用PPA—ELISA检测鸡血清中禽结核病抗体的研究

用ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测鸡血清中禽结核病抗体的研究孙力康达（青岛市畜牧兽医工作站）戈新刘均华（青岛市肉牛公司）李瑞忠（青岛市畜牧兽医工作站）１９７９年Ｄｕｄｏｉｓ－Ｄａｌｃｑ首先应用辣根过氧化物酶标记葡萄球菌Ａ蛋白，对细胞内抗原进行检测［１］。１９７...     

生物素─亲和素强化斑点试验检测口蹄疫病毒抗体的研究

常规酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）一般用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记ＩｇＧ进行检测．ＨＲＰ稳定性好，但敏感性稍差。为了克服这一不足，引入碱性磷酸酶检测系统，进行免疫强化斑点试验检出口蹿疫病毒抗体．用光敏生物素标记纯化的Ａ蛋白（ＳＰＡ）代替第二抗体．通过ＡＰ标记的亲和素（Ａｙｉｄｉｎ－ＡＰ）检测生物素化抗体，最后加底物ＢＣＩＰ和ＮＢＴ显色判定。该法具有良好的特导性和重复性，由于引入生物素系统和ＡＰ，使灵敏度大大提高，能检出微量抗体，比常规ＥＬＩＳＡ更敏感．     

盐析法提纯弓形虫抗原ELISA诊断试剂盒的应用效果

盐析法提纯弓形虫抗原ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒的应用效果崔君兆，郑挺，谢丽群，吕元聪，章玲珠（广西卫生防疫站南宁５３００２１）目前国内检测弓形体抗体的ＥＬＩＳＡ试剂盒一般是用虫体裂解抗原￣［６，７，８］，存在着抗原产量少，制备过程复杂，不利推广等缺点，虽有...     

ELISA双抗体夹心法诊断犬冠状病毒肠炎

从冠状病毒（ＣＣＶ）阳性病犬粪便提取物中提纯抗原，制备豚鼠抗血清，用饱和硫酸铵盐析法粗提，再经ＱＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０离子柱层析，提取ＩｇＧ，以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记，制备酶标抗体，按ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法操作术式，建立检测犬冠状病毒的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法，诊断犬冠状病毒肠炎粪样，并以电镜检查比较，证明该法特异、敏感，可在４小时内报告结果。     

现代诊断技术在兽医学上的应用及其进展

1　免疫酶技术 (ＥＩＡ)ＥＩＡ是根据抗原 -抗体结合的特异性 ,以酶作标记物 ,酶对底物具高效催化作用的原理而设计 ,既可用于抗原的检查 ,也常用于血清抗体的检测。1 .1　酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)ＥＬＩＳＡ是应用最广泛的免疫酶技术 ,包括间接法、夹心法、竞争法等。自ＶＯＬＬＥＲ和ＢＩＤＷＥＬＬ(1 975 )首先报道了应用间接ＥＬＩＳＡ方法检测病毒特异性抗体以来 ,ＥＬＩＳＡ方法已普遍应用于传染病的流行病学普查、抗体水平的评价以及疫苗质量的监控和标化等 ,迄今为止大多数动物病原体均已发展或报道了ＥＬＩＳＡ方法的研究与…     

用抗传染性氏囊病毒单克隆抗体建立夹心阻断ELISA检测鸡血清抗体及 …

用酶标记抗传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体，建立夹心阻断ＥＬＩＳＡ，检测ＩＢＤＶ鸡血清抗体。用Ｄ７８细胞毒免疫２４日龄的雏鸡，每周采血一次，共４次，用夹心阻断ＥＬＩＳＡ、微量细胞中和试验（ＶＮ）、琼脂扩散试验（ＮＧＰ）检测鸡血清抗体，结果表明：夹心阻断ＥＬＩＳＡ同ＶＮ之间具有较高的相关性（ｒ＝０．８１２６），与ＡＧＰ的相关性较低（ｒ＝０Ｘ．７５７５）。     

用酶联免疫吸附试验（ELISA）评价小鸡IBD免疫效果

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）评价小鸡ＩＢＤ免疫效果曹永长，毕英佐，朱基美（华南农业大学动物科学系，广州５１０６４２）酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）用于生产场疫苗的免疫效果评价还是最近几年才发展起来的￣［１，２］。我们采用美国ＩＤＥＸＸ公司提供的Ｉ...     

生物素—亲和素强化斑点试验检测口蹄疫病毒抗体的研究

常规酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）一般用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记ＩｇＧ进行检测。ＨＲＰ稳定性好，但敏感性稍差。为了克服这一不足，引入碱性磷酸酶性检测系统，进行免疫强化斑点试验检测口蹿疫病毒抗体。用光敏生物素标记纯化的Ａ蛋白（ＳＰＡ）代替和二抗体，通过ＡＰ标记怕亲和素检测生物素化抗体，是后加底和ＢＣＩＰ和ＮＢＴ显色判定。该法具有良好的特异性和重复性，由于引入生物系统和ＡＰ，使灵敏度大大提高，能检     

现地马传贫琼扩阴性 酶联免疫法阳性病马血清的特异性试验

在内蒙古牙克石市图里河镇非马传贫注苗区，用琼脂扩散试验（ＩＤ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）两种方法对６４匹马进行了对比检查，检出ＩＤ、ＥＬＩＳＡ双阳性４匹、ＤＬＩＳＡ单阳性马３匹。对３匹ＩＤ阴性，ＥＬＩＳＡ阳性马血清用不同浓度琼扩抗原重复检测结果为阴性，而用不同批次的ＥＬＩＳＡ抗原包被板及酶标抗体检测结果均为陧阳性，用马传盆病毒抗原对３匹单阳性马血清中和后，再进行ＥＬＩＳＡ测定，ＯＤ值均降低５     

猪瘟Dot－ELISA诊断试剂盒的研究

猪瘟Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒的研究黄骏明，朱庆虎（中国农科院哈尔滨兽医研究所）应用与猪瘟病毒有共同可溶性ＰＰ抗原的牛病毒性腹泻病毒ＯｒｅｇｏｎＣ。；Ｖ毒株制备抗原，进行免疫斑点试验（ＤＯｔ－ＥＬＩＳＡ）已成功地用于猪瘟血清抗体的监测［、’］。为了...     

Ab—ELISA和Ag—ELISA诊断骆驼伊氏锥虫感染的比较

采用四种方法：即①单克隆抗体检抗原的酶联免疫吸附试验（Ａｇ－ＥＬＩＳＡ）②检测抗体的在酶联免疫吸附试验（Ａｂ－ＥＬＩＳＡ）③表膜检查（ＢＣＥ）④小白鼠接种（ＭＩ），检查了肯尼亚１８３头骆驼锥虫的循环抗原，ＢＣＥ查出尼亚１８３头骆驼锥早的循环抗原，ＢＣＥ查出３７头阳性２０％），ＭＩ６０头阳性（３３％），Ａｇ－ＥＬＩＳＡ６３头阳性（４９％），Ａｂ－ＥＬＩＳＡ检出出的２４头中，Ａｇ－ＥＬＩＳＡ检出１８头     

用ELISA法检测犬细小病毒抗体

本文采用吸附豚鼠犬细小病毒（ＣＰＶ）多克隆抗体的微量板，进行间接酶免疫测定（ＥＬＩＳＡ）检测犬血清中的ＣＰＶ抗体。结果，ＥＬＩＳＡ抗体效价比血凝抑制抗体（ＨＩ）效价高，与ＨＩ效价的相关系数ｒ＝０．７８。     

抗赭曲霉毒素A酶标抗体的研制与应用研究

采用过碘酸钠氧化法研制成功了兔抗赭曲霉毒素Ａ酶标抗体。通过进行ＥＬＩＳＡ直接试验，对含不同浓度的赭曲霉毒素Ａ纯品和含毒饲料浸提液作了检测。结果证明，用过碘酸钠氧化法制备酶标抗体，方法简便、省时；用ＥＬＩＳＡ直接法检测赭曲霉毒素Ａ，具有灵敏度高，特异性强等优点。     

单克隆抗体ELISA检测犊牛粪便中冠状病毒抗原

用两株单克隆抗体混合后包被ＥＬＬＩＳＡ微孔板，加牛冠状病毒抗原，加经白陶土处理过的兔抗牛冠状病毒免血清，再加上辣根氧化物酶标记的羊抗兔ＩｇＧ抗体，加底物质显色间接ＥＬＩＳＡ检测牛冠状病毒抗原获得成功。用此方法检测细胞培养的牛冠状病毒上清液，其敏感度高出血凝试验（ＨＡ）８倍，从武汉市附近３个奶牛场采集犊牛腹泻粪便１０５份，用单抗ＥＬＩＳＡ检测牛冠状病毒抗原，共检出阳性３６份，并与血凝及血凝抑制试验，     

衣原体单克隆抗体在牛羊血清诊断上的应用

采用淋巴细胞亲交瘤技术，研制出的抗衣原体单克隆抗体，应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法，对本地区所采集的１２８份羊血清、９０份牛血清进行检测，结果，羊血清阳性检出率为２５．８％，牛血清阳性检出率为３２．２％，选择５０份羊血清、５０份牛血清用已建立的检测衣原体抗体ＥＬＩＳＡ与间接血凝试验（ＩＨＡ）进行比较，牛血清ＥＬＩＳＡ阳性检出率为３２．０％，ＩＨＡ为２４．０％，ＥＬＩＳＡ比ＩＨＡ试验高出８个百分点；羊血清ＥＬＩＳＡ阳性检出率为２６．０％，ＩＨＡ为２２．０％，ＥＬＩＳＡ比ＩＨＡ高出４个百分点。     

Ab─ELISA和Ag─ELISA诊断骆驼伊氏锥虫感染的比较

采用四种方法：即①单克隆抗体检测抗原的酶联免疫吸附试验（Ａｇ－ＥＬＩＳＡ）②检测抗体的酶联免疫吸附试验（Ａｂ－ＥＵＳＡ）③表膜检查（ＢＣＥ）④小白鼠接种（ＭＩ），检查了肯尼亚１８３头骆驼锥虫的循环抗原，ＢＣＥ查出３７头阳性２０％），ＭＩ６０头阳性（３３％），Ａｇ－ＥＬＩＳＡ６３头阳性（３４％），Ａｂ－ＥＬＩＳＡ检出９０头阳性（４９％）。其中ＢＣＥ未能检出的２４头中，Ａｇ－ＥＬＩＳＡ检出１８头（７５％）。所有阳性头数中，Ａｇ－ＥＬＩＳＡ检出９３％，Ａｂ－ＥＬＩＳＡ９５％。根据５５头的结果，阳性与阴性之间Ａｇ－ＥＬＩＳＡＯＤ值差异极显著（Ｐ＜０．０００１），Ａｂ－ＥＬＩＳＡＯＤ值差异不显著。因此，用Ａｇ－ＥＬＩＳＡ或结合ＢＣＥ诊断伊氏锥虫感染比用ＡＢ－ＥＬＩＳＡ更理想。     

二种方法检测猪传染性胃肠炎病毒抗体的比较

分别用血清中和（ＳＮ）试验和单克隆抗体（ＴＧＥｍＡｂ和ＴＧＥ／ＰＲＣＶｍＡｂ）阻断酶联免疫吸附试验（Ｂ－ＥＬＩＳＡ）对８１头美国进口猪血清作猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）抗体检测。ＳＮ试验检出７份阳性血清，检出率为８．６４％；Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清，检出率为８．６４％，无ＴＧＥ阳性。ＳＮ试验检出７份ＴＧＥ抗体阳性血清与Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出的７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清完全重合。结果证明，应用单克隆抗体进行的Ｂ－ＥＬＩＳＡ可鉴别诊断ＴＧＥ与ＰＲＣＶ感染，优于ＳＮ试验     

二种方法检测猪传染性胃肠炎病毒抗体的比较

分别用血清中和试验和单克隆抗体阻断酶联免疫吸附试验对８１头美国进口猪轿清作猪传染性胃肠炎抗体检测。ＳＮ试验同７份阳性血清，检出率为８．６４％，Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清，检出率为８．６４％，无ＴＧＥ阳性。ＳＮ试验检出７份ＴＧＥ抗体阳性血清与Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出的７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清完全重合。结果证明，应用单克隆抗体进行的Ｂ－ＥＬＩＳＡ可鉴别诊断ＴＧＥ与ＰＲＣＶ感染，优于Ｓ     

抗鸡传染性法氏囊病病毒酶标抗体的研制与应用

该试验采用过碘酸钠氧化法研制成功了抗鸡传染性法氏囊病病毒酶标抗体。通过进行双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ试验，对不同送检病料中的传染性法氏囊病病毒进行了检测。结果表明：用过碘酸钠氧化法制备酶标抗体方法简便、省时；用双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ试验检测传染性法氏囊病病毒，具有灵敏度高、特异性强等优点。     

斑点酶联免疫吸附试验检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体方法的建立

首次建立了斑点－酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ，美洲株）抗体的方法。特异性鉴定表明，ＰＲＲＳＶ不与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒阳性血清反应；与美国进口的ＰＲＲＳＶ抗体ＥＬＩＳＡ诊断试验盒检测结果比较，３５份猪血清的阴、阳性检出总符合率为８２．９％（２９／３５），其中Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的阳性检出率略高于进口试剂盒的检出率。