Determination on Huperzine A Content in Huperzia serrata( Thunb.) Trey.forma longipetiolata (Spring) Ching

[目的]建立HPLC法测定长柄石杉中石杉碱甲的含量.[方法]色谱条件:色谱柱为ZORBAX Extend-C18(150 mm×4.6mm,4.5μm),流动相为乙腈-浓度0.02 mol/L磷酸二氢钾(8:92,V/V),检测波长为310 nm,柱温为25℃,流速为1ml/min,进样量为10μl.[结果]石杉碱甲在0.046～0.460 μg/ml浓度范围内与峰面积呈良好线性关系(R =0.999 9),平均回收率为97.45％,RSD为2.70％,平均含量为0.025％.[结论]该方法简单、易行,可用于长柄石杉中石杉碱甲的含量测定.     

蛇足石杉中石杉碱甲的酶法提取研究

[目的]筛选蛇足石杉中石杉碱甲的酶法提取的最佳提取条件。[方法]采用纤维素酶酶解细胞壁,从而溶出更多的蛇足石杉细胞中的物质,并设计正交试验选出酶法提取的最佳提取条件。[结果]蛇足石杉中石杉碱甲的酶法提取的最佳工艺条件为纤维素酶用量0.125 g,酶解pH4.5,酶解温度60℃,酶解时间2.5 h;在此条件下,蛇足石杉中石杉碱甲的提取率为0.589‰;各因素中温度对纤维素酶的酶解效果影响最大。与酸提法相比,酶法提取的石杉碱甲的提取率提高了40.3%。[结论]该方法简便快捷、提取率高,可用来提取蛇足石杉中石杉碱甲。     

蛇足石杉体内抑制乙酰胆碱酯酶活性物质的内生真菌的分离

[目的]从蛇足石杉体内分离筛选出具有体外抑制乙酰胆碱酯酶活性的内生真菌。[方法]取野外采集的蛇足石杉的叶、茎和根进行表面消毒后接种于PDA培养基,分离出内生真菌后进行摇瓶发酵,超声提取其发酵产物,以DTNB法检测其发酵产物在体外抑制乙酰胆碱酯酶的活性。[结果]从根、茎、叶中分离得到194株内生真菌,在马铃薯葡萄糖液体培养基(PDB)中发酵后,对内生真菌发酵提取液进行体外AChE抑制活性检测;共有31株内生真菌显示出体外AChE抑制活性,抑制活性较强的有13株,抑制率在50.2%～80.5%。其中从蛇足石杉茎部位分离得到9株,叶部位分离得到4株。[结论]从蛇足石杉体内可分离出内生真菌,该内生真菌的发酵产物在体外有较强的抑制乙酰胆碱酯酶活性,这可能是寻找乙酰胆碱酯酶抑制药物的有效途径之一。     

液相色谱-串联质谱法快速测定蛇足石杉中的石杉碱甲

[目的]利用液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术建立一种快速测定蛇足石杉中石杉碱甲含量的分析方法。[方法]采用Shim-pack VP-ODS(150 L×2.0 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇与0.1%乙酸水溶液,梯度洗脱15 min,流速为0.3 m L/min,柱温保持在40℃,在质谱正离子模式下用多反应离子监测(MRM)模式来进行定量测定。[结果]在4.38~70.00μg/L的浓度范围内线性良好(r=0.998 9),回收率为96.0%~102.3%,RSD为2.18%;重现性好,变异系数为1.50%;定量检出限为0.438μg/L。[结论]该方法快速灵敏、结果准确、重现性好,对批量检测分析蛇足石杉中石杉碱甲含量有积极的参考意义。     

新疆展毛多根乌头中乌头碱分离及含量测定

[目的]研究展毛多根乌头有效成分乌头碱的分离及定量测定技术,为展毛多根乌头的开发利用提供试验依据。[方法]以乙醚为提取溶剂,从展毛多根乌头中分离其主要生物碱成分乌头碱(aconitine);采用改良异羟肟酸法,在波长512.6 nm波长处测定展毛多根乌头中乌头碱的含量。[结果]展毛多根乌头中乌头碱的含量为0.360 6%,平均回收率为97.40%。[结论]该定量分析方法简便、实用,显色稳定性好,为展毛多根乌头的开发利用提供了科学依据。     

忍冬不同器官中绿原酸的提取及含量测定

[目的]提取忍冬不同器官中的绿原酸并进行含量测定。[方法]采用酸乙醇回流法对＂巨花一号＂忍冬的藤、叶、花和花蕾中绿原酸进行提取,并采用高效液相色谱法对绿原酸进行检测和含量测定。[结果]忍冬不同器官中绿原酸的含量不同,其中花和花蕾中绿原酸的含量较高,藤和叶中含量较少;其排序为：花（3.798 mg/g）〉花蕾（3.795 mg/g）〉藤（2.558 mg/g）〉叶（2.185 mg/g）。[结论]从忍冬药材资源开发利用的角度而言,藤和叶也可以作为绿原酸提取和综合利用的材料。     

中药乌头中乌头碱含量测定

利用改良异羟肟酸铁法对郑州、洛阳等4地(市)市售乌头中双酯型乌头碱的含量进行定量分析,其含量在0.214%～0.388%之间.试验证明,本法灵敏、稳定、重现性好,回收率为99.71%.为兽医临床用药的安全性、有效性以及复方中乌头碱含量测定奠定了基础.     

石仙桃中总黄酮的提取及含量测定

采用单因素试验及正交试验设计,利用乙醇溶剂浸提结合微波辅助提取法对石仙桃(Phoidotaof chinensis Lind L.)总黄酮的提取工艺进行优化,并用分光光度计比色法测定提取的总黄酮含量。结果表明,石仙桃总黄酮提取的最佳工艺条件为微波功率300 W,提取时间30 min,温度60℃,料液比(m∶V,g∶m L)1∶20,乙醇体积分数80%。按照最佳工艺条件进行提取,石仙桃总黄酮提取量达31.41 mg/g。     

吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱提取工艺及含量测定

通过单因素试验研究吴茱萸碱、吴茱萸次碱的最佳提取工艺,测定不同采收期、不同处理后吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱含量.结果表明:吴茱萸碱、吴茱萸次碱提取工艺为,溶剂甲醇,超声波功率300 W,频率61 kHz,提取温度60℃,固液比1g:10mL,提取时间60 min;吴茱萸碱、吴茱萸次碱的含量在9月8日左右达到最高;修剪留分枝数多的含量较高;复合肥施加2次效果最佳;尿素和复合肥混合使用效果较差.在桂林地区,吴茱萸最佳采收期为9月上旬;修剪以轻剪为主;施加2次复合肥效果最好.     

高效液相色谱法测定不同年限三七根中皂苷含量

[目的]测定不同年限三七根中皂苷的含量。[方法]利用高效液相色谱法,对云南文山产区的三七主根中皂苷含量进行了测定,并探索了不同种植年限样品中皂苷含量的变化情况。色谱条件:色谱柱为Kromasil ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,紫外检测器检测波长为203 nm,柱温25℃。[结果]随着种植年限的增加,皂苷含量也相对增加,最佳种植的年限为3～4年。[结论]该方法简单易行,可用于不同年限三七根中皂苷的含量测定。     

千层塔中石杉碱甲的提取方法选择

［目的］优化选择千层塔中石杉碱甲的提取方法。［方法］采用Hypersil ODS2 C18柱,以乙腈∶磷酸盐缓冲液（pH值2.5）=20∶80（体积比）为流动相,流速1.0 ml/min,用紫外检测器于310 nm波长处检测。用酸提取-氯仿萃取-甲醇定容与酸提取-碱调pH值-过滤上柱的方法进行对比试验,选择千层塔中石杉碱甲的最佳提取方法。［结果］石杉碱甲的浓度在5-55 μg/ml与其峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 7）,RSD=0.95%。采用酸提取-氯仿萃取-甲醇定容的方法比较好,方法简单,快速,检测准确。用该方法进行提取,测得千层塔中石杉碱甲含量为0.40%。［结论］为更准确地测量千层塔中石杉碱甲提供了可靠的依据。     

石杉碱甲资源可持续利用研究进展

综述了有关石杉碱甲野生资源、人工栽培资源、组织培养资源、内生真菌资源的研究进展,为该资源的可持续利用提供了参考。     

3种抑菌剂对蛇足石杉内生真菌黑曲霉的抑制效果研究

[目的]探索3种抑菌剂对蛇足石杉内生真菌黑曲霉的抑制效果。[方法]采用平板涂布法分离获得供试菌,用菌丝生长速率法测定3种抑菌剂对黑曲霉的抑制效果。[结果]两性霉素B、苯甲酸钠、肉桂醛对黑曲霉的最低抑菌浓度分别为512.000 00 mg/L、4.00g/L、0.500 00 mg/L;EC50分别为1.910 00、150.000 00、0.120 00 mg/L,EC90分别为88.220 00、730.000 00、0.330 00 mg/L;3种抑菌剂中较优的抑菌剂为两性霉素B。[结论]该研究获得了3种抑菌剂的最低抑菌浓度,为蛇足石杉组织培养的深入研究提供了试验基础。     

高效液相色谱法测定八爪金龙及组方制剂中岩白菜素的含量

为测定八爪金龙及其组方制剂开喉剑中的有效成分岩白菜素,研究建立高效液相色谱(HPLC)法,以甲醇∶水(25∶75,V/V)为流动相,流速1.0 m L/min,柱温30℃,检测波长274 nm。结果表明,溶液中岩白菜素在0.585 6~58.560 0μg/m L时有良好的线性关系(r=0.999 5),平均回收率为103.17%,RSD为0.28%,该方法操作简单、稳定、准确、可行,可用于开喉剑及组方药材八爪金龙中岩白菜素的含量测定。     

方秆蕨中多糖含量的测定

[目的]确定方秆蕨多糖的最佳提取工艺,测定方秆蕨中的多糖含量。[方法]采用水提醇沉法提取方秆蕨多糖,研究料液比、提取时间、提取温度对多糖提取率的影响。采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖为标准品,蒸馏水为空白对照,于490 nm波长处分别测定对照品和供试品溶液的吸光度,按标准曲线计算方秆蕨中的多糖含量。[结果]方秆蕨多糖的最佳提取条件为料液比1∶40(g/ml)、温度80℃、时间2.5 h。[结论]方秆蕨多糖的含量为2.5%。     

中药萝藦中C21甾苷的含量测定

[目的]测定萝藦中C21甾苷的含量。[方法]以孕甾烯醇酮为标准物,采用磺基醋酸汞试剂法于510 nm波长处测定C21甾苷的吸光度值,并计算其含量。[结果]萝藦中C21甾苷含量为0.003 3 mg/ml,与相关文献中萝藦科植物中甾苷的含量接近。[结论]该方法准确率、重现性、线性关系等都满足科研和生产要求,可以用于萝藦中C21甾苷的含量测定。     

HPLC快速测定绞股蓝中槲皮素的含量

[目的]建立绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum（Thunb.）Makino]中槲皮素含量的简便、快速、准确检测方法。[方法]用Microsorb-MV100-5C18色谱柱（4.6mm×250.0mm,5μm）,ProStar325紫外可见检测器,流动相为甲醇-混合液（乙氰∶1.0%醋酸∶0.4%磷酸=30∶35∶35,V/V/V）（37∶63,V/V）,流速为0.6ml/min,检测波长为372nm,柱温为室温,进样量为20μl。[结果]槲皮素在0.64~25.60μg/ml范围内与峰面积线性关系良好（r=0.9999）,方法平均回收率大于96%（n=9）。[结论]该研究建立的方法简便、快速、准确。     

百两金药学研究概况

在广泛文献检索基础上,对百两金的种属、成分、药理和临床应用的研究进展进行综述,为进一步开发利用提供资料。