灰树花多糖PGF-1对荷瘤小鼠免疫功能的影响

以纯品灰树花多糖PGF - 1为原料 ,研究了其对S180 肉瘤生长的抑制作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果表明 ,在口服给药 5 0～ 15 0mg/kg·d的剂量下 ,PGF - 1对小鼠S180 肉瘤的抑制率为 2 0 .5 7%～ 34.75 %。经免疫试验发现PGF能明显增加荷瘤小鼠的胸腺指数、淋巴细胞转化能力、脾细胞抗体形成能力及IgM溶血素的含量     

黑蜂蜂胶免疫活性和体内抗肿瘤研究

[目的]观察东北黑蜂蜂胶醇提取物对昆明鼠免疫活性的影响和肿瘤抑制率。[方法]通过动物体内试验,制备H22模型小鼠,计算黑蜂蜂胶提取物肿瘤抑制率,测定单核-巨噬细胞碳廓清的吞噬指数。[结果]东北黑蜂蜂胶醇提取物各组的吞噬指数、瘤重与阴性对照组比较,具有统计学意义(P0.05),说明东北黑蜂蜂胶醇提取物能够提高H22小鼠的免疫活性,对肿瘤的生长在一定程度上有很强的抑制作用,东北黑蜂蜂胶的乙醇提取物抗肿瘤作用显著。[结论]该研究为蜂产品进一步走向医疗领域特别是治疗癌症提供理论支持。     

灰树花提取物的体内抗肿瘤及免疫活性研究

【目的】研究灰树花不同极性溶剂提取物在小鼠体内的抗肿瘤和机体免疫活性。【方法】按极性从低到高依次采用石油醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇加热回流提取灰树花子实体,获得石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、丙酮提取物和甲醇提取物。70只SPF级昆明小鼠（雌雄各半）分为7组,每组10只,分别标记为空白组、模型组、CTX阳性组及灰树花子实体石油醚、乙酸乙酯、丙酮及甲醇提取物组,小鼠接瘤后第2天开始给药,空白组不给药及生理盐水,模型组给予生理盐水,CTX阳性组隔天腹腔注射CTX 20 mg/kg,石油醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇提取物组每天灌胃相应的灰树花子实体提取物,抑瘤10 d。通过检测肿瘤抑制率,脏器指数,血清中影响因子干扰素-γ(INF-γ）、白细胞介素-2(IL-2）、血管内皮生长因子(VEGF）、过氧化氢酶(CAT）、丙二醛(MDA）和超氧化物歧化酶(SOD）水平等指标及肿瘤切片观察,研究灰树花子实体不同极性溶剂提取物对Hep-A-22荷瘤小鼠体内抗肿瘤、免疫活性及抗氧化作用。同时,通过小鼠耳肿胀试验和腹腔巨噬细胞吞噬试验进一步探究灰树花子实体提取物的免疫活性作用。【结果】各给药组均具有抑制肿瘤生长作用,其中灰树花子实体甲醇提取物组抑瘤效果最佳(52.31%）,与模型组相比有极显著性差异(P＜0.01）,该组血清中IL-2、INF-γ和SOD含量极显著增加(P＜0.01）,CAT含量显著增加（P＜0.05）,并与抑制肿瘤具有相关性。通过HE染色和荧光染色后的肿瘤细胞观察,发现肿瘤细胞出现大面积坏死、消融等现象;各给药组对小鼠二甲苯耳肿胀均有抑制效果,其中甲醇组和乙酸乙酯组效果较好,与空白组差异性极显著(P＜0.01）。【结论】灰树花甲醇提取物和乙酸乙酯提取物具有良好的抑制肿瘤生长效果。甲醇提取物组能够显著提高小鼠腹腔巨噬细胞活性,从而提高机体免疫活性,并与其抗肿瘤作用具有相关性。     

灰树花多糖的抗肿瘤作用及对巨噬细胞,自然杀伤细胞的影响

以灰树花粗多糖（ＧＦＰ）为材料，通过对接种有Ｌｅｗｉｓ肺癌及Ｃｏｌｏｎ癌的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠进行抗肿瘤疗效试验，灰树花多糖口服给药剂量为３４００ｍｇ／ｋｇ·ｄａｙ。发现灰树花多糖对足趾接种和腋皮下接种Ｌｅｗｉｓ肺癌的抑制率分别为６７．８３％￣７２．４４％和４５．３６％￣４６．７１％；对Ｃｏｌｏｎ癌的抑制率分别为５０．６８％￣５６．０３％和３７．３１％￣４０．４７％。通过免疫试验发现灰树花多糖能明显     

灰树花多糖对小鼠免疫功能的影响

[目的]探讨灰树花（Grifola frondosa）多糖对小鼠的免疫功能的作用。[方法]将30只昆明系小白鼠随机分为3组,每组10只,试验组分别灌喂300（低剂量组）、600 mg/kg（高剂量组）灰树花多糖15 d,对照组灌胃蒸馏水,研究灰树花多糖对小鼠免疫器官增重和血液生化指标的影响。[结果]低剂量组小鼠胸腺指数显著低于对照组（P〈0.05）;试验组（低剂量组和高剂量组）脾脏指数分别极显著或显著高于对照组（P〈0.01,P〈0.05）;低剂量组小鼠血清总蛋白和球蛋白水平分别显著或极显著高于对照组（P〈0.05,P〈0.01）;低剂量组血清总胆固醇水平显著低于对照组（P〈0.05）;低剂量组血清免疫球蛋白IgG含量显著高于对照组（P〈0.05）。[结论]低剂量灰树花多糖组能有效提高小鼠脾脏质量,提高小鼠血清抗体水平,降低血清总胆固醇水平,具有明显增强小鼠免疫能力和降低血脂的功能。     

高纯度碱提灰树花发酵菌丝体β-葡聚糖的免疫活性研究

【目的】探讨高纯度碱提灰树花菌株GF-932发酵菌丝体β-葡聚糖的免疫活性,以期为灰树花菌的开发利用提供依据。【方法】以碱提、酶解的方法,从灰树花菌株GF-932发酵菌丝体中提取β-葡聚糖,经过超滤和QSepharose FF凝胶柱层析纯化冻干得高纯度β-葡聚糖,采用分子排阻法测定该β-葡聚糖的相对分子质量和分子质量分布宽度,以HPLC法测定其β-葡聚糖含量;根据人体口服推荐剂量每kg体质量2.5 mg/d,分别设低剂量组(12.5mg/d)、中剂量组(25.0 mg/d)、高剂量组(75.0 mg/d),对SPF小鼠连续经口灌胃纯化的β-葡聚糖30 d,以灌胃灭菌蒸馏水作对照,通过迟发型变态反应、碳粒廓清和抗体生成细胞检测试验,观测灰树花β-葡聚糖对SPF小鼠吞噬细胞的足跖肿胀度、吞噬指数、溶血空斑数及小鼠体质量和脏器指数的影响。【结果】每100 g灰树花菌丝体中可得0.89gβ-葡聚糖纯品,其相对分子质量为136.43 ku,分子质量分布宽度为1.64。经口给予SPF小鼠不同剂量的灰树花β-葡聚糖30 d后,与对照组相比,各组动物体质量均呈增长状态,但差异不显著(P>0.05)。高纯度碱提灰树花β-葡聚糖能提高SPF小鼠吞噬细胞的足跖肿胀度、吞噬指数、抗体生成细胞数和脏器指数,即能增强小鼠吞噬细胞的吞噬功能及细胞、体液和免疫器官的免疫功能。【结论】高纯度碱提灰树花β-葡聚糖能显著提高小鼠的细胞吞噬功能及特异性免疫和非特异性免疫功能。     

异叶败酱多糖的体内抗肿瘤活性研究

【目的】研究异叶败酱多糖抑制U14宫颈癌实体瘤小鼠肿瘤生长的作用机制。【方法】建立小鼠宫颈癌(U14)实体瘤模型,以灌胃生理盐水和皮下注射环磷酰胺(25mg/kg)分别作为阴性和阳性对照,观察异叶败酱多糖不同剂量(30,60,90mg/kg)灌胃给药14d后,对小鼠肿瘤生长抑制作用的影响;检测异叶败酱多糖对荷瘤小鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)和碱性磷酸酶(AKP)活性的影响;用原位末端标记(TUNEL)法检测肿瘤细胞的凋亡情况;利用免疫组织化学法分析与细胞凋亡密切相关蛋白(突变型p53、Bcl-2、Bax)的表达情况。【结果】与阴性对照组相比,异叶败酱多糖中、高剂量组瘤质量显著下降,荷瘤小鼠血清LDH活性显著降低,Bax蛋白表达量显著升高,突变型p53和Bcl-2蛋白表达量显著下降(P0.05);异叶败酱多糖各组肿瘤组织的细胞凋亡数较阴性对照组均显著提高(P0.05),荷瘤小鼠血清AKP活性有所升高,但与阴性对照差异不显著(P0.05)。与阳性对照组相比,异叶败酱多糖中、高剂量组抗U14宫颈癌效果接近于临床化疗药环磷酰胺。【结论】异叶败酱多糖具有抑制实体瘤U14生长的作用,揭示该多糖可能通过调节细胞凋亡相关基因的表达,进而促进肿瘤细胞的凋亡而发挥其抗肿瘤作用。     

红皮云杉多酚体内抗肿瘤活性研究

[目的]研究红皮云杉多酚的抗肿瘤效果。[方法]采用动物试验法,将S180细胞注射进小鼠体内,通过测定抑瘤率和免疫指标,分析其抗肿瘤效果。[结果]环磷酰胺的抑瘤率为73.20%,高剂量红皮云杉多酚的抑瘤率为61.31%,但环磷酰胺对机体免疫器官和抗氧化能力有不良影响,而红皮云杉多酚对免疫器官具有保护作用,并可以明显提高机体的抗氧化能力。[结论]红皮云杉多酚有显著的抗肿瘤作用,且安全性好。     

绿豆活性肽对小鼠H22肝癌移植瘤的抑制作用

【目的】研究绿豆活性肽对小鼠H22肝癌移植瘤的抑制作用,为绿豆资源的综合利用提供参考。【方法】建立H22鼠肝癌荷瘤小鼠模型,研究不同剂量(400,800和1 600mg/kg)绿豆活性肽对小鼠H22移植性肿瘤的抑制作用及对胸腺、脾脏指数和血液生化指标的影响;采用ELISA测定瘤组织TE端粒酶活性以及Bcl-2、Bax的表达量,初步探究绿豆活性肽的作用机制。【结果】绿豆活性肽对荷瘤小鼠H22肿瘤的生长有明显的抑制作用,给药剂量为1 600mg/kg时抑制率达32.6%;绿豆活性肽能增大荷瘤小鼠胸腺指数和脾脏指数,升高血液中白细胞水平,降低血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酸和碱性磷酸酶水平;能显著抑制TE端粒酶活性,减弱Bcl-2表达而增强Bax的表达。【结论】绿豆活性肽对H22荷瘤小鼠有明显的抑瘤作用,且无毒副作用,这可能是通过调节免疫功能、抑制TE端粒酶活性、促进肿瘤细胞Bax表达以及抑制Bcl-2表达而实现的。     

仿刺参肠多糖提取物对小鼠实体瘤的抑制作用

采用碱解、酶解和醇沉淀法提取仿刺参Apostichopus japonicus肠组织中的粗多糖(简称肠多糖),通过构建小鼠H22肝癌实体瘤模型,采用腹腔给药途径,研究了不同剂量的肠多糖[200、100、50mg/(kg.d)]对小鼠实体瘤的抑制作用,并测定了小鼠的脾脏指数、胸腺指数以及血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素2(IL-2)的含量。结果表明:肠多糖对患H22肝癌小鼠的实体瘤具有显著的抑制作用,肠多糖高剂量组小鼠的瘤质量与肿瘤对照组差异极显著(P<0.01),肠多糖中、低剂量组的瘤质量与肿瘤对照组差异显著(P<0.05),肠多糖高、中、低剂量的抑瘤率分别为90.1%、85.2%和71.7%;各肠多糖组小鼠的脾脏指数与肿瘤对照组均无显著差异(P>0.05),但随着肠多糖剂量的上升,小鼠的脾脏指数也上升;各肠多糖组小鼠的胸腺指数均高于肿瘤对照组,除肠多糖低剂量组外其余各组均与肿瘤对照组差异显著(P<0.05);肠多糖高剂量组小鼠血清中的IL-2含量极显著高于3个对照组(P<0.01),而肠多糖中、低剂量组血清中的IL-2含量与肿瘤对照组、给药健康对照组均无显著差异(P>0.05);肠多糖高、中、低剂量组小鼠血清中的TNF-α含量与3个对照组均无显著差异(P>0.05)。     

灰树花菌丝体胞内多糖对于小鼠的免疫调节作用

为研究灰树花发酵产物提取出的胞内多糖的免疫活性,采用50只雄性昆明小鼠,随机分为5组,每组10只,设100、200和400mg/(kg·d)3个水平处理组,并设阳性对照组(黄芪多糖400mg/(kg·d))和阴性对照组(生理盐水),饲养30d后观察多糖对细胞免疫功能的影响。通过流式细胞仪检测脾细胞表面分子的CD4和CD8及对T淋巴细胞增殖的影响;用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测其细胞因子IL-6、IL-8、CRP和TNF-α的表达。结果表明:灰树花胞内多糖使小鼠脏器显著增大(P≤0.05);并显著增加了脾淋巴细胞的增殖能力(P≤0.05);对于T淋巴细胞亚群中免疫细胞CD4/CD8的比值随着用药量的增加而提升(P≤0.05);同时小鼠肠道中的细胞因子IL-6、IL-8和TNF-α的分子表达量起到了上调作用(P≤0.05);并且下调了炎症因子CRP的分子表达量(P≤0.05)。灰树花菌丝体胞内多糖能使小鼠体内免疫器官增大,免疫细胞分泌增多,相关免疫因子表达量增加。     

40株虫生真菌菌丝体提取物抗肿瘤活性的初步研究

以中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株为模型,用Resazurin法检测生长抑制率,对40株虫生真菌菌丝体的提取物进行体外抗肿瘤活性试验.结果表明,黄山被毛孢Hirsutella huangshanensis菌株RCEF0851和RCEF0868菌丝体提取物对CHO细胞株的抑制活性最强,其乙酸乙酯和二氯甲烷混合溶剂提取物在100 μg·mL-1时对CHO细胞的抑制率分别为(98.58±1.12)%、(98.47±2.11)%;其甲醇提取物在100 μg·mL-1浓度时对CHO细胞的抑制率也分别达到(97.30±1.83)%和(96.28±1.96)%.复筛的结果表明,RCEF0851和RCEF0868菌丝体提取物对CHO细胞的半数抑制浓度IC50分别为29.24 μg·mL-1和28.87 μg·mL-1.另外,环链拟青霉Paecilomyces cateniannulatus菌株RCEF0508菌丝的乙酸乙酯和二氯甲烷混合溶剂提取物在100 μg·mL-1时对CHO细胞的抑制率也达(95.96±2.01)%,这些菌株值得进一步深入研究.     

生地黄提取物的抗氧化活性研究

【目的】通过体外抗氧化试验,研究生地黄块根不同溶剂提取物的抗氧化活性,为生地黄的进一步开发利用提供理论依据。【方法】用体积分数70%的乙醇回流提取生地黄根粉末,减压浓缩得到乙醇浸膏,加蒸馏水制成悬浮液,依次用等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,分别得到石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇提取物;以2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)为对照,分别采用DPPH法、Feton法、FRAP法和还原能力测定法,研究4种不同熔剂提取物的抗氧化活性。【结果】生地黄4种不同熔剂提取物均具有不同程度的抗氧化活性,且抗氧化活性与提取物质量浓度呈量效关系。生地黄乙酸乙酯提取物的1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH.)清除活性(IC50值为0.178mg/mL)、还原能力(IC50值为0.341 mg/mL)和总抗氧化活性均最高,其中乙酸乙酯提取物的DPPH.清除活性高于对照BHT(IC50值为0.456 mg/mL)。生地黄氯仿提取物的羟自由基(OH.)清除活性最强,IC50值为1.397 mg/mL。【结论】生地黄乙酸乙酯提取物具有较强的抗氧化活性,可作为一种新的自由基清除剂和天然抗氧化剂。     

银杏中种皮提取物抗氧化活性的研究

分别采用卵黄脂蛋白多不饱和脂肪酸过氧化体系、超氧阴离子自由基体系、羟自由基体系、二苯代 苦味酰(DPPH)自由基体系以及总抗氧化能力等检测指标,对银杏中种皮采用不同提取方法(微波提取、超声提取、 乙醇和水浸提)获得的黄酮类物质的抗氧化能力进行了对比研究。结果表明,不同提取方法获得的提取液均具有较 强的抗氧化活性,而不同提取工艺可影响银杏中种皮提取液的抗氧化作用及其机理,其中乙醇浸提液对卵黄脂蛋 白过氧化体系的抑制率为50．69％,微波水提液对超氧阴离子和羟自由基的清除能力分别达213．96和411．26 U／L,乙醇超声提取液对DPPH 自由基的清除率及总抗氧化能力分别为89．8％和44．09 U／mL。     

灰树花菌丝体多糖G.F.-1理化性质及生物活性的研究

对灰树花菌丝体多糖 G.F.- 1的理化性质及生物活性进行了研究。结果表明 ,G.F.- 1是一种均一性好、相对分子质量为 1.2 3× 10 6 的多糖 ,其单糖组成的物质的量之比为 n(Xyl)∶ n(Man)∶ n(Glc) =0 .9∶1.4∶ 4 .7;其一级结构是由主链以β(1→ 3)、β(1→ 6 )糖苷键为主 ,分枝点大部分发生在主链糖基 C6位的β- D-葡聚糖所构成 ;同时 ,该多糖具有清除 O- ·2 自由基、显著促进小鼠淋巴细胞增殖、增强机体免疫力的生物活性功能     

灰树花液体深层培养条件的研究

对灰树花进行深层培养 ,结果表明 ,液体培养基以玉米粉 +麸皮、蛋白胨及牛肉膏为较好的碳源和氮源 ,无机盐 Mg SO4、KH2 PO4、Fe SO4、Zn SO4、Cu SO4的组合有利于灰树花菌丝的生长。通过正交试验及培养过程中各因素对菌丝生物量影响的研究 ,确定了发酵罐深层培养的最佳工艺条件 ,并得出 p H值在 5 .5 0～ 6 .5 0 ,通气量体积比在 1.0 0～ 1.40时 ,菌丝生物量积累最多。     

外来入侵植物大狼把草提取物的化感潜力

通过室内观察外来入侵植物大狼把草提取物对黄花草木樨、北美车前、胜红蓟和鸡眼草4种植物种子萌发和幼苗生长的影响,研究大狼把草提取物的化感活性。结果表明:大狼把草250～4 000μg·mL-1的乙醇提取物对北美车前、胜红蓟和500～4 000μg·mL-1的水提取物对胜红蓟种子萌发有显著抑制作用,相应的最大抑制率分别为60.80%、48.08%和63.64%。250～1 000μg·mL-1的乙醇提取物和250～2 000μg·mL-1的水提取物对黄花草木樨幼苗根长以及250～500μg·mL-1的乙醇提取物和250～2 000μg·mL-1的水提取物对黄花草木樨幼苗苗高有显著促进作用,相应的最大促进率分别为32.99%、54.45%、11.55%和18.12%,而4 000μg·mL-1的乙醇提取物对其幼苗根长有显著抑制作用,相应的抑制率为22.32%。1 000～4 000μg·mL-1的水提取物和2 000～4 000μg·mL-1的乙醇提取物对北美车前幼苗根长以及4 000μg·mL-1的乙醇提取物对其幼苗苗高有显著抑制作用,相应的最大抑制率分别为19.96%、33.10%和23.15%。250～4 000μg·mL-1的水提取物和1 000～4 000μg·mL-1的乙醇提取物对胜红蓟幼苗根长以及2 000～4 000μg·mL-1的乙醇提取物和水提取物对其幼苗苗高均有显著抑制作用,相应的最大抑制率分别为60.92%、40.80%、11.31%和11.65%。250～2 000μg·mL-1的乙醇提取物对鸡眼草幼苗根长和苗高以及1 000μg·mL-1的乙醇提取物对其幼苗干重有显著促进作用,相应的最大促进率分别为34.96%、18.93%和20.89%,1 000～4 000μg·mL-1的水提取物对其幼苗根长以及2 000～4 000μg·mL-1的水提取物对其幼苗苗高和干重有显著抑制作用,相应的最大抑制率分别为28.11%、12.40%和27.29%。     

花椒麻素在大鼠肠道的吸收动力学研究

【目的】研究花椒麻素在大鼠肠道的吸收动力学特征。【方法】以SD大鼠为供试动物,建立大鼠体循环肠灌流模型,并采用建立的高效液相色谱法(HPLC)测定肠循环液中花椒麻素质量浓度,研究花椒麻素在大鼠肠道不同部位(十二指肠、空肠、回肠、结肠)的吸收特性,分析不同质量浓度花椒麻素对大鼠肠吸收速率常数(Ka)、吸收百分率(P)和吸收半衰期(t1/2)的影响。【结果】25~100μg/mL花椒麻素在大鼠肠道的Ka为30.0~65.0min-1,P为30.16%~56.81%,t1/2为100.10~232.09min。花椒麻素在各肠段的P和Ka均随其质量浓度的增加而增大,而t1/2随其质量浓度的增加而减少。花椒麻素Ka和P均按空肠、回肠、十二指肠、结肠顺序依次下降,而t1/2依次升高。【结论】花椒麻素在大鼠肠道的吸收过程属于一级动力学过程,属被动转运,吸收部位主要是空肠和回肠。     

拟青霉属真菌菌丝提取物抗真菌和清除DPPH自由基 活性的初步研究

通过对不同寄主或不同来源的11种29株拟青霉进行抗白色念珠菌和清除自由基的活性筛选,发现古尼拟青霉菌株RCEF0866的菌丝体乙酸乙酯提取物具有较强的抗真菌活性,在菌丝浓度为100.0 mg.mL-1时,其提取物的抑菌圈达到(18.1±1.7)mm;菌株RCEF0866和RCEF4118的菌丝体甲醇提取物还具有较强的清除自由基活性,在菌丝浓度为5.0 mg.mL-1时,其对0.4 mg.mL-1的DPPH(1,1 diphenyl-2-picryhydrazyl)自由基的清除率分别为82.75%和79.53%。对菌株RCEF0866菌丝体的乙酸乙酯提取物进行薄层抑菌试验发现,其抗真菌主要成分的Rf值为0.90,表明该抗真菌成分为低极性成分。二苯代苦味肼基自由基薄层试验结果表明,RCEF0866菌丝体的甲醇提取物中具清除自由基活性的成分的Rf值为0.80,表明该清除自由基成分也为低极性成分。     

几种杀菌剂对黑星病菌室内药效测定

苹果及梨黑星病逐渐成为生产中的重要病害,可引起落叶及疮痂等症状,影响到商品果的产量和品质.苹果黑星病已补列为陕西省检疫对象.梨黑星病则发生于陕西省所有酥梨产区.由于研究滞后,在生产实际中不少农药效果较差.