猪胸膜肺炎放线杆菌快速PCR检测方法的建立

根据猪胸膜肺炎放线杆菌 (Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的 apx A基因序列设计了 1对可扩增 1个4 2 2 bp片段的特异性引物 ,成功地建立了一种检测 APP的快速 PCR方法 ,并确定了其特异性和灵敏性。对血清 1～ 13型等 13个 APP标准株均能扩增出预期 4 2 2 bp的特异性条带 ;对猪副嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌的扩增结果为阴性。对 APP菌液最低检出浓度为 6 8CFU/ m L(D6 0 0 为 0 .0 0 3)。 12株临床分离菌的 PCR扩增结果与生化鉴定结果是一致的。该方法能从病料中分离培养 8h的混合菌群中快速检测APP,可用于 APP的快速诊断和流行病学的调查。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立及应用

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起猪的一种高度接触性呼吸道传染病,该病可给养猪业造成巨大的经济损失。为有效控制和确诊该病,根据报道的猪胸膜肺炎放线杆菌APXIV毒株的基因序列,合成了2对可扩增长度分别为442 bp和378 bp的特异引物,建立检测胸膜肺炎放线杆菌的巢式PCR方法。利用合成的引物在扩增猪肺疫巴氏杆菌、猪链球菌、副猪嗜血杆菌和大肠杆菌等细菌DNA时,结果均为阴性。用引物检测猪胸膜肺炎放线杆菌的标准菌株可扩增出442 bp和378 bp的特异性条带。表明运用PCR法检测猪胸膜肺炎放线杆菌的特异性和灵敏性均较高,可作为猪传染性胸膜肺炎的快速诊断和流行病学调查的手段。     

猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立

根据已经发表的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(App)dsbE-like基因的序列,设计了一对可扩增374bp目的片段的特异性引物。经PCR扩增,App1-4和6-10型标准菌株均能扩出约374bp的片段,而对大肠埃希菌(K88)、巴氏杆菌(5:A)和链球菌(Ⅱ)的扩增结果均为阴性。用建立的方法来检测分离菌株MC、ME和MH,结果表明,该方法能用于临床分离株的检测。灵敏性试验表明本方法对App菌液最低检出浓度为71cfu/mL。建立的PCR检测App的方法可用于临床上对App的检测。     

一起猪传染性胸膜肺炎的诊治

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌所致的一种高度接触传染性呼吸道疾病,引起纤维素性胸膜炎和肺炎为特征,慢性感染猪生长率降低。本病的广泛传播与养猪集约化方式有关,在大群集约化饲养的条件下易接触传播。2006年10月,本区某猪场发生猪传染性胸膜肺炎,导致136头仔猪发病,经抢救治疗,治愈116头,治愈率85%,死亡20头。现将诊治情况报告如下:1发病情况2006年10月,某猪场仔猪突然发病,出现不食、发烧、精神沉郁等一般症状,先后有136头仔猪发病,用磺胺、青霉素、安乃近治疗效果欠佳,并有20头死亡,病程长的出现咳嗽、气喘、呼吸困难等症状,发…     

猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立

根据猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)外膜脂蛋白基因序列，设计合成了1对特异性引物。经PCR扩增，APP1～10标准血清型菌株均能扩增出大小为980bp的DNA片段，而大肠埃希氏茵、猪多杀性巴氏杆菌、猪链球菌、猪肺炎霉形体和葡萄球菌等的扩增结果均为阴性。该方法检测APP DNA的敏感性可达2pg。表明，此PCR方法特异性好，敏感性高，可用于猪传染性胸膜肺炎的快速诊断。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立

猪传染性胸膜肺炎(Infectious pleuropneumonia of swine.IPPS)是由猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobaxioous pleuropneumoniae.APP)引起的高度接触性、致死性呼吸道疾病,以纤维素性胸膜肺炎和出血性坏死性肠炎为主要病理特征.     

遵义市猪传染性胸膜肺炎的血清学调查

猪传染性胸膜肺炎(Porcine Contagious Pleuropneumonia)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus Pleuropneumoniae,APP)引起猪产生急性纤维素性胸膜肺炎或慢性局灶性坏死性肺炎的一种高度接触性、致死性传染病。为及时掌握我市猪传染性胸膜肺炎的流行动态,我们于2006年10月份对遵义市的7个县(市)部分规模养殖场和散养户随机采取猪血清172份进行了血清学检测,现将结果报告如下。1材料与方法1.1材料(1)被检血清:采集遵义市的桐梓、仁怀、正安、湄潭等7个县(市)部分规模养殖场和散养户猪血清172份。方法是耳静脉采血后自然凝固分离血清,置冰…     

猪胸膜肺炎放线杆菌PCR诊断方法的建立与应用

根据胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ基因设计1对引物，扩增特异的650bp棱酸片段，建立了应用PCR检测猪胸膜肺炎放线杆菌的方法。特异性试验结果表明，12个血清型的放线杆菌参考菌株均能扩增出650bp特异性的核酸片段，而大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、猪肺炎支原体、伤寒沙门氏菌和支气管败血性波氏杆菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明，PCR的最低检出限量为500个放线杆菌。利用建立的PCR检测方法对22株从山东省不同地区分离的疑似胸膜肺炎放线杆菌菌株进行检测．结果14株为阳性。对感染猪病变组织的检测结果表明，病变部位不同，胸膜肺炎放线杆菌的检出率不同，其中以扁桃体的检出率最高。     

猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立及临床应用

为建立直接检测可疑病料中胸膜肺炎放线杆菌（APP）的PCR诊断方法，对用以扩增apxⅣA毒力基因3’端长约442bp的核苷酸片段的引物、模板、Taq DNA聚合酶、dNTPs的最适剂量及退火温度进行了优化筛选，并进行了特异性及重复性试验；以筛选出的优化条件，对临床可疑病料进行了PCR检测。结果，在25μL体系中，以5pmol／μL引物、0．25μL Taq DNA聚合酶、2mmol／L dNTPs、56℃退火温度对APP标准菌株apxⅣA毒力基因的扩增效果最好，重复性和稳定性高；而对类症菌株的扩增结果则为阴性，表明其特异性强。对分离到APP的病料PCR阳性率为100％（5／5）；未分离到APP的纤维渗出性病料中，新鲜与陈旧病料PCR阳性率分别为70．59％（12／17）、50．00％（4／8），而非纤维渗出性病料的PCR结果均为阴性（0／45、0／9）。结果表明，建立的PCR方法特异、快速、稳定、敏感，优于细菌学方法，它可作为APP可疑病料的理想诊断方法。     

猪传染性胸膜肺炎PCR诊断方法的建立

根据已发表的猪胸膜肺炎放线杆菌APXIV毒素的基因序列，自行设计和合成了二对可扩增448bp和365bp目的片段的引物，成功的建立了检测APP的套式PCR方法。通过对猪肺疫巴氏杆菌、猪链球菌、大肠杆菌、猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体和猪丹毒杆菌的DNA进行了PCR检测，结果均为阴性；对猪胸膜肺炎放线杆菌的1、2、5、6、7、9国际标准血清型均扩增出448bp和365bp的特异性条带；检测的敏感度一步PCR可达到5OO个细菌，最低检出DNA浓度可达到0．585ng／mL；套式PCR可达到50个细菌，最低检出DNA浓度可达到58．5pg／mL。另外，对5株从病猪体内分离的猪胸膜肺炎放线杆菌进行了检测，5株均成阳性反应；对10只屠宰猪的肺脏分离物进行了检测，结果1份为阳性。结果表明此法特异性和敏感性均很高，可做为猪传染性胸膜肺炎的快速诊断和流行病学调查的手段。     

放线杆菌引起猪传染性胸膜肺炎的诊治报告

1发病情况该猪场地势较低,由于6～7月份阴雨连绵,使该场的产房保育舍等处的污水不能外流,并且其它的污水也流向该场。天晴后,没能及时对全群猪及猪舍投药预防,再加上持续高温和通风不良等应激因素造成了疾病暴发。4天后,该场部分仔猪发病,出现发烧症状,食欲减退,呼吸急促,产房内9头母猪关节肿大,起卧困难,随之有57头死亡。6天后,母猪有4头流产,产房内9头母猪关节肿大,起卧困难,主要发生在断奶前后,保育阶段哺乳母猪,发病率高达30%,仔猪死亡率达86%。2临床症状急性感染症状:仔猪体温达40℃～42℃,食欲废绝,精神沉郁,背毛粗乱,咳嗽,张口伸舌,…     

猪传染性胸膜肺炎的防治：猪胸膜肺炎放线杆菌病的特点

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌（APP）引起的猪的一种呼吸道传染病。各种年龄的猪均易感,并常与巴氏杆菌等混合感染。临床上急性以突然发病、肺部纤维性出血为特征;慢性以肺部局部坏死和肺炎为特征。该病在我国的发生呈现逐年上升的趋势,给我国的养猪业造成了严重的经济损失。本文主要从病原特点和流行特征等方面对该病进行综述。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离和鉴定

猪胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae，APP）引起猪以肺出血、坏死和纤维素性渗出为主要病变的接触性传染病。根据APP的生长是否需要V因子（NAD，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）分为两个生物型。生物Ⅰ型（biotype Ⅰ）为NAD依赖型，分为12个血清型，与胸膜肺炎嗜血杆菌相似；生物Ⅱ型（biotype Ⅱ）为非NAD依赖型，分为2个血清型，即原类溶血巴氏杆菌。本文主要讨论NAD依赖型APP。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的套式PCR检测

根据猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)apxⅣA毒素基因的序列,设计了两对特异性引物P1/P4和P6/P8,建立了检测APP全部15个血清型的套式PCR方法.对APP的15个国际标准血清型和国内的APP菌株进行了PCR检测,都能得到223 bp的特异性扩增产物;检测的灵敏度可达1.3 CFU,最低检出DNA浓度为9 fg.     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及药敏试验

为了给天津某规模猪场提供猪传染性胸膜肺炎(PCP)的科学防控和合理的用药方案,本试验对该猪场疑似患PCP的病猪进行临床综合诊断和病理组织学观察,无菌采集病料,通过细菌的分离与培养、镜检、生化试验、卫星试验、PCR检测、动物致病性试验及药敏试验等实验室方法对分离菌进行系统分析。结果发现,病猪呼吸困难,病理剖检和病理组织学观察可见有典型的纤维素性肺炎变化;显微镜下分离菌呈多形性的革兰氏阴性杆菌,且其生化试验、卫星试验结果与传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)特性一致;用APP APX ⅣA毒素基因特异性引物扩增结果为阳性;该APP分离菌对小鼠具有致病性,且对头孢噻肟、氟苯尼考等药物高度敏感。根据实验室检测结果并结合临床综合诊断,最终判定该细菌分离株为猪传染性APP。     

猪传染性胸膜肺炎的研究进展

猪传染性胸膜肺炎（PCP）是由胸膜肺炎放线杆菌（APP）引起猪的一种高度传染性呼吸道病。本病又称为坏死性胸膜肺炎,以急性出血和慢性纤维素性胸膜肺炎为特征。     

猪传染性胸膜肺炎的检测与诊断方法

猪传染性胸膜肺炎（porcine contagious pleuropneunloniae,PCP）是由猪胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae,APP）引起的猪的传染性呼吸道疾病。该病的主要特征是急性出血性纤维素性胸膜肺炎和慢性局灶性坏死性肺炎。该病是由英国Paffion在1957年首次发现并报道,以前称为副猪嗜血杆菌病（Hpp）,此后,Maffhews和paffison于1961年,Dlandcn于1963年也相继报道了该病。     

胸膜肺炎（嗜血杆菌）放线杆菌

此综述资料简要地介绍了本菌所致疾病、在世界各地的分布、细菌的分类、致病因子、血清型、本病的诊断防治、抗菌药物的选用等，后附文献。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌LAMP方法的建立

为建立快速检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的鉴别方法,本研究根据APP ApxIVA基因的保守区设计6条环介导等温扩增(LAMP)引物,利用Loopamp Realtime Turbidimeter LA-320c实时浊度仪对反应体系和条件进行优化,建立了APP的LAMP方法。结果显示:该方法在64℃下反应15min DNA即可出现扩增,扩增后2~3min内即可判定结果,最低检测限为0.307ng/L,具有良好的重复性及稳定性,与其他病原菌无交叉反应,同时,试验结果可实现肉眼可视化观察。采用建立的LAMP方法与SN/T 1447-2011标准公布的方法同时对36份临床疑似APP样品进行检测分析,结果显示:APP阳性10份,阴性26份,两种方法的符合率为100%。本研究建立的方法为防止猪传染性胸膜肺炎的传播提供了有效的检测手段。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离与鉴定

猪传染性胸膜肺炎(Porcine pleuropneumonia)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)所致的一种高度接触性传染性呼吸道疾病,以纤维素性胸膜炎和肺炎为特征,该病由Patison等1957年首次报道.在欧洲、美国、加拿大、日本、韩国、澳大利亚等地都曾经发生过此病.我国近年来大部分地区都有对该病的报道[1].