Liquid Suspension Culture of the Seeds of CAULIS DENDROBH

[目的]研究铁皮石斛种子的液体悬浮培养方法.[方法]以MS为基础培养基,设计了不同浓度的基础培养基、激素、天然附加物、pH、蔗糖等5个影响因子的15种培养液配方,筛选出铁皮石斛最适的液体培养条件.[结果]适中的无机盐浓度,NAA、较低的pH值、较高的蔗糖浓度以及适量的土豆汁都有利于铁皮石斛种子的萌发;试验优选出的相对适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/LNAA +80 g/L土豆汁+45 g/L蔗糖.[结论]筛选出了相对较合适的培养基配方,为铁皮石斛栽培种植提供了理论依据.     

铁皮石斛种子无菌萌发

[目的]研究铁皮石斛种子的无菌萌发方法。[方法]以改良MS+土豆熟汁液2.0%+蔗糖2.0%+琼脂0.65%+0.1 mg/L NAA为种子萌发培养基,将铁皮石斛种子播种后统计萌发率。[结果]铁皮石斛种子萌发率达90%以上,继代培养后组培苗生长正常。[结论]该研究建立了铁皮石斛种子的无菌萌发体系,为铁皮石斛实生苗的大批量生产奠定了基础。     

铁皮石斛不同外植体组培快繁技术比较

[目的]筛选适宜铁皮石斛繁殖的最佳方法。[方法]以铁皮石斛成熟蒴果和1年生植株茎段作为外植体,研究MS培养基中添加不同浓度激素对铁皮石斛种子和茎段诱导、增殖以及生根的影响,同时比较了传统玻璃兰花瓶与聚丙烯透明薄膜袋在铁皮石斛工厂化生产上的成本投入。[结果]适合铁皮石斛诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+120 g/L香蕉+35 g/L蔗糖+7.0 g/L卡拉胶;适合增殖的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+120 g/L香蕉+35 g/L蔗糖+7.0 g/L卡拉胶;适合生根的培养基为1/2MS+0.80 mg/L NAA+120 g/L香蕉+20 g/L蔗糖+7.0 g/L卡拉胶。对于工厂化生产而言,选用蒴果作为外植体具有利于无菌体系建立、增殖倍数多和苗长势整齐一致等优点,聚丙烯透明薄膜袋可以代替传统的玻璃兰花瓶。[结论]该研究可为减少铁皮石斛组培苗的生产成本、缩短生长周期、获得大量优质组培苗提供一定的理论依据。     

野生鼓槌石斛的有性扩繁方法

[目的]采集野生鼓槌石斛的成熟蒴果,利用组培无菌快繁技术获得大量野生鼓槌石斛种苗。[方法]将野生鼓槌石斛成熟蒴果消毒灭菌,并将其种子播种于MS培养基上获得大量原球茎,然后分别转接到不同的培养基上,最后在不同阶段的培养基上筛选出适合野生鼓槌石斛分化和生长的培养基。[结果]将野生鼓槌种子在MS培养基上培养,种子萌发率达95%以上;最利于原球茎分化的培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+土豆泥4%+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,成苗率高、出苗整齐;最适幼苗生长培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+香蕉汁7%+土豆泥2%+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,小苗粗壮、叶片浓绿;最适生根壮苗培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+香蕉汁7%+土豆泥2%+AC 0.5 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,瓶苗生根多而粗壮,叶片浓绿生长整齐。[结论]该研究为野生鼓槌石斛资源的收集与保存提供了参考。     

铁皮石斛种子试管苗的快速繁殖研究

为研究铁皮石斛种子试管苗的快速繁殖技术,以铁皮石斛的种子为外植体。在不同培养基、不同的激素组合进行诱导产生试管苗,用松树皮作为移栽基质。结果表明:铁皮石斛种子在不同激素的培养基上均能萌发;不同培养基对铁皮石斛原球茎的增殖、分化有明显差异,其顺序依次为改良MS>N6>MS>1/2N6>1/2改良MS>1/2 MS,以改良MS培养基最好;不同激素组合对铁皮石斛原球茎的增殖、分化有明显差异,其顺序依次为B5>B2>B3>B1>B4;不同激素组合对铁皮石斛生根有影响,其顺序依次为C2>C3>C1。因此,比较适合铁皮石斛种子萌发的激素是1/2MS+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L;适于铁皮石斛原球茎增殖、成苗的培养基及激素组合为改良MS+6-BA0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L;适于铁皮石斛原生苗生根的培养基为改良MS+ABT60.6 mg/L+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖15 g/L。在改良MS培养基中不加任何水果汁诱导铁皮石斛种子,获得了大量试管苗,移栽成活率达到90%以上。     

铁皮石斛离体快繁技术

以铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为研究对象,通过对不同无机盐浓度、不同培养温度以及不同激素浓度配比等影响因子进行研究,确立以种子无菌萌发为途径的铁皮石斛组培快繁体系。结果表明:25℃时,1/2MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA培养基配方最有利于铁皮石斛原球茎的诱导和幼苗分化;1/2MS+0.5 mg/L NAA培养基配方最适合铁皮石斛幼苗生根,生根率达100%。     

鼓槌石斛种子萌发培养与小苗组培快繁技术研究

[目的]利用鼓槌石斛蒴果,通过无菌播种萌发发育成苗及小苗快繁技术试验研究,从而获得大量种苗。[方法]用鼓槌石斛种子通过无菌播种获得大量原球茎,分别转接到4组不同的诱导芽培养基上,筛选出最适合鼓槌石斛小苗分化和成长的培养基,以其设置以N6为基本培养基,添加浓度均为1.0、1.5、2.0 mg/L的NAA和IAA,筛选最适合鼓槌石斛小苗生根壮苗培养基。[结果]将鼓槌石斛种子在MS＋6-BA1mg/L＋10%香蕉汁＋20 g/L蔗糖＋6 g/L琼脂＋1 g/L AC培养基上进行培养种子,种子萌发率达90%以上;最利于原球茎分化的培养基为N6＋NAA2 mg/L＋BA0.5 mg/L＋10%香蕉汁＋20 g/L蔗糖＋0.5 g/L牛肉蛋白胨＋5.8 g/L琼脂＋0.5g/L AC,培养出的苗整齐度高,均匀;最佳生根壮苗培养基为N6＋NAA 1.5 mg/L＋10%香蕉汁＋20 g/L蔗糖＋5.8 g/L琼脂＋1 g/LAC,苗生根数多、粗壮、整齐,叶浓绿。[结论]该研究结果为鼓槌石斛快速繁育技术提供了参考。     

鼓槌石斛种子萌发培养与小苗组培快繁技术研究（英文）

[目的]利用鼓槌石斛蒴果,通过无菌播种萌发发育成苗及小苗快繁技术试验研究,从而获得大量种苗。[方法]用鼓槌石斛种子通过无菌播种获得大量原球茎,分别转接到4组不同的诱导芽培养基上,筛选出鼓槌石斛最适合小苗分化和成长的培养基,以其设置以N6为基本培养基,添加浓度均为1.0、1.5、2.0mg/L的NAA和IAA,筛选最适合鼓槌石斛小苗生根壮苗培养基。[结果]将鼓槌石斛种子在MS＋6-BA1mg/L＋10%香蕉汁＋20g/L蔗糖＋6g/L琼脂＋1g/LAC培养基上进行培养种子,种子萌发率达90%以上;最利于原球茎分化的培养基为N6＋NAA2mg/L＋BA0.5mg/L＋10%香蕉汁＋20g/L蔗糖＋0.5g/L牛肉蛋白胨＋5.8g/L琼脂＋0.5g/LAC,培养出的苗整齐度高,均匀;最佳生根壮苗培养基为N6＋NAA1.5mg/L＋10%香蕉汁＋20g/L蔗糖＋5.8g/L琼脂＋1g/LAC,苗生根数多、粗壮、整齐,叶浓绿。[结论]该研究结果为鼓槌石斛快速繁育技术提供了参考。     

铁皮石斛高效快速繁殖体系研究

为了建立铁皮石斛(Dendrobium officinale)种子高效快速繁殖体系,以铁皮石斛种子为外植体,在萌发培养基上萌发为原球茎,原球茎经悬浮培养增殖,再接种于分化培养基分化、生根长成完整植株。结果显示,原球茎增殖最佳培养基为1/2 MS培养基+0.1 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+0.33 g/L(NH4)2SO4+0.525 g/L KNO3+30 g/L蔗糖;原球茎分化最佳培养基为N6+0.1 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+100 g/L土豆汁+25 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂+1 g/L活性炭;幼苗生根最佳培养基为1/2 MS+0.3 mg/L NAA+50 g/L土豆汁+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂+1 g/L活性炭;悬浮培养与固体培养相结合的技术优于固体组织培养技术,其具有生长周期短、节省空间、节约成本,促进原球茎增殖、提高分化率,促进生根的特点,可为铁皮石斛快繁和大规模化生产提供基础。     

铁皮石斛类原球茎液体悬浮培养增殖体系构建

以铁皮石斛(Dendrobium officinale)类圆球茎为研究材料,系统地研究了影响其液体悬浮培养增殖的诸多因素,如不同质量浓度的MS基本培养基、NAA、蔗糖、椰乳以及培养基pH值和接种量,旨在构建铁皮石斛类圆球茎液体悬浮培养增殖体系。研究结果表明:在液体悬浮培养条件下,最有利于铁皮石斛类原球茎的生长增殖的培养基为1/2MS基本培养基中添加1.0 mg/L NAA,50 g/L椰乳,蔗糖30 g/L;接种量为40 g/L。     

白芨种子萌发及其原球茎高效增殖体系建立

[目的]筛选白芨原球茎诱导和增殖的最适培养基,建立白芨原球茎高效增殖体系,为白芨种苗工厂化组培生产提供技术支持.[方法]以白芨种子为外植体,筛选适宜其无菌萌发的灭菌方法;以MS或1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的植物生长物质和附加物,通过单因素试验,确定最佳光照和温度条件,筛选最适合其原球茎诱导的培养基;通过正交试验,筛选最适合其增殖的培养基.[结果]采用75%乙醇处理白芨蒴果10 min,无菌萌发率达90.0%,且种子萌发不受影响.在原球茎诱导过程中,30.0 μmol/m2·s光照强度和25 ℃温度环境有利于原球茎诱导;最适合原球茎诱导的培养基为1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA.在原球茎增殖过程中,添加土豆泥、椰子汁、香蕉泥等附加物对原球茎增殖有益,其中添加50.0 g/L土豆泥的增殖效果最佳.正交试验结果表明,原球茎增殖的最佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+50.0 g/L土豆泥,增殖倍数达5.270.[结论]建立的白芨原球茎高效增殖体系可在白芨种苗工厂化组培生产中推广应用.     

基于原球茎培养的白芨育苗技术研究

[目的]研究白芨原球茎增殖液体培养及原球茎直播育苗技术。[方法]通过正交试验筛选MS培养基浓度、马铃薯汁浓度及KT浓度,对原球茎增殖液体培养进行研究;通过单因素试验筛选原球茎直播育苗的播种基质。[结果]白芨原球茎增殖液体培养各因素的优势组合为MS+KT 1.0 mg/L+马铃薯汁120 g/L;白芨原球茎直播有比较优势的基质为腐殖土50%+碎木屑50%+NAA 0.5 mg/L+香蕉汁100 g/L。[结论]白芨原球茎增殖液体培养及原球茎播种育苗的技术路线在生产上具有可行性,该方法简化了培养程序。     

金钗石斛的离体快繁体系研究

[目的]研究金钗石斛的离体快繁体系。[方法]以金钗石斛的种子为材料,采用组培法进行离体培养。[结果]适宜于金钗石斛圆球茎诱导增殖及芽分化的培养基为:MS+1 mg/L BA+0.02 mg/L NAA+浓度2%马铃薯+浓度3%白糖,增殖系数为7～10。生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L BA+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L GA+浓度2%香蕉+浓度2%马铃薯+浓度2%白糖;生根率达98%以上,移栽成活率在90%左右。[结论]该方法对金钗石斛的离体快繁体系进行了研究,为组培繁殖金钗石斛种苗提供了参考。     

兴仁金线莲丛生芽诱导增殖研究

[目的]筛选兴仁金线莲丛生芽的诱导和增殖的最佳培养基。[方法]用野生兴仁金线莲植株茎段作外植体,以MS为基本培养基,并添加不同浓度的6-BA和NAA,诱导丛生芽,筛选最佳培养基配方。[结果]MS是兴仁金线莲快繁最佳基本培养基;2.0～3.0 mg/L的6-BA有利于丛生芽的诱导;1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA有利于芽的生长;最佳蔗糖浓度为25 g/L。[结论]MS+2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+25 g/L蔗糖为丛生芽增殖的最佳培养基配方。     

墨兰的无菌播种及根状茎的增殖研究

[目的]研究墨兰无菌播种和根状茎的增殖情况,为墨兰的组织快繁提供参考。[方法]对金嘴墨兰的种子进行无菌播种,并对不同的培养基成分与培养条件在墨兰根状茎生长、增殖和生根的影响进行了研究。[结果]金嘴墨兰较适宜的种子萌发培养基为1/2 MS或改良MS;在根状茎增殖过程中,KC培养基的增殖效果最好,增殖倍数为8.1,其次为MS培养基,增殖倍数为7.4;6-BA和NAA的比例控制在2∶1效果较好;在墨兰生根培养过程中所加入的5种营养附加物香蕉泥、椰子汁、红薯汁、马铃薯汁、玉米汁都能够促进生根。[结论]根状茎增殖的较适宜培养基为KC+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.1 g/L+0.1%炭粉;红薯汁对墨兰的生根有显著的促进作用。     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

常绿杂交杜鹃组培快繁技术研究

[目的]研究常绿杂交杜鹃的组培快繁技术.[方法]以常绿杂交杜鹃一年生半木质化茎段为外植体,进行组织培养技术研究.[结果]外植体在1/2MS+ 1.8 mg/L ZT+O.1 mg/L IBA +30 g/L蔗糖+4 g/L琼脂,pH 5.0的培养基上诱导率可达96.67％;最佳继代培养基为1/2MS+ 1.2 mg/L ZT +0.1 mg/L NAA +30 g/L蔗糖+4 g/L琼脂,pH 5.0,此时芽苗生长健壮;最适生根培养基为1/2MS+ 1.0mg/L IBA+ 1.5 mg/L NAA +30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+3 g/L活性炭,pH 5.0,此时生根率可达95％.[结论]为常绿杂交杜鹃的快速繁殖提供技术支持.     

白及种子液体悬浮培养原球茎的研究

[目的]研究白及种子在液体悬浮培养条件下萌发的最佳条件,为快速繁殖白及幼苗提供技术支撑。[方法]研究不同光照条件、不同培养基和不同激素及浓度对白及种子萌发的影响。[结果]黑暗有利于白及种子萌发,1/2 MS适宜作为白及种子萌发基本培养基。植物激素对白及种子无菌萌发有一定的促进作用,其中,添加1.0 mg/L NAA对白及萌发促进效果最明显。[结论]在黑暗条件下,以1/2 MS+1.0 mg/L NAA为萌发培养基,白及种子萌发率高,萌发整齐一致,且原球茎生长速度一致。     

罗布麻种子诱导分化培养基的筛选

[目的]筛选罗布麻种子诱导分化的最佳培养基。[方法]以MS培养基为基础培养基,选择无污染的带皮罗布麻种芽（露白）作为外植体,考察不同浓度NAA对罗布麻种子诱导分化的影响,筛选出最佳的培养基。[结果]不同浓度的NAA均能促进罗布麻种子成活,且不同浓度见无显著性差异。罗布麻种子的最佳培养基为：MS＋0.02mg/LNAA＋1.00mg/LIBA＋10g/L琼脂＋30g/L蔗糖。[结论]该研究为罗布麻的规模化生产奠定了基础。