白魔芋多倍体诱导研究初报

采用种子浸泡法和根状茎顶芽滴液法进行白魔芋多倍体诱导，比较了不同秋水仙素浓度和不同处理时间对出苗率和变异率的影响。结果表明，滴液法对材料的毒害性更小，经同一浓度秋水仙素溶液处理后出苗率和植株形态变异率均高于种子浸泡法，但诱变加倍的效果不如浸泡法。实验中获得一株纯合四倍体植株，由0.20%秋水仙素溶液处理种子48h诱变得到。     

氨磺灵和秋水仙素诱导橡胶草四倍体效果的比较研究

为探讨不同诱变剂对橡胶草四倍体的诱导效果,以橡胶草幼芽为材料,采用浸芽法,比较分析氨磺灵和秋水仙素2种诱变剂不同浓度和处理时间对橡胶草多倍体的诱导效果及多倍体橡胶草的形态特征变化。结果表明：氨磺灵处理橡胶草的成苗率(60%~75%)和最高诱变率(14.08%)均高于秋水仙素处理（0~59%和5.56%）,其嵌合体率(27.27%)低于秋水仙素处理(75.00%),其中0.04 mmol/L氨磺灵处理 30 min,成苗率为71.00%,变异率14.08%,为最佳诱变条件。可见,氨磺灵比秋水仙素更适合用于橡胶草多倍体诱导。诱导后获得的四倍体橡胶草叶片厚度、气孔大小、花和种子大小均显著大于野生型二倍体植株,气孔密度则显著低于野生型植株,这些形态特征可辅助多倍体橡胶草快速筛选和鉴定。本研究初步探明了2种诱变剂对橡胶草染色体加倍的诱导效果,为今后橡胶草多倍体育种提供理论依据和技术支持。     

不同秋水仙素处理方法对罗汉果植株变异的影响

以二倍体罗汉果永青1号为研究材料,用0.05％、0.1％、0.2％三种不同浓度的秋水仙素对其进行滴生长点、浸种处理、定量注射法及涂抹法诱导多倍体.结果表明:滴生长点法诱变效果最好,诱变率可达24.3％,而定量注射法成活率为0,涂抹法诱变率为0.与正常植株相比,变异植株在前期生长缓慢,但中后期生长比较旺盛,植株形态有明显的改变,经染色体鉴定为多倍体.     

秋水仙素诱导尾巨桉多倍体的研究

摘 要:以尾巨桉无性系DH3229组培苗的腋芽为处理材料,研究摇床、渗透剂,秋水仙素浓度和处理时间对该腋芽多倍体诱导效果的影响。结果表明：摇床和渗透剂的使用,秋水仙素的浓度及处理时间均能够明显的影响该无性系腋芽多倍体的诱导率。在使用摇床和添加渗透剂的情形下,0.2%的秋水仙素溶液处理24h可达最大诱导率56%。在秋水仙素处理液浓度小于0.05%时,无论如何改变其它条件均不能获得变异植株;当秋水仙素处理液浓度大于2%且处理时间长于48h时,处理过的腋芽的死亡率会快速上升,这直接阻碍了诱导率的进一步提高。     

苦参种子催芽及秋水仙素诱导多倍体研究

采用浓硫酸浸种、热水浸泡和种皮破损等方法来提高苦参（Sophora flavescens Ait.）种子的萌发率,并用秋水仙素处理已萌发苦参种子,通过根尖压片观察细胞染色体加倍情况。结果表明,苦参种子发芽率随浓硫酸浸种时间的延长先增加后降低,其中浸种90min的效果最好,种子的发芽率高达83％,不采用任何处理的对照发芽率仅有13％;70℃热水处理提高种子发芽率,随着处理时间延长,发芽率逐渐降低;种皮破损也能显著提高苦参的种子发芽率;根尖压片观察细胞染色体的结果表明,秋水仙素能够诱导苦参根尖四倍体细胞的产生,当处理浓度相同时,多倍体细胞率随着处理时间的延长呈先增加后降低的趋势,诱变植株率却一直明显增加,其中处理0.2％＋72h时,根尖多倍体细胞率最高为59.5％,处理0.2％＋108h时,诱变植株率高迭68％,0.1％＋48h的根尖多细胞率和诱变植株率均最低,分别为18.5％和8％。同时部分个体出现了混倍体细胞现象,其中四倍体细胞出现几率高于八倍体细胞。     

秋水仙素诱导乌拉尔甘草同源四倍体的研究

在组织培养条件下,用秋水仙素溶液浸泡乌拉尔甘草试管苗(2n=2X=16)茎尖进行同源四倍体诱导,比较了不同秋水仙素浓度和不同处理时间对存活率、变异率的影响,并对加倍植株的鉴定和纯合四倍体的分离方法进行了研究.结果表明,秋水仙素浓度为0.1%,浸泡时间为12h时,茎尖的存活率和变异率分别为52.3%和22.1%,诱导率较高,并通过保卫细胞和根尖染色体数目鉴定,成功获得了甘草同源四倍体(2n=4X=32),为开展甘草多倍体育种奠定了物质和技术基础.     

贯叶连翘无菌苗茎尖诱导变异体研究

以研究贯叶连翘离体诱变及筛选变异体为目的,用贯叶连翘无菌苗茎尖为供试材料,研究了平阳霉素处理浓度、时间、外源添加物对供试茎尖存活率以及激素配比对茎尖不定芽诱导率的影响。结果表明：平阳霉素80mg/L的20min处理可作为适宜诱变处理,添加椰汁有利于茎尖存活;6-BA0.5mg/L、NAA0.01mg/L的激素组合有利于诱导正常型不定芽和获得较高的诱导率。通过研究,建立了贯叶连翘变异体诱导技术程序,获得了金丝桃素含量提高的变异体材料。     

秋水仙素对辣椒生长的影响及多倍体诱导效应研究

以秋水仙素为诱变剂,比较了不同浓度和不同处理时长组合下辣椒(Capsicum annuum L.)的生长差异和多倍体诱导效应.结果表明:和对照植株相比,所有处理变异植株在形态上表现为叶片宽大,叶色较深,茎变粗且节间距长,气孔增大;相关指标都表现出显著或极显著的差异,而且随着处理强度的增加差异更为明显.秋水仙素诱导产生的变异植株经染色体倍性鉴定植株表征为嵌合体(2 n=24或2 n=48).相同处理时长下,不同浓度秋水仙素溶液对辣椒多倍体诱导效应差异显著,而对相同浓度下不同处理时长对植株叶片数和气孔面积影响差异不显著(P>0.05),其它指标差异极显著(P<0.01).秋水仙素浓度与处理时长之间存在交互作用,不同处理之间除气孔面积差异不显著之外,其它指标间差异显著或极显著.结合加倍率和植株死亡率综合分析后认为,用0.05%的秋水仙素溶液处理6天诱导效果最佳,诱导诱导加倍率可达26.1%.     

鸡冠花离体快繁及多倍体诱导

以鸡冠花顶芽为外植体,研究其离体快繁程序并在无菌体繁殖条件下探索了秋水仙素溶液不同浓度和时间处理对鸡冠花的诱变效应.快繁研究结果显示:最适初代培养基为MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.2 mg/L;以芽和茎段为培养对象诱导产生不定芽的最适培养基分别是MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L,MS 6-BA1.0 mg/L NAA 0.02 mg/L,最佳生根培养基是1/2 MS IBA 0.4 mg/L.采用浸泡法将鸡冠花营养芽在0.05%、0.1%、0.15%和0.2%不同秋水仙溶液浓度下分别处理12 h、24 h、36 h和48 h,并对诱导处理后获得的再生植株进行鉴定,得出以0.15%秋水仙素溶液浸泡36 h为诱导多倍体的最佳处理组合,诱导率达23.3%.     

黑果枸杞和宁夏枸杞的多倍体诱导和鉴定

为了获得黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)和宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)的多倍体,本研究分别以这两种植物的种子为原材料,用不同浓度的秋水仙素在不同时间下进行处理。通过茎尖染色体压片法、流式细胞法、叶片下表皮气孔观察法进行鉴定。结果表明:黑果枸杞对秋水仙素的耐性高,而宁夏枸杞的耐秋水仙素性和诱导率更高。黑果枸杞种子在秋水仙素浓度0.1%,处理36 h的条件下诱导率最高,为25%;宁夏枸杞种子在秋水仙素浓度0.1%,处理48 h的条件下诱导率最高,诱导率为33.33%。通过叶片下表皮气孔及保卫细胞大小确定植株倍性实验发现,当黑果枸杞平均保卫细胞长度达到102.07μm左右,宁夏枸杞平均保卫细胞长度达到71.33μm左右时,植株为四倍体的可能性大。该研究为获得大量黑果枸杞和宁夏枸杞多倍体育种材料提供了方法,并通过叶片下表皮气孔观察的方法提高了多倍体鉴定的效率,为进一步选育优良的枸杞新品种提供了新的材料和方法。     

不同浓度秋水仙素对贡蕉的多倍体诱导

本试验以贡蕉胚性细胞悬浮系、胚性愈伤组织和多芽体为试验材料,利用不同浓度的秋水仙素溶液对不同外植体材料进行不同时间的诱变处理,以期获得染色体加倍的植株。结果表明,试验所用的胚性悬浮细胞系、胚性愈伤组织和多芽体三种不同外植体对秋水仙素处理的敏感性都较高,出现了不同程度的死亡,以0.4%(w/v)浓度的秋水仙素溶液处理多芽体48h诱导效果较好,多芽体的死亡率达到45.83%,接近半致死率,诱变率为18.64%。通过染色体计数和气孔鉴定,获得62株纯合四倍体小苗。诱变获得的植株的染色体数目加倍,叶片气孔数量减少,体积增大。本次试验为香蕉多倍体诱变育种和新种质的创新提供了技术参考和相关依据。     

秋水仙素离体诱导大花蕙兰多倍体试验

在离体培养条件下,以大花蕙兰红宝石原球茎为材料,比较了秋水仙素浸泡法和混培法在不同浓度、不同处理时间诱导加倍的效果。结果表明:无论是用秋水仙素溶液浸泡还是将秋水仙素加入培养基中混培,均可诱导大花蕙兰多倍体的产生。但以混培法效果较好,在秋水仙素3%、处理15d的条件下,诱导率最高达30%。     

秋水仙素诱导马铃薯野生种S.acaule多倍体的初步研究

马铃薯野生种需通过人工诱导染色体加倍后才能与栽培种进行杂交。本试验以马铃薯野生种S.acaule无菌苗带腋芽茎段为材料,采用浸泡法和混合培养法研究了秋水仙素诱导马铃薯野生种S.acaule产生多倍体的诱导效果。结果表明:在继代增殖培养基中添加浓度为0.3%的秋水仙素,共同培养时间为14d时获得诱导变异率最大,为31.6%;获得的87株变异株有2株为多倍体植株。     

剪秋罗种子催芽及秋水仙碱诱导多倍体研究

为了解决剪秋罗种子发芽率不高的问题,以剪秋罗种子为试验材料,比较种子新旧、播种基质以及不同浓度赤霉素(GA3)对剪秋罗种子发芽势和发芽率的影响,并在此基础上利用不同浓度秋水仙碱和不同时间处理剪秋罗萌动种子诱导多倍体。通过形态鉴定、气孔鉴定以及细胞学鉴定变异植株。结果表明：存放1年的剪秋罗种子发芽指标均优于当年新种子,当年种子可能具有初生休眠特性。以150 mg/L的GA3预处理存放1年的剪秋罗种子24 h并播种于培养皿中能获得最高的发芽势(76.33%)和最高的发芽率(85.33%)。经过秋水仙碱处理的种子普遍存活率低,但每个处理浓度下都获得了变异植株,秋水仙碱浓度0.1%为筛选出的最适诱导浓度。变异植株表现出了与对照植株在形态上、气孔分析上和细胞学检测上的差异。经鉴定,初选出1株多倍体。研究为培育剪秋罗多倍体新品种探索出了一条新的育种途径。     

EMS诱变处理芸豆(Phaseolous vulgaris L.)种子条件分析

为确定甲基磺酸乙酯(EMS)对芸豆种子的最佳诱变条件,快速有效地获得性状稳定的芸豆有益突变植株,以诱变剂EMS诱变处理芸豆品种"英国红"的纯系干种子,采用5个EMS诱变浓度(0.0%,0.4%,0.6%,0.8%,1.0%),5个诱导时间(0,6,8,10,12h),分析诱变后的种子发芽率和相对成苗率。结果表明:EMS诱变处理对芸豆发芽率有显著的抑制效应;EMS诱变浓度对发芽率的抑制效应小于诱导时间;EMS诱变处理对芸豆的相对出苗率和相对成苗率无显著影响;0.8%的EMS诱变浓度和8h的诱导时间组合,是芸豆种子的最佳诱变条件。     

盾叶薯蓣组织培养及四倍体诱导技术的初步研究

以盾叶薯蓣的茎段、叶柄、叶作为外植体进行离体组织培养,其效果以茎段和叶柄最好。诱导愈伤组织的培养基以MS+2,4-D 2.0mg/L+BA 0.5mg/L为佳;在培养过程中,可用MS+BA 3.0mg/L+NAA 0.2mg/L作为分化培养基,后逐步转为MS+BA 1.Omg/L+NAA 0.2mg/L作为继代培养基;生根培养可使用MS+NAA 1.0mg/L的培养基。在组织培养条件下,对盾叶薯蓣进行了多倍体诱导的研究。结果表明,用0.15%的秋水仙素处理24小时后,诱导率可达50%,效果较好。经秋水仙素诱导的变异株,与正常的二倍体植株相比,植株粗壮,叶片变大变厚,叶色浓绿,部分还出现畸形叶。叶片表皮气孔检测发现,多倍体植株叶片表皮气孔变大,且单位面积下的气孔数目减少;进行细胞学研究发现,正常植株的染色体的数目为2n=2x=20,变异植株染色体数目为,变异植株染色体数目为2n=4x=40,为四倍体。     

墨兰多倍体的离体诱导和鉴定

以墨兰‘企剑白墨’的根状茎为材料,研究了秋水仙素处理对墨兰根状茎生长和多倍体诱导的影响。结果表明,秋水仙素对根状茎有严重的毒害致死作用,在试验浓度和时间范围内,随着秋水仙素浓度的升高或处理时间的延长,根状茎存活率明显降低。秋水仙素能诱导‘企剑白墨’根状茎的染色体加倍,但不同浓度和时间处理的染色体加倍效率不一样。只在0.01%×3 d处理下诱导出四倍体,诱导率为11.11%,其余处理诱导出二、四混倍体,诱导率在0～19.44%之间。四倍体根状茎比二倍体粗壮,顶端更圆,再生出的四倍体植株株型紧凑,叶片质地变硬,根明显增粗。     

滇丁香化学诱变的多倍体及其鉴定研究

为获得滇丁香新种质、选育抗性新品种,用不同浓度的氨磺灵溶液浸泡滇丁香种子,以种子下胚轴膨大视为变异株,统计变异率和发芽率,通过形态学观察、气孔观察、染色体计数及流式细胞仪检测确定其倍性。结果表明：15μmol/L氨磺灵浸泡种子24 h为滇丁香多倍体诱导最佳方法,变异率达60.1%,发芽率为66.7%,获得2株四倍体植株;25μmol/L氨磺灵诱导24 h,变异率为50%,获得1株八倍体植株。滇丁香变异植株在株高、叶长、叶厚方面均与对照植株呈显著差异,多倍体滇丁香植株株型矮小、叶片畸形较圆润且变厚、叶色较深、叶毛茎毛粗长。多倍体植株气孔的长和宽及保卫细胞的长和宽均显著大于二倍体植株,且气孔密度显著小于二倍体植株。经流式细胞仪检测,不同倍性植株DNA含量近似倍数关系。经染色体计数,滇丁香二倍体植株染色体数目为2n=44,四倍体植株4n=88。四倍体滇丁香丙二醛含量极显著低于二倍体,而脯氨酸含量极显著高于二倍体。     

商陆(Phytolacca acinosa)微茎尖培养及多倍体诱导

本研究对商陆(Phytolacca acinosa)进行茎尖微茎尖培养与多倍体诱导研究。研究结果表明:适合商陆微茎尖生长的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.02 mg/L;适合诱导商陆微茎尖生根的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L,诱导率为100%。用0.3%的琼脂溶胶配制成秋水仙素浓度为0.2%的溶胶药剂连续处理微茎尖48 h,获得变异植株,表现为植株健壮,叶片皱缩增大,颜色加深,气孔数目增多、增大。压片法对变异植株根尖进行染色体鉴定,证明变异株为多倍体。     

秋水仙素诱导美洲商陆四倍体的研究

利用改良L.D.Cua法对美洲商陆进行多倍体诱变,在秋水仙碱浓度为0.2%条件下,设置24h、48h和72h三个诱变时间,并对所得到的变异株和对照株进行形态学、细胞学等方面的比较研究,结果表明：诱变48h效果最好;与对照相比,变异株的叶片厚度增加43.75%;叶形指数减少37.95%;气孔纵横径分别增加52.94%和73.01%;保卫细胞内叶绿体数目增加20.91%;花直径增加22.96%;花粉粒直径增加22.47%;果实直径增加23.66%。对变异株进行花粉母细胞减数分裂染色体鉴定,小孢子细胞的染色体数为n=2x=36,而对照小孢子细胞的染色体数为n=x=18,证明变异株为四倍体。