金针菇的原生质体单核化

采用显微镜单孢分离技术从金针菇菌株 FL19(黄色品种 )和 880 1(白色品种 )分离刚萌发的原生质体再生菌株 ,分别获得 89和 83株单个原生质体再生菌株 ,并对它们的不亲和性因子基因型进行测定 .结果表明 ,两个亲本的不亲和性因子 A和 B都存在 3个复等位基因 .原生质体单核化技术可为白色金针菇的品种改良提供一个新途径     

小单孢菌40027菌株原生质体的形成和再生

通过酶解温度、酶解时间和再生培养基对小单孢菌40027菌株原生质体形成和再生的研究,确定小单孢菌40027菌株原生质体制备条件为37℃酶解60min;原生质体的再生培养基为R-1培养基。     

种间杂交选育新型产脂蛹虫草

为选育能够合成虫草素又能高效积累油脂的新型蛹虫草菌株,将高产虫草素的蛹虫草FY1421及高效合成油脂特别是不饱和脂肪酸的深黄被孢霉菌株Z0108进行原生质体融合。对亲本的原生质体的形成与再生、双亲灭活及融合的条件进行了筛选与优化,并结合96微孔板初筛和摇瓶发酵复筛,获取融合子。结果表明:蛹虫草菌株FY1421采用1. 5%溶壁酶+0. 5%蜗牛酶+0. 5%纤维素酶的混合酶液处理120 min,原生质体数量最多,再生率最高;深黄被孢霉菌株Z0108采用1%溶壁酶+1%蜗牛酶+1%纤维素酶的混合酶液处理4 h,原生质体数量最多,再生率最高; FY1421原生质体采用60℃水浴热灭活10 min,Z0108原生质体采用紫外线灭活30 s,均可达到100%的灭活率;灭活双亲在35℃下,使用40%的PEG促融10 min,融合效率最高。从650株融合子筛选得到融合菌株RCS262,其摇瓶发酵虫草素含量达5 926μg·g~(-1),油脂含量达到37. 5%。采用原生质体融合技术进行蛹虫草与深黄被孢霉的种间杂交,成功获得融合菌株既能高产虫草素,也具有高效积累油脂的能力。     

平菇原生质体单核化菌株的制备及其培养特征分析

【目的】比较分析平菇菌株原生质体单核化再生菌株培养特征,为平菇新品种选育提供创制材料及技术理论据支撑。【方法】采用原生质体制备技术获得平菇单核化菌株,采用生物学方法对实验菌株进行培养特征分析。【结果】各菌株原生质体释放量随酶解时间延长呈先升高再降低的趋势,11个菌株在酶解处理3.5 h时原生质体释放量最大、浓度可达2.12×10⁷个/mL,占总数的的84.6%;各菌株原生质体萌发率和单核率均具有较大差异,原生质体平均萌发率为69.62%,原生质体单核率为5.74%;比较分析出发菌株与其单核菌株的菌丝长速、形态、长势等特征发现,20个单核菌株的菌丝形态优于其出发菌株,占单核菌株的48.78%;12个单核菌株的菌丝长速显著高于其出发菌株,占单核菌株的29.27%。【结论】所有供试菌株在原生质体释放速率、原生质体再生能力、单核得率以及菌丝长速、长势、菌落形态等具有丰富的遗传多样性。     

一株产紫杉醇真菌PM-1菌株的原生质体制备条件研究

在探明小孢拟盘多毛孢(Pestalotiopsis microspora)PM-1菌株产生紫杉醇的基础上,本试验系统研究了菌龄、孢壁降解酶、稳渗剂、酶解时间及温度和培养基初始pH值对小孢拟盘多毛孢PM-1菌株原生质体制备和再生的影响,以期建立稳定高效的原生质体制备和再生体系。研究发现,小孢拟盘多毛孢PM-1菌株原生质体制备受多种因素影响,其中主要因素为混合酶系中各种酶的浓度配比及酶解时间,综合各项试验结果,明确PM-1菌株原生质体制备适宜的条件为分生孢子悬浮液接种Fries液体培养基(pH5.5)振荡培养18h,Lywallzyme(7.5g/L)、Drislase(7.5g/L)、Snailase(7.5g/L)3种酶的混合溶液,在36℃下酶解3h,以0.7mol/L NaCl作为稳渗剂制备的原生质体产量最高。研究结果为菌株的遗传改良和提高菌株的紫杉醇产生率奠定了基础。     

金针菇的原生质体单核化

采用显微镜单孢分离技术从金针菇菌株FL19（黄色品种）和8801（白色品种）分离刚萌发的原生质体再生菌株，分别获得89和83株单个原生质 体再生菌株，并对它们的不亲和性因子基因型进行测定，结果表明，两个亲本的不亲和性因子A和B都存在3个复等位基因，原生质体单核化技术可以白色金针菇的品种改良提供一个新途径。     

小麦纹枯病菌原生质体制备条件及再生菌株致病性研究

以小麦纹枯病菌HD-6为对象,进行原生质体制备与再生研究,并将再生菌株与原始菌株的致病性进行比较分析,为建立小麦纹枯病菌高效遗传转化体系提供依据.选用溶壁酶、崩溃酶、蜗牛酶、纤维素酶4种常见酶分别对小麦纹枯病菌进行酶解,并通过单因素试验分析酶解温度、酶解时间以及溶液pH值对原生质体得率的影响.结果表明,4种酶均能够裂解小麦纹枯病菌细胞壁得到一定数量的原生质体,其中崩溃酶的裂解效果最好,每克菌丝得到的原生质体数可达到2.6×108个.该酶的最佳反应温度是24℃,最适的酶解时间是3h,最适的pH值是6.0.获得的原生质体可以完成再生,并且再生菌株与原始菌株的致病力没有显著差异.     

食用菌育种的研究进展

对食用菌育种目标及单孢分离、组织分离、杂交育种、原生质体融合、理化诱变、空间诱变、分子生物学等育种方法的研究进展进行了综述,认为随着生物学的发展,杂交育种、原生质体融合及分子生物学方法仍然是食用菌育种的发展方向。     

鸡腿菇单孢分离和单孢杂交的研究

[目的]杂交育种被应用在各个物种之间.选育高品质,高产量的菌种.[方法]单孢分离技术是杂交育种行之有效的育种手段之一,近年来国内已开展这方面的研究.试验利用简单的仪器,设计一种适合鸡腿菇孢子收集和单孢分离的方法.[结果]鉴定挑选出35个单核菌株进行配对杂交,经染色镜检、拮抗试验、瓶栽试验,获得48个杂交新菌株.[结论]应用单孢分离技术对鸡腿菇进行杂交行之有效.     

金针菇单核原生质体菌株遗传差异的ISSR分析

原生质体技术在遗传分析和育种中具有重要作用.金针菇双核体在制备原生质体过程中会出现单核化.为了解单核原生质体之间是否存在差异,对3个金针菇菌株单核体原生质体不同交配型菌株以及配对而成的双核体菌株进行了ISSR分析.结果表明,3个金针菇菌株2种不同交配型单核原生质体配对的双核体与出发菌株之间遗传关系较近,遗传相似系数高的为0.97、低的为0.75;3个金针菇菌株的不同交配型菌株之间遗传差异较大,分别为0.77、0.73和0.59,表明不同交配型的单核原生质体菌株之间遗传差异显示其遗传背景的不同.