樱桃叶片褪黑素和谷胱甘肽氧化还原循环的影响

【目的】研究不同价态和浓度硒对甜樱桃叶片褪黑素含量以及谷胱甘肽(GSH)氧化还原循环的影响,为探究外源硒、内源褪黑素和GSH氧化还原循环间的关系提供参考。【方法】2015年在四川广元进行田间试验,以两年生甜樱桃‘红蜜’和‘布鲁克斯’为试验材料,试验包括清水处理(CK)、单施Se~(6+)(来源于Na_2SeO_4)、单施Se~(4+)(来源于Na_2SeO_3)、Se~(6+)+褪黑素和Se~(4+)+褪黑素5个处理,30 d后采取叶片,测量叶片硒含量和褪黑素的含量。2016年以重庆綦江两年生甜樱桃‘布鲁克斯’叶片为试验材料进行离体试验,将甜樱桃离体叶片放置在2 mg·L~(-1) Se~(6+)处理0、1、2、3和4 d,以清水处理为对照,每天上午10:00采取叶片;将离体叶片分别置于0、0.5、1.0、2.0、4.0 mg·L~(-1) Se~(6+)溶液24 h后采取叶片,离体试验分别测量叶片硒和褪黑素的含量以及GSH氧化还原循环的物质和酶活性。【结果】田间试验中,2.0 mg·L~(-1) Se~(4+)和Se~(6+)处理显著降低了‘红蜜’和‘布鲁克斯’甜樱桃叶片褪黑素含量,且两种甜樱桃叶片褪黑素含量在Se~(6+)+褪黑素和Se~(4+)+褪黑素处理下分别比单施Se~(6+)和单施Se~(4+)处理高。离体试验中,硒处理第1天‘布鲁克斯’离体叶片褪黑素含量高于对照,之后低于对照且随着时间延长而逐渐降低。硒处理第1天迅速降低了GSH氧化还原循环的物质和酶活性,即GSH、氧化性谷胱甘肽(GSSG)、GSH+GSSG和GSH/GSSG比值低于对照,谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性也低于对照,之后随着时间的延长,GSH氧化循环效率升高并超过对照。在不同浓度Se~(6+)处理24 h下,Se~(6+)处理增加了叶片褪黑素的含量,且随着浓度的增加而增加,GSH氧化循环效率则呈下降的趋势。【结论】外源硒处理提高了甜樱桃叶片硒含量,且六价硒的效果显著高于四价硒。外源硒处理影响甜樱桃褪黑素的含量和GSH氧化还原循环。     

甜樱桃砧木品种嫩茎段离体培养技术

以甜樱桃砧木品种"吉塞拉6号"春季萌发的半木质化新枝为外植体,经清洗消毒后切成1cm长茎段,接种于发生培养基上诱导萌发无菌芽,继而培育成无菌系。经过连续继代增殖和生根培养,培育成试管苗。将试管苗移入"泥炭+椰糠+珍珠岩"基质中进行炼苗,成活率达到了96%以上,培养二个月后移入塑料穴盘中,育成高质量的"穴盘苗"。研究表明发生培养基配方为1/2MS+3.0mg/L ZT+0.3mg/L IBA+2.0mg/L活性炭;增殖培养基配方为MS+1.0mg/L BA+0.1mg/L NAA为宜;生根培养基以1/2MS+0.3mg/L IBA。三个培养阶段的培养基配方及培养室光温调控、试管苗炼苗技术组成整个组织培养快繁技术体系,为甜樱桃嫁接育苗奠定了良好基础。     

哈密大枣叶片不定芽再生体系研究

建立哈密大枣叶片离体再生体系,为遗传转化奠定基础.采用哈密大枣叶片为外植体,研究基本培养基、激素浓度、暗培养时间、AgNO3等因素对离体叶片不定芽诱导的影响,并获得再生植株.MS、NN69、WPM三种培养基相比较,NN69更适合做为诱导愈伤组织的基本培养基;TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于 BA;再生培养基中添加1 mg/L AgNO3对不定芽的形成有显著的影响（P ＜0．05）;培养初期经过2周避光培养更有利于提高再生效率;采用10 mg/L维生素 C浸泡15 min可以防止褐化,并能提高不定芽再生率;培养基中添加聚乙烯吡咯烷酮（PVP）或者维生素C,不定芽再生率无显著提高（P ＞0．05）;培养基添加活性炭（AC）会抑制外植体的分化.叶片在 NN69＋1．0 mg/L TDZ＋0．20 mg/L IBA＋AgNO31．0 mg/L培养基上,暗培养2周后转入光照培养,出芽外植体转入 MS＋1 mg/L 6GBA＋0．20 mg/L IBA 不定芽再生效果最好.不定芽生长至3 cm 以上时,转至0．40 mg/L IBA的1/2MS培养基上进行诱导生根.     

大樱桃快速育苗技术研究

为了促进大樱桃生产发展,本文总结了大樱桃快速育苗技术,用以指导生产。主要步骤是2月末育苗,4月初定植,5月末~7月初嫁接,10月培育成苗。