一种84K杨再生体系的建立

将脱分化与再分化过程分开,探讨不同培养基和激素配比对黑暗条件下84K杨叶片及茎段外植体产生愈伤组织及愈伤组织诱导出芽的影响.结果表明,84K杨叶片产生愈伤组织的高效培养基为MS+KT 0.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;茎段为WPM+KT0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L.愈伤组织诱导出芽的高效培养基为WPM+TDZ 0.05 mg/L+6-BA 0.5 mg/L.为下一步获得高效的84K杨转基因体系提供一个高效受体系统.     

珍稀植物香果树植株再生体系的建立

通过不定芽直接再生和经愈伤组织诱导器官发生两种途径,建立了香果树快速、高频率发生的植株再生体系,探讨了不同外植体（幼叶切块、茎段、叶柄和根）、叶片放置方式、植物生长调节剂和培养条件对不定芽直接再生和愈伤组织诱导器官发生的影响.香果树愈伤组织诱导器官发生结果表明:不同外植体在MS附加1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L 2,4-D的培养基上愈伤组织诱导率均为100%,其中叶片外植体叶面向下放置效果最好;愈伤组织在MS添加0.5 mg/L 6-BA和0.5 mg/L NAA的培养基上不定芽的分化率为94.35%.香果树不定芽直接再生结果显示:叶片外植体在MS添加6-BA或ZT的培养基上,不定芽直接再生率均高达100%,其中在MS附加2.0 mg/L 6-BA培养基上,产生的不定芽数目多,生长旺盛;附加1.0 mg/L ZT 培养基上,不定芽数目多达56.67个/cm[[sup]]2[[/sup]],但生长较弱.黑暗预培养有利于香果树叶片外植体不定芽的再生.两种途径得到的不定芽转到1/2 MS培养基上均可生根,生根率达100%,附加1.0 mg/L 的IBA和0.5%的活性炭有利于再生植株根的生长.      

苎麻叶片高效再生体系的建立

以湘苎2号、湘苎3号、新宁青麻、四川洪县园麻的叶片为材料,构建4个品种高效、稳定的不定芽再生体系. 湘苎2号、湘苎3号、新宁青麻、四川洪县园麻最适诱导愈伤组织及分化不定芽的培养基分别为MS+0.7 mg/L TDZ+0.02 mg/L 2,4-D,MS+0.3 mg/L TDZ+0.01 mg/L 2,4-D,MS+0.3 mg/L TDZ+0.05 mg/L 2,4-D,MS+ 0.9 mg/L TDZ +0.05 mg/L 2,4-D;不定芽分化率分别为83.3%,81.7%,90.0%,86.7%;4个品种再分化时出现丛生芽,新宁青麻愈伤组织的平均再生不定芽数达2.62个,其他3个品种也都有数量不等的丛生芽产生,不定芽生根培养基为MS+ 0.05 mg/L NAA;叶块经过添加6%蔗糖培养基培养2周,再转入含3%蔗糖的培养基中培养,其中经6%蔗糖培养能显著提高湘苎2号、新宁青麻、四川洪县园麻不定芽分化率、平均再生不定芽数.     

二倍体马铃薯野生种高效再生体系的建立

以二倍体马铃薯野生种(Solanum cardiophyllum)的叶片和茎段为材料,进行离体再生体系的研究.结果表明,叶片和茎段愈伤组织最适诱导培养基分别为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,平均诱导率分别达93.75%和99.26%;来源于叶和茎段的愈伤组织不定芽分化的最适培养基分别为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA<,3> 2.5 mg/L和MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA<,3> 5.0 mg/L,不定芽平均分化率达96.43%和97.25%.生根培养基以MS+NAA 0.3 mg/L效果最好,平均生根率达100%.     

花生高效再生体系的建立初报

为了建立花生高效再生体系,选用外引及自选共8个花生品种(系)胚小叶作外植体,研究愈伤组织诱导率和不定芽分化率。结果表明:品种间愈伤组织诱导率和不定芽分化率均差异显著。品种冀花4号愈伤组织诱导率最高,为98%;太空1号、唐油4号、豫花9626、花育20较高,泉花646、阜花13次之;品系452-2最低,为43%。不定芽分化率为5%~73%,其中冀花4号最高,为73%;太空1号68%较高;豫花9626次之,为35%;花育20、泉花646和452-2较低,分别为13%、11%和10%;阜花13、唐油4号最低,均为5%。     

甜魔芋愈伤组织诱导与植株再生研究

以甜魔芋球茎为外植体,进行愈伤组织诱导、芽分化及植株再生研究。结果表明：球茎在MS附加1.5mg／LBA和1．5mg／LNAA的培养基中,愈伤组织诱导率达100％;在MS附加1．0∽1．5mg/LBA和0．2mg/LAA分化培养基中,其分化率达90％以上;不定芽在生根培养基MS附加0．5mg／LBA和0．2mg/LNAA上,能100％生根形成完整的植株。     

铃兰愈伤组织诱导及芽的分化

以铃兰越冬芽的幼叶基部和幼嫩花梗为外植体进行培养,结果表明,在以ＭＳ为基本培养基的条件下,附加２,４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ和ＺＴ０．２ｍｇ／Ｌ时,可诱导幼叶基部产生愈伤组织,附加ＺＴ２．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ,可使转接的愈伤组织分化出芽,附加２,４－Ｄ１．０ｍｇ／Ｌ和ＫＴ０．２ｍｇ／Ｌ时,可诱导花梗产生愈伤组织;附加６－ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ和ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ时,可使转接的愈伤组织分化出芽。     

Thidiazuron等植物生长调节剂对水稻(Oryza sativa L.)愈伤组织不定芽分化的影响

建立高效的植株再生体系是遗传转化的重要基础。以北方主栽水稻品种为试材 ,将 Thidiazuron(简称TDZ)应用于水稻愈伤组织的不定芽分化研究 ,探讨了 TDZ等植物生长调节剂对水稻愈伤组织不定芽分化和生长的影响。结果表明 ,TDZ显著促进水稻愈伤组织的不定芽分化 ,其细胞分裂素活性均大大高于 KT和 6 - BA,最佳使用浓度仅为 KT和 6 - BA的 1/ 10～ 1/ 2 0。不同 TDZ浓度对不定芽的分化效率在不同品种上有差异 ,东农 4 2 1品种在浓度为 0 .10 m g· L- 1时诱导效率最高 ,平均芽数达到 7.7个 /块 ,诱导效率达到 5 5 8.30 % ;东农 92 - 11品种在浓度为 0 .2 0 m g· L- 1时效果最佳 ,平均芽数为 7.9个 /块 ,分化效率高达 5 5 3%。高浓度的 TDZ有一定的毒害作用 ,导致愈伤组织褐化 ,诱导的不定芽出现矮化、叶片卷曲、玻璃化等现象     

马铃薯不同品种叶片再生体系的建立

以马铃薯6个品种为材料,建立叶片再生体系。结果表明,6-BA和GA3对马铃薯叶片愈伤组织生长量和不定芽分化率均有显著影响。不同马铃薯愈伤组织生长最高的6-BA质量浓度分别是"大西洋"、"底西瑞"和"虎头"1mg/L,"费乌瑞它"和"夏坡蒂"2mg/L,"紫花白"3mg/L;愈伤组织生长最高的GA3质量浓度分别是"大西洋","费乌瑞它","夏坡蒂"和"紫花白"5mg/L,"底西瑞"0.02和0.15mg/L,"虎头"0.02,0.05和0.1mg/L。在不同培养基中获得的最大愈伤组织生长量分别为"大西洋"0.039 5g,"费乌瑞它"0.037 5g,"夏坡蒂"0.041g,"紫花白"0.0396g,"底西瑞"0.042 5g和"虎头"0.039 5g。不同马铃薯不定芽分化最高的6-BA质量浓度分别是"大西洋","费乌瑞它"和"夏坡蒂"2mg/L,"紫花白"和"底西瑞"1mg/L,"虎头"0.1mg/L;不定芽分化最高的GA3质量浓度分别"大西洋"0mg/L,"费乌瑞它"2mg/L,"夏坡蒂"1mg/L,"紫花白"5mg/L,"底西瑞"和"虎头"0.1mg/L。在不同培养基中获得的最高不定芽分化率分别是"大西洋"18.18%,"费乌瑞它"13.04%,"夏坡蒂"17.86%,"紫花白"15.00%,"底西瑞"44.44%和"虎头"47.83%。诱导6个马铃薯品种生根的最佳培养基为1/2MS+0.1mg/LNAA,生根率分别为"大西洋"95.2%,"费乌瑞它"83.3%,"夏坡蒂"92.4%,"紫花白"94.8%,"底西瑞"96.7%和"虎头"95.6%。6个马铃薯品种的移栽成活率均为90%以上。     

大花香水月季再生体系的初步建立

 以大花香水月季（Rosa odoratavar. gigantea）为材料,研究了影响愈伤组织诱导和分化的因素,包括不同生长调节剂浓度和组合、暗培养时间等。结果表明,以带有腋芽的茎段为外植体,MS为基本培养基,腋芽萌发的最适激素浓度组合为6-BA 1.5mg/L+NAA0.12mg/L;最适诱导愈伤培养基为MS+2,4-D 4.0mg/L,诱导率为93.33%;最适诱导不定芽培养基为MS+TDZ 3.0mg/L+GA3 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,暗培养15d,再生率为18%。本研究通过间接器官再生途径初步建立的大花香水月季植株再生体系,为利用外源基因对月季进行遗传改良奠定了基础。     

欧美杨108离体叶片和茎段再生体系的优化(英文)

[目的]优化欧美杨108的无性繁殖再生体系的培养条件。[方法]以欧美杨108无菌苗为材料,采用正交试验优化叶片直接分化和茎段愈伤组织分化再生体系的培养条件。[结果]欧美杨108的叶片适宜在光照下进行直接再生分化,茎段适宜在光照下进行愈伤组织诱导再生分化。叶片不定芽分化的培养基为MS基本培养基(琼脂7.0 g/L、pH 6.0、蔗糖20 g/L)附加0.6 mg/L 6-BA和0.2 mg/L NAA;茎段愈伤组织诱导培养基为WPM固体培养基附加0.75 mg/L KT和1.5 mg/L 2,4-D。不定芽诱导生根培养基为WPM固体培养(蔗糖30 g/L)附加2.0 mg/L IBA。[结论]该研究优化了欧美杨108叶片的直接分化再生体系和茎段愈伤组织再生体系的培养条件,为其组织培养及遗传转化体系的构建提供了基础支持。     

欧美杨108离体叶片和茎段再生体系的优化

[目的]优化欧美杨108的无性繁殖再生体系的培养条件。[方法]以欧美杨108无菌苗为材料,采用正交试验优化叶片直接分化和茎段愈伤组织分化再生体系的培养条件。[结果]欧美杨108的叶片适宜在光照下进行直接再生分化,茎段适宜在光照下进行愈伤组织诱导再生分化。叶片不定芽分化的培养基为MS基本培养基(琼脂7.00 g/L、pH 6.00、蔗糖20 g/L)附加0.60 mg/L 6-BA和0.20 mg/L NAA;茎段愈伤组织诱导培养基为WPM固体培养基附加0.75 mg/L KT和1.50 mg/L 2,4-D。不定芽诱导生根培养基为WPM固体培养(蔗糖30 g/L)附加2.00 mg/L IBA。[结论]优化了欧美杨108叶片的直接分化再生体系和茎段愈伤组织再生体系的培养条件,为其组织培养及遗传转化体系的构建提供了基础支持。     

根癌农杆菌介导欧美杨108遗传转化体系的优化

[目的]优化根癌农杆菌介导的欧美杨108遗传转化体系。[方法]以欧美杨108无菌苗的叶片为外植体,通过农杆菌介导法对其遗传转化体系进行优化研究。[结果]试验获得的优化转化体系如下:农杆菌介导欧美杨108遗传转化的潮霉素最佳叶片分化浓度为2mg/L,生根浓度为1 mg/L。优化筛选的最适转化条件为:预培养48 h,菌液浓度OD600为0.4,侵染15 min,共培养48 h。试验共获得18个抗性愈伤和抗性芽,转化频率为4.3%;经PCR检测初步证明TCS基因已整合至欧美杨108再生植株中。[结论]该研究建立了高效欧美杨108叶片农杆菌介导的遗传转化体系。     

天花粉蛋白基因导入欧美杨108

为获得含有天花粉蛋白（ TCS）的转基因欧美杨108植株,进行了植物表达载体的构建以及导入欧美杨108的研究。将北京大学惠赠的含有TCS启动子及结构基因的质粒pT1-3经SacⅠ和BamHⅠ双酶切后与同样双酶切的载体pCambia1301用T4 DNA连接酶相连,转化大肠杆菌,构建植物表达载体pC-tPro-TCS。将构建的植物表达载体转入农杆菌LBA4404,采用农杆菌介导法,将其导入欧美杨108中。结果表明,共得到18个潮霉素抗性愈伤和抗性芽,转化效率为4．3％。抗性体经PCR和PCR-Southern检测,初步确认TCS基因已经导入到欧美杨108中。     

银白杨叶片不定芽再生影响因素的研究

该文以银白杨无菌试管苗叶片为外植体 ,进行了不同培养基及不同因子对银白杨叶片不定芽诱导的研究 ,建立了叶片不定芽再生植株体系 ,为今后的遗传工程改良奠定了基础 .结果表明 :银白杨叶片不定芽诱导的最适培养基是MS附加 6 BA和NAA(5∶1) (即MS +6 BA 0 5mg L +NAA 0 1mg L +蔗糖 2 5 % +琼脂 0 5 5 % ,pH 5 8) ,不定芽再生率达 95 %以上 ;当 6 BA NAA <5时 ,叶片不定芽再生率和再生系数均降低 ,当 5≤ 6 BA NAA≤ 30时 ,随着比值的增大 ,不定芽再生率明显下降 ,不定芽再生系数也减少 ;叶片不定芽再生能力强的最佳取材位置是自试管苗顶端向下伸展叶的第 1～ 3片叶 ;生根试管植株叶片的不定芽再生能力强于无根试管植株 ;叶片不定芽诱导的最佳光照时间为每天 14h .     

美洲黑杨×欧美杨F1无性系遗传变异

为了研究美洲黑杨Populus deltoides(I-69)×欧美杨(P.euramericana(I-45)F1无性系各性状的遗传变异情况,利用美洲黑杨×欧美杨F1无性系第12年生的数据,对胸径、树高、材积、木材密度、湿心材比例、圆满度、利用率和弯曲度等8个性状进行了研究.结果表明,除弯曲度这一性状无性系之间差异不显著外,其他所有性状在各无性系之间都呈极显著差异.通过对遗传参数的估算可知,胸径、树高、材积、木材密度、湿心材比例、圆满度和利用率等性状的狭义遗传力分别为0.65,0.75,0.50,0.81,0.51,0.71和0.63,表明各性状为中等至高度遗传,各性状受遗传控制要强于环境的影响,也表明各无性系在各性状上的差异主要是由遗传上的差异造成的,通过选择可以获得较高的遗传增益.895,797,312,139和194等无性系是生长表现最突出的无性系,木材密度最大的前5个无性系是1271,410,187,748和1317,而根据圆满度和利用率2个指标选出的无性系为561,748,1150,1317和1381.由此可见,生长性状、材质性状和干形性状的优良无性系各不相同,必须根据育种目标进行多性状综合分析,才能对各无性系做出合适的评价.表3参13     

玉米愈伤组织再生植株的促进方法研究

以来源于13个基因型的玉米幼胚愈伤组织为试验材料，研究愈伤组织经震荡洗脱、吸湿干燥处理后进行植株再生和直接进行植株再生3种处理在植株再生率、再生进程和愈伤组织生根上的差异，结果表明，愈伤组织在植株再生前经过48h震荡洗脱加48h吸湿干燥处理、或仅进行48h吸湿干燥处理均可以普遍提高植株再生苗率，加快植株再生进程，但易发生愈伤组织先生根现象．震荡洗脱加干燥处理可以更快促进植株再生．各处理对不同基因型愈伤组织在植株再生率、植株再生进度和愈伤组织生根的影响程度上存在差异．     

菊花幼嫩花瓣愈伤组织的诱导和植株再生

以菊花幼嫩花瓣作为供体材料,ＭＳ作为基本培养基,在激素组合为６ＢＡ１～３ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ或２,４ Ｄ１～３ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１ｍｇ／Ｌ的范围内均能诱导出愈伤组织,但以ＭＳ附加６ＢＡ２ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ的诱导率最高,可达１００％。将愈伤组织转移到ＭＳ＋６ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０２ｍｇ／Ｌ的培养基上,分化芽的频率为７７８％。将３ｃｍ左右的茎段转移到不含激素的ＭＳ培养基或ＭＳ＋ＮＡＡ０１ｍｇ／Ｌ的培养基上,生根率可达９５％以上。     

影响银白杨再生体系建立的因素分析

为了获得银白杨离体再生体系的优化方案,通过对离体再生体系中银白杨无菌苗的获得、生芽培养基激素组合及诱导出芽、生根培养基激素组合及诱导生根进行了一系列优化试验。结果显示:影响银白杨植株再生的最主要因素是激素浓度和类型,其次是培养基种类和外植体类型;最利于银白杨再生植株的培养基条件为:芽增殖培养基以MS 6-BA1.0mg/L NAA0.3mg/L IBA0.6mg/L为宜,生根培养基以1/2MS NAA0.05mg/L IBA0.2mg/L为宜。