聚丙烯酰胺凝胶电泳操作注意事项研究

[目的]得到清晰的特异性条带,更好地分析SRAP标记产物。[方法]对聚丙烯酰胺电泳的上样量、电压条件进行了梯度试验,同时就灌胶方式、银染时间、显影剂调配等各步骤的操作进行了详细地探讨。[结果]上样量7μl、电压1 000 V最合适,能得到DNA条带清晰、特异性条带区分效果明显的条带。[结论]为后续电泳操作及分析过程奠定技术基础。     

浅谈种子纯度聚丙烯酰胺凝胶电泳测定技术

电泳是指荷电的胶体颗粒在电场中的移动。1809年,一位俄国物理学家进行了世界上第一次电泳实验,这个早期实验为电泳理论和技术的发展及其应用奠定了基础。     

利用半干技术进行水平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的同工酶分析

采用滤纸条半干技术进行水平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的同工酶分析,提高了电泳的分辨率,缩短了电泳时间(从10-12h缩短到4-5h),简化了操作,节省了试验药品费用.     

大豆品种的聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定研究

利用改良聚丙烯酰胺凝胶电泳法，对１２个南斯拉夫大豆品种种子贮藏蛋白进行了电泳分析。结果表明，１２个品种的蛋白质电泳组成表现了较高的多态性，每１品种均可根据各自的电泳图谱加以区分。尽管少数大豆品种表现相似的电泳模式，但在一些细微组分上仍存在差异     

大白菜非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的优化

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的检测效果受到凝胶聚合速度、片段迁移率等多种因素影响。以大白菜为供试材料,研究比较了凝胶聚合速度及PCR产物在不同浓度凝胶上的检测效果。不同浓度的凝胶是由2种〔40%(19∶1)和30%(29∶1)〕贮存液分别配制的4种浓度(5%,7%,9%,11%)。结果表明,在4～30℃,凝胶聚合速度随温度的升高而加快;APS保持不变,不同温度下TEMED∶APS合适配比也不同:4℃(冬季)时,TEMED/APS的合适配比是1∶10,25℃(春秋)、30℃(夏季),选择1∶20的配比为宜;2种不同贮存液配制的相同浓度凝胶检测效果不同,30%(29∶1)优于40%(19∶1),由前者配制7%的凝胶上DNA片段分离效果好,带型清晰,分辨率高。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳检测亚麻SSR标记

以亚麻为试验材料,提取亚麻基因组DNA,选择多态性SSR标记,并将标记产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,最后硝酸银染色,建立了一套有效、方便的应用于亚麻SSR标记的聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测方法。     

基于聚丙烯酰胺凝胶电泳的棉花EcoTILLING技术体系创建

以棉花纤维发育相关基因GhSUS1为目标基因,从EcoTILLING技术中常用的关键酶CELⅠ的提取、活性检测、目标基因引物设计及酶切等方面入手,开展了棉花EcoTILLING技术体系的创建研究。结果表明:所提取的CELⅠ活性高,稳定性好。在42℃、酶切体系为8μL PCR扩增产物中加入2μL粗酶液,与缓冲液等量混合,酶切45 min,能有效地对单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)所在的异源双链错配位点进行酶切。对棉花GhSUS1基因设计A和D染色体亚组特异性引物进行等位基因的多态性分析,结果表明:EcoTILLING结果与测序结果一致,说明建立的基于PAGE的Eco-TILLING技术体系稳定可靠,可用于棉花复等位基因发掘研究。     

微卫星DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术的探讨

采用PCR一非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、硝酸银染色检测DNA片段。结果表明,该方法检测DNA具有灵敏度高、背景浅、条带清晰等突出特点。聚丙烯酰胺凝胶电泳后采用银染技术分析,方便快捷,易长期保存,且减小了对人体、环境的毒害作用。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳检测南苜蓿SSR标记

以南苜蓿(Medicago polymorpha)为试验材料,用CTAB法提取南苜蓿基因组,选择已开发的蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)引物100对,分别在一年生苜蓿SSR-PCR反应体系和苜蓿属变种SSR-PCR反应体系的基础上进行PCR扩增,并将扩增产物进行8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,都得到了位点明显、背景清晰的条带。结果表明,南苜蓿均适合于现有的一年生苜蓿SSR-PCR反应体系和苜蓿属变种SSR-PCR反应体系,建立了一套有效、成熟的应用于南苜蓿SSR标记的聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测的方法,该方法可以用于南苜蓿杂交F1代的鉴定以及后期资源的遗传分析。     

SSR标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法改进

[目的]改良SSR标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,提高大规模SSR分子标记分析的工作效率。[方法]在利用SSR标记构建中国春/兰考大粒F2群体遗传图谱的基础上,对变性PAGE点样方法进行改进,并对中国春/兰考大粒筛选的122对差异引物进行组合分析。[结果]试验表明,引物扩增条带特异性强、覆盖范围不大即可采用两次点样法分析;两次点样和单次点样的凝胶扩增条带均清晰可辨;分析相同数量的样品,两次点样法较单次点样法节约了41%的试验时间,节约了50%的试剂用量。[结论]两次点样法简化了试验步骤,节约了试验成本,加速了试验进程,更适用于遗传作图。     

银杏营养贮藏蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳研究

营养贮藏蛋白质在木本植物的生长发育过程中起着重要的作用。应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对银杏不同部位的营养贮藏蛋白质进行了研究,经分析初步确定了两种营养贮藏蛋白质组分的分子量,探讨了其季节性变化规律,结果表明银杏皮层中的营养贮藏蛋白质含量均高于木质部中的含量。     

大白菜非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术影响因素研究

电泳技术是分子标记辅助育种技术的关键步骤,建立一套高效的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术体系可提高分子标记辅助育种技术的工作效率。以根肿病抗感大白菜作为试材,以凝胶聚合速度及凝胶条带的清晰度作为衡量标准,分别对电泳中的凝胶浓度、温度、促凝剂配比3个重要因素进行研究。结果发现凝胶浓度、温度、促凝剂配比均与凝胶聚合时间呈现负相关,但4种常用凝胶浓度制胶时间差异不明显,可主要根据目的产物的大小选择浓度。在凝胶质量方面,温度、促凝剂配比与凝胶的脆性呈负相关。综合分析,操作中环境温度为25～35℃,促凝剂配比为1∶10的条件,聚合速度适中,条带清晰,检测效果最佳。     

用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定家畜血清、禽卵清乳酸脱氢酶同工酶初报

<正> 前言乳酸脱氢酶(LDH)同工酶是动物体内一类很重要的酶。在糖酵解过程中,LDH 能催化丙酮酸还原成乳酸,从而完成葡萄糖的无氧酵解过程。由于组成 LDH 的亚基不同,LDH 有五种异构体,分别是 LDH_1、LDH_2、LDH_3、LDH_4,LDH_5,由于它们等电点(PH)、分子量和所带的电荷不同,故可通过电泳方法将其区分     

苹果过氧化物同工酶研究

采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定了３１个苹果品种过氧化物酶同工酶。嫩茎中酶带数量最多，共检出１３条酶带；同一品系内未表现特征酶带，杂种与亲本间谱型也明显不同；不同酶带谱型年间重复性良好，可作为品种识别及杂种基因型变异程度的鉴定依据。     

猕猴桃过氧化物同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,测定了猕猴桃不同种,不同器官,雌雄株以及嫁接苗与组培苗的过氧化物同工酶,对酶谱特征进行了分析。结果表明,美味猕猴桃（海沃德为代表）与中华猕猴桃（皖蜜为代表）叶片虽有共同的酶带,但都有自身酶谱的特异性,美味猕猴桃不同器官酶谱也具有特异性,猕猴桃雌雄株没有发现特殊的“性酶带”,但是雄株酶带活性明显高于雌性;中华猕猴桃嫁接苗与组培苗酶谱差异无规律可循。     

魟鱼软骨多糖的聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别

[目的]用聚丙烯酰胺凝胶电泳对魟鱼软骨多糖（RCG）进行定性鉴别。[方法]利用纯化RCG,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。[结果]RCG经纯化,基本实现了多糖的分离;根据聚丙烯酰胺凝胶电泳迁移率,可明显鉴别出魟鱼RCG。[结论]该法重现性较好,简单易行,可用于魟鱼RCG的定性鉴别。     

利用种子蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定玉米种子纯度的研究

利用种子贮存蛋白SDS-PAGE技术,对2份玉米母本 种子的蛋白质进行电泳分析,结果表明,它们的母本种子蛋白质电泳图谱差异明显,特征谱带稳定。种子蛋白电泳鉴定与田间小区种植鉴定结果之间纯度达97;以上,该技术可作为玉米杂交种和自交系种子纯度鉴定的一种手段。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳技术在虫生真菌研究中的应用（综述）

本文综述了用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术测定虫生真菌酯酶图谱和蛋白质肽谱的研究和应用情况,用该技术测得的虫生真菌酯酶同工酶谱已经应用于种下分类及其与毒力的关系,世代差异与遗传变异,优良菌株的筛选与物理诱变,菌株检测与放菌治虫效果评价。测得的蛋白质肽谱也已用于不同类别虫生真菌的分类和成分分析,本文地该技术在这方面应用的特点及其应用的特点及应注意的问题进行了讨论。