不同蛋白酶酶解产物活性大豆肽分子量分布状态的研究

研究不同蛋白酶的酶解产物活性大豆肽的分子量分布状态.用6种单一酶和6种复合酶对大豆分离蛋白进行酶解,采用高效液相色谱分析,计算分子量,界定出分子量分布范围.据此考核大豆肽含量及分子量分布状态,判定不同蛋白酶的水解效果.结果表明,6种单一蛋白酶水解生成的蛋白和肽分子量范围差异很大,大豆蛋白改性酶水解效果最好,酶解后分子量分布范围在6 441～144 Dalton之间,MW≤1 000 Dalton的组分占97.42%,符合肽的标准.6种复合蛋白酶水解生成的蛋白和肤分子量范围差异也很大,以大豆蛋白改性酶与蛋白液化剂组合最好,其分子量范围在4 560～141 Dalton之间,MW≤1 000 Dalton的组分占99.52 %.     

罗非鱼鱼皮酶解物对罗非鱼鱼片的冷冻保护作用

【目的】以罗非鱼鱼皮为研究对象,评价其酶解产物的冷冻保护活性,为新型安全、高效的无磷 抗冻剂开发提供基础数据。【方法】以水解度为指标,对碱性蛋白酶的酶解温度、pH 值、酶添加量进行单因 素试验,再采用正交试验确定最佳酶解时间,使用高效体积排阻色谱法对优化条件下所得酶解产物进行分子量 测定,以解冻失水率、盐溶性蛋白含量、Ca2+-ATPase 活性、巯基含量为抗冻活性指标对酶解产物的冷冻保护 作用效果进行探究。【结果】使用碱性蛋白酶水解罗非鱼皮,正交试验得到其最优酶解条件为温度 55 ℃、pH 7.5、 酶添加量为 0.7%,确定最佳酶解时间为 3 h;优化条件下的酶解产物分子量主要集中在 367.05~6 264.80 u。在 5% 剂量条件下,6 周冻藏期内酶解产物处理的鱼肉失水率、盐溶性蛋白含量、Ca2+-ATPase 酶活性、总巯基等冷冻 保护作用生化指标均接近或优于含磷抗冻剂处理,并显著优于空白对照。【结论】罗非鱼皮碱性蛋白酶酶解产 物对罗非鱼片的冷冻变性有显著抑制作用。     

扇贝加工废弃物蛋白酶解及其酶解产物分子量分布的研究

对用复合酶酶解扇贝加工废弃物制备水解蛋白的工艺进行了研究,通过正交试验方法确定了用两种复合酶酶解的最适水解条件。结果表明,用枯草杆菌中性蛋白酶和风味酶复合酶酶解的最佳酶解参数为:加酶量比为2∶1,温度为65℃,pH为7.0,时间为5 h,水解液氨基酸态氮含量为50.3%,蛋白质水解度为95.5%。用木瓜蛋白酶和风味酶复合酶酶解的最佳酶解参数为:加酶量比为2∶1,温度为65℃,pH为7.0,时间为5 h,水解液氨基酸态氮含量为43.2%,蛋白质水解度为85.0%。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析法对水解产物的分析结果表明,两种混合酶的酶解产物为蛋白肽和游离氨基酸,其相对分子质量均集中分布在585和150左右。     

天然橡胶分子量、分子量分布及其性能的研究

研究了5个品系天然橡胶的分子量、分子量分布及其生胶的P0、PRI、门尼粘度,混炼胶的硫化特性和硫化胶的物理机械性能。结果显示:热研88-13生胶的数均分子量、重均分子量、粘均分子量较低,分子量分布较宽;热研8-79生胶的数均分子量较高,分子量分布较窄;其余各品系橡胶的数均分子量、重均分子量、粘均分子量和分子量分布较为接近。     

波纹巴非蛤酶解产物脱色脱腥及其分子量分布研究

为充分利用波纹巴非蛤蛋白资源,采用复合酶水解制备酶解液,以感官值和蛋白回收率为指标,选取粉末活性炭(氧化锌炭、磷酸炭)、颗粒活性炭、硅藻土(10#、300#)、树脂(LX-32、LSA-821),采用单因素试验对波纹巴非蛤酶解液进行脱色脱腥,综合确定最佳吸附条件并筛选出最佳吸附剂。以酶解液、树脂体积质量比及流速为单因素优化最佳吸附剂柱层析分离条件,并采用凝胶层析分析脱色脱腥后酶解液的分子量分布。结果表明:树脂LX-32的动态吸附脱色脱腥效果最佳,最佳脱色脱腥工艺为酶解液与树脂(V∶W)比2.5∶1、流速5 BV/h,在此条件下,酶解液感官值为7.8,蛋白回收率为78.70(±0.47)%,分子量分布范围147~4 729 u的组分所占比例为75.21%,具有较好的品质,可作为保健与营养食品基料。     

罗非鱼鳞胶原蛋白的提取及其酶解产物的抗氧化性

以罗非鱼鳞为原料,提取酸溶胶原蛋白(acid-soluble collagen,ASC)和酶促酸溶胶原蛋白(pepsin-soluble collagen,PSC),并对PSC的理化性质及其酶解产物抗氧化性进行探讨.实验结果表明: 0.1 mol/L HCl提取ASC和PSC的得率分别为3.52%和14.88%;PSC氨基酸组成中,每1000个氨基酸残基甘氨酸为351个,亚氨基酸脯氨酸和羟脯氨酸为180;PSC强吸收峰在205 nm处,磷酸盐缓冲液检测PSC的性质,与I型胶原蛋白相符.PSC经胃蛋白酶水解3 h, 过氧化抑制率达到82.8%,抗氧化效果略优于等量的Vc.     

右旋糖酐水解改善右旋糖酐分子量分布的研究

在右旋糖酐原料药生产工艺改进研究中,遇到右旋糖酐发酵水平降低时,右旋糖酐盐酸水解的还原糖变化和重均分子量关系异常。随后进行了蔗糖和右旋糖酐盐酸水解的竞争性、右旋糖酐酶专一性、不同分子量右旋糖酐盐酸水解特异性、盐酸水解和右旋糖酐酶解制备右旋糖酐40等研究。结果表明:蔗糖水解具有极强的竞争性,同一条件下,蔗糖的盐酸水解是右旋糖酐的8倍;右旋糖酐酶不降解蔗糖,专一性地降解右旋糖酐;从T-5到T-2000的盐酸水解基本保持在同一水平,T-10000远远高于其他;盐酸水解制备的右40分子量分布为,重均分子量33 000～36 000,10%大分子120 000,10%小分子5000;右旋糖酐酶酶解制备的右旋糖酐分子量分布为,重均分子量38 000～42 000,10%大分子110 000,10%小分子7 000,右旋糖酐酶解制备右40可以改善分子量分布;盐酸水解制备右40的收率大于右旋糖酐酶解制备右40,因此右旋糖酐酶解制备右40等原料药工艺需要进一步研究。     

鲤鱼肌肉中胶原蛋白酶的分离纯化与性质分析

利用明胶酶谱法,在鲤鱼肌肉中检测到了一种具有分解胶原蛋白能力的丝氨酸蛋白酶.通过硫酸铵盐析、DEAE-Sephacel和Phenyl-Sepharose等一系列柱层析法,纯化得到了分子质量为70 ku,能够降解胶原蛋白的丝氨酸蛋白酶（Collagenolytic Serine Proteinase,CSP）.性质分析表明,CSP在弱碱性条件下显示活性,最适温度为30℃;丝氨酸蛋白酶抑制剂特异抑制CSP的活性.CSP能有效地分解鲤鱼肌肉中的I型胶原蛋白,提示其可能在鱼体死后肌肉胶原蛋白降解中发挥着重要的作用.     

大米淀粉的分子量分布及其与粘性的相关性研究

【目的】研究大米淀粉的分子量分布和粘性，探讨天然淀粉（直链淀粉和支链淀粉的混合体系）的分子结构与特征粘度的关系。【方法】以6种大米淀粉为原料，采用凝胶色谱法和乌式粘度计测定大米淀粉的分子量分布和特征粘度，用非线性回归拟合分子量分布与特征粘度关系的数学模型。【结果】大米淀粉主要由支链淀粉、中间级分和直链淀粉3个级分组成。6种大米支链淀粉的平均相对分子质量约为0.90×108～15.60×108 g•mol-1，直链淀粉的平均相对分子质量约为4.06×106～6.58×106 g•mol-1。支链淀粉分子的分子量分布范围较直链淀粉分子的窄。中间级分的分子量分布较宽。大米淀粉的特征粘度约为77.65～237.53 g•g-1。【结论】天然大米淀粉的比浓粘度、比浓对数粘度与浓度的关系呈二次曲线的特征。当支链淀粉的平均相对分子质量和摩尔比较大时，淀粉的特征粘度较高，较大的直链淀粉平均相对分子质量和摩尔比使特征粘度减小，用指数模型拟合淀粉分子量分布规律与特征粘度的关系可以达到较高的精度，该模型可为定量描述天然淀粉或直链淀粉和支链淀粉混合体系的粘度与其分子结构的关系提供一种方法。     

鳕鱼皮胶原蛋白酶解液的制备及抗氧化研究

[目的]利用酶解法从鳕鱼皮中提取胶原蛋白肽,研究其抗氧化能力。[方法]以鳕鱼鱼皮为原料,采用胃蛋白酶进行酶解,通过正交试验研究pH、水解温度、加酶量及水解时间4个因素对酶解鳕鱼皮的影响,确定胃蛋白酶酶解鳕鱼皮的最佳条件,并采用试剂盒法对酶解产物进行抗氧化活性研究。[结果]各因素对酶解鳕鱼皮的影响为水解时间〉水解温度〉加酶量〉pH,胃蛋白酶酶解鳕鱼皮的最佳工艺条件为：加酶量4%、温度37℃、pH 3、时间3 h。此条件下,蛋白质水解度可达到6.91%。胃蛋白酶酶解鳕鱼皮得到的胶原肽粗品具有一定的抗氧化能力,并对超氧阴离子自由基具有较强的清除作用。[结论]该研究为开发新的抗氧化剂提供科学参考。     

Study on Enzymatic Hydrolysis of Gadus morrhua Skin Collagen and Molecular Weight Distribution of Hydrolysates

Process parameters on enzymatic hydrolysis and molecular weight （MW） distribution of collagen hydrolysates from Gadus morrhua skin were investigated. The optimal process parameters were obtained by the single-factor and orthogonal experiments. The molecular weight distribution of hydrolysates was determined using both Sephadex G25 partition and high speed liquid chromatography electricity spray mass spectrum （HPLC-ESI-MS）. Collagen hydrolysates were first gained by an alkaline protease ＂alcalase＂ for 3 h at temperature （50~C）, pH （10.0）, substrate concentration （75 g L-~）, and E/S （3%）. The molecular weight distribution of collagen hydrolysates ranged from 300 to 1 500 Da, and most of peptides were under 1 200 Da. Sephadex G25 partition and HPLC-ESI-MS should be successfully employed to determine the molecular weight distribution of collagen hydrolysates.     

鲮胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)cDNA的分子克隆和序列分析

采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法，从鲮肝脏总RNA中扩增出胰岛素样生长因子-I（IGF-I）基因，克隆至质粒PUGm-T。测定该基因序列，推导其编码的蛋白质序列。克隆的鲮IGF-IcDNA编码序列包括信号肽、B、C、A、D和E6个区域，共161个氨基酸残基。与鲤IGF-I比较，信号肽由44个氨基酸残基组成比鲤少17个，成熟肽核苷酸序列和氨基酸序列的同源性分别为95.2%和100%,E区域分析结果表明，克隆的鲮IGF-I序列属于IGF-I Ea-2亚型。     

鲮胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)cDNA的分子克隆和序列分析

采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法，从鲮肝脏总RNA中扩增出胰岛素样生长因子-I（IGF-I）基因，克隆至质粒PUGm-T。测定该基因序列，推导其编码的蛋白质序列。克隆的鲮IGF-IcDNA编码序列包括信号肽、B、C、A、D和E6个区域，共161个氨基酸残基。与鲤IGF-I比较，信号肽由44个氨基酸残基组成比鲤少17个，成熟肽核苷酸序列和氨基酸序列的同源性分别为95.2%和100%,E区域分析结果表明，克隆的鲮IGF-I序列属于IGF-I Ea-2亚型。     

纤维素微球的分子质量及其分布

[目的]采用黏度法和凝胶渗透色谱法(GPC)测定纤维素和纤维素微球的分子质量,为研究纤维素微球的结构和性能关系提供基础数据。[方法]黏度法以镉乙二胺溶液为溶剂,通过乌式粘度计,25℃下测定溶液的特性粘数η来计算纤维素分子量;GPC法以8%的LiCl-N,N-二甲基乙酰胺(LiCl-DMAc)为溶剂,0.5%的LiCl/DMAc为流动相,测定纤维素和纤维素微球的相对分子质量及其分布。同时通过对测定结果的分析,对2种方法进行对比研究。[结果]黏度法测定纤维素和纤维素微球的粘均分子量Mη分别为224 532和16 686;GPC测定纤维素和纤维素微球的重均分子量Mw分别为284 196和22 345。[结论]GPC的测定结果较接近真实值,能够真实地反映纤维素和纤维素微球分子量分布的特性。     

红枣多糖提取工艺参数的优化及分子量的分布研究

以正交法优化了红枣多糖的热水浸提工艺参数,采用分级醇沉和分步醇沉的方法研究了红枣多糖分子量的分布。结果表明,热水浸提红枣多糖的最优工艺条件为料液比1∶15、温度100℃、时间6h、提取2次;在醇浓度小于80%时,多糖得率与醇浓度呈指数相关;乙醇浓度达80%时,可沉淀出大部分红枣多糖;分步醇沉试验结果表明,红枣多糖的分子量分布广泛,以60%和70%醇浓度沉淀出的中等分子量的多糖比例最多,低分子量和高分子量红枣多糖所占比例较少。     

基于分子量分布的生活污水荧光光谱研究

采用超滤及微滤膜法对生活污水进行分级,以荧光光谱为基本分析手段,结合荧光区域积分(FRI)法研究不同分子量区间组分的荧光特性。结果表明,不同分子量区间水样的同步荧光光谱图(SFS)中均含有3类荧光峰,分别为类蛋白质峰、类富里酸峰及类腐殖酸峰,其中类蛋白质峰荧光最强;类蛋白质、类腐殖酸及类富里酸的SFS区间积分强度大小顺序为类蛋白质区域类腐殖酸区域类富里酸区域,表明生活污水中蛋白质含量最高,腐殖酸次之,富里酸最少;各水样三维荧光光谱(EEM)图中主要存在4类荧光峰,分别为Peak T1、Peak T2、Peak A、Peak C,其中类蛋白质峰强度明显强于类腐殖酸;荧光区域积分(FRI)分析表明,类蛋白质占总标准体积60%~70%,进一步表明蛋白质为水体有机物的主要成分;膜孔径越小,类腐殖酸含量越高,腐殖化程度越高。     

低分子量卡拉胶及其衍生物的生物学活性研究进展

综述了低分子量卡拉胶及其衍生物在抗肿瘤、抗病毒、抗凝血等方面的生物学活性及其作用机理的研究进展,并阐述了活性片段的构效关系。     

大豆多肽分子质量分布与苦味的确定

利用葡聚糖凝胶（Sephadex G-25)柱层析和高压液相色谱（HPLC）测定大豆多肽分子质量与水解度以及分子质量与苦味之间的关系。试验结果表明，随着水解度的增加，大豆蛋白水解物分子质量变小，当水解度约为25％时，其分子质量绝大多数在500－1000u之间。分子质量为500－1000u的大豆多肽苦味较强。     

载体对聚丁二烯分子量分布的影响

研究了稀土ziegler-Natta型载体催化剂中载体对聚丁二烯分子量分布的影响。实验中发现载体的加入使聚合物的分子量分布变宽,说明载体增加了稀土催化体系的链转移速率。